① 微生物檢測或鑒定技術或方法有哪些
微生物檢測或鑒定技術或方法有哪些
通過顯微鏡直接觀察。一般來說,在一定的培養條件下(相同的培養基、溫度以及培養時間),同種微生物表現出穩定的菌落特徵。這些特徵包括菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等方面。(見高中生物選系1《生物技術實踐》圖2-8)因此可以通過顯微鏡觀察菌落特徵對微生物種類進行判斷。
使用選擇培養基培養微生物或人為提供有利於目的菌株生長的條件。選擇培養基,顧名思義其作用是允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他微生物生長。例如,使用以尿素作為唯一氮源的培養基能夠培養出可合成脲酶的微生物;在培養基中PH調至酸性有利於黴菌的生長繁殖(抑制細菌的生命活動)等。選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特徵進行間接判斷,得到的微生物往往並不只有一種,但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。
使用鑒別培養基。即根據微生物的代謝特點,在培養基中加入某種指示劑或化學葯品。例如,水質檢驗中大腸桿菌的檢驗(大腸桿菌的存在數量用以衡量水被糞便污染的程度)就用到了伊紅—美藍試劑,該試劑與水或乳製品中的大腸桿菌反應出現深紫色且帶有金屬光澤,屬於大腸桿菌的特徵反應。與選擇培養相比,鑒別培養基的鑒別所得結果的范圍比較小,一般可直接測定某微生物的種類。
② 科普小知識微生物檢測(微生物檢測技術的內容簡介)
1.微生物檢測技術的內容簡介
第一模塊 微生物檢驗基礎 項目一 微生物及微生物檢驗概述 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、什麼是微生物 二、微生物的特點 三、微蠢蠢薯生物對產品的污染 四、污染的預防與控制 五、微生物檢驗的任務和意義 六、微生物檢驗的對象 七、微生物檢驗的質量管理 八、微生物檢驗的發展趨勢 【思考題】 閱讀小知識:微生物的命名及分類 項目二 微生物的形態結構 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、細菌 二、放線菌 三、酵母菌 四、黴菌 五、病毒 【思考題】 閱讀小知識:小布商成了英國皇家學會的會員 微生物的奠基人——巴斯德 項目三 微生物的生理特性 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、微生物的營養 二、微生物的生長 三、微生物的代謝 【思考題】 閱讀小知識:抗生素的濫用及食品安全 第二模塊 微生物檢驗常規技術 微生物實驗室守則 實驗室的急救 項目四 微生物培養基的配製 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、培養基的分類 二、選用或設計培養基的基本原則 任務4 1配製常用的微生物培養基 【思考題】 項目五 消毒滅菌技術 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、消毒滅菌的有關概念 二、消毒滅菌的方法 任務5 1乾熱滅菌技術及玻璃器皿的滅菌 【思考題】 任務5 2高壓蒸汽滅菌技術及培養基的滅菌 【思考題】 任務5 3無菌室的消毒處理及超凈台的使用 【思考題】 任務5 4液體過濾除菌 【思考題】 項目六 微生物的分離、純化、培養技術 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、接種技術 二、分離純化技術 任務6 1微生物的接種 【思考題】 任務6 2微生物純種的分離培養及菌落 特徵觀察 【思考題】 項目七 微生物染色及顯微形態觀察技術 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、顯微技術 二、染色技術 任務7 1普通光學顯微鏡的使用 【思考題】 任務7 2細菌帶者的染色及形態結構觀察 【思考題】 任務7 3酵母菌、黴菌的染色及形態結構 觀察 【思考題】 閱讀小知識:顯微鏡 項目八 微生物的計數技術 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、細胞數量的測定 二、細胞生物量的測定 任務8 1顯微鏡直接計數 【思考題】 任務8 2平板菌落計數 【思考題】 項目九 菌種保藏技術 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、菌種保藏的基本原理 二、菌種保藏方法 任務9 1實驗室常用簡易菌種保藏法 【思考題】 任務9 2菌種的冷凍真空乾燥保藏法 【思考題】 任務9 3菌種的液氮超低溫保藏法 【思考題】 項目十 血清學檢驗技術 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、抗原、抗體及血清學反應 二、血清學反應的特點及影響因素 三、血清學反應的基本類型 閱讀小知識:單克隆抗體及 生物導彈 第三模塊 產品中的微生物檢驗綜合實訓 項目十一 微生物檢驗工作流程與質量控制 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、微生物檢驗工作流程 二、微生物檢測的質量控制 任務11 1對某一檢測結果的分析和報告 的撰寫 【思考題】 項目十二 食品的微生物學檢驗 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、概述 二、食品檢樣的採集與制備 三、食品檢樣的保存及送檢 四、食品衛生微生物學檢驗技術 五、食品中致病菌的檢測技術檔液 六、食品中黴菌和酵母菌的檢驗技術 七、微生物快速檢測技術 任務12 1食品中細菌總數和大腸菌群的檢測 【思考題】 任務12 2罐頭食品商業無菌的檢測 【思考題】 任務12 3酸乳中乳酸菌的檢測 【思考題】 任務12 4食品中糞大腸菌群的檢測 【思考題】 任務12 5紙片法快速檢測食品中金黃色 葡萄球菌 【思考題】 項目十三 化妝品的微生物學檢驗 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、概述 二、化妝品的衛生學檢驗標准 三、化妝品的採集與預處理 四、化妝品的衛生細菌檢驗 任務13 1化妝品中綠膿桿菌的檢測 【思考題】 項目十四 葯品的微生物學檢驗 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、葯品無菌檢查法 二、微生物限度檢查法 任務14 10?9%氯化鈉注射劑的無菌 檢驗 【思考題】 任務14 2咳嗽糖漿中細菌總數、黴菌及 酵母菌總數的測定 【思考題】 項目十五 環境的微生物學檢測 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、空氣潔凈度的微生物檢測 二、水質的微生物學檢驗 三、活性污泥中微生物生物量的測定 任務15 1生活飲用水中細菌總數和總 大腸菌群的檢測 【思考題】 任務15 2發酵車間空氣中微生物的 測定 【思考題】 任務15 3活性污泥生物相的觀察 【思考題】 附錄 附錄1 微生物實驗室常用玻璃器皿及 洗滌 附錄2 實驗室常用培養基的配製 附錄3 實驗室常用染色液的配製 附錄4 食品生產相關產品的國家衛生 標准 附錄5 《中華人民共和國葯典》(2005年版) (二部)微生物限度標准 附錄6 化妝品衛生標准(GB7916-87) 參考文獻 隨著經濟的高速發展和加入WTO,我國已全面走向世界經濟大舞台,國際、國內貿易迅猛發展,商品貿易快速增加。
在產品的生產企業、流通領域及質量技術監督管理部門,迫切需要從事產品質量控制、商品質量檢驗、質量技術監督與管理等方面的專業人才,高職高專商品質量檢驗專業正是為適應這一新。
2.微生物常識
微生物的定義 形體微小,結構簡單,通常要用光學顯微鏡和電子顯微鏡才能看清楚的生物,統稱為微生物。
(但有些微生物是可以看見的,像屬於真菌的蘑菇、靈芝等。) 1 特點: 個體微小,一般<0.1mm。
構造簡單,有單細胞的,簡單多細胞的,非細胞的。進化地位低。
2 分類: 原核類: 三菌,三體。 真核類: 真菌,原生動物,顯微藻類。
非細胞類: 病毒,亞病毒 ( 類病毒,擬病毒,朊病毒)。 3 五大共性: 體積小,面積大; 吸收多,轉化快微生物; 生長旺,繁殖快; 適應強,易變異; 分布廣,種類多。
[編輯本段]微生物的類群 種類 原核:細菌、放線菌、螺旋體、支原體、立克次氏體、衣原體。 真核:真菌、藻類、原生動物。
非細胞類:病毒和亞病毒。 一般地,在中國大陸地區的教科書中,均將微生物劃分為以下8大類: 細菌、病毒、真菌、放線菌、立克次體、支原體、衣原體、螺旋體。
1 細菌: (1)定義:一類細胞細短,結構簡單,胞壁堅韌,多以二分裂方式繁殖和水生性強的原核生物 (2)分布:溫暖,潮濕和富含有機質的地方 (3)結構:主要是單細胞的原核生物,有球形,桿形,螺旋形 基本結構:細胞膜 細胞壁 細胞質 核質 特殊結構:莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞 (4)繁殖: 主要以二分裂方式進行繁殖的 (5)菌落: 單個細菌用肉眼是看不見的,當單個或少數細菌在固體培養基啊行大量繁殖時,便會形成一個肉眼可見的,具有一定形態結構的子細胞群落. 菌落是菌種鑒定的重要依據.不同種類的細菌菌落的大小,形狀光澤度顏色硬度透明度都不同. 2 放線菌 (1)定義:一類主要成菌絲狀生長和以孢子繁殖的陸生性較強的原核生物 (2)分布:含水量較低,有機物較豐富的,呈微鹼性的土壤中 (3)形態構造:主要由菌絲組成,包括基內菌絲和氣生菌絲(部分氣生菌絲可以成熟分化為孢子絲,產生孢子) (4)繁殖:通過形成無性孢子的形式進行無性繁殖 無性繁殖 有性繁殖 (5)菌落:在固體培養基上:乾燥,不透明,表面呈緻密的絲絨狀,彩色乾粉 3 病毒 (1) 定義:一類由核酸和蛋白質等少數幾種成分組成的「非細胞生物」,但是它的生存必須依賴於活細胞. (2)結構:蛋白質衣殼以及核酸(核酸為DNA或RNA) (3)大小:一般直徑在100nm左右,最大的病毒直徑為200nm的牛痘病毒,最小的病毒直徑為28nm的脊髓灰質炎病毒 (4)增殖:病毒的生命活動中一個顯著的特點為寄生性。病毒只能寄生在某種特定的活細胞內才能生活。
並利用會宿主細胞內的環境及原料快速復制增值。在非寄生狀態時呈結晶狀,不能進行獨立的代謝活動。
以 噬菌體為例: 吸附→DNA注入→復制、合成→組裝→釋放[編輯本段]微生物的特點 一、微生物的化學組成 C,H,O,N,P,S以及其他元素 二、微生物的營養物質 1 水和無機鹽 2 碳源:凡能為微生物提供生長繁殖所需碳元素的營養物質 來源 作用 3氮源:凡能為微生物提供所必需氮元素的營養物質 來源 作用:主要用於合成蛋白質,核酸以及含氮的代謝產物 4 能源:能為微生物生命活動提供最初能源來源的營養物質或輻射能 根據碳源和能源分類: 5生長因子:微生物生長不可缺少的微量有機物 能引起人和動物致病的微生物叫病源微生物,有八大類: 1.真菌:引起皮膚病。深部組織上感染。
2放線菌:皮膚,傷口感染。 3螺旋體:皮膚病,血液感染 如梅毒,鉤端螺旋體病。
4細菌:皮膚病化膿,上呼吸道感染 ,泌尿道感染,食物中毒,敗血壓症,急性傳染病等。 5立克次氏體:斑疹傷寒等。
6衣原體:沙眼,泌尿生殖道感染。 7病毒:肝炎,乙型腦炎,麻疹,艾滋病等。
8支原體:肺炎,尿路感染。 生物界的微生物達幾萬種,大多數對人類有益,只有一少部份能致病。
有些微生物通常不致病,在特定環境下能引起感染稱條件致病菌。 能引起食品變質,腐敗,正因為它們分解自然界的物體,才能完成大自然的物質循環。
微生物的作用 微生物對人類最重要的影響之一是導致傳染病的流行。在人類疾病中有50%是由病毒引起。
世界衛生組織公布資料顯示:傳染病的發病率和病死率在所有疾病中占據第一位。微生物導致人類疾病的歷史,也就是人類與之不斷斗爭的歷史。
在疾病的預防和治療方面,人類取得了長足的進展,但是新現和再現的微生物感染還是不斷發生,像大量的病毒性疾病一直缺乏有效的治療葯物。一些疾病的致病機制並不清楚。
大量的廣譜抗生素的濫用造成了強大的選擇壓力,使許多菌株發生變異,導致耐葯性的產生,人類健康受到新的威脅。一些分節段的病毒之間可以通過重組或重配發生變異,最典型的例子就是流行性感冒病毒。
每次流感大流行流感病毒都與前次導致感染的株型發生了變異,這種快速的變異給疫苗的設計和治療造成了很大的障礙。而耐葯性結核桿菌的出現使原本已近控制住的結核感染又在世界范圍內猖獗起來。
微生物千姿百態,有些是腐敗性的,即引起食品氣味和組織結構發生不良變化。當然有些微生物是有益的,它們可用來生產如乳酪,麵包,泡菜,啤酒和葡萄酒。
微生物非常小,必須通過顯微鏡放大約1000 倍才能看到。比如中等大小的細菌,1000個疊加在一起只有句。
3.微生物檢測
黴菌和酵母計數操作細則1 設備和材料 1。
1 溫箱:25~28℃。 1。
2 振盪器。 1。
3 天平。 1。
4 顯微鏡。 1。
5 玻塞三角瓶:300mL。 1。
6 試管:15mm*150mm。 1。
7 平皿:直徑9cm。 1。
8 吸管:1mL及10mL。 1。
9 酒精燈。 1。
10 載物玻片。 1。
11 蓋玻片。 1。
12 廣口瓶。 1。
13 牛皮紙袋:121℃滅菌20min。 1。
14 金屬勺、刀等。 1。
15 試管架。 1。
16 接種針。 1。
17 橡皮 *** 。 2 培養基和試劑 2。
1 馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養基,附加抗菌素,按GB 4789。 28中4。
79規定。 2。
2 孟加拉紅培養基:按GB 4789。28中4。
81規定。 2。
3 滅菌蒸餾水。 2。
4 乙醇。 3 操作步驟 3。
1 采樣:取樣時須特別注意樣品的代表性和避免采樣時的污染。首先准備好滅菌容器和采樣工具,如滅菌牛皮紙袋或廣口瓶,金屬刀或勺等。
在衛生學調查基礎上,採取有代表性的樣品。樣品採集後應盡快檢驗,否則應將樣品放在低溫乾燥處。
糧食(包括糧庫貯糧,糧店或家庭小量存糧)樣品的採集,可根據糧囤或糧垛的大小和類型,分層定點取樣,一般可分三層五點,或分層隨機採取不同點的樣品,充分混合後,取500g左右送檢。 小量存糧可使用金屬小勺採取上、中、下各部位的混合樣品。
穀物加工製品(包括熟飯、糕點、麵包等)、發酵食品、乳及乳製品以及其他液體食品,用滅菌工具採集可疑霉變食品250g,裝入滅菌容器內送檢。 3。
2 以無菌操作稱取檢樣25g(或25mL),放人含有225mL滅菌水的玻塞三角瓶中,振搖30min,即為1:10稀釋液。 3。
3 用滅菌吸管吸取1∶10稀釋液10mL,注入試管中,另用帶橡皮 *** 的1mL滅菌吸管反復吹吸50次,使黴菌孢子充分散開。 3。
4 取1mL1∶10稀釋液注入含有9mL滅菌水的試管中,另換一支1mL滅菌吸管吹吸5次,此液為1∶100稀釋液。 3。
5 按上述操作順序做10倍遞增稀釋液,每稀釋一次,換用一支1mL滅菌吸管,根據對樣品污染情況的估計,選擇3個合適的稀釋度,分別在做10倍稀釋的同時,吸取1mL稀釋液於滅菌平皿中,每個稀釋度做2個平皿,然後將涼至45℃左右的培養基注入平皿中,待瓊脂凝固後,倒置於25~28℃溫箱中,3d後開始觀察,共培養觀察5d。 3。
6 計算方法:通常選擇菌落數在10~150之間的平皿進行計數,同稀釋度的2個平皿的菌落平均數乘以稀釋倍數,即為每克(或毫升)檢樣中所含黴菌和酵母數。 3。
7 報告:每克(或毫升)食品所含黴菌和酵母數以個/g(個/mL)表示。
4.微生物檢測或鑒定技術或方法有哪些
通過顯微鏡直接觀察。
一般來說,在一定的培養條件下(相同的培養基、溫度以及培養時間),同種微生物表現出穩定的菌落特徵。這些特徵包括菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等方面。
(見高中生物選系1《生物技術實踐》圖2-8)因此可以通過顯微鏡觀察菌落特徵對微生物種類進行判斷。 使用選擇培養基培養微生物或人為提供有利於目的菌株生長的條件。
選擇培養基,顧名思義其作用是允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他微生物生長。例如,使用以尿素作為唯一氮源的培養基能夠培養出可合成脲酶的微生物;在培養基中PH調至酸性有利於黴菌的生長繁殖(抑制細菌的生命活動)等。
選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特徵進行間接判斷,得到的微生物往往並不只有一種,但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。
5.微生物食品檢測的檢測方法有哪些
Easy TestTMEasyTestTM測試片利用了特異性酶與特異性顯色底物反應的原理,使目標菌與非目標菌呈現可明顯區別的不同特異性顏色;EasyTestTM測試片的培養載體採用了無紡布和水溶性營養底物的設計,具有良好的吸水性,可快速吸收測試液,使微生物自動均勻分布於無紡布上,為測試液和營養底物創造了一個固定的混合區域;EasyTestTM測試片為一次性即用產品,操作簡便、無需耗費大量人力配製培養基和高壓滅菌、後續廢棄物的處理工作簡單、環保,並且最重要的是可以有效縮短檢測時間、提高檢測效率,非常適用於食品微生物檢測和環境衛生監測。
試驗方法選取100份食品樣品,包括肉製品、乳製品、蔬菜、豆製品、水果、油炸食品、面點、飲料、水產品、速凍食品和調味品,以國家標准方法GB4789-2010《食品安全國家標准食品微生物學檢驗》為檢測依據,採用EasyTestTM測試片、3MPetrifilmTM測試片和國標的傳統培養基法分別測定各個樣品的菌落總數、大腸桿菌數和大腸菌群數,再將EasyTestTM測試片的結果分別與3MPetrifilmTM測試片和國家標准中的傳統培養法得到的結果進行比較,然後根據相關性判斷EasyTestTM測試片的准確度和適用性。 結果分析菌落總數試驗EasyTestTM菌落總數測試片以TTC(氯化三苯四氮唑,一種氧化還原指示劑)為顯色物質,TTC接受微生物呼吸鏈產生的氫後可形成非水溶性的紅色三苯甲脂,紅色三苯甲脂經微生物作用會在EasyTestTM測試片的無紡布上形成紅色點狀物(EasyTestTM測試片上的菌落分布情況見圖3),通過計數紅點,即可獲得菌落總數。
EasyTestTM菌落總數測試片的培養條件為36±1℃,48±3h。
6.細菌感染的微生物學檢測方法是怎樣的
細菌感染的微生物學檢測方法:包括細菌學診斷 (檢測及鑒定病原菌);檢測病原菌成分(抗原和核酸),以及檢測患 者血中特異性抗體。
①細菌學診斷:包括直接鏡檢、細菌染色檢查 法、分離與培養。細菌染色檢查法主要包括革蘭染色、抗酸染色和熒 光染色後光鏡檢查。
但很多細菌的形態和染色性缺乏明顯特徵,僅憑 形態學不能做確切的診斷。②檢測病原菌成分:包括抗原檢測及核酸 檢測。
a.抗原檢測常用的方法有玻片凝集試驗、協同凝集試驗、間接 血凝試驗、乳膠凝集試驗、對流免疫試驗、酶免疫技術、免疫熒光技 術和同位素標記技術等。這些試驗特異、敏感、簡便,即使是在採集樣品前患者使用了抗生素,對細菌的培養不易成功,但細菌的抗原仍 能被檢測出來。
b.核酸檢測是近年來廣泛應用的分子生物學技術,③抗體的檢測,即血清學檢測。常用的血清學 試驗包括玻片或試管凝集試驗、沉澱試驗、補體結合試驗和冷凝集試驗等,可根據病原菌的種類加以選擇。
7.食品微生物檢測檢什麼
食品中的微生物按照其對人類有無危害可分為兩類。
一類是有益菌;例如酵母菌、乳酸菌等,可用來釀造美酒或腌制鹹菜;另一類是有害菌,例如大腸菌群及其他腸道性致病菌,它們會引起食物中毒或引發傳染病。 食品的微生物檢測內容比較多。
其中,反映食品衛生質量的細菌污染指標是菌落總數和大腸菌群。 食品中的細菌數量一般是以單位(g、ml)食品中細菌的個數來計,常用菌落總數來表示。
利用菌落總數一方面可以起到監督食品的清潔狀態的作用,另一方面可以用來預測食品的保藏期。大腸菌群是腸道致病菌污染的指示菌,它一般直接或間接來自人與溫血動物糞便。
食品中如檢出大腸菌群,就表示食品曾受到污染。 菌落總數和大腸菌群是食品的衛生指標,絕大部分食品都需要檢驗這兩個指標是否合格。
其中,菌落總數培養時間是48小時,大腸菌群的檢測時間也在24到72小時之間。按照國標要求,菌落總數和大腸菌群是食品企業出廠時必須檢驗的項目。
除衛生指標之外,食品中還需檢驗是否含有致病菌(致病菌不得檢出),包括黴菌和酵母菌以及沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌等。 致病菌的種類很多,並非所有食品所檢致病菌都相同,常檢的致病菌有沙門、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌等。
當然,根據產品的類別不同,檢測項目也存在差別,一般可以按照產品和原材料等所屬的衛生標准來確定檢測的項目。
③ 微生物學檢查主要包括哪三樣
微生物學檢查的方法
臨床微生物學實驗室接到標本後應立即進行微生物學檢驗。主要包括直接鏡檢、檢測特異性抗原或病原體成分、進行分離培養和鑒定、體外葯敏試驗等。
(一)直接鏡檢
標本經塗片染色或制備濕片鏡檢,有些標本如尿液、腦脊液等經過離心濃縮後鏡檢出其初步結果對有些病人標本有診斷參考價值。直接鏡檢對於確定進一步檢出步驟及鑒定方法也很有幫助。另外,直接鏡檢還可評價標本是否符合檢驗要求。
(二)快速診斷
快速檢測病原體成分主要是指特異性抗原和核酸檢測。特異性抗原檢測包括免疫熒光技術、膠乳凝集試驗、酶免疫技術、對流免疫電泳、化學發光免疫測定等。核酸檢測包括核酸探針雜交、PCR技術。其他快速檢測法還有氣-液相色譜法、化學發光、生物發光測定法和基因或蛋白微型陣列晶元技術等。
(三)直接葯敏試驗
直接葯敏試驗即在分離培養病原體的同時,直接將臨床標本接種於平板,用抗生素紙片作葯物敏感性試驗,在18~24h內可獲得結果。但因其在試驗時接種量難以標准化,且對混有雜菌和混合感染的標本不易明確其結果,故分離出純培養物後應再作體外葯物敏感試驗。
(四)常規檢驗
1.分離培養:通常由正常無菌部位採取的標本接種血平板,置於空氣或含5%~10%CO2的氣缸中培養,大部分細菌可於24~48h生長良好。若原始培養為陰性,但據鏡檢結果和臨床信息提示可能有病原菌存在,則應再採集大量標本,離心濃縮或溶解離心法處理,取沉澱接種營養豐富的需氧或厭氧培養基來培養。
對於存在正常菌群部位採集的標本,分離時應採用選擇培養基以利於病原菌生長,也可加某些抗生素抑制污染菌的生長。對於某些感染標本中發現的細菌,如尿路感染的尿液中檢出大腸埃希菌,可能是病原菌,也可能是污染菌或正常菌群,其臨床意義的確定有賴於定量培養法。即取一定量的標本如液體標本用液體培養基作一系列稀釋;組織標本稱量後製成懸液,並稀釋成l0-1,10-2,10-3等,分別取0.1ml塗布於血瓊脂平板或傾注培養,35℃24h後計算每克標本所含細菌數。
2.鑒定:分離出的細菌一般應經過細菌形態、菌落特點、生化反應、血清學試驗、動物接種等鑒定。目前尚有某些微量鑒定系統,其鑒定快速、簡便,值得推廣。如用於鑒定腸桿菌科的20E,鑒定非發酵菌的20NE及鑒定厭氧菌的20A等。
3.體外純菌葯物敏感性試驗:常用方法包括抑菌試驗、殺菌試驗、聯合葯敏試驗和檢測細菌產生的抗生素滅活酶等。
(五)報告
直接鏡檢要求2h報告,說明標本是否合格,發現微生物情況和特點;初步鑒定和直接葯敏結果於24h或次晨報告,報告可能的病原菌和直接葯敏結果;最後鑒定和細菌葯敏結果一般不超過3天,還規定除血培養外,所有送檢標本必須在24h內預報。
④ 微生物檢測包括哪些啊
食品中微生物指標的常見檢驗項目如下:菌落總數、大腸菌群計數、大腸桿菌計數、腸道致病菌(沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌)、副溶血性弧菌、單核細胞增生李斯特氏菌、雙岐桿菌、空腸彎麴菌、黴菌計數和酵母計數。
一般食品中活菌數達到108cfu.g⁻¹時,則可認為食品處於初期腐敗階段。
(4)微生物檢驗技術有哪些方面擴展閱讀
微生物檢驗方法包括顯微鏡檢、染色技術、培養基制備技術、接種、分離純化和培養技術等。
接種,將微生物接到適於它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程。
分離純化,在進行菌種鑒定時,所用的微生物一般均要求為純的培養物。得到純培養的過程。
培養,根據培養時是否需要氧氣,可分為好氧培養和厭氧培養。根據培養基的物理狀態,可分為固體培養和液體培養兩大類。
⑤ 微生物檢驗包括哪些項目
微生物檢測有一般微生物如細菌總數、黴菌和酵母計數檢測,以及致病菌檢測,在一定的培養條件下(相同的培養基、溫度以及培養時間),同種微生物表現出穩定的菌落特徵。
根據微生物的代謝特點,在培養基中加入某種指示劑或化學葯品。與選擇培養相比,鑒別培養基的鑒別所得結果的范圍比較小,一般可直接測定某微生物的種類。
選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特徵進行間接判斷,得到的微生物往往並不只有一種,但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。
微生物檢驗范圍
國內外開展微生物檢驗的食品種類較多,食品分類方法也不盡相同。總的來看涉及微生物檢驗的食品種類主要有:奶製品、預烹煮食品、飲用水、蛋製品、水果、穀物、嬰幼兒食品、肉及肉製品、軟體動物、禽肉、貝類、白明膠、香草(葯)。
即食食品、罐頭食品、調味品,粉類製品、豆製品、冷凍飲品、糖果、海鮮、甜點、蔬菜、藻類、食療食品、米面製品等。
我國開展微生物檢驗的重點食品種類為:奶製品、罐頭食品、調味品、蛋製品、澱粉類製品、發酵和非發酵性豆製品、冷凍飲品、糖果、飲用天然礦泉水等,其中食糖以及保健品的微生物檢驗為我國所獨有。
⑥ 病原微生物中細菌常見檢測方法有哪些
病原微生物種類繁多,變異迅速,快速鑒定病原微生物的檢驗技術也在不斷發展前進著。目前,應用比較廣泛的病原微生物檢測方法主要有直接塗片鏡檢、分離培養、生化反應、血清學反應、核酸分子雜交、基因晶片、多聚酶鏈反應等,該文對這些檢測技術進展做一綜述。 對人和動物具有致病性的微生物稱為病原微生物,又稱病原體,有病毒、細菌、立克次體、支原體、衣原體、螺旋體、真菌、放線菌、朊粒等。這些病原微生物可引起感染、過敏、腫瘤、痴獃等疾病,也是危害食品安全的主要因素之一。近年來出現的SARS、高致病性禽流感、西尼羅病毒感染等疾病的傳染性極強,往往造成世界性大流行,因此對病原體的檢測必須做到快速、准確。常規病原學檢測方法操作繁瑣,檢測周期長,而且對操作人員技術水平要求比較高。隨著醫學微生物學研究技術的不斷發展,病原學診斷已不再局限於病原體水平,深入到分子水平、基因水平的檢測手段不斷出現並被應用於臨床和實驗室 J。核酸分子雜交技術、PCR技術、基因晶片技術等檢測方法,自動化程度高,快速省時、無污染、結果精確,可以准確靈敏地鑒定病原微生物。1 傳統的病原微生物的檢測方法傳統的病原微生物學實驗室檢查以染色、培養、生化鑒定等為主,將標本直接塗片染色鏡檢和接種在培養基上進行分離培養是對細菌或真菌感染性疾病進行病原學診斷的常用方法。1.1 直接塗片鏡檢病原微生物體形體積微小,大多無色半透明狀,將其染色後可藉助顯微鏡觀察其大小、形態、排列等。直接塗片染色鏡檢簡便快速,對那些具有特殊形態的病原微生物感染仍然適用,例如淋球菌感染、結核分枝桿菌、螺旋體感染等的早期初步診斷。直接塗片鏡檢不需要特殊的儀器和裝置,在基層實驗室里仍然是十分重要的病原微生物檢測手段。1.2 分離培養與生化反應 分離培養主要用於臨床標本(如血液、痰、糞便等)或培養物中有多種細菌時對某一種細菌的分離。細菌的生長繁殖需要一定時間,檢測周期較長,不能同時處理批量樣本。為解決這一問題,各種自動化培養和鑒定系統不斷產生,傳統鑒定方法也在逐步改進,大大加快了檢驗速度。例如Microscan WalLCAway全自動微生物分析儀,可同時做細菌鑒定和葯敏試驗,檢驗500多個菌種。苛養菌如肺炎鏈球菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血桿菌等對營養要求比較高,常規培養陽性率低。雍剛 等將不要同比例的葡萄糖、玉米澱粉、生長因子、酵母粉、氨基酸等特殊增菌劑加入到巧克力培養基中製成了新型淋病奈瑟菌培養基,大大提高了淋病奈瑟菌的分離培養率。蘇盛通等在營養瓊脂中加人了中葯紅棗、赤小豆培養甲型鏈球菌、乙型鏈球菌、肺炎鏈球菌等細菌,生長指數明顯高於血平板。1.3 組織細胞培養 活組織細胞培養適於專營活組織細胞內生存的病原體,包括病毒、立克次體、衣原體等。不同病原體敏感的組織細胞是不一樣的,將活細胞從病原體敏感的動物組織中取出在體外進行原代培養或用病原體敏感細胞系進行傳代培養,再將病原體接種於相應的組織細胞中後,病原體可在其中繁殖增長,引起特異性的細胞病變效應。也可以將病原體直接接種於敏感動物體內,引起相應組織器官出現特異的病理學改變。往往可以根據這些特異的病變對病原體進行鑒定。2 血清學與免疫學檢測血清學檢測是通過已知的抗體或抗原來檢測病原體的抗原或抗體從而對病原體進行快速鑒定的技術,簡化了鑒定步驟,常用的方法包括血清凝集技術、乳膠凝集實驗、熒光抗體檢測技術、協同凝集試驗、酶聯免疫測試技術等。酶聯免疫技術的應用大大提高了血清學檢測的敏感性和特異性,不僅可檢測樣本中病原體抗原,也可檢測機體的抗體成分。幽門螺奸菌在我國人群感染率高達50% ~80% ,應用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測唾液中抗HP抗體來診斷HP感染,其結果滿意。乙型肝炎病毒(HBV)在我國人群中感染率極高,ELISA應用於乙型肝炎病人早期血清學診斷的效果最為明顯。臨床上致病菌往往和非致病菌混合在一起,如何從這些細菌中分離出目標菌是關鍵。免疫磁珠分離技術(IMBS)是近年來發展起來的在微生物檢測領域中一種新技術。其基本原理是將特定病原體的單抗或多抗或二抗偶聯到磁珠微球上,通過抗原抗體反應形成磁珠一目標病原體復合物或磁珠一一抗一目標病原體復合物,在外部磁場磁力的作用下,將目標病原體分離出來。目前已經開發出了針對各種病原體的免疫磁珠,如大腸埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、軍團菌等,廣泛應用到各級科研和實驗室 。經IMBS分離出的白色念珠菌可直接在顯微鏡下檢測,檢測時間縮短至4 h。IM—Bs還可以和其它檢測技術聯合來檢測病原菌,免疫磁珠分離得到的目標菌可繼續用於分離培養使大腸埃希菌0157最低檢測限由200 cfu·g 提高到2 cfu·g~;IMBS結合聚合酶鏈反應(IMBS—PCR)可對培養條件比較特殊的細菌如苛養菌、厭氧菌進行快速檢測,肉類中的產毒素型產氣莢膜梭菌經IMBS.PCR檢測
目前主要普通培養(簡稱標)般報告要用儀器、核酸檢測(PCR)、目前快速檢測(主要包括:免疫磁珠、酶聯免疫試劑盒、金標檢測卡等根據自需求選擇
目前主要有普通培養法(簡稱國標方法)一般出報告的要用,儀器法、核酸檢測法(PCR)、還有目前的快速檢測法(主要包括:免疫磁珠、酶聯免疫試劑盒、金標檢測卡等。這個根據自己的需求來選擇吧。
簡述hiv的微生物學檢測方法有哪些
梅毒是由蒼白螺旋體感染引起的一種性傳播性疾病 。梅毒螺旋體感染人體後出現兩種抗體:一種是特異性抗體(TPHA),為lgM。當有補體存在和厭氧條件下,對活螺旋體的動力有抑製作用,並可將螺旋體殺死或溶解,對機體的再感染有保護作用。另一類是非特異性抗體(快速血漿反應素 RPR)。為lgA與lgM的混合物,可與正常生物組織中的類脂抗原發生非特異性結合,對人體無保護作用
傳統檢測有三種方法
1、直接顯微鏡觀察,正常情況,在一定的培養條件下(相同的培養基、溫度以及培養時間),同種微生物表現出穩定的菌落特徵。可以通過顯微鏡觀察菌落特徵對微生物種類進行判斷。
2、選擇培養基培養微生物或人為提供有利於目的菌株生長的條件,選擇培養基,其作用是允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他微生物生長。選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用型別或某一特徵進行間接判斷,得到的微生物往往並不只有一種,但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。
3、鑒別培養基,根據微生物的代謝特點,在培養基中加入某種指示劑或化學葯品。與選擇培養相比,鑒別培養基的鑒別所得結果的范圍比較小,一般可直接測定某微生物的種類。
現代定義
微生物:個體難以用肉眼觀察的一切微小生物之統稱。
微生物包括細菌、病毒、真菌、和少數藻類等。(但有些微生物是肉眼可以看見的,像屬於真菌的蘑菇、靈芝等。)病毒是一類由核酸和蛋白質等少數幾種成分組成的「非細胞生物」,但是它的生存必須依賴於活細胞。
根據存在的不同環境分為空間微生物、海洋微生物等,按照細胞機構分類分為原核微生物和真核微生物。
主要特徵
1、體小面大
2、吸多轉快
3、生長繁殖快
微生物的這一特性使其在工業上有廣泛的應用,如發酵、單細胞蛋白等。微生物是人類不可或缺的好朋友。
這個是我在網上找到的的微生物的檢測試紙片,也不知道方法咋樣,你要也可以去網站上看看的
像大腸桿菌測試紙片 腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現的食物傳播性疾病的病因。它除了引起腹瀉、出血性腸炎外,還可發生溶血性尿毒綜合症、血栓性血小板減少性紫癜等嚴重的並發症。自1982年美國首次發現因該致病菌引起的食物中毒以來,腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開始逐漸擴散和蔓延,相繼在英國、加拿大、日本等多個國家引起腹瀉爆發和流行。我國已陸續有十餘個省份在市售食品、進口食品、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7。大腸桿菌O157測試片(FilmplateTM E.coli O157BO204)3方元方圓生物的採用進口高選擇性顯色培養基作為主要原料,運用專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認,大大地簡化了檢測程式,非常適合各級檢驗部門和食品企業使用。本品適用於海產品、水產品、各類熟肉製品和冷葷、蛋及蛋製品等的快速檢測。參照標准:食品衛生微生物學檢驗大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗(GB/T4789.36)。
; 用浸有滅菌生理鹽水的棉簽在被檢物體表面取25cm2的面積,在其內塗抹10次,然後剪去手接觸部分棉棒,將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的取樣管內送檢。擦拭時棉簽要隨時轉動,保證擦拭的准確性。對每個擦拭點應詳細記錄所在分場的具 *** 置、擦拭時間及所擦拭環節的消毒時間
先配製固體培養基,再劃線培養1天,之後挑每一種菌落的細菌製片,顯微鏡下觀察細菌的種類
⑦ 微生物檢驗技術考試的基本操作知識有哪些
微生物檢驗技術操作的最基本的要求就是無菌二字。說起來簡單,做起來難,操作過程中稍微不注意,染上了雜菌,實驗結果就作廢。
無菌操作技術主要包括兩方面:
1)創造無菌的培養環境。包括提供密閉的培養容器、培養容器的滅菌、培養基的滅菌等;
2)在操作和培養過程中防止一切其它微生物的侵入的措施。包括紫外線殺菌、甲醛熏蒸、超凈台的消毒與檢測、操作工具、器皿滅菌、操作方法等。
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⑧ 微生物檢測有哪些
1、體積測量法:又稱測菌絲濃度法。原理:通過測定一定體積培養液中所含菌絲的量來反映微生物的生長狀況。
菌絲濃度測定法是大規模工業發酵生產上微生物生長的一個重要監測指標。這種方法比較粗放,簡便,快速,但需要設定一致的處理條件,否則偏差很大,由於離心沉澱物中夾雜有一些固體營養物,結果會有一定偏差。
2、稱乾重法。原理:利用離心或過濾法測定。一般乾重為濕重的10-20%。稱乾重發法較為煩瑣,通常獲取的微生物產品為菌體時,常採用這種方法,如活性乾酵母(activity dry yeast, ADY),一些以微生物菌體為活性物質的飼料和肥料。
3、比濁法。原理:微生物的生長引起培養物混濁度的增高。通過紫外分光光度計測定一定波長下的吸光值,判斷微生物的生長狀況。該法主要用於發酵工業菌體生長監測。
4、菌絲長度測量法。方法:對於絲狀真菌和一些放線菌,可以在培養基上測定一定時間內菌絲生長的長度。
⑨ 食品微生物檢測內容有哪些
三個方面的內容:
第一類是致病菌及其毒素,比如沙門氏菌、副溶血性弧菌、單增李斯特菌、金葡菌腸毒素等,它們主要導致胃腸道疾病,嚴重的會造成肝、腦、腎等臟器的損害,甚至死亡。;
第二類是產毒真菌和真菌毒素,包括黃麴黴毒素、伏馬菌素、展青黴素等,它們或造成人的急性中毒事件,或因長期攝入,造成消化道癌症和某些地方病。
第三類是病毒和寄生蟲。
⑩ 微生物檢驗包括哪些
問題一:通常微生物檢驗五項指標分別為哪些 菌種 菌群 總數? 位置? 顏色
問題二:微生物檢驗准備工作包括哪幾個方面 微生物檢驗工作是一項對前期准備要求很嚴格的工作,依照我的個人經驗,建議你要准備以下事項:1,清楚你的檢驗工作的目的,是檢測什麼樣品的什麼項目,依照什麼標准,例如依照GBT 4789.2-2008 食品衛生微生物學檢驗,檢測某食品樣品的菌落總數項目,那處你就要熟讀這個標准,要知道准備什麼用到的儀器器具,用到什麼培養基,要有怎樣的培養條件,怎樣去觀察結果以及數據處理,怎樣填寫檢驗報告。所有這些都瞭然於心,才建議你往下進行。2,所用器具的滅菌准備,培養基的制備、滅菌,樣品的前處理,這些在相應的標准,以及很多的指導書都可以輕易查到,我就不多說。3,檢驗操作環境的准備:如操作台的紫外照射消毒,自身勞保用品的佩戴等,4,培養環境的准備:培養箱的清潔騰空,溫濕度設定到指定數值,便於檢驗操作完成後,馬上放入培養。由於時間有限,個人經驗有限,只能為你提供微薄的經驗分享一下,有更多問題我們可以分享交流一下。
問題三:食品微生物檢驗的指標有哪些 我國衛生部頒布的食品微生物指標有菌落總數、大腸菌群和致病菌三項。
1、菌落總數
菌落總數是指食品檢樣經過處理,在一定條件下培養後所得1g或1ml檢樣中所含細菌菌落的總數。它可以反應食品的新鮮度、被細菌污染的程度、生產過程中食品是否變質和食品生產的一般衛生狀況等。因此它是判斷食品衛生質量的重要依據之一。
2、大腸菌群
大腸菌群包括大腸桿菌和產氣桿菌的一些中間類型的細菌。這些細菌是寄居於人及溫血動物腸道內的腸居菌,它隨著的大便排出體外。食品中如果大腸菌群數越多,說明食品受糞便污染的程度越大。故以大腸菌群作為糞便污染食品的衛生指標來評價食品的質量,具有廣泛的意義。
3、致病菌
致病菌既能夠引起人們發病的細菌。對不同的食品和不同的場合,應該選擇一定的參考菌群進行檢驗。例如:海產品以副溶血性弧菌作為參考菌群,蛋與蛋製品以沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌等作為參考菌群,米、面類食品以蠟樣芽孢桿菌、變形桿菌、黴菌等作為參考菌群,罐頭食品以耐熱性芽孢菌作為參考菌群等等。
4、黴菌及其毒素
我國還沒有制定出黴菌的具體指標,鑒於有很多黴菌能夠產生毒素,引起疾病,故應該對產毒黴菌進行檢驗。例如:麴黴屬的黃麴黴、寄生麴黴等,青酶屬的桔青酶、島青酶等,鐮刀酶屬的串珠鐮刀酶,禾穀鐮刀酶等等。
5、其它指標
微生物指標還應包括病毒,肝炎病毒、豬瘟病毒、雞新城疫病毒、馬立克氏病毒、口蹄疫病毒,狂犬病病毒,豬水泡病毒等;另外,從食品檢驗的角度考慮,寄生蟲也被很多學者列為微生物檢驗的指標:如旋毛蟲,囊尾蚴,住肉孢子蟲、蛔蟲,肺吸蟲,弓形體,蟎,薑片吸蟲,中華分枝睾吸蟲等等 。
問題四:臨床微生物學檢驗的任務有哪些? ① 研究感染性疾病的病原學特徵;② 提供快速、准確的病
原學診斷;③ 指導合理應用抗生素;④ 監控醫院感染。
微生物學檢驗的基本任務:
① 研究標本採集、運送和保存的方法,以及標本的處理方法對提高檢出率的關系。
② 各種感染性疾病的病原體的檢測方法,最佳方法的選擇、各種病原微生物的鑒定程序以及雙歧鑒定流程、質量控制。
③ 各種病原微生物的快速診斷法、自動化儀器和微量化裝制的使用。
④ 執行國際標准操作程序和方法做好抗菌葯物敏感試驗。
⑤結果分析、實驗方法的評價及臨床意義。
問題五:食品微生物的主要檢測指標有哪些 我國衛生部頒布的食品微生物指標有菌落總數、大腸菌群和致病菌三項。
1、菌落總數
菌落總數是指食品檢樣經過處理,在一定條件下培養後所得1g或1ml檢樣中所含細菌菌落的總數。它可以反應食品的新鮮度、被細菌污染的程度、生產過程中食品是否變質和食品生產的一般衛生狀況等。因此它是判斷食品衛生質量的重要依據之一。
2、大腸菌群
大腸菌群包括大腸桿菌和產氣桿菌的一些中間類型的細菌。這些細菌是寄居於人及溫血動物腸道內的腸居菌,它隨著的大便排出體外。食品中如果大腸菌群數越多,說明食品受糞便污染的程度越大。故以大腸菌群作為糞便污染食品的衛生指標來評價食品的質量,具有廣泛的意義。
3、致病菌
致病菌既能夠引起人們發病的細菌。對不同的食品和不同的場合,應該選擇一定的參考菌群進行檢驗。例如:海產品以副溶血性弧菌作為參考菌群,蛋與蛋製品以沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌等作為參考菌群,米、面類食品以蠟樣芽孢桿菌、變形桿菌、黴菌等作為參考菌群,罐頭食品以耐熱性芽孢菌作為參考菌群等等。
4、黴菌及其毒素
我國還沒有制定出黴菌的具體指標,鑒於有很多黴菌能夠產生毒素,引起疾病,故應該對產毒黴菌進行檢驗。例如:麴黴屬的黃麴黴、寄生麴黴等,青酶屬的桔青酶、島青酶等,鐮刀酶屬的串珠鐮刀酶,禾穀鐮刀酶等等。
5、其它指標
微生物指標還應包括病毒,肝炎病毒、豬瘟病毒、雞新城疫病毒、馬立克氏病毒、口蹄疫病毒,狂犬病病毒,豬水泡病毒等;另外,從食品檢驗的角度考慮,寄生蟲也被很多學者列為微生物檢驗的指標:如旋毛蟲,囊尾蚴,住肉孢子蟲、蛔蟲,肺吸蟲,弓形體,蟎,薑片吸蟲,中華分枝睾吸蟲等等 。