❶ 生物製品中水分的測定 直接乾燥法
一、基於生物製品中的水分受熱後，產生的蒸汽壓高於空氣在電熱乾燥箱中的分壓，使製品中的水分蒸發出來，同時，由於不斷的加熱和排走水蒸氣，而達到完全乾燥的目的，製品乾燥速度取決於整個壓差的大小。
二、樣品的制備、測定及結果計算
①樣品必須磨碎，全部皮尺經過20~40目篩陵握含，混勻。在磨碎過程中，要防止樣品水分含量變化。一般水分在14%以下時稱為安全水分，即在實驗室條件下進行粉碎過篩等處理，水分含量一般不會發生變化。但要求動作迅速。制備好的樣品存於乾燥潔凈的磨口瓶中備用。
②測定時，精確稱取上述樣品2~10 g（視樣品性質和水分含量而定），置於已乾燥、冷卻並稱至恆重的有蓋稱量瓶中，移入95~105℃常壓烘箱中，開蓋2~4小時後取出，加蓋置乾燥內冷卻0.5小時後稱重。再烘1小時左右，又冷卻0.5小時後稱重。重復此操作，直至前後兩次質量差不超過2mg即算恆重。
③測定結果按下式計算：
水分（%）= %
式中m1 ----------乾燥前樣品於稱量瓶質量，g
m2 ---------乾燥後樣品與稱量瓶質量，g
m 3 --------- 稱量瓶質量， g
三、操作條件選擇
操作條件選擇主要包括:稱樣數量,稱量皿規格,乾燥設備及乾燥條件等的選擇.
①稱樣數量：測定時稱樣數量一般控制在其乾燥後的殘留物質量在1.5~3g為宜。對於水分含量較低的生物製品，將稱樣數量控制在3~5g。
②稱量皿規格：稱量皿分為玻璃稱量瓶和鋁質稱量盒兩種。前者能耐酸鹼，不受樣品性質的限制，故常用於乾燥法。鋁質稱量盒質量輕，導熱性強，但對酸性食品不適宜，常用於減壓乾燥法。稱量皿規格的選擇，以樣品置於其中平鋪開後厚度不超過皿高的1/3為宜。
③乾燥設備：電熱烘箱有各種形式，一般使用強力循環通風式，其風量較大，烘乾大量試樣時效率高，但質輕試樣有時會飛散，若僅作測定水分含量用，最好採用風量可調節的烘箱。當風量減小時，烘箱上隔板1/2~1/3面積的溫度能保持在規定溫度±1℃的 范圍內，即符合測定使用要求。溫度計通常處於離隔板3cm的中心處，為保證測定溫度較恆定，並減少取出過程中因吸濕而產生的誤差，一批測定的稱量皿最好為8~12個，並排列在隔板的較中心部位。
④乾燥條件：溫度一般控制在95℃~105℃，對熱穩定的生物製品，尺笑可提高到120℃~130℃范圍內進行乾燥；對含還原糖較多的製品應先用低溫（50℃~60℃）乾燥0.5小時，然後在用100℃~105℃乾燥。
乾燥時間的確定有兩種方法，一種是乾燥到恆重，另一種是規定一定的乾燥時間。前者基本能保證水分蒸發完全；對於准確度要求不高的樣品，可採用第二種方法進行。
❷ 科普小知識微生物檢測(微生物檢測技術的內容簡介)
1.微生物檢測技術的內容簡介
第一模塊 微生物檢驗基礎 項目一 微生物及微生物檢驗概述 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、什麼是微生物 二、微生物的特點 三、微蠢蠢薯生物對產品的污染 四、污染的預防與控制 五、微生物檢驗的任務和意義 六、微生物檢驗的對象 七、微生物檢驗的質量管理 八、微生物檢驗的發展趨勢 【思考題】 閱讀小知識：微生物的命名及分類 項目二 微生物的形態結構 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、細菌 二、放線菌 三、酵母菌 四、黴菌 五、病毒 【思考題】 閱讀小知識：小布商成了英國皇家學會的會員 微生物的奠基人——巴斯德 項目三 微生物的生理特性 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、微生物的營養 二、微生物的生長 三、微生物的代謝 【思考題】 閱讀小知識：抗生素的濫用及食品安全 第二模塊 微生物檢驗常規技術 微生物實驗室守則 實驗室的急救 項目四 微生物培養基的配製 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、培養基的分類 二、選用或設計培養基的基本原則 任務4 1配製常用的微生物培養基 【思考題】 項目五 消毒滅菌技術 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、消毒滅菌的有關概念 二、消毒滅菌的方法 任務5 1乾熱滅菌技術及玻璃器皿的滅菌 【思考題】 任務5 2高壓蒸汽滅菌技術及培養基的滅菌 【思考題】 任務5 3無菌室的消毒處理及超凈台的使用 【思考題】 任務5 4液體過濾除菌 【思考題】 項目六 微生物的分離、純化、培養技術 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、接種技術 二、分離純化技術 任務6 1微生物的接種 【思考題】 任務6 2微生物純種的分離培養及菌落 特徵觀察 【思考題】 項目七 微生物染色及顯微形態觀察技術 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、顯微技術 二、染色技術 任務7 1普通光學顯微鏡的使用 【思考題】 任務7 2細菌帶者的染色及形態結構觀察 【思考題】 任務7 3酵母菌、黴菌的染色及形態結構 觀察 【思考題】 閱讀小知識：顯微鏡 項目八 微生物的計數技術 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、細胞數量的測定 二、細胞生物量的測定 任務8 1顯微鏡直接計數 【思考題】 任務8 2平板菌落計數 【思考題】 項目九 菌種保藏技術 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、菌種保藏的基本原理 二、菌種保藏方法 任務9 1實驗室常用簡易菌種保藏法 【思考題】 任務9 2菌種的冷凍真空乾燥保藏法 【思考題】 任務9 3菌種的液氮超低溫保藏法 【思考題】 項目十 血清學檢驗技術 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、抗原、抗體及血清學反應 二、血清學反應的特點及影響因素 三、血清學反應的基本類型 閱讀小知識：單克隆抗體及 生物導彈 第三模塊 產品中的微生物檢驗綜合實訓 項目十一 微生物檢驗工作流程與質量控制 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、微生物檢驗工作流程 二、微生物檢測的質量控制 任務11 1對某一檢測結果的分析和報告 的撰寫 【思考題】 項目十二 食品的微生物學檢驗 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、概述 二、食品檢樣的採集與制備 三、食品檢樣的保存及送檢 四、食品衛生微生物學檢驗技術 五、食品中致病菌的檢測技術檔液 六、食品中黴菌和酵母菌的檢驗技術 七、微生物快速檢測技術 任務12 1食品中細菌總數和大腸菌群的檢測 【思考題】 任務12 2罐頭食品商業無菌的檢測 【思考題】 任務12 3酸乳中乳酸菌的檢測 【思考題】 任務12 4食品中糞大腸菌群的檢測 【思考題】 任務12 5紙片法快速檢測食品中金黃色 葡萄球菌 【思考題】 項目十三 化妝品的微生物學檢驗 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、概述 二、化妝品的衛生學檢驗標准 三、化妝品的採集與預處理 四、化妝品的衛生細菌檢驗 任務13 1化妝品中綠膿桿菌的檢測 【思考題】 項目十四 葯品的微生物學檢驗 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、葯品無菌檢查法 二、微生物限度檢查法 任務14 10?9%氯化鈉注射劑的無菌 檢驗 【思考題】 任務14 2咳嗽糖漿中細菌總數、黴菌及 酵母菌總數的測定 【思考題】 項目十五 環境的微生物學檢測 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、空氣潔凈度的微生物檢測 二、水質的微生物學檢驗 三、活性污泥中微生物生物量的測定 任務15 1生活飲用水中細菌總數和總 大腸菌群的檢測 【思考題】 任務15 2發酵車間空氣中微生物的 測定 【思考題】 任務15 3活性污泥生物相的觀察 【思考題】 附錄 附錄1 微生物實驗室常用玻璃器皿及 洗滌 附錄2 實驗室常用培養基的配製 附錄3 實驗室常用染色液的配製 附錄4 食品生產相關產品的國家衛生 標准 附錄5 《中華人民共和國葯典》（2005年版） （二部）微生物限度標准 附錄6 化妝品衛生標准（GB7916-87） 參考文獻 隨著經濟的高速發展和加入WTO，我國已全面走向世界經濟大舞台，國際、國內貿易迅猛發展，商品貿易快速增加。
在產品的生產企業、流通領域及質量技術監督管理部門，迫切需要從事產品質量控制、商品質量檢驗、質量技術監督與管理等方面的專業人才，高職高專商品質量檢驗專業正是為適應這一新。
2.微生物常識
微生物的定義 形體微小，結構簡單，通常要用光學顯微鏡和電子顯微鏡才能看清楚的生物，統稱為微生物。
（但有些微生物是可以看見的，像屬於真菌的蘑菇、靈芝等。） 1 特點： 個體微小，一般<0.1mm。
構造簡單，有單細胞的，簡單多細胞的，非細胞的。進化地位低。
2 分類： 原核類： 三菌，三體。 真核類： 真菌，原生動物，顯微藻類。
非細胞類： 病毒，亞病毒 （ 類病毒，擬病毒，朊病毒）。 3 五大共性： 體積小，面積大； 吸收多，轉化快微生物； 生長旺，繁殖快； 適應強，易變異； 分布廣，種類多。
[編輯本段]微生物的類群 種類 原核：細菌、放線菌、螺旋體、支原體、立克次氏體、衣原體。 真核：真菌、藻類、原生動物。
非細胞類：病毒和亞病毒。 一般地，在中國大陸地區的教科書中，均將微生物劃分為以下8大類： 細菌、病毒、真菌、放線菌、立克次體、支原體、衣原體、螺旋體。
1 細菌： （1）定義：一類細胞細短，結構簡單，胞壁堅韌，多以二分裂方式繁殖和水生性強的原核生物 （2）分布：溫暖，潮濕和富含有機質的地方 （3）結構：主要是單細胞的原核生物，有球形，桿形，螺旋形 基本結構：細胞膜 細胞壁 細胞質 核質 特殊結構：莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞 （4）繁殖： 主要以二分裂方式進行繁殖的 （5）菌落： 單個細菌用肉眼是看不見的，當單個或少數細菌在固體培養基啊行大量繁殖時，便會形成一個肉眼可見的，具有一定形態結構的子細胞群落. 菌落是菌種鑒定的重要依據.不同種類的細菌菌落的大小，形狀光澤度顏色硬度透明度都不同. 2 放線菌 （1）定義：一類主要成菌絲狀生長和以孢子繁殖的陸生性較強的原核生物 （2）分布：含水量較低，有機物較豐富的，呈微鹼性的土壤中 （3）形態構造：主要由菌絲組成，包括基內菌絲和氣生菌絲（部分氣生菌絲可以成熟分化為孢子絲，產生孢子） （4）繁殖：通過形成無性孢子的形式進行無性繁殖 無性繁殖 有性繁殖 （5）菌落：在固體培養基上：乾燥，不透明，表面呈緻密的絲絨狀，彩色乾粉 3 病毒 （1） 定義：一類由核酸和蛋白質等少數幾種成分組成的「非細胞生物」，但是它的生存必須依賴於活細胞. （2）結構：蛋白質衣殼以及核酸（核酸為DNA或RNA） (3)大小：一般直徑在100nm左右，最大的病毒直徑為200nm的牛痘病毒，最小的病毒直徑為28nm的脊髓灰質炎病毒 （4）增殖：病毒的生命活動中一個顯著的特點為寄生性。病毒只能寄生在某種特定的活細胞內才能生活。
並利用會宿主細胞內的環境及原料快速復制增值。在非寄生狀態時呈結晶狀，不能進行獨立的代謝活動。
以 噬菌體為例： 吸附→DNA注入→復制、合成→組裝→釋放[編輯本段]微生物的特點 一、微生物的化學組成 C,H,O,N,P,S以及其他元素 二、微生物的營養物質 1 水和無機鹽 2 碳源：凡能為微生物提供生長繁殖所需碳元素的營養物質 來源 作用 3氮源：凡能為微生物提供所必需氮元素的營養物質 來源 作用：主要用於合成蛋白質，核酸以及含氮的代謝產物 4 能源：能為微生物生命活動提供最初能源來源的營養物質或輻射能 根據碳源和能源分類： 5生長因子：微生物生長不可缺少的微量有機物 能引起人和動物致病的微生物叫病源微生物，有八大類： 1.真菌：引起皮膚病。深部組織上感染。
2放線菌：皮膚，傷口感染。 3螺旋體：皮膚病，血液感染 如梅毒，鉤端螺旋體病。
4細菌：皮膚病化膿，上呼吸道感染 ，泌尿道感染，食物中毒，敗血壓症，急性傳染病等。 5立克次氏體：斑疹傷寒等。
6衣原體：沙眼，泌尿生殖道感染。 7病毒：肝炎，乙型腦炎，麻疹，艾滋病等。
8支原體：肺炎，尿路感染。 生物界的微生物達幾萬種，大多數對人類有益，只有一少部份能致病。
有些微生物通常不致病，在特定環境下能引起感染稱條件致病菌。 能引起食品變質，腐敗，正因為它們分解自然界的物體，才能完成大自然的物質循環。
微生物的作用 微生物對人類最重要的影響之一是導致傳染病的流行。在人類疾病中有50%是由病毒引起。
世界衛生組織公布資料顯示：傳染病的發病率和病死率在所有疾病中占據第一位。微生物導致人類疾病的歷史，也就是人類與之不斷斗爭的歷史。
在疾病的預防和治療方面，人類取得了長足的進展，但是新現和再現的微生物感染還是不斷發生，像大量的病毒性疾病一直缺乏有效的治療葯物。一些疾病的致病機制並不清楚。
大量的廣譜抗生素的濫用造成了強大的選擇壓力，使許多菌株發生變異，導致耐葯性的產生，人類健康受到新的威脅。一些分節段的病毒之間可以通過重組或重配發生變異，最典型的例子就是流行性感冒病毒。
每次流感大流行流感病毒都與前次導致感染的株型發生了變異，這種快速的變異給疫苗的設計和治療造成了很大的障礙。而耐葯性結核桿菌的出現使原本已近控制住的結核感染又在世界范圍內猖獗起來。
微生物千姿百態，有些是腐敗性的，即引起食品氣味和組織結構發生不良變化。當然有些微生物是有益的，它們可用來生產如乳酪，麵包，泡菜，啤酒和葡萄酒。
微生物非常小，必須通過顯微鏡放大約1000 倍才能看到。比如中等大小的細菌，1000個疊加在一起只有句。
3.微生物檢測
黴菌和酵母計數操作細則1 設備和材料 1。
1 溫箱：25~28℃。 1。
2 振盪器。 1。
3 天平。 1。
4 顯微鏡。 1。
5 玻塞三角瓶：300mL。 1。
6 試管：15mm*150mm。 1。
7 平皿：直徑9cm。 1。
8 吸管：1mL及10mL。 1。
9 酒精燈。 1。
10 載物玻片。 1。
11 蓋玻片。 1。
12 廣口瓶。 1。
13 牛皮紙袋：121℃滅菌20min。 1。
14 金屬勺、刀等。 1。
15 試管架。 1。
16 接種針。 1。
17 橡皮 *** 。 2 培養基和試劑 2。
1 馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養基，附加抗菌素，按GB 4789。 28中4。
79規定。 2。
2 孟加拉紅培養基：按GB 4789。28中4。
81規定。 2。
3 滅菌蒸餾水。 2。
4 乙醇。 3 操作步驟 3。
1 采樣：取樣時須特別注意樣品的代表性和避免采樣時的污染。首先准備好滅菌容器和采樣工具，如滅菌牛皮紙袋或廣口瓶，金屬刀或勺等。
在衛生學調查基礎上，採取有代表性的樣品。樣品採集後應盡快檢驗，否則應將樣品放在低溫乾燥處。
糧食（包括糧庫貯糧，糧店或家庭小量存糧）樣品的採集，可根據糧囤或糧垛的大小和類型，分層定點取樣，一般可分三層五點，或分層隨機採取不同點的樣品，充分混合後，取500g左右送檢。 小量存糧可使用金屬小勺採取上、中、下各部位的混合樣品。
穀物加工製品（包括熟飯、糕點、麵包等）、發酵食品、乳及乳製品以及其他液體食品，用滅菌工具採集可疑霉變食品250g，裝入滅菌容器內送檢。 3。
2 以無菌操作稱取檢樣25g（或25mL），放人含有225mL滅菌水的玻塞三角瓶中，振搖30min，即為1:10稀釋液。 3。
3 用滅菌吸管吸取1∶10稀釋液10mL，注入試管中，另用帶橡皮 *** 的1mL滅菌吸管反復吹吸50次，使黴菌孢子充分散開。 3。
4 取1mL1∶10稀釋液注入含有9mL滅菌水的試管中，另換一支1mL滅菌吸管吹吸5次，此液為1∶100稀釋液。 3。
5 按上述操作順序做10倍遞增稀釋液，每稀釋一次，換用一支1mL滅菌吸管，根據對樣品污染情況的估計，選擇3個合適的稀釋度，分別在做10倍稀釋的同時，吸取1mL稀釋液於滅菌平皿中，每個稀釋度做2個平皿，然後將涼至45℃左右的培養基注入平皿中，待瓊脂凝固後，倒置於25~28℃溫箱中，3d後開始觀察，共培養觀察5d。 3。
6 計算方法：通常選擇菌落數在10~150之間的平皿進行計數，同稀釋度的2個平皿的菌落平均數乘以稀釋倍數，即為每克（或毫升）檢樣中所含黴菌和酵母數。 3。
7 報告：每克（或毫升）食品所含黴菌和酵母數以個/g（個/mL）表示。
4.微生物檢測或鑒定技術或方法有哪些
通過顯微鏡直接觀察。
一般來說，在一定的培養條件下（相同的培養基、溫度以及培養時間），同種微生物表現出穩定的菌落特徵。這些特徵包括菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等方面。
（見高中生物選系1《生物技術實踐》圖2-8）因此可以通過顯微鏡觀察菌落特徵對微生物種類進行判斷。 使用選擇培養基培養微生物或人為提供有利於目的菌株生長的條件。
選擇培養基，顧名思義其作用是允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他微生物生長。例如，使用以尿素作為唯一氮源的培養基能夠培養出可合成脲酶的微生物；在培養基中PH調至酸性有利於黴菌的生長繁殖（抑制細菌的生命活動）等。
選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特徵進行間接判斷，得到的微生物往往並不只有一種，但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。
5.微生物食品檢測的檢測方法有哪些
Easy TestTMEasyTestTM測試片利用了特異性酶與特異性顯色底物反應的原理，使目標菌與非目標菌呈現可明顯區別的不同特異性顏色；EasyTestTM測試片的培養載體採用了無紡布和水溶性營養底物的設計，具有良好的吸水性，可快速吸收測試液，使微生物自動均勻分布於無紡布上，為測試液和營養底物創造了一個固定的混合區域；EasyTestTM測試片為一次性即用產品，操作簡便、無需耗費大量人力配製培養基和高壓滅菌、後續廢棄物的處理工作簡單、環保，並且最重要的是可以有效縮短檢測時間、提高檢測效率，非常適用於食品微生物檢測和環境衛生監測。
試驗方法選取100份食品樣品，包括肉製品、乳製品、蔬菜、豆製品、水果、油炸食品、面點、飲料、水產品、速凍食品和調味品，以國家標准方法GB4789-2010《食品安全國家標准食品微生物學檢驗》為檢測依據，採用EasyTestTM測試片、3MPetrifilmTM測試片和國標的傳統培養基法分別測定各個樣品的菌落總數、大腸桿菌數和大腸菌群數，再將EasyTestTM測試片的結果分別與3MPetrifilmTM測試片和國家標准中的傳統培養法得到的結果進行比較，然後根據相關性判斷EasyTestTM測試片的准確度和適用性。 結果分析菌落總數試驗EasyTestTM菌落總數測試片以TTC（氯化三苯四氮唑，一種氧化還原指示劑）為顯色物質，TTC接受微生物呼吸鏈產生的氫後可形成非水溶性的紅色三苯甲脂，紅色三苯甲脂經微生物作用會在EasyTestTM測試片的無紡布上形成紅色點狀物（EasyTestTM測試片上的菌落分布情況見圖3），通過計數紅點，即可獲得菌落總數。
EasyTestTM菌落總數測試片的培養條件為36±1℃，48±3h。
6.細菌感染的微生物學檢測方法是怎樣的
細菌感染的微生物學檢測方法：包括細菌學診斷 （檢測及鑒定病原菌）；檢測病原菌成分（抗原和核酸），以及檢測患 者血中特異性抗體。
①細菌學診斷：包括直接鏡檢、細菌染色檢查 法、分離與培養。細菌染色檢查法主要包括革蘭染色、抗酸染色和熒 光染色後光鏡檢查。
但很多細菌的形態和染色性缺乏明顯特徵，僅憑 形態學不能做確切的診斷。②檢測病原菌成分：包括抗原檢測及核酸 檢測。
a.抗原檢測常用的方法有玻片凝集試驗、協同凝集試驗、間接 血凝試驗、乳膠凝集試驗、對流免疫試驗、酶免疫技術、免疫熒光技 術和同位素標記技術等。這些試驗特異、敏感、簡便，即使是在採集樣品前患者使用了抗生素，對細菌的培養不易成功，但細菌的抗原仍 能被檢測出來。
b.核酸檢測是近年來廣泛應用的分子生物學技術，③抗體的檢測，即血清學檢測。常用的血清學 試驗包括玻片或試管凝集試驗、沉澱試驗、補體結合試驗和冷凝集試驗等，可根據病原菌的種類加以選擇。
7.食品微生物檢測檢什麼
食品中的微生物按照其對人類有無危害可分為兩類。
一類是有益菌；例如酵母菌、乳酸菌等，可用來釀造美酒或腌制鹹菜；另一類是有害菌，例如大腸菌群及其他腸道性致病菌，它們會引起食物中毒或引發傳染病。 食品的微生物檢測內容比較多。
其中，反映食品衛生質量的細菌污染指標是菌落總數和大腸菌群。 食品中的細菌數量一般是以單位（g、ml）食品中細菌的個數來計，常用菌落總數來表示。
利用菌落總數一方面可以起到監督食品的清潔狀態的作用，另一方面可以用來預測食品的保藏期。大腸菌群是腸道致病菌污染的指示菌，它一般直接或間接來自人與溫血動物糞便。
食品中如檢出大腸菌群，就表示食品曾受到污染。 菌落總數和大腸菌群是食品的衛生指標，絕大部分食品都需要檢驗這兩個指標是否合格。
其中，菌落總數培養時間是48小時，大腸菌群的檢測時間也在24到72小時之間。按照國標要求，菌落總數和大腸菌群是食品企業出廠時必須檢驗的項目。
除衛生指標之外，食品中還需檢驗是否含有致病菌（致病菌不得檢出），包括黴菌和酵母菌以及沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌等。 致病菌的種類很多，並非所有食品所檢致病菌都相同，常檢的致病菌有沙門、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌等。
當然，根據產品的類別不同，檢測項目也存在差別，一般可以按照產品和原材料等所屬的衛生標准來確定檢測的項目。
❸ 生物製品鑒別實驗包括以下哪些方法
二、 生物學測定常用方法
生物學測定系指採用生物學方法，以反映被測物的生物學特性為目的的測定方法。以下為生物學測定常用方法，根據具體情況，在產品的常規質控時可採用其中的一種或幾種。鑒於一種測定方法僅能反映製品某一方面的特性，且方法的變異一般較大，為更好控制產品質量，必要時需同時採用多種方法進行測定。
（一）、酶反應試驗
是指在體外能促進酶分子的活化或本身具備酶的活性，通過底物的變化檢測酶活性。主要用於酶、輔酶、激酶、激活劑、抑制劑等的活性測定。這類方法的變異相對較小，結果比較准確。
（二）、結合試驗
是基於產品與某種物質的結合特性而設計的試驗，如免疫結合試驗。目前主要用於生物製品的鑒別。由於在結合試驗中測定的分子不一定都具有生物活性，所以一般不用作製品的活性（或效力）測定。這類方法的變異也相對較小。
（三）、細胞測定試驗
是指產品可以誘導細胞產生可測定的應答，如細胞增殖、聚集、分化、死亡、遷移或產生特定的化學物質等。細胞測定試驗一般能較好地反映製品的生物學活性，常用於各種生物製品的活性（效力）測定。與上述兩類方法相比，這類方法的變異較大。與使用傳代細胞相比，使用原代細胞的方法變異更大。
（四）、動物試驗
是指以整體動物為試驗材料檢測製品生物學活性（或效力）的試驗方法，如動物保護力試驗，一般用於疫苗的效力測定。由於動物實驗的成本高、周期長和變異大，所以一般僅用於成品檢定。對於某些治療用的製品，由於其作用機理或本身化學性質的原因，難以建立體外測活的方法，也可以採用動物試驗方法測定，但由於這類方法的變異一般相對較大，在進一步的研究中應盡可能以體外法代替。
❹ 生物製品質量控制時常用的生物學檢測方法有哪些及其定義
首先看看你的是什麼生物製品，生物製品多了
我還是舉例說吧
假如生物製品是 食品 檢測方法 測菌落（細菌是否合格）
假如生物製品是 氨基酸 檢測方法 薄板層析
假如生物製品是 多肽 檢測方法 質譜
……………………蛋白質………………HPLC
……………………注射葯品…………測菌落+密封測試
……………………抗體………………純度HPLC＋活性測試。
所以說你要做的生物製品是什麼才能知道需要測什麼。生物製品是個很大的范圍。
❺ 生物製品的外源性污染檢測包括哪些內容
包括野毒檢查、支原體檢查、乙肝表面抗原(HbsAg)、丙肝抗體(HCAb)和艾滋抗體(HIAb)的檢查、殘余細胞DNA檢查4個方面。
生物製品( Biological procts)是指以微生物、細胞、動物或人源組織和體液等為原料，應用傳統技術或現代生物技術製成，用於人類疾病的預防、治療和診斷。人用生物製品包括：細菌類疫苗、病毒類疫苗、血液製品、重組生物製品、體內外診斷試劑以及其他生物活性制劑等。作為生物製品的生產原料（生產基質）的安全性與終產品的安全性密切相關，而外源因子污染是影響生產基質安全性的一個極其重要的因素，生物製品生產基質及終產品中外源因子污染情況的監控是生產企業及各國葯品管理機構最為關注的一個問題。本文就生物製品中外源因子，特別是病毒性外源因子的檢測控制現狀與進展進行綜述。
❻ 生物製品常用的儀器有哪些,並描述其作用
1、樣品保存儀器。冰箱或超低溫冰箱、液氮罐、通風櫃以及鼓風乾燥機；
2、樣品處理儀器。移液器、天平、離心機、凍干機、高壓滅菌器以及電泳儀；
3、培養儀器。各類培養箱、生物安全櫃、超凈工作台、發酵罐、搖床、轉瓶機、聚合酶鏈式反應器以及酶標儀；
4、觀察分析儀器。顯微鏡、菌落計數儀、流式細胞儀、DNA測序儀以及高效色譜；
5、其他儀器。洗瓶機、超純水機以及超聲波清洗儀。
❼ 微生物檢測手段及注意事項
1. 微生物計量法
1.1 體積測量法
又稱測菌絲濃度法，通過測定一定體積培養液中所含菌絲的量來反映微生物的生長狀況。方法是，取一定量的待測培養液(如10 mL)放在有刻度的離心管中，設定一定的離心時間(如5 min)和轉速(如5000 rpm)，離心後，倒出上清夜，測出上清夜體積為v，則菌絲濃度為(10-v)/10。菌絲濃度測定法是大規模工業發酵生產上微生物生長的一個重要監測指標。這種方法比較粗放，簡便，快速，但需要設定一致的處理條件，否則偏差很大，由於離心沉澱物中夾雜有一些固體營養物，結果會有一定偏差。
1.2稱 乾重法
可用離心或過濾法測定。一般乾重為濕重的10~20%。在離心法中，將一定體積待測培養液倒入離心管中，設定一定的離心時間和轉速，進行離心，並用清水離心洗滌1~5次，進行乾燥。乾燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘乾，或採用紅外線烘乾，也可在80 ℃或40 ℃下真空乾燥，乾燥後稱重。如用過濾法，絲狀真菌可用濾紙過濾，細菌可用醋酸纖維膜等濾膜過濾，過濾後用少量水洗滌，在40 ℃下進行真空乾燥。稱乾重發法較為煩瑣，通常獲取的微生物產品為菌體時，常採用這種方法，如活性乾酵母(Activity Dry Yeast, ADY),一些以微生物菌體為活性物質的飼料和肥料。
1.3 比濁法
微生物的生長引起培養物混濁度的增高。通過紫外分光光度計測定一定波長下的吸光值，判斷微生物的生長狀況。對某一培養物內的菌體生長作定時跟蹤時，可採用一種特製的有側臂的三角燒瓶。將側臂插入光電比色計的比色座孔中，即可隨時測定其生長情況，而不必取菌液。該法主要用於發酵工業菌體生長監測。如使用UNICO公司的紫外-可見分光光度計，在波長600 nm處用比色管定時測定發酵液的吸光光度值OD600，以此監控E.coli的生長及誘導時間。
1.4 菌絲長度測量法
對於絲狀真菌和一些放線菌，可以在培養基上測定一定時間內菌絲生長的長度，或是利用一隻一端開口並帶有刻度的細玻璃管，到入合適的培養基，卧放，在開口的一端接種微生物，一段時間後記錄其菌絲生長長度，藉此衡量絲狀微生物的生長。
2. 微生物計數法
2.1 血球計數板法
血球計數板是一種有特別結構刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四條溝和兩條嵴，中央有一短橫溝和兩個平台，兩嵴的表比兩平台的表面高0.1 mm，每個平台上刻有不同規格的格網，中央0.1 mm2面積上刻有400個小方格。通過油鏡觀察，統計一定大格內微生物的數量，即可算出1 mL菌液中所含的菌體數。這種方法簡便，直觀，快捷，但只適宜於單細胞狀態的微生物或絲狀微生物所產生的孢子進行計數，並且所得結果是包括死細胞在內的總菌數。
2.2 染色計數法
為了彌補一些微生物在油鏡下不易觀察計數，而直接用血球計數板法又無法區分死細胞和活細胞的不足，人們發明了染色計數法。藉助不同的染料對菌體進行適當的染色，可以更方便的在顯微鏡下進行活菌計數。如酵母活細胞計數可用美藍染色液，染色後在顯微鏡下觀察，活細胞為無色，而死細胞為藍色。
2.3 比例計數法
將已知顆粒(如黴菌孢子或紅細胞)濃度的液體與一待測細胞濃度的菌液按一定比例均勻混合，在顯微鏡視野中數出各自的數目，即可得未知菌液的細胞濃度。這種計數方法比較粗放。並且需要配製已知顆粒濃度的懸液做標准。
2.4 液體稀釋法
對未知菌樣做連續十倍系列稀釋，根據估計數，從最適宜的三個連續的10倍稀釋液中各取5 mL試樣，接種1 mL到3組共15隻裝培養液的試管中，經培養後記錄每個稀釋度出現生長的試管數，然後查最大或然數表MPN(Most Probable Number)得出菌樣的含菌數，根據樣品稀釋倍數計算出活菌含量。該法常用於食品中微生物的檢測，例如飲用水和牛奶的微生物限量檢查。
2.5 平板菌落計數法
這是一種最常用的活菌計數法。將待測菌液進行梯度稀釋，取一定體積的稀釋菌液與合適的固體培養基在凝固前均勻混合，或將菌液塗布於已凝固的固體培養基平板上。保溫培養後，用平板上出現的菌落數乘以菌液稀釋度，即可算出原菌液的含菌數。一般以直徑9 cm的平板上出現50~500個菌落為宜。但方法比較麻煩，操作者需有熟練的技術。平板菌落計數法不僅可以得出菌液中活菌的含菌數，而且同時將菌液中的'細菌進行了一次分離培養，獲得了單克隆。
2.6 試劑紙
在平板計數法的基礎上，發展了小型商品化產品以供快速計數用。形式有小型厚濾紙片，瓊脂片等。在濾紙和瓊脂片中吸有合適的培養基，其中加入活性指示劑2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑(TTC，無色)待蘸取測試菌液後置密封包裝袋中培養。短期培養後在濾紙上出現一定密度的玫瑰色微小菌落與標准紙色板上圖譜比較即可估算出樣品的含菌量。試劑紙法計數快捷准確，相比而言避免了平板計數法的人為操作誤差。
2.7 膜過濾法
用特殊的濾膜過濾一定體積的含菌樣品，經丫叮橙染色，在紫外顯微鏡下觀察細胞的熒光，活細胞會發橙色熒光，而死細胞則發綠色熒光。
3. 間接測定法
微生物的生長伴隨著一系列生理指標發生變化，例如酸鹼度，發酵液中的含氮量，含糖量，產氣量等，與生長量相平行的生理指標很多，它們可作為生長測定的相對值。因此可利用生理指標等間接參數來測定生物量。
3.1 測定含氮量
大多數細菌的含氮量為乾重的12.5%，酵母為7.5%，黴菌為6.0%。根據含氮量×6.25，即可測定粗蛋白的含量。含氮量的測定方法有很多，如用硫酸，過氯酸，碘酸，磷酸等消化法和Dumas測N2氣法。Dumas測N2氣法是將樣品與CuO混合，在CO2氣流中加熱後產生氮氣，收集在呼吸計中，用KOH吸去CO2後即可測出N2的量。
3.2 測定含碳量
將少量(乾重0.2~2.0 mg)生物材料混入1 mL水或無機緩沖液中，用2 mL 2%的K2Cr2O7溶液在100 ℃下加熱30分鍾後冷卻。加水稀釋至5 mL，在580 nm的波長下讀取吸光光度值，即可推算出生長量。需用試劑做空白對照，用標准樣品做標准曲線。
3.3還原糖測定法
還原糖通常是指單糖或寡糖，可以被微生物直接利用，通過還原糖的測定可間接反映微生物的生長狀況，常用於大規模工業發酵生產上微生物生長的常規監測。方法是，離心發酵液，取上清液，加入斐林試劑，沸水浴煮沸3分鍾，取出加少許鹽酸酸化，加入Na2S2O3臨近終點時加入澱粉溶液，繼續加Na2S2O3至終點，查表讀出還原糖的含量。
3.4 氨基氮的測定
離心發酵液，取上清液，加入甲基紅和鹽酸作指示劑，加入0.02 mol/L的NaOH調色至顏色剛剛褪去，加入底物18%的中性甲醛，反應數刻，加入0.02 mol/L的使之變色，根據NaOH的用量折算出氨基氮的含量。根據培養液中氨基氮的含量，可間接反映微生物的生長狀況。
3.5 其他生理物質的測定
P，DNA，RNA，ATP，NAM(乙醯胞壁酸)等含量以及產酸，產氣，產CO2(用標記葡萄糖做基質)，耗氧，黏度，產熱等指標，都可用於生長量的測定。也可以根據反應前後的基質濃度變化，最終產氣量，微生物活性三方面的測定反映微生物的生長。如在BMP-2的發酵生產上，隨時監測溶氧量的變化和酸鹼度的變化，判斷細菌的長勢。
4. 商業化快速微生物檢測法
微生物的檢測，其發展方向是快速，准確，簡便，自動化，當前很多生物製品公司利用傳統微生物檢測原理，結合不同的檢測方法，設計了形式各異的微生物檢測儀器設備，正逐步廣泛應用於醫學微生物檢測和科學研究領域。例如：
4.1 試劑盒，培養基等手段
抗干擾培養基和微生物數量快速檢測技術結合解決了傳統微生物檢測手段不能解決的難題，為建立一套完整的抗干擾微生物檢測系統奠定了堅實的基礎。如：抗干擾微生物培養基，新型生化鑒定管，微生物計數卡，環境質量檢測試劑盒等，可方便的用於多項檢測。
4.2 藉助新型先進儀器
BACTOMETER全自動各類總菌數及快速細菌檢測系統可以數小時內獲得監測結果，樣本顏色及光學特徵都不影響讀數，對酵母和黴菌檢測同樣高度敏感原理是利用電阻抗法(Impedance Technology)將待測樣本與培養基置於反應試劑盒內，底部有一對不銹鋼電極，測定因微生物生長而產生阻抗改變。如微生物生長時可將培養基中的大分子營養物經代謝轉變為活躍小分子，電阻抗法可測試這種微弱變化，從而比傳統平板法更快速監測微生物的存在及數量。測定項目包括總生菌數，酵母菌，大腸桿菌群，黴菌，乳酸菌，嗜熱菌，革蘭氏陰性菌，金黃色葡萄球菌等。
微生物OD值是反映菌體生長狀態的一個指標，OD是Optical Density(光密度)的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度。通常400～700 nm 都是微生物測定的范圍，需要紫外分光光度計測最大吸收波長。用得最多的是：505 nm測菌絲菌體、560 nm測酵母、600 nm測細菌。用測OD方法畫微生物生長曲線時，同一株菌的起始培養濃度可以准備多管(根據檢測點的需要，如需檢測10個點，就准備10管)，然後每個點取一管出來測OD值就行了。
一般測菌體密度的OD的波長范圍是580 nm-660 nm，如枯草芽孢桿菌用600 nm，已經屬於可見光區(200 nm～400 nm為紫外光區，400 nm～800 nm為可見光區)。空白如用水做，需要離心洗滌菌體;空白如用不接種的培養基做就不需要洗滌，但是不接種的培養基要和接種的同時培養以求條件一致，最後注意一般OD值在控制在0.1~0.4最好，在這個區內的值就可靠，如果OD大於1.0，一般要稀釋後再測，因為OD太大，分光光度計的靈敏度就會顯著降低。
一般都測吸光值，而且最好是整個實驗過程中，保持發酵液或菌體的稀釋倍數一致，吸光值與稀釋倍數不一定成正比，可保證整個實驗點有可比性。且取值的時候要連續讀數，重復3次的數最好。
另，用分光光度計測微生物的OD值為什麼要把波長設為600 nm
這個波長其實只是針對濁度，而分光光度計在600 nm處對濁度的反應比較靈敏。測吸收峰的實際意義並不大，比如LB搖瓶培養過夜的大腸桿菌，其實在400多納米處的吸收最大，但那很可能是培養液的吸收峰。
❽ 生物製品的無菌檢查法的實驗原理，准備工作及操作步驟
1. 目的：建立無菌檢查的標准操作規程，確保檢驗結果的准確性。 2. 范圍：適用於本廠質監科化驗室對本廠生產的注射劑進行無菌檢查。3. 責任：化驗員有責任按本操作規程操作，並對檢驗結果負責。4. 定義：無菌檢查法系指檢查葯品是否無菌的一種方法。5.內容：5. 1無菌操作設備：無菌操作室或超凈工作台，無菌衣、口罩、帽子、消毒鞋、酒精燈等。5.1.1無菌室分無菌操作室和緩沖間。在緩沖間內應有洗手盆、干手器、無菌衣放置架及掛鉤、拖鞋等。無菌操作室應具有空氣除菌過濾的層流裝置，局部潔凈度100級超凈工作台。緩沖間及操作室內均設置能達到空氣消毒的紫外光燈和照明燈，操作室或工作台應保持空氣正壓。5.1.2無菌室應每周和每次操作前用0.1％新潔爾滅或2％甲酚液擦拭操作台及可能污染的死角，開動無菌空氣過濾器及紫外光燈殺菌1小時。在每次操作完畢，同樣用2％甲酚或0.1％新潔爾滅溶液擦拭工作檯面，用紫外光燈殺菌半小 時。5.1.3無菌室的無菌程度檢查：無菌室在消毒處理後，無菌試驗前及操作過程中需檢查空氣中菌落數。取直徑90mm雙碟，在接種室內點燃酒精燈，在酒精燈旁，以無菌操作，將雙碟半開注入溶化的營養瓊脂培養基約20ml，製成平板：在35-37℃預培養48小時，證明無菌後將3個平板以無菌方式帶入無菌操作間的潔凈區域左、中、右各放1個；打開碟蓋扣置，平板在空氣中暴露30分鍾後將蓋蓋好，置35-37℃培養48小時，取出檢查，3個平板上生長的菌落數相加總數不得超過10個。 無菌操作檯面或超凈工作台應定期請有關部門檢測其潔凈度，應達到100級（一般用塵埃粒子計數儀），檢測塵埃粒徑≤5μm的粒數不得超過3.5個／升；空氣流量應控制在0.75-1.0m3/s；細菌菌落數平均<1個，可根據無菌狀況定期置換過濾器。5.1.4無菌室內應准備好盛有消毒用5％甲酚的玻璃缸、酒精燈、火柴、鑷子、75％酒精棉及拖鞋等。5.2儀器、用具：5.2.1真空泵、恆溫培養箱、生物顯微鏡、托盤天平（精度0.1g）、抽濾瓶（500ml）、 三角瓶（100、500 ml）、移液管（1、10ml）、注射器（要求規格）、試管、雙碟（9cm）、注射針、鑷子、剪刀、白金耳、橡皮管、紗布、棉花（原棉）、不銹鋼吸管筒、接種環、微孔濾膜（直徑約5cm），孔徑應在0.45±0.02μm )載玻片、灑精燈、取樣勺、吸耳球、噴霧瓶。5.2.2用具的包紮：5.2.2.1移液管在移液管上端管內,鬆鬆地塞進少許原棉,然後放入不銹鋼滅菌筒內。5.2.2.2試管在管口塞上紗布棉塞。5.2.2.3無菌衣、褲、帽、口罩將洗凈的衣褲、帽子、口罩配套後裝入布袋，扎緊袋口，再用牛皮紙包好。5.2.2.4注射器洗滌干凈的注射器及注射針頭裝配好後，放入墊有紗布的帶蓋容器內（飯 第3頁/共7頁盒）一層層放好，上面蓋上紗布，然後蓋上容器的蓋子，用牛皮紙包好。5.2.2.5濾器 將檢驗合格後微孔濾膜先有水中浸泡濕潤，取出後固定在細菌過濾器的濾板上，濾板下、濾膜上均用耐高溫墊圈墊好，上好濾器。在滅菌前濾器的螺勿擰太緊，濾器上口用8層紗布及牛皮紙包紮，裝妥後放入容器內，再將盛濾器的容器蓋好蓋子，用牛皮紙包紮。5.2.3用具的滅菌：將包紮好的用具，在121±0.5℃蒸汽滅菌櫃中滅菌30分鍾，物品取出時切勿立即置冷處，以免急速冷卻滅菌物品內蒸汽冷凝造成負壓，易致染菌，應置溫箱或或加溫烘乾。5.3培養基、試劑：5.3.1一般採用商品乾燥培養基，臨用時按照使用說明書進行配製，需注意培養基的pH值應符合規定，否則必須校正後，滅菌使用。使用前，按要求分裝滅菌好的細菌培養基須經30-35℃培養48小時，真菌培養基須經20-25℃培養72小時，證明無菌生長後方可使用。 制備的需氣菌、厭氣菌培養基應半個月內用完，在供試品接種前，培養基指示劑氧化層的顏色不得超過培養基深度約1/5，否則須經水浴煮沸加熱，只限加熱一次。5.3.2革蘭氏碘液：先用3-5ml蒸餾水溶解2.0g碘化鉀，再加入1.0g碘片，攪拌溶解後，加蒸餾水稀釋至300ml，搖勻。置密閉棕色瓶中備用。5.3.3結晶紫染色液：將結紫1.0g溶解於20ml95%乙醇中後，與80ml1%草酸銨溶液相混合，靜置48小時使用。此液穩定，置密閉的棕色瓶中可儲存數月。5.3.4沙黃染色液：將0.2g沙黃溶解於10ml95%乙醇中，待完全溶解後再加蒸餾水至100ml。5.3.5生理鹽水：稱取9g氯化鈉，加水1000ml溶解，分裝後於121±0.5℃濕熱滅菌30分鍾。供作稀釋劑用。 第4頁/共7頁5.3.6 75%乙醇量取無水乙醇75ml,加水稀釋至100ml，搖勻，即得。5.3.7 0.1%新潔爾滅：量取5%新潔爾滅20ml，加水稀釋至約1000ml，搖勻，即得。5.4培養基靈敏度檢查：5.4.1新購的乾燥培養基或採用不同牌號原材料的新鮮培養基，其質量均應符合靈敏度檢查要求。 (1)取藤黃微球菌[Micrococcus luteus CMCC（B） 28001］的營養瓊脂斜面和白色念珠菌[Candida albicans CMCC（F）98001］的真菌培養基瓊脂斜面的新鮮培養物，分別用0.9%無菌氯化鈉溶液製成均勻的菌懸液；取生孢梭菌[Clostridium sporogenes CMCC（B）64941]不含瓊脂的需氣、厭氣培養基新鮮培養物，用滅菌毛細管將其吸至滅菌離心管內，離心，棄去上清液，沉澱菌體用0.9%無菌氯化鈉溶液製成均勻菌懸液。然後以10倍系列稀釋後，製成1ml中含10-100個菌並計數。 (2)取藤黃微球菌、生孢梭菌的需氣、厭氣培養基新鮮培養物，白色念珠菌的真菌培養基瓊脂斜面的新鮮培養物，取接種至黴菌培養基內，20-25℃用0.9%無菌氯化鈉溶液作10倍稀釋，製成1ml中含10-100個菌並計數。 將藤黃微球菌的上述(1)或(2)的稀釋液各1ml，分別接種至每管裝量為9ml的需氣、厭氣菌培養基3管，生孢梭菌的上述(1)或(2)的稀釋液各1ml，分別接種至每管裝量為12ml的需氣、厭氣菌培養基3管，白色念珠菌的上述(1)或(2)的稀釋液各1ml，接種至每管裝量為9ml的真菌培養基3管，以未接種的培養基作對照，按規定的溫度培養5天並逐日記錄結果。結果判定：以每株菌接種後的培養基不得少於2管呈現生長，即該培養基的靈敏度檢查符合要求。5.4.2配製的培養基應在涼暗處保存，一般不得超過2周，臨用前細菌和黴菌培養基分別經30-35℃和20-25℃培養不少於48小時和72小時，證明無菌生長後方可使用。5.4.3需氣菌、厭氣菌培養基在試管中裝量高度不得少於7Cm，其指示劑氧化層不得超過培養基深度的1／5，否則須經水浴煮沸10分鍾，但只限加熱一次。 第5頁/共7頁無菌試驗培養時間結束時，指示劑氧化層應不超過培養基深度的1／2。5.5對照用菌液的制備：5.5.1試驗用菌種、菌種的復甦、菌種的接種與保存等均應按照「抗生素微生物檢定法」標准操作規程項下操作。5.5.2金黃色葡萄球菌菌液用接種環取金黃色葡萄球菌[Staphy-lococcus aureus CMCC（B）26003]的營養瓊脂斜面新鮮培養物少許，接種至營養肉湯培養基內，在30-35℃培養16-18小時後，用滅菌生理鹽水稀釋成1:1065.5.3生孢梭菌菌液用接種環取生孢梭菌[CMCC（B）64941]的需氣菌、厭氣菌培養基新鮮培養物1白金耳，接種至相同培養基內，在30-35℃培養18-24小時後，用滅菌生理鹽水稀釋成1:106。5.5.4白色念珠菌菌液用接種環取白色念珠菌[CMCC（F）98001]的真菌瓊脂培養基斜面新鮮培養物1白金耳，接種至真菌培養基內，在20-25℃培養24小時後，用滅菌生理鹽水稀釋成1:105。5.5.5上述制備的菌液，一般當日使用。5.6進入無菌室的操作要點：5.6.1根據試驗程序,將用具物品搬入緩沖間,打開紫外光燈和空氣過濾裝置並使其工作1小時以上。5.6.2操作人員用肥皂水刷洗雙手,關閉緩沖間紫外光燈,進入緩沖間內,關閉第一層門,用2%來蘇爾或0.1%新潔爾滅溶液洗雙手,用消毒毛巾擦乾,換上無菌衣、帽、口罩及消毒鞋。5.6.3關閉無菌室內紫外光燈，進入第二層門並將用具搬至無菌室內，關閉無菌室門。5.6.4凡進入無菌室後不應再外出取物品，因此，在每次試驗中所用物品必須計劃好，並准備好備用物品。從進入第一層門直至無菌室內，隨操作人員的進入應噴霧2%來蘇爾或0.1 %新潔爾滅溶液。5.7檢查法：5.7.1無菌檢查法包括：直接接種法和薄膜過濾法。前者適用於非抗菌作用的供試品；後者適用於有抗菌作用的或大容量的供試品。5.7.2操作時，應先用0.1%新潔爾滅浸泡或擦拭容器表面後，以無菌的方法取 第6頁/共7頁內容物。5.7.3凡無菌檢查中，均應取相應溶劑和稀釋劑同法操作，作陰性對照。5.7.4供試品制備： 用滅菌鑷取出注射器，在火焰旁將針芯插入針管並安上針頭，蓋為橡皮塞時，用注射器在已消毒好的橡皮塞中心位置刺入吸取葯液。按規定須稀釋或滅活的供試品，可直接或將瓶內供試液抽出至滅菌玻璃容器內進行滅活處理並稀釋至規定的體積和濃度；抽取瓶中內容液體時，應將供試品倒置並使針頭在液面下。5.7.5直接接種法：按規定量取供試品，以無菌操作將該供試品分別接種於需氣菌、厭氣菌培養基6管，其中1管接種金黃色葡萄球菌液1ml，作陽性對照，另接種於真菌培養基5管。輕輕搖動，使供試品與培養基混合。需氣菌、厭氣菌培養基管置30-35℃、真菌培養基管置20-25℃培養7日。在培養期間應逐日觀察並記錄是否有菌生長。陽性對照管在24小時內應有菌生長，如在加入供試品後，培養基出現渾濁，培養7天後，不能從外觀上判斷有無微生物生長，可取該培養液適量轉種至同種新鮮培養基中或斜面培養基上繼續培養，細菌培養2日，真菌培養3日，觀察是否再出現渾濁或斜面有無菌生長，或用接種環取培養液塗片，染色，用顯微鏡觀察是否有菌。5.7.6薄膜過濾法： 將微孔濾膜過濾裝置、抽濾瓶、排氣管與真空泵相連，真空泵可置無菌室外。取規定量供試品，按規定的方法處理後，加入0.9%無菌氯化鈉溶液100ml中，混合後，通過裝有孔徑不大於0.45μm 的薄膜過濾器，減壓抽干後，用0.9%無菌氯化鈉溶液沖洗濾膜3次，每次至少100ml，取出濾膜分成3等份，分別加入上述二種培養基中，按規定溫度和時間培養。陽性對照管應根據供試品特性加入相應對照菌液1ml（抗細菌葯物，以金黃色葡萄球菌為對照菌；抗厭氧菌葯物，以生孢梭菌為對照菌；抗真菌葯物，以白色念珠菌為對照菌）。陽性對照管細菌應在培養24-48小時，真菌應在培養24-72小時有菌生長。5.8結果判斷： 第7頁/共7頁當陽性對照管顯渾濁並確有菌生長，陰性對照管呈陰性時，可根據觀察所得的結果判定：如需氣菌、厭氣菌及真菌培養基管均為澄清或雖渾濁但經證明並非有菌生長，均應判為供試品合格；如需氣菌、厭氣菌及真菌培養基管中任何1管顯渾濁並確證有菌生長，應重新取2倍量供試品，分別依法復試，除陽性對照管外，其他各管均不得有菌生長，否則應判為供試品不合格。6 培訓6.1 培訓對象：化驗員。6.2 培訓時間：二小時。7 記錄 記錄名稱 保存部門 保存時間 無菌檢驗記錄 質監科 葯品有效期後一年 QF-01-007-00無 菌 檢 驗 記 錄品 名： 批 號： 規 格： 檢驗日期： 年 月 日培養基名稱需氣、厭氣菌培養基真菌培養基培養培養溫度30—35℃20—25℃培養時間管 號1234512345培養天數及結果1234567結 論備 注 復核人： 檢驗人：