常見的生物消毒方法有哪些

『壹』 實驗室常用的消毒和滅菌方法有哪些呢

常用的消毒滅菌方法多採用物理方法和化學方法兩大類。
1.乾熱滅菌法是利用恆溫乾燥箱內120℃-150℃的高熱，並保持90-120分鍾，殺死細菌和芽孢，達到滅菌目的的一種方法。

主要適用於不便在壓力蒸汽滅菌器中進行滅菌，且不易被高溫損壞的玻璃器皿、金屬器械以及不能和蒸汽接觸的物品的滅菌。用此方法滅菌的物品乾燥，易於貯存。酒精燈火焰燒灼滅菌法也是屬於乾熱滅菌的方法之一，在進行動物細胞體外培養工作時，常須利用工作檯面上的酒精燈火焰對金屬器具及玻璃器皿口緣進行補充滅菌。

2.濕熱滅菌法壓力蒸汽濕熱滅菌法是目前最常用的一種滅菌方法。

它利用高壓蒸汽以及在蒸汽環境中存在的潛熱作用和良好的穿透力，使菌體蛋白質凝固變性而使微生物死亡。適合於布類工作衣、各種器皿、金屬器械、膠塞、蒸餾水、棉塞、紙和某些培養液的滅菌。

3.射線滅菌法利用紫外線燈進行照射滅菌的方法。

紫外線是一種低能量的電磁輻射，可以殺滅多種微生物。紫外線的作用機制是通過對微生物的核酸及蛋白質等的破壞作用而使其滅活。適合於實驗室空氣、地面、操作檯面滅菌。

4.過濾除菌法是將液體或氣體通過有微孔的濾膜過濾，使大於濾膜孔徑的細菌等微生物顆粒阻留，從而達到除菌的方法。過濾除菌法大多用於遇熱易發生分解、變性而失效的試劑、酶液、血清、培養液等。目前，常用微孔濾膜金屬濾器或塑料濾器正壓過濾除菌，或用玻璃細菌濾器、濾球負壓過濾除菌。

5.化學消毒劑消毒法用於那些不能利用物理方法進行滅菌的物品、空氣、工作面、操作者皮膚、某些實驗器皿等。在使用時應注意安全，特別是用在皮膚或實驗材料上的消毒劑，須選用合適的葯劑種類、濃度和處理時間，才能達到安全和滅菌的目的。

抗生素抑菌法主要用於培養液，是培養過程中預防微生物污染的重要手段以及作為微生物污染不嚴重時的「急救」措施。常用的抗生素有青黴素、鏈黴素和新黴素等。

『貳』 常見的五種消毒方法

1、機械消毒法：用去除或隔離的方法將染毒物品的表面去除或隔離，防止毒劑損傷人員。如被毒劑污染的糧食、食品等，可先將表層部分去除，然後通風日曬和徹底沖洗。2、焚燒：是一返唯慧種簡單、迅速、徹底的消毒方法，因對物品的破壞性大，故漏答只限於處理患傳染病病鴨屍體、污染的墊料、垃圾等。焚燒應在專用的焚燒爐內進行。

1、機械消毒法：用去除或隔離的方法將染毒物品的表面去除或隔離，防止毒劑損傷人員。如被毒劑污染的糧食、食品等，可先將表層部分去除，然後通風日曬和徹底沖洗。

2、焚燒：是一種簡單、迅速、徹底的消毒方法，因對物品的破壞性大，故只限於處理患傳染病病鴨屍體、污染的墊料、垃圾等。焚燒應在專用的焚燒爐內進行。

3、煮沸消毒法：即利用煮沸100℃經5min可殺死一切細菌的繁殖體。一般消毒以煮沸10min為宜。用於一般外科器械、膠管和注射器、飲水和食具的消毒。

4、乾熱空氣滅菌法：乾熱空氣滅菌法屬於乾熱滅山春菌法，是其中的一種。乾熱空氣滅菌是指使待滅菌物品在乾燥空氣中被加熱，用達到足以殺死細菌的溫度的方法來滅菌。

5、高壓蒸汽滅菌法：可殺滅包括芽胞在內的所有微生物，是滅菌效果最好、應用最廣的滅菌方法。方法是將需滅菌的物品放在高壓鍋里，加熱時蒸汽不外溢，高壓鍋內溫度隨著蒸汽壓的增加而升高。

『叄』 常用的消毒和滅菌方法包括

常用的消毒和滅菌方法包括：熱力消毒、化學消毒和紫外線消毒。

熱力消毒原理：高溫能使微生物的蛋白質和酶變性或凝固，喪失其功能，使新陳代謝受到障礙而死亡，從而達到消毒與滅菌的目的。在熱力消毒分為濕熱（如高壓滅菌）與乾熱（包括燃燒或焚燒）兩大類。

化學消毒原理：一是使蛋白質變性，酚類、醇類、醛類和重金屬等，能使蛋白質凝固或變性，使病毒的生長繁殖受抑制而死亡。二是干擾酶系統，重金屬鹽能與微生物的巰基（－SH)酶結合，使其活性降低或消失，從而影響病原菌的代謝。

氧化劑、鹵素類也能氧化微生物體內的某些酶系統。三是使細胞漿膜通透性增加，清潔劑能降低病原菌細胞膜表面張力，使細胞培賣碧膜通透性增加，菌體配唯內物質外漏，引起死亡。

紫外線消毒原理：通過紫外線的照射，破壞及改變微生物的DNA結構，使細菌當即死亡或不能繁殖後代，達到殺菌的目的。紫外線輻照能量低，穿透力弱，僅能殺滅直接照射到的微生物。

消毒和滅菌的區別

消毒與滅菌的目的不同，消毒是將配舉大部分病原微生物殺死，僅有小部分病原微生物存活，以達到無法使人體發病的目的，滅菌是將所有病原微生物殺死，已達到完全無菌的狀態，並且滅菌的難度比消毒的難度大。

其次兩者使用的場所和處理的物品也不相同，消毒大多數使用在公共場所，滅菌主要用於醫療物品。平時要注意個人衛生，吃飯之前要洗手，避免細菌進入體內。

『肆』 常用的消毒滅菌法有哪些

（1）加熱滅菌法

利用高溫來殺死微生物（超過最高生長溫度）的方法。加熱滅菌的原理：當高溫作用於微生物時，首先引起細胞內生理生化反應速率加快，機體內對溫度敏感的物質如蛋白質、核酸等，隨著溫度的增高而遭受不可逆的破壞，盡而導致細胞內原生質體的變化、酶結構的破壞，從而使細胞失去了生活機能上的協調，停止了生長發育。隨著高察前和溫的繼續作用，細胞內原生質便發生凝固，酶結構完全破壞，活動消失，生化反應停止，滲透交換等新陳代謝活動消失，細胞死亡。加熱滅菌可分乾熱滅菌和濕熱滅菌兩大類。

1）乾熱滅菌 利用灼燒或乾熱空氣滅菌而沒有飽和水蒸氣參加的滅菌法稱為乾熱滅菌法。由於乾熱滅菌使用方便，方法簡單，故在生產上廣泛應用。如火焰滅菌法：直接利用火焰把微生物燒死，故又稱焚燒滅菌法。採用此法滅菌既徹底又迅速，但只適用於金屬制的接種工具、試管口及污染物品等的處理。熱空氣滅菌法：即在電熱恆溫乾燥箱中利用乾熱空氣來滅菌。

2）濕熱滅菌 即利用蒸汽進行滅菌的方法。濕熱滅菌又分為高壓、常壓、間歇滅菌和巴氏滅菌4種。

①高壓蒸汽滅菌 由於高壓蒸汽具有較強的穿透敗盯力和較常壓高的溫度，能大大縮短滅菌時間，提高工作效率，加之蛋白質在濕熱條件下容易變性，在熱蒸汽條件下，細菌的芽孢在120℃，經20～30分鍾可全部被殺死。如滅菌材料體積較大，不易被穿透時，可將壓力增加到0.152兆帕，延長至1～2小時。在高壓蒸汽滅菌中，滅菌溫度隨蒸汽壓力的增加而升高（圖2-6）。

圖2-7 簡易常壓滅菌法

③常壓間歇蒸汽滅菌法 這是利用常壓蒸汽反復幾次滅菌的方法。具體做法是將待滅菌物品放在鍋內，100℃處理1小時左右，殺死微生物的營養細胞，讓其冷卻至30℃左右，此時芽胞會萌發，再以同樣方法加熱處理，反復3次，可達到滅菌目的。該方法可用於不耐高溫的葯品、營養物、特殊培養基的滅菌。

④低溫巴氏滅菌法 即在60～70℃下，經一定時間，殺死有害微生物的方法。適應於不耐高溫的物品消毒。有些培養基，在高溫下遭到破壞，用此法既可殺死致病微生物的營養體，又能使培養基的成分不致受到嚴重破壞。食用菌生產中培養料堆積發酵工藝，就是利用這個原理殺死其中的病蟲、雜菌。

（2）過濾除菌法

又分液體過濾和空氣過濾兩種，就是採用機械的方法，設計一種濾孔比細菌還小的篩子，做成各種過濾器，通過機械過濾，只讓液體培養基或空氣從篩孔流出，各種微生物菌體則留在篩子上，從而達到除菌的目的。這種方法適用於對熱不穩定的體積小的液體培養基（如動物血清、蛋白質、酶、維生素等）及氣體的滅菌。超凈工作台的工作原理就是將帶菌空氣通過過濾滅菌形成無菌空氣，從風洞中吹出，來造成工作台范圍的無菌狀態。過濾滅菌的最大優點是不破壞培養基中各種物質的化學成分。常用的過濾器有用硅藻土製的、石棉製的、陶瓷土製的，也有用火棉膠、硝化纖維素濾膜製成的。

（3）輻射滅菌法

利用輻射產生的能量進行殺菌的方法稱輻射滅菌。輻射可分電離輻射和非電離輻射兩種，α-射線、β-射線、γ-射線、X-射線、中子和質子、微波等屬電離輻射，紫外線、臭氧、日光為非電離輻射。

1）紫外線滅菌 紫外線殺菌的原理是利用紫外線的輻射作用。用燈管直接照射細菌使其發生光化學反應，將細菌細胞質誘導形成胸腺嘧啶雙聚體，從而抑制DNA的復制而發生變性、致死。另一方面，空氣在紫外線照射下產生的臭氧（O₃），也具有一定的殺菌作用。紫外線的有效作用距離為1.2～2.0米。紫外燈一般懸吊在接種室或培養室的上方，個數依房間大小而定，容1～2個人操作的接種室，安裝一個30瓦的紫外燈就可以了。在每次接種前，應將所需的器具一起放入接種室（箱）內，然後打開紫外燈照射。如果接種室體積較大，開燈照射2小時才能達到滅菌效果；如果較小，只需開燈半小時左右既可達到滅菌效果。由於紫外線穿透力弱，即使是普通玻璃也不能濾過，因此，只適於空氣或物體表面的滅菌。紫外線對人體皮膚，尤其是眼睛有殺傷作用，應避免直視，工作時應將紫外燈關閉。紫外線消毒時工作場所如果處在稍暗無光的情況下，能提高殺菌效果。細菌接受致死量紫外線照射後，隨即給予可見光照射，部分細菌有復活的可能。幹細胞比濕細胞對紫外線的抗性強，孢子比其營養細胞對紫外線更具抗性。

2）微波滅菌 由於微生物的細胞中都含有70%～90%的水分，水分子在微波電場中被極化，並隨著電場方向的改變而轉動，在轉動過程中分子之間高速度摩擦產生熱能，這種熱能不同於外部加熱，可在短時間里使細胞爆破而物體本身的溫度卻只有極微增加，從而達到滅菌效果。用YM7601型微波爐只需60秒鍾就能殺死食品中192萬個大腸桿菌。

3）臭氧發生器消毒 臭氧（O₃）具有強烈的氧化作用，能破壞微生物的細胞膜與核酸。O₃也是一種暫態物質，常溫下能自然分解，還原成氧。其滅菌原理實際上和紫外線消毒極相似。

『伍』 常用的消毒方法有哪幾種

常用的消毒方法有三種，即物理消毒法、化學消毒法、生物消毒法。

（1）物理消毒法

指用物理因素殺滅病原微生物及其他有害微生物的方法。包括自然凈化、機械除菌、高熱滅菌和太陽光照射等。

（2）化學消毒法

指用化學葯品進行的消毒方法。

（3）生物消毒法

指用微生物發酵所產之熱達到消滅病原微生物的方法。

『陸』 常用的消毒方法有哪些

通常所說的消毒是指經過高壓或常壓滅菌後，菌種瓶冷卻至室溫，為了將純菌種接入菌種瓶內，就必須創造局部相對無菌的接種滲源空間，為此就得採用物理或化學方法對局部空間進行消毒，使飄浮的大部分微生物致死。換句話說，就是凈化接種的空間。此外，栽培前為了改善菌種培養及菌棒栽培環境，尤其是老菇棚、菌種場的空間及衛生條件等，統稱為消毒。消毒的方式主要有以下幾種：

（1）巴氏消毒

在60～66℃的溫度下，可以把大部分營養菌殺死，如雙孢菇培養料的後發酵過程，能殺死有害於蘑菇的雜菌和害蟲。

（2）沸水消毒

主要用於金屬器具、針筒等的消毒。在沸水中燒煮20～30分鍾，可殺死微生物的營養體，細胞芽孢則需1～2小時才能殺死。若在水中加入2%～5%的碳酸溶液少許，可大大縮短消毒時間；加入1%碳酸氫鈉可提高水的沸點，加速芽孢死亡，並能防止金屬器械因燒煮而生銹。

（3）乾燥消毒

利用物質乾燥使微生物失水，以達到殺菌或抑菌的目的。微生物細胞含有70%～90%的水分，微生物失水後就會趨向死亡。人們常利用這一特性來對食品（如干香菇、木耳）、葯品等作較長期的保存。

（4）滲透壓消毒

利用高滲透壓或低滲透壓殺菌或抑菌的方法稱滲透壓消毒。通常用的鹽溶液濃度為20%左右，糖溶液濃度為50%～70%。

（5）化學葯劑消毒

這是利用化學葯劑進行殺菌或抑菌的方法。下面介紹幾類主要消毒葯劑：

石灰：有生石灰與熟石灰之分。其機理是能水解蛋白質和核酸，使酶系統受破壞，並能分解菌體中的糖類。1%～3%的石灰水可起到很強的殺菌作用。在菇房及其周圍環境，須用生石灰進行消毒，因為熟石灰長時間暴露在空氣中，可吸收空氣中的二氧化碳，形成沒有殺菌作用的碳酸鈣。

石硫合劑：與石灰配製的波爾多液，常用作菇房及床架的消毒。波爾多液是以硫酸銅石灰等量式100～200倍的配合式，即硫酸銅1千克，石灰1千克，水100～200升。配製時先將硫酸銅、石灰分別在水中溶化，同時倒入另一隻木桶或大缸內，邊倒邊攪拌，即成天藍色的波爾多液。配製要用木桶或陶瓷的盛器，隨配隨用，不宜久貯。使用時用噴霧器噴灑。

煤酚皂液（C₆H₄CH₃OH）：是一種表面活性物質消盯喊孫毒劑，又稱來蘇爾，為含50%煤酚的肥皂溶液。它的殺菌機制與石炭酸相同，殺菌效力比苯酚大4倍，且對皮膚的刺激比碳酸小，常用濃度2%～4%，用於皮膚、接種室（箱）、培養室檯面、地面、工具等的消毒，常安排在熏蒸後、接種前使用。煤酚皂液除本身具有較強的殺菌作用外，還具有沉降塵埃、菌體和中和甲醛氣體作用，使空間更潔凈、舒適。

乙醇（C₂H₅OH）：又稱酒精。是良好的脫水劑、蛋白質變性劑及脂溶劑，70%～75%乙醇殺菌效果最好。無水酒精及95%酒精殺菌力很低，其原因是高濃度的酒精具有很強的脫水作用，與雜菌菌體接觸後，會立即引起菌體表層蛋白質的凝固，形成一層保護膜，使酒精分子無法進一步滲入菌體細胞內。

甲醛（CH₂O）：有辛辣臭味，易溶於水，對人眼、鼻有強烈刺激作用。甲醛溶液又稱福爾馬林，含甲醛37%～40%，有較強的腐蝕性與刺激性，是一種強還原劑。它的殺菌機理是：與微生物蛋白質的氨基結合，使其蛋白質凝固變性達到殺菌的目的。0.1%～0.25%的甲醛溶液，在6～12小時內能殺滅細菌、芽孢及病毒。對使用時間較長、污染較重的接種室（箱）或培養室，可採用甲醛與高錳酸鉀混合熏蒸的方法進行徹底滅菌。常用方法有兩種，一種是按每立方米空間用6～10毫升甲醛溶液與半量至等量的高錳酸鉀混合進行氧化反應，放出熱量，使甲醛沸騰揮發。接種室一般熏蒸12小時，接種箱熏蒸0.5小時。另一種方法是將甲醛溶液直接置小電爐或火盆上加熱蒸發。此法需人看管，但效果好。因為甲醛揮發過程中水分也因加熱而蒸發，提高了空間濕度，增強了消毒滅菌效果。消毒後的接種室應在12小時後，加熱蒸發等量氨水或噴入3%煤酚皂液進行中和，再待6～10小時才能進入操作。

5%甲醛溶液還常用於防腐及作物種子表面消毒；用於器械消毒，浸泡1～2小時。

高錳酸鉀：紫色針狀結晶，是一種常用的強氧化劑。稀釋1000倍到1250倍的高錳酸鉀溶液都具有殺菌作用，0.5%～1%的高錳酸鉀水溶液在5分鍾內可殺死大多數細菌；5%的水溶液1小時內可殺死細菌芽孢，但對黴菌的殺傷力較弱；0.1%的高錳酸鉀水凱鏈溶液常用於皮膚、玻璃器皿的消毒，但要隨用隨配。因高錳酸鉀可以和培養料內的有機物發生化學反應被還原成無殺菌作用的二氧化錳，故不能直接用於拌料滅菌。

新潔爾滅：是陽離子型表面活性強力殺菌劑，具有芳香氣味，極苦，易溶於水。對無芽孢病原菌、黴菌等具有較強的殺菌作用，效果為碳酸的10倍。消毒特點：快速、徹底、高效。原液濃度5%，常用濃度為0.1%，用作皮膚、金屬器械的消毒。注意應現配現用。對人體無刺激性，對器械也無腐蝕性，是一種高效無毒的殺菌消毒抑制劑。

硫磺：常用於培養室及菇房等空間的熏蒸消毒，還可用於殺蟲、殺蟎。使用劑量是15～20克/米³。由於熏蒸產生的SO₂的密度比空氣大，容易下沉，熏蒸時，應注意將裝有硫磺的容器放在空間較高的位置。為了提高殺菌效果，熏蒸前向牆壁和空間噴少量水，促使產生更多的亞硫酸，提高滅菌效果。

多菌靈：多菌靈為廣譜高效內吸氨甲基酸酯類殺真菌劑，具有廣譜、高效、有效期長等特點，對人、畜低毒，殘效期10天左右，是食用菌生產中的一種常用的理想殺菌劑。但在使用中，由於菇農缺乏農葯常識，操作不當，導致效果下降。現就多菌靈的使用方法和注意事項簡述如下：

①市售的多菌靈多為50%可濕性粉劑和40%膠懸劑，前者使用更為普遍。無論選用哪一種劑型，都應購買質量可靠、信譽好的正規產品，且出廠後一年內使用為佳。超過一年且仍在有效期內的，可酌情加大劑量。

②拌料時，要嚴格控制葯液濃度，50%可濕性粉劑的一般用量是占乾料重量的0.1%，如果用量過大，不僅增加成本，還會影響菌絲生長。

③溶解粉劑時，應注意水量充足、攪拌均勻、溶解完全；拌料時料、葯攪拌均勻。

④多菌靈在鹼性環境中易分解失效，因此拌料時避免同時使用石灰，更不能把多菌靈、石灰製成混合液使用。

⑤多菌靈耐高溫，在發酵、高壓滅菌過程中，不受影響。

⑥多菌靈易使雜菌產生抗葯性，故應與其他殺菌劑交替使用，增強殺菌效果。

⑦多菌靈對毛霉、根霉的防治效果較差，在使用時應適當提高培養料pH，抑制毛霉、根霉的生長。

⑧銀耳、木耳、猴頭菇對多菌靈特別敏感，栽培中應避免使用。

近年來，隨著各地食用菌產業的迅速發展，在消毒劑的研製與生產方面也像雨後春筍一樣不斷出現，大有替代這些傳統的消毒葯劑之勢，如克霉王、必潔士、凈霉靈等，在此不再一一介紹。

『柒』 常用的滅菌方法有哪些

常用的滅菌方法有哪些?
微生物學實驗常用的滅菌方法有哪些一般分為溼熱滅菌法和乾熱滅菌法兩種。
一、溼熱滅菌法是指用飽和水蒸氣、沸水或流通蒸汽進行滅菌的方法，由於蒸汽潛熱大，穿透力強，容易使蛋白質變性或凝固，所以該法的滅菌效率比乾熱滅菌法高，是最常用的滅菌方法。溼熱滅菌法可分為：煮沸滅菌法、巴氏消毒法、高壓蒸汽滅菌法、流通蒸汽滅菌法、和間歇蒸汽滅菌法。
（1）煮沸滅菌法：將水煮沸至100攝氏度，保持5-10分鍾可殺死細菌繁殖體，保持1-3小時可殺死芽胞。在水中加入百分之一至百分之二的碳酸氫鈉時沸點可達105攝氏度，能增強殺菌作用，還可去污防銹。此法適用於食具、刀箭、載玻片及注射器等。
（2）巴氏消毒法：一種低溫消毒法，因巴斯德首創而得名。有兩種具體方法，一是低溫維持法：62攝氏度維持30分鍾；二是高溫瞬時法：75攝氏度作用15-30秒。該法適用於食品的消毒。
（3）流通蒸氣滅菌法：利用常壓下的流通蒸汽進行滅菌。
（4）間歇蒸汽滅菌法
（5）高壓蒸汽滅菌法：103.4千帕蒸汽壓溫度達121.3攝氏度，維持15-20分鍾。
二、乾熱滅菌法是指在乾燥環境（如火焰或乾熱空氣）進行滅菌的技術。一般有火焰滅菌法和乾熱空氣滅菌法。
（1）火焰滅菌法：是指用火焰直接燒灼的滅菌方法。該方法滅菌迅速、可靠、簡便，適合於耐火焰材料（如金屬、玻璃及瓷器等）物品與用具的滅菌，不適合葯品的滅菌。
（2）乾熱空氣滅菌法：是指用高溫乾熱空氣滅菌的方法。該法適用於耐高溫的玻璃和金屬製品以及不允許溼熱氣體穿透的油脂（如油性軟膏機制、注射用油等）和耐高溫的粉末化學葯品的滅菌，不適合橡膠、塑料及大部分葯品的滅菌。
臨床上常用的滅菌的方法有哪些？一、物理方法
1、溫度
利用溫度進行滅菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法。高溫可使微生物細胞內的蛋白質和酶類發生變性而失活，從而起滅菌作用，低溫通常起抑菌作用。
1）乾熱滅菌法:
a.灼燒滅菌法：利用火焰直接把微生物燒死。此法徹底可靠，滅菌迅速，但易焚毀物品，所以使用范圍有限，只適合於接種針、環、試管口及不能用的污染物品或實驗動物的屍體等的滅菌。
b.乾熱空氣滅菌法：這是實驗室中常用的一種方法，即把待滅菌的物品均勻地放入烘箱中，升溫至160°C，恆溫1小時即可。此法適用於玻璃皿、金屬用具等的滅菌。
2）溼熱滅菌法:
在同樣的溫度下，溼熱滅菌的效果比乾熱滅菌好，這是因為一方面細胞內蛋白質含水量高，容易變性。另一方面高溫水蒸汽對蛋白質有高度的穿透力，從而加速蛋白質變性而迅速死亡。
a.巴氏消毒法：有些食物會因高溫破壞營養成分或影響質量，如牛奶、醬油、啤酒等，所以只能用較低的溫度來殺死其中的病原微生物，這樣既保持食物的營養和風味，又進行了消毒，保證了食品衛生。該法一般在62°C，30分鍾既可達到消毒目的。此法為法國微生物學家巴斯德首創，故名為巴氏消毒法。
b.煮沸消毒法：直接將要消毒的物品放入清水中，煮沸15分鍾，即可殺死細菌的全部營養和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸鈉或2%的石炭酸，則效果更好。此法適用於注射器、毛巾及解剖用具的消毒。
c.間歇滅菌法：上述兩種方法在常壓下，只能起到消毒作用，而很難做恭完全無菌。若採用間歇滅菌的方法，就能殺滅物品中所有的微生物。具體做法是：將待滅菌的物品加熱至100°C，15~30分鍾，殺死其中的營養體。然後冷卻，放入37°C恆溫箱中過夜，讓殘留的芽孢萌發成營養體。第2天再重復上述步驟，三次左右，就可達到滅菌的目的。此法不需加壓滅菌鍋，適於推廣，但操作麻煩，所需時間長。
d.加壓蒸汽滅菌法：這是發酵工業、醫療保健、食品檢測和微生物學實驗室中最常用的一種滅菌方法。它適用於各種耐熱、體積大的培養基的滅菌，也適用於玻璃器皿、工作服等物品的滅菌。
加壓蒸汽滅菌是把待滅菌的物品放在一個可密閉的加壓蒸汽滅菌鍋中進行的，以大量蒸汽使其中壓力升高。由於蒸汽壓的上升，水的沸點也隨之提高。在蒸汽壓達到1.055公斤/厘米2時，加壓蒸汽滅菌鍋內的溫度可達到121°C。在這種情況下，微生物（包括芽孢）在15~20分鍾便會被殺死，而達到滅菌目的。如滅菌的對象是砂土、石蠟油等面積大、含菌多、傳熱差的物品，則應適當延長滅菌時間。
在加壓蒸汽滅菌中，要引起注意的一個問題是，在恆壓之前，一定要排盡滅菌鍋中的冷空氣，否則表上的蒸汽壓與蒸汽溫度之間不具對應關系，這樣會大大降低滅菌效果。
3）影響滅菌的因素
a.不同的微生物或同種微生物的不同菌齡對高溫的敏感性不同。多數微生物的營養體和病毒在50~65°C，10分鍾就會被殺死；但各種孢子、特別是芽孢最能抗熱，其中抗熱性最強的是嗜熱脂肪芽孢桿菌，要在121°C，12分鍾才被殺死。對同種微生物來講，幼齡菌比老齡菌對熱更敏感。
b.微生物的數量多少顯然會影響滅菌的效果，數量越多，熱死時間越長。
c.培養基的成分與組成也會影響滅菌效果。一般地講，蛋白質、糖或脂肪存在，則提高抗熱性，pH在7附近，抗熱性最強，偏向兩極，則抗熱能力下降，而不同的鹽類可能對滅菌產生不同的影響；固體培養基要比液體培養基滅菌時間長。
4）滅菌對培養基成分的影響
a.pH值普遍下降。
b.產生混濁或沉澱，這主要是由於一些離子發生化學反應而產生混濁或......
什麼叫滅菌？滅菌方法有哪幾種滅菌的定義：
滅菌是指用物理或化學的方法殺滅全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之達到無菌保障水平。經過滅菌處理後，未被污染的物品，稱無菌物品。經過滅菌處理後，未被污染的區域，稱為無菌區域。
微生物對滅菌劑的抵抗力取決於原始存在的群體密度、菌種或環境賦予菌種的抵抗力。滅菌是獲得純培養的必要條件，也是食品工業和醫葯領域中必需的技術。
將培養基、發酵設備或其他目標物中所有微生物的營養細胞及其芽胞（或孢子）殺滅或去除，從而達到無菌的過程。
常用的滅菌方法：
熱滅菌法
熱滅菌法利用高溫使微生物細胞內的一切蛋白質變性，酶活性消失，致使細胞死亡。通常有乾熱、溼熱和間歇加熱滅菌等法。
乾熱滅菌
火焰灼燒法或烘箱內熱空氣滅菌法稱為乾熱滅菌法把金屬器械或洗凈的玻璃器皿放入電熱烘箱內，在150～170℃下維持1～2小時後，可達到徹底滅菌（包括細菌的芽孢）的目的。灼燒（incineration或bustion）是一種最徹底的乾熱滅菌法，應用范圍僅限於接種環、接種針的滅菌或帶病原菌的材料、動物屍體的燒毀等。
溼熱滅菌以沸水、蒸氣和蒸氣加壓滅菌。
巴氏消毒法：因最早由法國微生物學家巴斯德用於果酒消毒，故名。這是一種專用於牛奶、啤酒、果酒或醬油等不宜進行高溫滅菌的液態風味食品或調料的低溫消毒方法。
巴氏滅菌法就是溼熱滅菌，此法有兩種方式[1]，①經典的低溫維持法（lowtemperatureholdingmethod，LTH）：在61.7～62.8℃下處理30分鍾；②較現代的高溫瞬時法（hightemperatureshorttime或flushpoint，HTST）：在71.6℃或略高溫度下處理15分鍾。在上述諸法中，以蒸氣加壓滅菌效果最好，可用常壓蒸氣滅菌，也可在高壓蒸氣鍋中（一般使用1千克/厘米2）滅菌,其蒸氣溫度可達121℃,能將耐熱的芽孢在30分鍾內全部殺死。但對某些易被高壓破壞的物質，如某些糖或有機含氮化合物，宜在0.6千克/厘米2壓力下(110℃)滅菌15～30分鍾。
煮沸消毒法：採用在100℃下煮沸數分鍾的方法，一般用於飲用水的消毒。
間歇滅菌
間歇滅菌連續3天,每天進行一次蒸氣滅菌的方法。此法適用於不能耐100℃以上溫度的物質和一些糖類或蛋白質類物質。一般是在正常大氣壓下用蒸氣滅菌1小時。滅菌溫度不超過100℃,不致造成糖類等物質的破壞，而可將間歇培養期間萌發的孢子殺死，從而達到徹底滅菌的目的。
輻射滅菌
輻射滅菌在一定條件下利用射線進行滅菌的方法。較常用的有紫外線，其他還有電離輻射（射線加快中子等）。波長在25000～80000納米之間的激光也有強烈的殺菌能力,以波長26500納米最有效。輻射滅菌法僅限於某一定材料，因所需設備復雜，難於廣泛使用。
滲透壓滅菌
滲透壓滅菌利用高滲透壓溶液進行滅菌的方法。在高濃度的食鹽或糖溶液中細胞因脫水而發生質壁分離，不能進行正常的新陳代謝，結果導致微生物的死亡。
化學試劑滅菌
大多數化學葯劑在低濃度下起抑菌作用,高濃度下起殺菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化學滅菌劑必須有揮發性，以便清除滅菌後材料上殘余的葯物。
化學滅菌常用的試劑有表面消毒劑、抗代謝葯物（磺胺類等）、抗生素、生物葯物素抗生素是一類有微生物或其他生物生命活動過程中的合成的次生代謝產物或人工衍生物，他們在很低濃度時就能抑制或感染它種生物（包括病原菌，病毒，癌細胞等）的生命活動，因而可用作優良的化學治療劑。...
醫療器械常用的滅菌方式有哪些？醫療器械滅菌工藝的驗證方法就是與菌過程的相適應性，一般的滅菌方式包括以下：
1、溼熱滅菌：
溼熱滅菌是將產品放在壓力鍋內，利用飽和蒸汽在最小溫度為1210C的壓力下，熱力和溼氣被迅速傳遞給滅菌產品，滅菌時間至少15min。蒸汽潛熱大，可迅速提高物體的溫度，水分子穿透力強，容易使蛋白質凝固變性，所以溼熱滅菌是熱力滅菌中最常用、效果較可靠的一種滅菌方法。適用於溼熱滅菌的醫療器械有：衣服、被單、聚四氟乙烯、外科手術器械、硅橡膠、聚丙烯、環氧樹脂等。但對一些不耐高溫的聚合物如聚氨酯等，承受不了這樣的高溫，只能採用其他的滅菌方法。；
2、乾熱滅菌：
熱滅菌是將產品放於熱空氣箱中、利用乾熱空氣的氧化作用，殺滅一切活的微生物或消除熱原的方法。乾熱滅菌通常使用的溫度較高，范圍在160～2500℃，依據其使用的溫度，暴露的時間可達2h。乾熱滅菌條件一般為160x120min以上、180。Cx60min以上或250。C×45min以上，也可採用其它溫度和時間參數。實際應用中，乾熱滅菌的適用范圍十分有限，一般應用於耐高溫的玻璃器具和金屬外科器械，另有些產品不僅要求達到必要的無菌水平，還要消除細菌內毒素(熱原物質)，應用其他的滅菌方法很難消除細菌內毒素，而乾熱滅菌的溫度時間參數設置在250℃x45min，可以除去玻璃器具的熱原物質。
3、環氧乙烷滅菌：
包裝系統的材料中最起碼有一種具備一定的透氣性，環氧乙烷滅菌是醫療器械領域比較常用的滅菌方法，環氧乙烷滅菌原理是通過其與蛋白質分子上的巰基(一SH)、氨基(一NH：)、羥基(一OH)和羧基(一COOH)以及核酸分子上的亞氨基(一NH一)發生烷基化反應，造成蛋白質失去反應基團，阻礙了蛋白質的正常生化反應和新陳代謝，導致微生物死亡，從而達到滅菌效果。環氧乙烷滅菌時，滅菌櫃內的溫度、溼度、滅菌氣體濃度、滅菌時間都是影響滅菌效果的重要參數。一般採用的滅菌條件：溫度(55±10)oC、相對溼度(60±10)％、滅菌壓力8xl05Pa滅菌時間120min。環氧乙烷是一種烷化劑，穿透力強，能夠使用各種包裝材料，在常溫下能殺滅各種微生物(包括細菌、芽孢、病毒、真菌孢子等)H。適用於生物醫用高分子材料，比如天然橡膠、聚乙烯、聚丙烯及聚氯乙烯等。
4、輻射滅菌：
要求構成包裝系統的所有包裝材料都能夠耐抗輻照射線的處理而不至於老化脆裂；
輻射滅菌是將滅菌產品放於適宜放射源輻射的1射線或適宜的電子加速器發生的電子束中進行電離輻射產生自由基通過控制輻射條件而達到殺滅微生物的方法。滅菌用的1射線通常以鈷Co一60或銫Cs一137作為放射源，發生衰變時發射出1．33MeV和1．17MeV兩個能級的射線，使微生物DNA受到不可恢復的損失，達到人們所需要的目標131。輻射滅菌通常用於外科器具、人工假體、注射器和縫合線等。
5、低溫等離子體滅菌：
低溫等離子體滅菌是最近幾年才發展起來的新的低溫滅菌技術。等離子體是氣體或蒸汽受電場或磁場影響，使大部分分子發生離子化而形成的。等離子體滅菌器是由電源、激發原、氣原、傳輸系統和滅菌腔室組成，抽真空後通過水蒸汽，蒸汽在電場作用下轉變為等離子體。等離子體滅菌優點是殺菌效果可靠、作用溫度低、滅菌後的器械不需要放置空氣中去除殘留氣體，無腐蝕性同。目前，許多國家已開始應用這種技術，主要用於不耐熱的醫療器械。
總結語：
滅菌工藝的驗證是無菌保證的必要條件，滅菌產品的無菌保證取決於滅菌材料的選擇，生產過程中適宜的的滅菌工藝、規范的GMP管理質量管理體系，同時滅菌工藝的確定應綜合考慮生......
生物中滅菌方法有哪些滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有微生物,包括芽孢和孢子.
實驗室里常用的滅菌方法有：灼燒滅菌、乾熱滅菌、高壓蒸氣滅菌.
（滅菌與消毒是不同的,用紫外線處理屬於消毒.）
微生物實驗室常用的滅菌方法有哪些常用的滅菌方法主要包括以下三種：乾熱滅菌；溼熱滅菌；紫外滅菌
1.乾熱滅菌法
1.1灼燒與火焰滅菌：灼燒主要用於接種工具滅菌,在火焰上灼燒即可達滅菌目的,火焰滅菌通常用於無菌操作中試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等實驗物品的滅菌,防止管口污染。
1.2干烤滅菌：利用熱輻射及乾熱空氣進行滅菌.將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷製品包裝後,在烤箱內加熱至160℃,保溫2h可完全滅菌.但不宜超過170℃.此外降溫過速,驟冷易引起玻璃器皿炸裂.乾熱滅菌時裝入干烤箱內的物品切勿緊密,應有空隙,利於熱空氣流動,過密,致使溫度不均,部分物品滅菌不徹底.
2.溼熱滅菌法
通過加壓提高蒸汽溫度,用高壓蒸汽滅菌,溫度高,滅菌效果最好.
注意事項：1.完全排除高壓滅菌器內的冷空氣.有冷空氣存在時,在同一表壓下所達到的溫度值要低,而冷空氣排出越少,溫度就低得越多.在高壓蒸汽滅菌時,為保證達到規定的溫度,必須將冷空氣完全排除.否則,雖然壓力達到,而溫度達不到規定的要求,滅菌就不徹底.
3.紫外線
殺菌譜廣,但穿透力弱,影響因素多,殺菌效能受到一定限制.
紫外線消毒效果與紫外線強度、照射時間、溫度與溼度等因素有關.紫外燈殺菌的溫度以20~40℃,相對溼度40%~60%為宜.
常用的消毒滅菌方法有哪些(1)天然消毒法：利用日光等天然條件殺滅致病微生物，達到消毒目的，稱為天然消毒法。
①日光曝曬法：日光由於其熱、乾燥和紫外線的作用，而具有一定的殺菌力。日光殺菌作用的大小受地區、季節、時間等因素影響，日光越強，照射時間越長，殺菌效果越好。日光中的紫外線由於通過大氣層時，因散熱和吸收而減弱，而且不能全部透過玻璃，因此，必須直接在陽光下曝曬，才能取得殺菌效力。日光曝曬法常用於書籍、床墊、被褥、毛毯及衣服等的消毒。曝曬時應經常將被曬物翻動，使物品各面都能與日光直接接觸，一般在日光曝曬下4～6小時可達到消毒目的。
②通風：通風雖然不能殺滅微生物，但可在短時間內使室內外空氣交換，減少室內致病微生物。通風的方法有多種，如用門、窗或氣窗換氣，也可用換氣扇通風。居室內應定時通風換氣，通風時間一般每次不少於30分鍾。
(2)物理滅菌法：利用熱力等物理作用，使微生物的蛋白質及酶變性凝固，以達到消毒、滅菌目的，稱為物理滅菌法。
①燃燒法：是一種簡單易行、迅速徹底有效的滅菌方法，但對物品的破壞性大，多用於耐高熱，或已帶致病菌而又無保留價值的物品，如被某些細菌或病毒污染的紙張、敷料，搪瓷類物品如坐浴盆，也可以用火焰燃燒消毒滅菌，應先將盆洗凈擦乾，再倒人少許90％酒精，點燃後慢慢轉動浴盆，使其內面完全被火焰燒到。應用此法時，要注意安全，須遠離易燃或易爆物品，以免引起火災。
②煮沸法：是一種經濟方便的滅菌法，一般等水開後計時，煮沸10—15分鍾可殺死無芽胞的細菌。可用於食具、毛巾、手絹等不怕溼而耐高溫的物品的消毒滅菌。
③高壓蒸汽滅菌法：利用高壓鍋內的高壓和高熱釋放的潛能進行滅菌，此法殺菌力強，是最有效的物理滅菌法。待高壓鍋上汽後，加閥再蒸15分鍾，適合消毒棉花、敷料等物品。
(3)化學消毒滅菌法：化學消毒滅菌法是利用化學葯物滲透細菌體內，破壞其生理功能，抑制細菌代謝生長，從而起到消毒的作用。家庭常用化學消毒滅菌方法有以下三種。
①擦拭法：用化學葯液擦拭被污染的物體表面，常用於地面、傢俱、陳列物品的消毒。如用0．5％-3％漂白粉澄清液、84消毒液等含氯消毒劑(現市場都出售，要看好有效期及使用方法)，擦拭牆壁、床、桌椅地面及廁所。
②浸泡法：將被消毒物品浸泡在消毒液中，常用於不能或不便蒸煮的生活用具。浸泡時間的長短因物品及溶液的性質而有不同。如用1％-3％漂白粉澄清液浸泡餐具、便器需1小時，用0.5％「84」消毒液浸泡需15分鍾，而用0.02％高效消毒片浸泡只需5分鍾，就可以達到目的。若浸泡嘔吐物及排泄物，不但消毒液濃度要加倍，而且浸泡時間也要加倍。
③熏蒸法：是利用消毒葯品所產生的氣體進行消毒。常用於傳染病人居住過的房間空氣及室內表面消毒。
福爾馬林(甲醛)+高錳酸鉀：每立方米加入福爾馬林25—40毫升，高錳酸鉀15—30克，兩種葯放置在一起即產生氣體，可達到消毒目的。消毒時，必須將門窗緊閉12-24／小時，消毒後再打開門窗進行通風，此法對各種細菌、病毒引起的傳染病均有效。
食醋：每立方米用3-10毫升食醋，加水2～3倍加熱熏蒸，用於室內空氣消毒，對於預防流感等呼吸道傳染病有效。