⑴ 如何正確採集病原微生物標本
【標本的採集方法】
防止皮膚寄生菌或環境微生物引起的污染是血培養的關鍵問題,采血前嚴團蘆激格執行消毒程序是十分重要的。
1 皮膚消毒程序: 嚴格按以下三步法進行:
(1) 75%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s 以上。
(2) 用一根碘酊或聚維酮碘(碘伏)棉簽消毒皮膚,1~2%碘酊作用30s 或聚維酮碘作用60s,從穿刺點向外畫圈消毒,至消毒區域直徑達3cm以上。
(3) 75%酒精脫碘。
對碘過嘩橡敏的病人只能用70%酒精消毒,消毒60s。 待穿刺部位酒精揮發乾燥後穿刺采血。 2 培養瓶消毒程序
(1) 用塌襪75%酒精消毒血培養瓶橡皮塞子
⑵ 工作人員手部微生物檢測,塗抹法
10-2、10-3、10-4、10-5都可以的,同時做幾個嘛。這樣就可以比較哪個濃度更適合檢測。
⑶ 手部微生物檢測方法
不能將棉球放到培養基裡面培養,這樣根本沒辦法計數.將棉簽放入10ml滅菌生理鹽水中,混勻,取1
ml到平板中,再到平板(45℃的培養基約15ml).37℃培養48h,計數.
假如手很臟,細菌很多,則將棉簽放入含10ml滅菌生理鹽水的采樣管後,取1ml到9ml無菌生理鹽水中(相當於10倍稀釋),再取1ml該稀釋液到滅過菌的平板中,再倒入培養基.
⑷ 無菌棉簽的微生物檢測
對設備進行清洗後,用無菌棉簽擦拭取樣區,擦拭面積25cm2。取樣前,無菌棉簽須在無菌生理鹽水中潤濕。取樣後用10ml無菌生理鹽團祥氏水宴斗洗脫,將洗脫液按《微生物限度檢查標准操作規程》檢測,同時做空白對照。取樣位塌散置為不同的三個區域,連續驗證三批。在最後一批生產結束後,分別於3、6、9小時同法取樣,檢測微生物限度,最後一次取樣後SOP對設備進行清潔後同法取樣檢測微生物限度,於第二天、第三天、第四天同一時間同法取樣測微生物限度。取樣時,應用力平穩而緩慢地擦拭取樣點,在向前移動的同時將其從一邊移動到另一邊,擦拭過程應覆蓋整個表面。翻轉棉球,讓棉球的另外一面也進行擦拭,但與前次擦拭的移動方向垂直。
⑸ 病原微生物中細菌常見檢測方法有哪些
病原微生物種類繁多,變異迅速,快速鑒定病原微生物的檢驗技術也在不斷發展前進著。目前,應用比較廣泛的病原微生物檢測方法主要有直接塗片鏡檢、分離培養、生化反應、血清學反應、核酸分子雜交、基因晶片、多聚酶鏈反應等,該文對這些檢測技術進展做一綜述。 對人和動物具有致病性的微生物稱為病原微生物,又稱病原體,有病毒、細菌、立克次體、支原體、衣原體、螺旋體、真菌、放線菌、朊粒等。這些病原微生物可引起感染、過敏、腫瘤、痴獃等疾病,也是危害食品安全的主要因素之一。近年來出現的SARS、高致病性禽流感、西尼羅病毒感染等疾病的傳染性極強,往往造成世界性大流行,因此對病原體的檢測必須做到快速、准確。常規病原學檢測方法操作繁瑣,檢測周期長,而且對操作人員技術水平要求比較高。隨著醫學微生物學研究技術的不斷發展,病原學診斷已不再局限於病原體水平,深入到分子水平、基因水平的檢測手段不斷出現並被應用於臨床和實驗室 J。核酸分子雜交技術、PCR技術、基因晶片技術等檢測方法,自動化程度高,快速省時、無污染、結果精確,可以准確靈敏地鑒定病原微生物。1 傳統的病原微生物的檢測方法傳統的病原微生物學實驗室檢查以染色、培養、生化鑒定等為主,將標本直接塗片染色鏡檢和接種在培養基上進行分離培養是對細菌或真菌感染性疾病進行病原學診斷的常用方法。1.1 直接塗片鏡檢病原微生物體形體積微小,大多無色半透明狀,將其染色後可藉助顯微鏡觀察其大小、形態、排列等。直接塗片染色鏡檢簡便快速,對那些具有特殊形態的病原微生物感染仍然適用,例如淋球菌感染、結核分枝桿菌、螺旋體感染等的早期初步診斷。直接塗片鏡檢不需要特殊的儀器和裝置,在基層實驗室里仍然是十分重要的病原微生物檢測手段。1.2 分離培養與生化反應 分離培養主要用於臨床標本(如血液、痰、糞便等)或培養物中有多種細菌時對某一種細菌的分離。細菌的生長繁殖需要一定時間,檢測周期較長,不能同時處理批量樣本。為解決這一問題,各種自動化培養和鑒定系統不斷產生,傳統鑒定方法也在逐步改進,大大加快了檢驗速度。例如Microscan WalLCAway全自動微生物分析儀,可同時做細菌鑒定和葯敏試驗,檢驗500多個菌種。苛養菌如肺炎鏈球菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血桿菌等對營養要求比較高,常規培養陽性率低。雍剛 等將不要同比例的葡萄糖、玉米澱粉、生長因子、酵母粉、氨基酸等特殊增菌劑加入到巧克力培養基中製成了新型淋病奈瑟菌培養基,大大提高了淋病奈瑟菌的分離培養率。蘇盛通等在營養瓊脂中加人了中葯紅棗、赤小豆培養甲型鏈球菌、乙型鏈球菌、肺炎鏈球菌等細菌,生長指數明顯高於血平板。1.3 組織細胞培養 活組織細胞培養適於專營活組織細胞內生存的病原體,包括病毒、立克次體、衣原體等。不同病原體敏感的組織細胞是不一樣的,將活細胞從病原體敏感的動物組織中取出在體外進行原代培養或用病原體敏感細胞系進行傳代培養,再將病原體接種於相應的組織細胞中後,病原體可在其中繁殖增長,引起特異性的細胞病變效應。也可以將病原體直接接種於敏感動物體內,引起相應組織器官出現特異的病理學改變。往往可以根據這些特異的病變對病原體進行鑒定。2 血清學與免疫學檢測血清學檢測是通過已知的抗體或抗原來檢測病原體的抗原或抗體從而對病原體進行快速鑒定的技術,簡化了鑒定步驟,常用的方法包括血清凝集技術、乳膠凝集實驗、熒光抗體檢測技術、協同凝集試驗、酶聯免疫測試技術等。酶聯免疫技術的應用大大提高了血清學檢測的敏感性和特異性,不僅可檢測樣本中病原體抗原,也可檢測機體的抗體成分。幽門螺奸菌在我國人群感染率高達50% ~80% ,應用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測唾液中抗HP抗體來診斷HP感染,其結果滿意。乙型肝炎病毒(HBV)在我國人群中感染率極高,ELISA應用於乙型肝炎病人早期血清學診斷的效果最為明顯。臨床上致病菌往往和非致病菌混合在一起,如何從這些細菌中分離出目標菌是關鍵。免疫磁珠分離技術(IMBS)是近年來發展起來的在微生物檢測領域中一種新技術。其基本原理是將特定病原體的單抗或多抗或二抗偶聯到磁珠微球上,通過抗原抗體反應形成磁珠一目標病原體復合物或磁珠一一抗一目標病原體復合物,在外部磁場磁力的作用下,將目標病原體分離出來。目前已經開發出了針對各種病原體的免疫磁珠,如大腸埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、軍團菌等,廣泛應用到各級科研和實驗室 。經IMBS分離出的白色念珠菌可直接在顯微鏡下檢測,檢測時間縮短至4 h。IM—Bs還可以和其它檢測技術聯合來檢測病原菌,免疫磁珠分離得到的目標菌可繼續用於分離培養使大腸埃希菌0157最低檢測限由200 cfu·g 提高到2 cfu·g~;IMBS結合聚合酶鏈反應(IMBS—PCR)可對培養條件比較特殊的細菌如苛養菌、厭氧菌進行快速檢測,肉類中的產毒素型產氣莢膜梭菌經IMBS.PCR檢測
目前主要普通培養(簡稱標)般報告要用儀器、核酸檢測(PCR)、目前快速檢測(主要包括:免疫磁珠、酶聯免疫試劑盒、金標檢測卡等根據自需求選擇
目前主要有普通培養法(簡稱國標方法)一般出報告的要用,儀器法、核酸檢測法(PCR)、還有目前的快速檢測法(主要包括:免疫磁珠、酶聯免疫試劑盒、金標檢測卡等。這個根據自己的需求來選擇吧。
簡述hiv的微生物學檢測方法有哪些
梅毒是由蒼白螺旋體感染引起的一種性傳播性疾病 。梅毒螺旋體感染人體後出現兩種抗體:一種是特異性抗體(TPHA),為lgM。當有補體存在和厭氧條件下,對活螺旋體的動力有抑製作用,並可將螺旋體殺死或溶解,對機體的再感染有保護作用。另一類是非特異性抗體(快速血漿反應素 RPR)。為lgA與lgM的混合物,可與正常生物組織中的類脂抗原發生非特異性結合,對人體無保護作用
傳統檢測有三種方法
1、直接顯微鏡觀察,正常情況,在一定的培養條件下(相同的培養基、溫度以及培養時間),同種微生物表現出穩定的菌落特徵。可以通過顯微鏡觀察菌落特徵對微生物種類進行判斷。
2、選擇培養基培養微生物或人為提供有利於目的菌株生長的條件,選擇培養基,其作用是允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他微生物生長。選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用型別或某一特徵進行間接判斷,得到的微生物往往並不只有一種,但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。
3、鑒別培養基,根據微生物的代謝特點,在培養基中加入某種指示劑或化學葯品。與選擇培養相比,鑒別培養基的鑒別所得結果的范圍比較小,一般可直接測定某微生物的種類。
現代定義
微生物:個體難以用肉眼觀察的一切微小生物之統稱。
微生物包括細菌、病毒、真菌、和少數藻類等。(但有些微生物是肉眼可以看見的,像屬於真菌的蘑菇、靈芝等。)病毒是一類由核酸和蛋白質等少數幾種成分組成的「非細胞生物」,但是它的生存必須依賴於活細胞。
根據存在的不同環境分為空間微生物、海洋微生物等,按照細胞機構分類分為原核微生物和真核微生物。
主要特徵
1、體小面大
2、吸多轉快
3、生長繁殖快
微生物的這一特性使其在工業上有廣泛的應用,如發酵、單細胞蛋白等。微生物是人類不可或缺的好朋友。
這個是我在網上找到的的微生物的檢測試紙片,也不知道方法咋樣,你要也可以去網站上看看的
像大腸桿菌測試紙片 腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現的食物傳播性疾病的病因。它除了引起腹瀉、出血性腸炎外,還可發生溶血性尿毒綜合症、血栓性血小板減少性紫癜等嚴重的並發症。自1982年美國首次發現因該致病菌引起的食物中毒以來,腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開始逐漸擴散和蔓延,相繼在英國、加拿大、日本等多個國家引起腹瀉爆發和流行。我國已陸續有十餘個省份在市售食品、進口食品、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7。大腸桿菌O157測試片(FilmplateTM E.coli O157BO204)3方元方圓生物的採用進口高選擇性顯色培養基作為主要原料,運用專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認,大大地簡化了檢測程式,非常適合各級檢驗部門和食品企業使用。本品適用於海產品、水產品、各類熟肉製品和冷葷、蛋及蛋製品等的快速檢測。參照標准:食品衛生微生物學檢驗大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗(GB/T4789.36)。
; 用浸有滅菌生理鹽水的棉簽在被檢物體表面取25cm2的面積,在其內塗抹10次,然後剪去手接觸部分棉棒,將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的取樣管內送檢。擦拭時棉簽要隨時轉動,保證擦拭的准確性。對每個擦拭點應詳細記錄所在分場的具 *** 置、擦拭時間及所擦拭環節的消毒時間
先配製固體培養基,再劃線培養1天,之後挑每一種菌落的細菌製片,顯微鏡下觀察細菌的種類
⑹ 清潔驗證的取樣方法
發表個人見解的時間到了:1。
淋洗樣品的取樣方法需要驗證嗎?個人覺得不必要。但是你的分析檢驗方法是需要驗證的。你的取樣方法只要有取樣規程就可以了,描述在哪裡取樣才有代表性,何時取樣,取樣量等。我覺得已經足夠。驗證什麼?2。擦拭取樣里,這個:「一定量」定義很模糊的,關鍵是你把這「一定量」抹到板上後,你能擦回來多少。當然你這個一定量可以基於標准限度的50%,100%,150%這樣的量來塗抹。比如你的清潔限度是100ug/100cm2,則可以考慮塗抹量為50ug,100ug,150ug(假設板的面積為100cm2),不嫌麻煩的話每個做它三個樣品,然後選擇個回收率最低的值,作為你的結果。3.
淋洗樣品做回收率做得很少哦,不過你又要問這個「一定量」的話,可以自己計算一下。計算依據為:淋洗樣品的限度的50%,100%,150%(mg/l)*該設備最後一次淋洗液的體積(l),攪勻後,取樣,檢測。4。殘留物在下個產品中的殘留量有兩種計算方式,一是根據殘留物的毒性數據ld50值,二是根據mtdd的千分之一(maximum
therapeutical
daily
dose最低治療劑量
,主觀認為,一個活性物質的千分之一「最低治療劑量」已經不能顯示治療作用了,也就是就算有這么點兒殘留在下個產品里,姐也可以不理會它了!),兩種演算法我比較傾向於,哪個算出來限度低就選哪個。5
據我所知,沒什麼其他演算法。你說的那書我沒看過,但是萬變不離其宗,都一樣。無非就是四個因子:上個產品的毒性(ld50值)或者活性數據(mtdd)以及下個產品的批量以及每日最大口服劑量。
值得注意的是計算出來的都是一個量值,單位為g,或者kg,而我們在實際運用過程中應更直觀的體現,就要用這個量去除以設備的最終淋洗液的量,得到一個淋洗液的濃度值。比如:計算出來的結果是50g,而最終淋洗液的總體積為2000l,那麼你這個限度就是50g/2000l,即為0.025g/l:當然我只是瞎舉了個例子而已。
⑺ 生物物證棉簽簡單介紹棉簽使用步驟
生物物證棉簽簡單介紹棉簽使用步驟
1. 產品組成:2支棉簽+1瓶提取液/包。
2. DNA消毒:在潔凈車間將棉簽和提取液放入透析紙包裝袋密封,用環氧乙烷進行消毒。環氧乙烷能穿透透析
紙漏談,對棉簽進行消毒,消除所有DNA,確保沒有殘余DNA。
3. 使用方法:用棉簽蘸取提取液,使棉簽濕潤,再用棉簽擦拭遺留DNA的印跡,將棉簽放入專用保存盒,確保
棉簽不與任何物體接觸。
4. 在現場,擦拭DNA後的棉簽可放回原包裝袋進行保存,確保不會受到DNA污染。透析紙上可書寫簡單說明。
5. 在實驗室,將棉簽頭伸入離心管口部,用離心管蓋壓住棉簽頭,用力搬動棉簽桿,可以輕易使棉簽頭折斷,
並掉入離心管。
生物物證棉簽 產品特點:
用於生物物證的提取和保存,適合現場血斑、唾液斑、精斑等各種生物物證的提取和DNA檢驗使用。本品所用棉簽均在凈化條件下生產,並經滅菌處理,棉簽頭部由純棉之城,絕無外源DNA污染。
使用方法:
1.用棉簽擦取斑跡部位(若為乾燥檢材,使用2-3滴超純水濕潤棉簽頭)余襲,擦拭時力度適中。擦拭後在棉簽擦拭的一側用記號筆標記,以明確豎搜兄棉簽提取斑跡的部位。
2.將採集生物物證檢材後的棉簽陰涼放入物證袋中,置於陰涼乾燥處保存。
⑻ 接觸碟表面微生物采樣後 怎樣驗證有無培養基殘留
接觸碟表面微生物采樣後 怎樣驗證有無培養基殘留
表面微生物的監睜和告測方法有兩種,一是培養皿接觸法,二是棉簽擦拭法,棉簽擦拭法需要做棉簽的回收率驗證,目前基本上都改用「培養皿接觸法」了。
具體方法:
1、提前將平皿培養基從冷庫中取出,放置至室溫。
2、打開培養皿上蓋,使無菌培養基表面與取樣面直接接觸,均勻按壓培養皿底板,確保全部培養基表面與取樣點表面均勻接觸10秒左右,蓋上碟蓋,做好標記。
3、取樣後,用蘸有70%酒精的濕棚雀紗布擦拭被取樣表面,以除去殘留培養基。
4、全部采樣結束後,將培養皿倒置於恆溫培養箱中培養,每批監測需放置兩個空白培養皿進行陰性對照。培養溫度為20~25℃,悉明培養5天,然後再在30~35℃下培養2天。