微生物移液管管桶怎麼打開視頻

㈠ 微生物培養的方法有哪些

微生物培養法是在人為條件下繁殖微生物的方法。根據微生物的種類以及對養料、溫度、氧氣、水分、酸鹼度等環境條件的要求不同，並聯系生產和實驗上的具體要求，可有不同的培養方法。可分好氣培養法和厭氣培養法兩類。中海生物技術的培養基一是好氣微生物培養法，常用：
①搖床培養法，即將微生物接種於盛有液體培養基的三角瓶後，放在恆溫培養室中的搖床上作有節奏的振盪，使空氣不斷進入培養液中，促其良好生長;
②淺盤培養法，又稱表面培養法，在盤內放一淺層培養基，使微生物能夠充分接觸空氣，而有利於生長繁殖，但此法所需空間大，並且容易污染雜菌;
③深層培養法，適用於好氣微生物的大規模發酵培養，在大容積的液體培養基中，通入無菌空氣，並不斷攪拌，可使微生物充分接觸空氣，迅速繁殖並積累代謝產物。二是厭氣微生物培養法，實驗室常用化學還原劑或抽氣機吸除培養基中的分子氧，也有用靜止狀態的深層培養法。在生產中常用密封式發酵罐或不通風的固體發酵法。

㈡ 微生物檢驗細菌的接種方法

微生物檢驗細菌的接種方法

常用的細菌接種方法有平板劃線分離法、斜面接種法、穿刺接種法、液體和半固體接種法、塗布接種法等。下面是我為大家帶來的關於微生物檢驗細菌的接種方法的知識，歡迎閱讀。

一、平板劃線分離法

平板劃線分離法:是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環在平板培養基表面，通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經培養後生長繁殖成單菌落，通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種。有時這種單菌落並非都由單個細胞繁殖而來的，故必須反復分離多次才可得到純種。其原理是將微生物樣品在固體培養基表面多次作“由點到線”稀釋而達到分離目的的。

為方便劃線，一般培養基不宜太薄，每皿約傾倒20ml培養基，培養基應厚薄均勻，平板表面光滑。劃線分離主要有分區劃線法和連續劃線法兩種(如圖1， A、B)。

分區劃線法是將平板分四區，故又稱四分區劃線法。劃線時每次將平板轉動60~70°劃線，每換一次角度，應將接種環上的菌燒死後，再通過上次劃線處劃線;

另一種連續劃線法是從平板邊緣一點開始，連續作波浪式劃線直到平板的另一端為止，當中不需灼燒接種環上的菌。

1)連續劃線法

將瓊脂平皿半開蓋倒置於培養箱內至無冷凝水，接種環於酒精燈外焰燒至紅透，接種棒也要充分灼燒，最後再集中燒接種環至紅。

輕輕搖勻待接種試管，左手手心托待接種試管底側部，右手執接種環，右手小指拔下試管塞，於酒精燈附近將接種環伸進試管，稍候，再插入待接接種液中，蘸一下，取滿一環，抽出、燒塞、蓋蓋、放回試管架。或將接種環通過稍打開皿蓋的縫隙伸入平板，在平板邊緣空白處接觸一下使接種環冷卻，然後以無菌操作接種環直接取平板上待分離純化的菌落。

於靠近酒精燈處打開平皿蓋約30°，右手將環伸進平皿，將菌種點種在平板邊緣一處，輕輕塗布於瓊脂培養基邊緣(如圖2)，抽出接種環，蓋上平皿蓋，然後將接種環上多餘的培養液在火焰中灼燒，打開平皿蓋約30°伸入接種環，待接種環冷卻後，再與接種液處輕輕接觸，開始在平板表面輕巧滑動劃線，接種環不要嵌入培養基內劃破培養基，線條要平行密集，充分利用平板表面積，注意勿使前後兩條線重疊，劃線完畢，關上皿蓋。灼燒接種環，待冷卻後放置接種架上。培養皿倒置於適溫的恆溫箱內培養(以免培養過程皿蓋冷凝水滴下，沖散已分離的菌落)。培養後在劃線平板上觀察沿劃線處長出的菌落形態，鏡檢後再接種斜面。

2)分區劃線法

取菌、接種、培養方法與“連續劃線法”相似。

分區劃線法分離時平板分四個區，故又稱四分區劃線法。其中第4區是單菌落的主要分布區，故其劃線面積應最大。為防止第4區內劃線與1、2、3區線條相接觸，應使4區線條與1區線條相平行，這樣區與區間線條夾角最好保持120°左右。

先將接種環沾取少量菌在平板1區劃3~5條平行線，取出接種環，左手關上皿蓋，將平板轉動60~70°，右手把接種環上多餘菌體燒死，將燒紅的接種環在平板邊緣冷卻，再按以上方法以1區劃線的菌體為菌源，由1區向2區作第2次平行劃線。第2次劃線完畢，同時再把平皿轉動約60~70°，同樣依次在3、4區劃線。劃線完畢，灼燒接種環，關上皿蓋，同上法培養，在劃線區觀察單菌落。

二、斜面接種法

該法主要用於單個菌落的純培養、保存菌種或觀察細菌的某些特性。

(1)左手平托兩支試管，拇指按住試管的底部。外側一支試管是斜面上長有菌苔的'菌種試管，內側一支是待接的空白斜面，兩支試管的斜面同時向上。用右手將試管塞旋松，以便在接種時容易拔出。

(2)右手拿接種環(如握毛筆一樣)，在火焰上先將環端燒紅滅菌，然後將有可能伸入試管的其餘部位也過火滅菌.

(3)將兩支試管的上端並齊，靠近火焰，用右手小指和掌心將兩支試管的試管塞一並夾住拔出，試管塞仍夾在手中，然後讓試管口緩緩過火焰。注意不得將試管塞隨意丟於桌上受到沾污，試管口切勿燒得過燙以免炸裂。

(4)將已灼燒的接種環伸入外側的菌種試管內。先把接種環的先端觸及無菌苔的培養基上使其冷卻(如果操作迅速，此時接種環尚未完全冷卻)。再根據需要用接種環沾取一定量的菌苔，注意勿刮破培養基。將沾有菌苔的接種環迅速抽出試管，注意勿使接種環碰到管壁或管口上。

(5)迅速將沾有菌種的接種環伸入另一支待接斜面試管的底部，輕輕向上劃線(直線或曲線，根據需要確定)，勿劃破培養基表面。

(6)接好種的斜面試管口再次過火焰，試管塞底部過火焰後立即塞入試管內。

(7)將沾有菌苔的接種環在火焰上燒紅滅菌。先在內焰中燒灼，使其乾燥後，再在外焰中燒紅，以免菌苔驟熱，會使菌體爆濺，造成污染。

(8)放下環後，再將試管塞旋緊，在試管外面上方距試管口2～3cm處貼上標簽。

(9)28℃～37℃恆溫培養。

斜面接種方法及無菌操作過程如下具體操作過程見圖3。

三、穿刺接種法

用接種針經火焰滅菌，沾取少量菌種，垂直地穿入試管固體培養基中心至底部，然後將挑起菌落的接種針平行於管壁插入瓊脂斜面底部、沿著原接種線將針拔出、燒試管塞和試管口、塞上試管塞，再將接種針上殘留的菌體在火焰上燒掉。要做到手穩、動作輕巧快速。見下圖4。(a:垂直接種法，b：水平接種法)

四、液體和半固體接種法

1)液體接種法

包括從外面菌種接人培養液，或從液體菌種接入液體培養液，兩種情況都可以用接種環接種。但在培養量比較大的情況下，液體接種宜採用移液管接種，要求無菌操作。

左手持試管，右手將燒灼過的接種環伸入菌種管，待冷卻後，取菌液一環，立即移入培養基管中，在接近液面的管壁上輕輕研磨，然後將試管稍傾斜，並沾取少許液體調和，使菌液混合於培養基中

2)半固體培養基接種法

將燒灼過的接種針插入菌種管冷卻後，沾取菌液少許，立即垂直插入半固體培養基的中心至接近於管底處，但不可直刺至管底，然後循原路退出(圖5，B)。管口通過火焰，塞上棉塞，接種針燒灼滅菌後放下。

將上述已接種好的培養物， 37℃度恆溫箱內培養，24小時後取出觀察結果。

五、塗布接種法

將瓊脂平皿半開蓋倒置於培養箱內至無冷凝水，用無菌移液管吸取菌懸液0.1mL，滴加於培養基平板上，右手持無菌玻璃塗棒，左手拿培養皿，並用拇指將皿蓋打開一縫，在火焰旁右手持玻璃塗棒與培養皿平板表面將菌液自平板中央均勻向四周塗布擴散，切忌用力過猛將菌液直接推向平板邊緣或將培養基劃破。接種後，將平板倒置於恆溫箱中，培養觀察。

㈢ 做微生物實驗要注意什麼

呵呵 我也是學這個專業的
從一開始的時候，老師就強調我們
微生物的實驗最怕什麼。就是最怕微生物 會沾染雜菌
而且 除了你要培養的微生物的安全之外你還要考慮好自身的安全以及環境安全

進實驗室之前一定要穿實驗服，如果有條件的可以經常給實驗服滅滅菌，帶手套是一定要的，還有口罩，一般活性炭口罩就可以了。必要時要帶腳套和帽子，如果需要接觸有毒物質，最好在乳膠手套外面再增加一個一次性的塑料手套，透明的那種，可以隨時扔掉

關於你自己的東西可以紫外線殺菌，然後操作之前要用無水乙醇有的說是醫用酒精，濃度百分之七十五的擦拭雙手，所有動作要在超凈台中進行。

實驗器具也要滅菌，一般不太講究的就是乾熱滅菌和高壓蒸汽滅菌，一般培養基什麼的都是高壓蒸汽滅菌。以前專業課老師講過，高壓蒸汽滅菌的話效果比乾熱滅菌要好，因為受熱均勻滅的比較透徹。蒸汽滅菌鍋我就不多說了吧，樓主應該會用。

其他的東西 比如平皿什麼的就用乾熱滅菌，在烘箱裡面，一般用報紙裹好，至於你常用的槍頭和槍的話同樣也要滅菌。
如果要求嚴格的話所有的器皿我指的是玻璃的，要先刷洗干凈後泡在鉻酸洗液當中，要求過夜，完後拿出來控干，差不多不滴水就行，用少量自來水洗去帶顏色的那部分鉻酸，這一部分的水是要求倒入廢液瓶中，不可以進入下水道的。然後用自來水洗四十遍，其實要求是四十到五十遍，沒錯，我沒有打錯，你也沒有看錯，就是要這么多遍。然後，蒸餾水潤洗三遍，晾乾就可以進行乾熱滅菌了。瓶蓋瓶塞之類的要在鹽酸當中過夜，1%的，然後自來水洗蒸餾水洗滌就好。
有棉塞什麼的東西記得要在酒精的的外焰上過一下，接種針要灼燒到發紅在晾涼！
培養的過程要看你是連續培養還是半連續的還是不連續的，在加培養液的時候同樣注意不要引入雜菌
記住，在實驗室里堅決不允許吃東西喝水！
出來的時候要記得洗手哈，實驗服別隨便亂扔
至於廢料肯定不能帶出來滴，那些有毒的或者生長非常快的微生物沾染過的不要隨便的就扔掉要放在廢物桶里統一處理，培養皿清洗干凈後，再次乾熱滅菌就又可以用了哈
然後差不多粗淺的說一下吧，具體的如果你需要更詳細的資料的話應該書上應該有更詳細的。

這個問題貌似剛剛回答過一次了，那我就直接把我回答過的答案又復制過來了，這個可不涉及到那種能搜一搜到的啊，可是我一個字一個字的敲上去的，樓主看著辦吧

㈣ 微生物接種方法有哪幾種

接種常見方法有：平板劃線接種法、斜面接種法、傾注培養法、穿刺接種法、液體接種法。

一、平板劃線分離法

平板劃線分離法:是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環在平板培養基表面，通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經培養後生長繁殖成單菌落，通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種。

二、斜面接種法

該法主要用於單個菌落的純培養、保存菌種或觀察細菌的某些特性。

三、穿刺接種法

穿刺培養，是指將帶有欲培養微生物的接種針深插至半固體培養基（瓊脂含量0.2%〜1.0%）中接種，並進行微生物固體深層培養的一種方法，主要用於厭氧或兼性厭氧微生物的培養。

四、液體接種法

液體培養，是指將微生物直接接種於液體培養基中，並不斷振盪或攪拌，使微生物均勻地在液體培養基中生長繁殖的一種培養方法。液體培養適用於好氧微生物和植物組織培養，以迅速得到大量繁殖體為目的。

五、塗布接種法

微生物學實驗中的一種操作方法。由於將含菌材料現加到還較燙的培養基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡，而且採用稀釋倒平台法也會使一些嚴格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長，因此在微生物學研究中更常用的純種分離方法是塗布平板法。

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接種注意事項

1、每次接種時間最長不得連續超過2小時。

2、操作時，接種工具尖端和種塊不能接觸到管口和外部其它物體。工具尖端碰到外面物體要重換工具，種塊碰到外面物體則作廢。

3、一般用種量：每支試管母種可擴繁一級種100支左右；擴接原種6～8瓶。

㈤ 微生物實驗的樣品可以拆開後放微生物實驗室嗎

需要重新消毒、密封才能放在實驗室。
微生物實驗室的要求：一、無菌操作要求。1.接種細菌時必須穿工作服、戴工作帽。2.進行接種食品樣品時，必須穿專用的工作服、帽及拖鞋，應放在無菌室緩沖間，工作前經紫外線消毒後使用。3.接種食品樣品時，應在進無菌室前用肥皂洗手，然後用75％酒精棉球將手擦乾凈。4.進行接種所用的吸管，平皿及培養基等必須經消毒滅菌，打開包裝未使用完的器皿，不能放置後再使用，金屬用具應高壓滅菌或用95%酒精點燃燒灼三次後使用。5.從包裝中取出吸管時，吸管尖部不能觸及外露部位，使用吸管接種於試管或平皿時，吸管尖不得觸及試管或平皿邊。6.接種樣品、轉種細菌必須在酒精燈前操作，接種細菌或樣品時，吸管從包裝中取出後及打開試管塞都要通過火焰消毒。7.接種環和針在接種細菌前應經火焰燒灼全部金屬絲，必要時還要燒到環和針與桿的連接處，接種結核菌和烈性菌的接種環應在沸水中煮沸5min，再經火焰燒灼。8.吸管吸取菌液或樣品時，應用相應的橡皮頭吸取，不得直接用口吸。
二、無菌間使用要求。1、無菌間通向外面的窗戶應為雙層玻璃，並要密封，不得隨意打開，並設有與無菌間大小相應的緩沖間及推拉門，另設有0.5-0.7平方米的小窗，以備進入無菌間後傳遞物品。2、無菌間內應保持清潔，工作後用2%-3%煤酚皂溶液消毒，擦拭工作檯面，不得存放與實驗無關的物品。3、無菌間使用前後應將門關緊，打開紫外燈，如採用室內懸吊紫外燈消毒時，需30W紫外燈，距離在1.0m處，照射時間不少於30min，使用紫外燈，應注意不得直接在紫外線下操作，以免引起損傷，燈管每隔兩周需用酒精棉球輕輕擦拭，除去上麵灰塵和油垢，以減少紫外線穿透的影響。4、處理和接種食品標本時，進入無菌間操作，不得隨意出入，如需要傳遞物品，可通過小窗傳遞。5、在無菌間內如需要安裝空調時，則應有過濾裝置。
三、消毒滅菌要求。微生物檢測用的玻璃器皿、金屬用具及培養基、被污染和接種的培養物等，必須經滅菌後方能使用。

㈥ 自然界分離微生物的一般操作步驟

自然界的微生物，幾乎都是混雜在一起的。人們要想觀察、研究和利用某一種微生物，就必須將它從各種微生物混生的環境中分離開來。所以微生物的分離是一項十分重要的技術。

一、分離的基本方法

微生物分離的方法很多，主要有連續稀釋分離法，平板劃線分離法和單細胞分離法等方法。其中，單細胞分離法需要貴重精密儀器，中學無法開展，而連續稀釋分離法和平板劃線分離法卻簡便易行，中學完全具備開展條件。現將這兩種方法說明如下。

1.連續稀釋分離法

①取1克土樣，在火焰旁放入裝有99毫克無菌水的錐形瓶內，充分搖勻，將菌分散。

②用移液管吸取上述菌懸液1毫升，放入盛有9毫升無菌水的試管中，並進一步稀釋成1000倍，即10-3的菌懸液。按10倍稀釋法連續稀釋到10-8（每1次稀釋，都須更換移液管）。

③取3支1毫升移液管分別從10-8、10-7、10-6菌懸液中吸取1毫升菌懸液，分別注入編號10-8、10-7和10-6的培養皿內，同一稀釋液重復做3個培養皿。

④將溫度為45～50℃的營養瓊脂培養基（其成分和配製方法見本章第三節）倒入上述各培養皿內，輕輕旋轉使菌懸液充分混合均勻，凝固後，將培養皿倒扣放置在溫暖處（28℃左右），每天觀察培養基表面有無微生物菌落。

⑤經過一定時間培養後，培養基上長出菌落，根據菌落特徵，初步判斷屬於何種類型的微生物，並在顯微鏡下檢查，若菌體形態一致，則可認為是初步分離到純菌種。

⑥將分離培養所得的純菌種，從平板培養基轉移到試管斜面培養基上培養。

2.平板劃線分離法

①取1克土樣，在火焰旁加進裝有99毫升無菌水的錐形瓶中，堵塞棉塞，製成菌懸液待用。

②取一培養皿置於實驗台上，左手將培養皿打開稍許，向培養皿內注入熔化的營養固體培養基10～12毫升，輕輕轉動培養皿，使其中的培養基分布均勻，平放桌上，使其凝成平板。然後在皿底用蠟筆劃分A、B、C、D幾個區。應連續製作幾份平板培養基。

③將培養皿底部用姆指和無名指固定成傾斜狀態，在火焰旁將培養皿稍微打開。在此同時，用環狀接種針在火焰旁取少許菌懸液，迅速送入培養皿內，在平板培養基的一邊，作第1次平行劃線 6～7條，轉動培養皿約70°角，用燒過冷卻的接種針，通過第1次劃線部分作第2次平行劃線，然後再用同樣方法，作第3次平行劃線。劃線時，應使平板培養基表面向下，以免空氣中雜菌落入。接種針應與平板表面成30°角左右。不要使接種針碰到培養皿邊緣，也不要將培養基劃破。

④將劃線後的培養皿倒放在28℃左右的溫暖處進行培養，待長出菌落後，鑒定微生物類群，並根據鏡檢結果，判斷是否已分離到了純菌種。如果菌種很純，則可轉移到斜面培養基上進一步培養。

連續稀釋分離法和平板劃線法，均須在無菌室或接種箱內進行。

二、各類微生物的分離

1.從土壤中分離好氣性及兼性厭氣細菌

其分離方法見本節「分離的基本方法」

2.從土壤中分離放線菌

①製作高氏一號培養基，趁熱注入培養皿中，凝成平板，待用。

②稱取土壤10克，放入裝有100毫升無菌水的錐形瓶中，並加入10%酚10滴，以抑制細菌生長。振盪10分鍾，製成10-1菌懸液。按照連續稀釋分離法，進一步製成10-3菌懸液。

③用移液管吸取0.1毫升10-3菌懸液，注入平板培養基上，用無菌玻璃刮刀將菌懸液均勻塗抹在整個培養基上。然後將培養皿倒置於25～30℃溫箱中，培養7～10天，培養基上會出現微生物菌落。如果菌落的硬度較大，乾燥緻密，且與基質緊密結合，不易被針挑起，這就是放線菌菌落。

④挑取放線菌菌落，接種於斜面培養基上。

3.從土壤中分離黴菌

①製作豆芽汗葡萄糖培養基，並添加80%乳酸數滴，以抑制細菌生長。將培養皿中，凝成平板，待用。

②稱取10克土壤，按上述分離放線菌的方法製成10-4或10-5的菌懸液。

③取0.1毫升菌懸液注入培養皿內培養基上，用玻璃刮刀塗抹均勻。然後將培養皿倒置於25～30℃溫箱內培養3～4天。培養基上會出現微生物菌落。黴菌菌落常長成絨狀、棉絮狀或蜘蛛網狀，可根據這一特徵尋找黴菌菌落。

④挑取培養皿內的黴菌菌落接種於斜面培養基上。

4.從飲水中分離大腸桿菌

①製作伊紅美藍培養基，趁熱注入培養皿中，凝成平板，待用。

②用滅過菌的錐形瓶盛取河水或溝水，按1：10稀釋。

③取0.1毫升稀釋液接種於伊紅美藍培養基上。用平板劃線分離法進行分離。

④將劃線後的培養皿倒置37℃溫箱中培養18～24小時。培養基中會出現大腸桿菌菌落，菌落中心呈暗藍黑色，發金屬光澤。

⑤將菌落接種於斜面培養基上（由營養瓊脂培養基製成）。