㈠ 微生物染色的微生物染色的基本原理
微生物染色的基本原理,是藉助物理因素和化學因素的作用而進行的。物理因素如細胞及細胞物質對染料的毛細現象、滲透、吸附作用等。化學因素則是根據細胞物質和染料的不同性質而發生地各種化學反應。酸性物質對於鹼性染料較易吸附,且吸附作用穩固;同樣,鹼性物質對酸性染料較易於吸附。如酸性物質細胞核對於鹼性染料就有化學親和力,易於吸附。但是,要使酸性物質染上酸性材料,必須把它們的物理形式加以改變(如改變pH值),才利於吸附作用的發生。相反,鹼性物質(如細胞質)通常僅能染上酸性染料,若把它們變為適宜的物理形式,也同樣能與鹼性染料發生吸附作用。
微生物染色 - 染料的種類和選擇
染料分為天然染料和人工染料兩種。天然染料有胭脂蟲紅、地衣素、石蕊和蘇木素等,它們多從植物體中提取得到,其成分復雜,有些至今還未搞清楚。目前主要採用人工染料,也稱煤焦油染料,多從煤焦油中提取獲得,是苯的衍生物。多數染料為帶色的有機酸或鹼類,難溶於水,而易溶於有機溶劑中。為使它們易溶於水,通常製成鹽類。
微生物細胞是由蛋白質、核酸等兩性電解質以及其他化合物組成。所以,微生物細胞表現出兩性電解質的性質。兩性電解質兼有鹼性基和酸性基,在酸性溶液中離解出鹼性基呈鹼性帶正電,在鹼性溶液中離解出酸性基呈酸性帶負電。[1]染料可按其電離後染料離子所帶電荷的性質,分為酸性染料、鹼性染料、中性(復合)染料和單純染料四大類。
1、酸性染料
這類染料電離後染料離子帶負電,如伊紅、剛果紅、藻紅、苯胺黑、苦味酸和酸性復紅等,可與鹼性物質結合成鹽。當培養基因糖類分解產酸使pH值下降時,細菌所帶的正電荷增加,這時選擇酸性染料,易被染色。
2、鹼性染料
這類染料電離後染料離子帶正電,可與酸性物質結合成鹽。微生物實驗室一般常用的鹼性染料有美蘭、甲基紫、結晶紫、鹼性復紅、中性紅、孔雀綠和蕃紅等,在一般的情況下,細菌易被鹼性染料染色。
3、中性(復合)染料
酸性染料與鹼性染料的結合物叫做中性(復合)染料,如瑞脫氏(Wright)染料和基姆薩氏(Gimsa)染料等,後者常用於細胞核的染色。
4、單純染料
這類染料的化學親和力低,不能和被染的物質生成鹽,其染色能力視其是否溶於被染物而定,因為它們大多數都屬於偶氮化合物,不溶於水,但溶於脂肪溶劑中,如紫丹類(Sudanb)的染料。
㈡ 在顯微鏡下觀察標本都是染色的原理是什麼
染色是提高標本顯微觀察效果的關鍵措施::
由於活體的微生物個體的顏色在顯微鏡下差別很小,同時所觀察樣本中所含的微生物種類繁多,個體微小,形態千差萬別。每一種的組織結構、內含物質復雜多變,相互間交織貫穿在一起。如果不加染色顯然是很難在顯微鏡的視野中把它們相互區別出來。
正是因為這樣,由於標本內部的微生物種類、形態、組織結構、物質大分子的成分染色劑的化學反應(著色)各有不同。通過染色,它們之間就會形成各自不同的顏色梯度,從而產生不同的視覺對比度。這樣便有利於在顯微鏡下把它們的個體形態、著色差別、內含物、組織結構區分出來。所以大多數的標本都需要染色才能更好地在顯微鏡進行下觀察。
染色是製作永久標本的必須步驟和措施:
在製作永久保存標本時,必須對標本進行固定和染色,通過固定和染色才能把標本的外部形態和內部結構層次永久固定下來,使之得以長久保存不分解變質。
不是所有的觀察標本都需要染色:
染色的標本雖然能夠增加標本的色度和色差,但在固定、染色過程中由於化學作用的緣故,也會使一些內部物質的形態和分子結構發生變性而失真,從而影響觀察的真實性。再者,一些活體觀察是不需要或不能使用染色劑的。
㈢ 微生物在絕大情況下為什麼要染色後才能在顯微鏡下進行觀察
因為光線的問題,光線很穿液碧卜透微生物,因為他忒薄了,所以染色可以反射很多光,你就能看見了.,4,因為微生物在絕大數情況下反射的光線是人眼所看不到的,2,因為大部分微生物細胞中沒有色素沉積,多是無色透明的,所以要經過染色對不同結構進行觀察。不染色時,也可通過相差或DIC模式進行觀察。,2,微生物製片不一定都要做染色,通常染色都要殺死微生物慧前,並將其固定,而你要是做水片的話經常就不染色,尤其像是觀察酵母的時候就無需染色,只要把光調暗點就行,如3樓所說使用相差和濾光片鬧穗就更加不用染色了。,1,
㈣ 觀察細菌為什麼要染色
由於細菌個體極其微小,所以要觀察細菌的早歲世形態必須雀高有一架顯微鏡可以放大一千倍或倍數更高的顯微鏡。二細菌本身是無色半透明的,即使放在顯微鏡下,看起來還是比較模糊,不容易看清楚。細菌經過染陸肢色後他們的輪廓在顯微鏡下就比較清楚了。
㈤ 實驗:觀察植物細胞——操作過程為什麼要染色任何情況下都要染色嗎
操作過程依細胞不同而不同,比如觀察葉肉細胞就要切片因為葉肉太厚,觀察黑藻細胞中細胞質流動就不要因為黑藻葉是單層細胞。染色也是依你要看的東西而定,觀察葉肉細胞的時候就沒染色因為要觀察的葉綠體等本身就有顏色,觀察黑藻細胞質流動也沒有染色。事實上當觀察的僅僅是植物細胞本身的時候不需要染色,因為大多數情況下染色就意味著細胞死亡,像觀察細胞質流動就肯定不能染色呀~~初中植物細胞觀察我印象中都米有染色的。
染色的目的一般是為了觀察裡面的某些結構或化學成分。比如高中生物裡面花生細胞里脂肪的觀察,那是為了看脂肪,事實上不是看細胞。觀察染色體的時候染色是為了看染色體撒,但是那個時候細胞也已經掛了啊。。當然有些染色是不傷害細胞的,比如熒游標記,當然你不用想那個的咯~~
所以吧,一般觀察細胞活動的時候我們都不染色。為了方便觀察,一般用些有顏色的材料,比如質壁分離實驗里頭用紫色洋蔥表皮細胞哇,因為紫色易觀察嘛,葉綠體也是一個觀察時用來定位的東東~
㈥ 進行微生物製片時是否都需要進行染色為什麼
並不一定需要染色,有些時候必須進行不染色標本的觀察。
染色的目的是為了讓觀察更加清晰,讓需要觀察到的現象通過染色暴露出來,或者通過通過染色可以實現某些鑒別等功效。
在某些情況下,例如觀察細菌的運動,那麼就不能進行染色,否則一旦染色細菌死亡就觀察不到了,再比如觀察表皮標本中是否寄生有真菌,那麼此時觀察真菌的菌絲就是不染色進行的,菌絲染色不著色,染色後各種浮色反而妨害觀察。
㈦ 觀察微生物個體形態時為什麼要先進行製片染色
主要原因如下:
細菌較小,容易游動不易於觀察,故需放置在棉花或者殺死固定
一般細菌沒有顏色,顯微鏡下不容易觀察,不能看清楚內部的轎培檔閉亂詳細結構。所以一中李般需要殺死並染色觀察
㈧ 進行簡單染色的目的及原理是什麼
目的:破壞細胞膜的選擇透過性,再使用染色劑,將生物組織浸入染色劑內。
原理:使組織細胞的某一部分染上與其他部分不同的顏色或深度不同的顏色,產生不同的折射率,以便觀察。
最常用的是蘇木精和伊紅染色法;按照現代的染色理論的觀點,染料之所以能夠上染纖維,並在纖維織物上具有一定牢度,是因為染料分子與纖維分子之間存在著各種引力的緣故。
(8)生物為什麼要染色擴展閱讀:
伊紅為酸性染料,將細胞質和細胞間質,如細胞質中的RNA染成紅色。我們稱這種能被伊紅染紅的性質為嗜酸性。染色深淺可反映嗜鹼性和嗜酸性強弱;若對兩種染料缺乏親和力,則稱為嗜中性。
有些組織成分可以顯示與染料顏色不同的顏色,當用藍色鹼性染料甲苯胺進行染色時,組織中的糖胺多糖成分被染成紫紅色,此種顯色與染料顏色不同的現象成為異染性。
㈨ 觀察細菌時,為什麼一般都需要先將細菌進行染色
由於細菌細胞小且無色透明,直接用光學顯微鬧兆鏡觀察時,菌體和背景反差很小,難以看清細菌的形態,更不易識別某些細胞結運跡構,因此,一般都需要先將細菌進行染色,藉助於顏色的反襯作用,以提高觀察樣品不同部位的反差,能更清楚地進行觀察和研究。此外,某些染色法還可用於鑒別不同類群的細菌,故細菌的染色是工業微生物學實驗中重要的基本技術。旁彎並染色前必須先對塗在載玻片上的細菌樣品進行固定,固定的作用一是殺死細菌並使菌體粘附於玻片上,一是增加菌體對染料的親和力。一般常用酒精燈火焰加熱固定的方法,但應注意防止細胞膨脹和收縮,盡量保持細胞原形。