㈠ 聚氯乙烯固體葯用硬片怎麼做微生物
參照葯包材國家標准檢測檢驗方法,生物相溶性檢驗標准即可了.
㈡ 凍乾粉怎麼做微生物檢測
得看是水針劑使用的還是口服的,或者外用的。
如果水針劑需要進行無菌檢查,把樣品溶解後過濾,然後加入液體培養基,如果長菌即是不合格。
口服的溶劑後加入固體TSA和SDA分別培養。33℃細菌25℃黴菌。控制菌做大腸桿菌和沙門。
如果外用,同微生物限度測試。
㈢ 如何培養微生物
液體接種
從中海生物技術固體培養基中將菌洗下,倒入液體培養基中,或者從液體培養物中,用移液管將菌液接至液體培養基中,或從液體培養物中將菌液移至固體培養基中,都可稱為液體接種
穿刺接種
在保藏厭氧菌種或研究微生物的動力時常採用此法。做穿刺接種時,用的接種工具是接種針。用的培養基一般是半固體培養基。它的做法是:用接種針蘸取少量的菌種,沿半固體培養基中心向管底作直線穿刺,如某細菌具有鞭毛而能運動,則在穿刺線周圍能夠生長
活體接種
活體接種是專門用於培養病毒或其它病原微生物的一種方法,因為病毒必須接種於活的生物體內才能生長繁殖。所用的活體可以是整個動物;也可以是某個離體活組織,例如猴腎等;也可以是發育的雞胚。接種的方式是注射,也可以是拌料喂養
澆混接種
該法是將待接的微生物先放入中海生物的培養皿中,然後再倒入冷卻至45°C左右的固體培養基,迅速輕輕搖勻,這樣菌液就達到稀釋的目的。待平板凝固之後,置合適溫度下培養,就可長出單個的微生物菌落
劃線接種
這是最常用的接種方法。即在固體培養基表面作來回直線形的移動,就可達到接種的作用。常用的接種工具有接種環,接種針等。在斜面接種和平板劃線中就常用此法
塗布接種
與澆混接種略有不同,就是先倒好平板,讓其凝固,然後再將菌液倒入平板上面,迅速用塗布棒在表面作來回左右的塗布,讓菌液均勻分布,就可長出單個的微生物的菌落
㈣ 固體分離法適應於任何微生物
最常用的兩種方法:
1.平板劃線分離法
把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環在平板培養基,通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經培養後生長繁殖成單菌落,通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種
優點:可以觀察菌落特雀友征,對混合菌進行分離。
缺點:不能計數,一般用於從菌種的分離純化。
例如:篩選大腸桿菌菌種。
2.稀釋塗布平板法
將菌液進行一系列的梯度稀釋,然後將不同稀釋度的菌液分別塗布到瓊脂固體培養基的表面,進行培養。在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養基表面形成單個的菌落。
優點:槐飢可以計數,可以觀察菌落特徵。
缺點:吸收量較少,較麻煩,平板不幹燥效果不好,容易蔓延。頃明槐一般用於平板培養基的回收率計數。
例如:測定純凈水中大腸桿菌的含量
㈤ 在做微生物檢測實驗的時候,固體試樣該如何處理
我只做過土壤樣品,一般是用取一點放在生理鹽水中,vortex 5分鍾,然後做梯度稀釋塗布。
㈥ 進行微生物富集培養為什麼要用液體培養基固體培養基不行嗎
你好!
用於一般培養可以用固體培養基,但是時間比較長,我們做微生物實驗用固體培養基一般都要隔幾天才能有效果。
如果是富集培養,需要培養時間短,容易收集的,所以用液體培養基比較快,也容易分離。
如有疑問,請追問。
㈦ 請教:固體培養基是如何分離和計數微生物的拜託了各位 謝謝
方法步驟: ①菌懸液的制備:如果用於分離的樣品是水樣液體則不需此沖畢過程,即可直接作為菌懸液。固體樣品如土壤、泥等,則需制備菌懸液。具體做法是:稱取樣品1g,放入盛有99ml無菌水的三角瓶中,震盪5分鍾充分搖均,使細菌分散。這樣將樣品稀釋成為10-2菌懸液。 ②稀釋:接10倍稀釋法把制備好的10-2菌懸液稀釋到10-8(液體樣品稀釋到10-6)。 取6支裝有9ml無菌水的試管,編好號從10-3~10-8(液體樣品從10-1~10-6)。用無菌移液管從10-2菌懸液中吸取1ml,放入編號10-3的試管中(無菌操作),用手輕壓移液管上的橡皮頭吸吹三次(吸入時一次比一次液面高),目的是將移液管中的菌懸液全部洗下並混勻,製成10-3菌液。用同一支移液管吸1ml10-3的菌液,放入編號10-4試管中混勻,重復以上操作製成10-4菌液。依此類推,直到第六管即編號10-8的試管,製成不同稀釋度的菌液。 ③接種:難備好經滅菌的、溫度為45~50℃的牛肉膏蛋白腖培養基140ml;經滅菌的培養皿(直徑9cm)九套,分別標上10-6,10-7,10-8(每個稀釋度三套),即做三個重復。 用經滅菌的移液管吸取1ml菌液,倒入相應編號的培養皿中,然後即可倒入培養基15ml(溫度不能太高或太低,太高易把菌燙死,太低則易凝固)。倒入後立即輕輕搖動培養皿,使培養基與菌液充分混勻,立即靜止,水平放置待其冷卻。凝固後即製成平板。注意在培養基冷卻過程中不能搖動培養皿,否則培養基表面會凹凸不平。上述過程都進行無菌操作。 ④培養觀察:將製作的平板放入30~37℃的恆溫箱中培養1~2天。通過培養,即可見平板上長出各種不同的菌落。選擇所需要的單個菌落,接種到斜面培養基上進一步培養後,進行鏡檢,如無雜菌,即成為純種;如有雜菌,可再稀釋分離,直到純種。 稀釋分離方法總結。 (2)平板畫線法:分離純化菌種最常用的方法。主要依據是,通過用接種環連續畫線的移動過程中,使混雜的細菌分散開,經過培養,分散的單個細菌繁殖成單個菌落。 製作平板方法同稀釋法,但是必須提前倒好,充分冷卻後方可使用;並且表面必需光滑,厚薄均勻;培養基用量要比稀釋法厚一些,每皿約20ml左右。接種使用接種環沾取待分離的混雜菌液(或固體培養基上的菌體少許),然後在平板表面一側作第一次平行畫線(無菌操作),畫線占培養皿總面積的1/3即可。第一次畫線完成後,左手把平板轉動70°角。第二次畫線是用接種環劃過第一次畫線部分,即是把第一次劃在平板上的菌液作為菌源,畫線方法與面積同第一次。然後再轉動70°角,灼燒接種環後做第三次畫線。畫線時注意不要把培養基劃破,最後一次平行畫線不要與第一次畫線相接,否則達不到分離的目的。 幾種常用畫線方式: 畫線完畢後,將平板倒置於恆溫箱中培養,待長出菌落後進行觀察,方法同稀釋法。 2.細菌的計數:除了對細菌進行觀察外,有時還要調查各種樣品中的細菌數量。如對水污染程度的調查、水質標準的調查及食品衛生的檢查等。細菌的計數方法一般有顯微計數法和菌落平板計數法。 (1)顯微計數法:利用血球計數器在顯微鏡下直接計數,是常用的計數方法。血球計數器是一塊特製的載玻片,載玻片上有四條槽而構裂判皮成三個平台。中間的平台較寬,而且被一短橫槽隔成兩半,兩個半邊上各刻有一個方格網。每個方格網分成9個大格,中央的大格是計數室。 計數室的刻度有兩種:一種是由25大格組成,每個大格又分成16個小格,25×16=400小格;另一種是由16大格組成,每個大格又分成25個小格,16×25=400小格。兩種的總體積均為0.1mm3。計數器的構造如圖4-5和圖4-6所示。 計數方法:25×16的計數器,顯微鏡下數左上、右上、左下、右下和中央共五個大格,即5×16=80小方格的細菌數。若80小肆差格的細菌數為A,則每毫升菌液的含菌量=A×400/80×10×1000=50000A;16×25的計數器,顯微鏡下數左上、右上、左下、右下共四個大格,即4×25=100個小格的細菌數。若100小格的總菌數為A,則每毫升菌液的含菌量=A×400/100×10×1000=40000A。 (2)平板菌落計數法:因為每個活的細菌在平板上繁殖都能形成一個菌落,即平板上的菌落數等於接入平板的活菌數。如果待測的樣品細菌稀少(如自來水),則可以直接接種到培養基,製成平板。但許多樣品細菌的密度都很大,為使計數准確,首先應將待測樣品稀釋成不同稀釋度的菌液。再取一定稀釋度、一定量的菌液,接種到培養皿中,製成平板。經培養後,統計菌落數目,即可計算出樣品中的含菌數。具體操作同稀釋分離方法。 計數時,按下列公式計算: 每毫升菌液的活菌數=同一稀釋度3次重復的菌落平均數×稀釋倍數×5。
滿意請採納
㈧ 固定固體培養基方法是什麼
在野體培養基中加入一定量凝固劑,使其成為固體狀態即為固體兄蘆培養基。理想的凝固劑應具備以下條件:①不被所春敬培養的微生物分解利用;②在微生物生長的溫度范圍內保持固體狀態,在培養嗜熱細菌時,由於高溫容易引起培養基液化,通常在培養基中適當增加凝固劑來解決這一問題;③凝固劑凝固點溫度不能太低,否則扒塵慎將不利於微生物的生長;④凝固劑對所培養的微生物無毒害作用;⑤凝固劑在滅菌過程中不會被破壞;⑥透明度好,粘著力強;⑦配製方便且價格低廉。常用的凝固劑有瓊脂(agar)、明膠(gdatin)和磚膠(silica gel)。
1.取一個1000ml的燒杯,放入500ml的蒸餾水,並將上述葯品(除了瓊脂)全部溶解在水中。
2.調節PH值。用10%的氫氧化鈉溶液將PH值調到7.2左右,並定容到1000ml。
3.將這些液體分裝在10個錐形瓶中,每瓶裝100ml
4.其中在五個錐形瓶中放入剪碎的瓊脂,每個錐形瓶2.4g,並將十個錐形瓶都加上棉塞,包上報紙。
5.將包紮好的錐形瓶放入滅菌鍋中滅菌十分鍾。
6.到時間後,將錐形瓶取出,待其冷卻後得到的即為固體培養基。
㈨ 利用固體培養基獲得純培養的方法
利用固體培養基,讓微生物在培養基的表面生長,就可以獲得微生物的純培養,但是這需要進行一個操作,就是劃線空鍵分離。通過使用接種環劃線分離,劃線過程中,接種環上洞虧兆的細菌不斷減少,逐漸就可以分離出單個菌落,當然這是需要一個經驗和技巧的,經驗越豐富的人,通過劃線分離,獲得單納租個菌落的效果就越好。
㈩ 檢查固體食物中的微生物含量
這個要分好幾種情況的呢。因為固體食品還分溶於水、不溶於水等等呢。另外,你所說的固體還包括包裝嗎?
我暫且羅列一下吧。
一、固體、半固體或黏稠性供試品:取供試品10g,加PH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液至100ml,用勻漿儀或其他適宜的方法,混勻,作為1:10的供試液。必要時加適量的無菌聚山梨酯80,並置水浴中適當加溫使供試品分散均勻。
二、非水溶性供試品
方法1 取供試品5g(5ml),加入含溶化的(溫度不超過45℃)5g司盤80、3g單硬脂酸甘油酯、10g聚山梨酯80無菌混合物的燒杯中,用無菌玻棒攪拌成團後,慢慢加入45℃左右的PH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液至100ml,邊加邊攪拌,使供試品充分乳化,作為1:20的供試液。
方法2 取供試品10g,加至含20ml無菌十四烷酸異丙酯(製法見附錄XIII B無菌檢查法中供試品的無菌檢查項下)和無菌玻璃珠的適宜容器中 ,必要時可增加十四烷酸異丙酯的用量,充分振搖,使供試品溶解。然後加入45℃的PH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液100ml,振搖5~10分鍾,萃取,靜置使油水明顯分層,取其水層作為1:10的供試液。