保存的微生物怎麼活化

⑴ 甘油菌菌種活化步驟，甘油菌怎麼保存

二、甘油菌怎麼保存

1、如果是20%甘油保存菌種（甘油：菌液=20：80），一般放置在零下70℃的環境下保掘睜藏。

2、如果是一般細菌的菌種，在純化後，接種在普通肉湯管中，然後經過4-6小時增菌後，放入適量甘油-生理鹽水保存液，在零下20℃的環境下進行保藏。如果是鏈球菌屬和奈瑟氏菌屬的菌種，在純化後，接種在血清肉湯管中，在5-10%CO2中經過8-10小時增菌後，加入適量甘油-生理鹽水保存液，放置在零下80℃的環境下進行保藏。如果是真菌菌種，在純化後，直接取菌洗入肉湯，加入甘油-生理鹽水保存液，放置在零下20℃的環境下進行保藏。

⑵ 芽孢桿菌怎麼活化

芽孢桿鍵蠢埋菌的活化方法是：
1、菌種活化。按照菌：紅糖和水按0.5：1、5：25左右的比例浸泡兩個小時以上，檔州浸泡時用小的氣泵曝氣更佳。
2、菌種耗氧。枯草芽孢繁殖需要大量氧氣，使用時間一般是晴天上午9到11點，保證氧氣充足。
3、溫度適宜。使用溫度是25℃以上為宜，水溫低，菌種生長緩慢，無法迅速形成優勢種，效果不理想。
芽孢桿菌屬細菌較大（4~10μm），革蘭氏陽性、是嚴格需氧或兼性厭氧的有莢膜的桿菌。該屬細菌的重要特性是能夠產生對不利條件具有特殊抵抗力的芽孢。芽孢桿菌屬可分為以下亞群：多黏芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌（包括蠟樣芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌）、稿螞短芽孢桿菌和炭疽芽孢桿菌。

⑶ 菌種保藏及活化的問題

一、安瓿瓶裝微生物菌種開封1-1、用浸過70％酒精的脫脂棉擦凈安瓿瓶。1-2、用火焰將安瓿瓶口加熱滅菌。 1-3、用鑷子將鋁封口撕開。二、菌株恢復培養2-1、用無菌吸管，吸取0.3-0.4ml適宜的液體培養基，滴入安瓿管內，輕輕振盪，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。2-2、取約0.2ml菌體懸浮液，移植於指定的瓊脂斜面培養基上，剩餘的菌液，注入指定的液體培養基內（3-4ml），然後在建議的溫度下培養。三、注意事項3-1、菌種活化前，請將安瓿瓶保存在5-10℃的環境下。3-2、厭氧菌的培養，如無特別說明，自開封至接種完成，均需以無氧氣體充填，以保持厭氧狀態。3-3、某些菌種經過冷凍乾燥保存後，延遲期較長，需連續兩次繼代培養才能正常生長。四、製作ｅｍ菌液4-1、菌種活化:用ｅｍ菌種10克、紅糖0.1公斤（紅糖先用熱水溶化），加入1公斤的水。註：（先把水加熱到100°c後加入紅塘或白糖，而後繼續加熱5分鍾。冷卻到40°c時加入ｅｍ菌種），密閉發酵(35°c-40°c溫度)下活化3天，打開容器口聞到有酸甜味即活化成功。可以作為液體菌種使用。4-2、製作原液：將活化好的液體菌種加入二級發酵罐。菌種——二級發酵罐(密閉) (加水比例:按1:10的比例加入) 二級發酵液:（10%的無菌糖水！ 0.1%瓊脂粉！溫度35-40度！發酵5-7天！）成品發酵液標准（氣味：酸甜！ ph值：4.0-5.0！ 活菌含量：100億/ml ！）

⑷ 怎樣活化-80或-20冷凍保藏的菌種（細菌、真菌），活化溫度呢

我們也都是室溫自然融化。其實這樣看具體的菌體種類的。
不過既然可以超低溫保存的，說明耐凍性很好，凍融過程中的損失不會大到沒有菌體存活。
有些菌種反復凍融幾次都沒關系呢。
至於說38甚至40，應該是指大腸桿菌之類的耐溫菌種吧。
30℃一般都沒事。

⑸ 一隻低溫斜面保存的細菌菌種怎麼活化呀

將保存菌種在適宜生長溫度下恢復一段時間。然後挑取尖端菌絲體轉接在新的斜面培養基上，既可以活化復壯。

⑹ 怎樣讓植物乳酸菌活化，需要哪些試劑以及具體的操作步驟，微生物實驗

培養基的配製與滅菌

1目的
1.1了解並掌握培養基的配製、分裝方法
1.2掌握各種實驗室滅菌方法及技術。
2原理
培養基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養料。由於微生物具有不同的營養類型，對營養物質的要求也各不相同，加之實驗和研究的目的不同，所以培養基的種類很多，使用的原料也各有差異，但從營養角度分析，培養基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無機鹽、生長素以及水分等。另外，培養基還應具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。
瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質，是應用最廣的凝固劑。加瓊脂製成的培養基在98～100℃下融化，於45℃以下凝固。但多次反復融化，其凝固性降低。
任何一種培養基一經製成就應及時徹底滅菌，以備純培養用。一般培養基的滅菌採用高壓蒸汽滅菌。
3材料
3.1器皿及材料
天平、稱量紙、牛角匙、精密pH試紙、量筒、刻度搪瓷杯、試管、三角瓶、漏斗、分裝架、移液管及移液管筒、培養皿及培養皿盒、玻璃棒、燒杯、試管架、鐵絲筐、剪刀、酒精燈、棉花、線繩、牛皮紙或報紙、紗布、乳膠管、電爐、滅菌鍋、乾燥箱。
3.2葯品試劑
蛋白腖、牛肉膏、NaCl、K2HPO4、瓊脂、NaNO3、KCl、MgSO4、FeSO4、蔗糖、麥芽糖、木糖、葡萄糖、半乳糖、乳糖、土豆汁、豆芽計、磷酸銨、5%NaOH溶液、5%HCl溶液。
4流程
稱葯品→溶解→調pH值→融化瓊脂→過濾分裝→包紮標記→滅菌→擺斜面或倒平板。
5步驟
5.1培養基的制備
5.1.1稱量葯品
根據培養基配方依次准確稱取各種葯品，放入適當大小的燒杯中，瓊脂不要加入。蛋白腖極易吸潮，故稱量時要迅速。
5.1.2溶解
用量筒取一定量(約占總量的1/2)蒸餾水倒入燒杯中，在放有石棉網的電爐上小火加熱，並用玻棒攪拌，以防液體溢出。待各種葯品完全溶解後，停止加熱，補足水分。如果配方中有澱粉，則先將澱粉用少量冷水調成糊狀，並在火上加熱攪拌，然後加足水分及其它原料，待完全溶化後，補足水分。
5.1.3調節pH
根據培養基對pH的要求，用5%NaOH或5%HC1溶液調至所需pH。測定pH可用pH試紙或酸度計等。
5.1.4溶化瓊脂
固體或半固體培養基須加入一定量瓊脂。瓊脂加入後，置電爐上一面攪拌一面加熱，直至瓊脂完全融化後才能停止攪拌，並補足水分(水需預熱)。注意控制火力不要使培養基溢出或燒焦。
5.1.5過濾分裝
先將過濾裝置安裝好（圖3-1）。如果是液體培養基，玻璃漏斗中放一層濾紙，如果是固體或半固體培養基，則需在漏斗中放多層紗布，或兩層紗布夾一層薄薄的脫脂棉趁熱進行過濾。過濾後立即進行分裝。分裝時注意不要使培養基沾染在管口或瓶口，以免浸濕棉塞， 引起污染。液體分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。固體分裝裝量為管高的1/5，半固體分裝試管一般以試管高度的1/3為宜；分裝三角瓶，其裝量以不超過三角瓶容積的一半為宜。
5.1.6包紮標記
培養基分裝後加好棉塞或試管帽，再包上一層防潮紙，用棉繩系好。在包裝紙上標明培養基名稱，制備組別和姓名、日期等。
5.1.7滅菌
上述培養基應按培養基配方中規定的條件及時進行滅菌。普通培養基為121℃20min，以保證滅菌效果和不損傷培養基的有效成份。培養基經滅菌後，如需要作斜面固體培養基，則滅菌後立即擺放成斜面(圖3-2)，斜面長度一般以不超過試管長度的1/2為宜；半固體培養基滅菌後，垂直冷凝成半固體深層瓊脂。
5.1.8倒平板
將需倒平板的培養基，於水浴鍋中冷卻到45～50℃,立刻倒平板。
5.2滅菌方法
滅菌是指殺死或消滅一定環境中的所有微生物，滅菌的方法分物理和化學滅菌法兩大類。本實驗主要介紹物理方法的一種，即加熱滅菌。
加熱滅菌包括濕熱和乾熱滅菌兩種。通過加熱使菌體內蛋白質凝固變性，從而達到殺菌目的。蛋白質的凝固變性與其自身含水量有關，含水量越高，其凝固所需要的溫度越低。在同一溫度下，濕熱的殺菌效力比乾熱大，因為在濕熱情況下，菌體吸收水分，使蛋白質易於凝固；同時濕熱的穿透力強，可增加滅菌效力。
5.2.1.高壓蒸汽滅菌法
高壓蒸汽滅菌用途廣，效率高，是微生物學實驗中最常用的滅菌方法。這種滅菌方法是基於水的沸點隨著蒸汽壓力的升高而升高的原理設計的。當蒸汽壓力達到1.05kg/cm2時，水蒸氣的溫度升高到121℃，經15～30min，可全部殺死鍋內物品上的各種微生物和它們的孢子或芽孢。一般培養基、玻璃器皿以及傳染性標本和工作服等都可應用此法滅菌（圖3-4）。
5.2.1.1操作方法和注意事項如下
加水
打開滅菌鍋蓋，向鍋內加水到水位線。立式消毒鍋最好用已煮開過的水，以便減少水垢在鍋內的積存。注意水要加夠，防止滅菌過程中干鍋。
裝料、加蓋
滅菌材料放好後，關閉滅菌器蓋，採用對角式均勻擰緊鍋蓋上的螺旋，使蒸汽鍋密閉，勿使漏氣。
排氣

打開排氣口(也叫放氣閥)。用電爐加熱，待水煮沸後，水蒸氣和空氣一起從排氣孔排出，當有大量蒸汽排出時，維持5min，使鍋內冷空氣完全排凈。
升壓、保壓和降壓
當鍋內冷空氣排凈時，即可關閉排氣閥，壓力開始上升。當壓力上升至所需壓力時，控制電壓以維持恆溫，並開始計算滅菌時間，待時間達到要求（一般培養基和器皿滅菌控制在121℃，20min）後，停止加熱，待壓力降至接近「0」時，打開放氣閥。注意不能過早過急地排氣，否則會由於瓶內壓力下降的速度比鍋內慢而造成瓶內液體沖出容器之外。
滅菌後的培養基空白培養
滅菌後的培養基放於37℃培養箱中培養，經24h培養無菌生長，可保存備用；斜面培養基取出後，立即擺成斜面後空白培養；半固體的培養基垂直放置凝成半固體深層瓊脂後，空白培養。
5.2.2乾熱滅菌法
通過使用乾熱空氣殺滅微生物的方法叫乾熱滅菌。一般是把待滅菌的物品包裝就緒後，放入電烘箱中烘烤，即加熱至160～170℃維持1～2h。
乾熱滅菌法常用於空玻璃器皿、金屬器具的滅菌。凡帶有膠皮的物品，液體及固體培養基等都不能用此法滅菌。
5.2.2.1滅菌前的准備
玻璃器皿等在滅菌前必須經正確包裹和加塞，以保證玻璃器皿於滅菌後不被外界雜菌所污染。常用玻璃器皿的包紮和加塞方法如下：平皿用紙包紮或裝在金屬平皿筒內；三角瓶在棉塞與瓶口外再包以厚紙，用棉繩以活結扎緊，以防滅菌後瓶口被外部雜菌所污染；吸管以拉直的曲別針一端放在棉花的中心，輕輕捅入管口，松緊必須適中，管口外露的棉花纖維統一通過火焰燒去，滅菌時將吸管裝入金屬管筒內進行滅菌，也可用紙條斜著從吸管尖端包起，逐步向上卷，頭端的紙卷捏扁並擰幾下，再將包好的吸管集中滅菌。
5.2.2.2乾燥箱滅菌
將包紮好的物品放入乾燥烘箱內，注意不要擺放太密，以免妨礙空氣流通；不得使器皿與烘箱的內層底板直接接觸。將烘箱的溫度升至160～170℃並恆溫1～2h，注意勿使溫度過高，超過170℃，器皿外包裹的紙張、棉花會被烤焦燃燒。如果是為了烤乾玻璃器皿，溫度為120℃持續30分鍾即可。溫度降至60～70℃時方可打開箱門，取出物品，否則玻璃器皿會因驟冷而爆裂。
用此法滅菌時，絕不能用油、蠟紙包紮物品。
5.2.2.3火焰滅菌
直接用火焰灼燒滅菌，迅速徹底。對於接種環，接種針或其它金屬用具，可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱進行滅菌。此外，在接種過程中，試管或三角瓶口，也採用通過火焰而達到滅菌的目的。
6結果
6.1記錄各種不同物品所用的滅菌方法及滅菌條件（溫度、壓力等）。
6.2試述高壓蒸汽滅菌的過程及注意事項。
7思考
7.1制備培養基的一般程序是什麼？
7.2做過本次實驗後，你認為在制備培養基時要注意些什麼問題？
7.3滅菌在微生物學實驗操作中有何重要意義？
4試述高壓蒸汽滅菌的操作方法和原理。
5高壓蒸汽滅菌時應注意哪些事項？

⑺ 細菌低溫保存後，怎麼復甦

將保存在砂土管、冷凍乾燥管中處休眠狀態的生產菌種接入試管斜面活化後，再碰冊州經搖瓶及種子罐逐級擴大培養而獲得一姿仿定數量和質笑蔽量純種

⑻ 如何對微生物菌種進行活化

方法如下：

1 定期移植法的菌種復甦較簡單，直接盯空帆轉接即可；

2 液體石蠟法保存的菌種在復甦時，挑取少量菌體轉接在虧租適宜的新鮮培養基上，生長繁殖後，再重新轉接一次；

3 沙土管法保存菌種在復甦時，在無菌條件下打開沙土管，取部分沙土粒於適宜的斜面培養基上，長出菌落後再轉接一次。或取沙土粒於適宜的液體培養基中，增殖培養後再轉接斜面；

4 真空冷凍乾燥法保存菌種在復甦時先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部，將安瓿管頂部燒熱， 用無菌棉簽沾冷水，在頂部擦一圈，頂部出現裂紋，用挫刀或鑷子頸部輕叩一下，敲下已開裂的安瓿管的頂端，用無菌水或培養液溶解菌塊，使用無菌吸管移入新鮮培養基上，進行適溫培養；

5 -80℃ 冰箱凍結法保存菌種復甦時，從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置38℃-40℃水浴中快速復甦並適當快速搖動。直到內部結冰全部溶解為止，約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內容物移至適宜的培養基上進行培養

6 液氮超低溫凍結法保存菌種復甦與-80℃ 冰箱凍結法保存菌種復甦相似，從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置在38℃-40℃水浴中快速復甦並適當搖動。直到內部結冰全部溶解為止，一般約需50秒-100秒凱雹。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內容物移至適宜的培養基上進行培養。

⑼ 細菌活化

要先進行活化......

先在最適培養條件下培養一段時間,這個就是活化,然後再接種.至於活化需要的時間嘛,跟你的菌種有關系.....

你不會保藏的時候用的就是培養液吧????如果是的話,那估計就不用活化了

你可以直接作一個一級接種,那樣就像當於活化了....然後就二級接種.就可以用了..

有沒雜菌就不好說了....可能是雜菌...操作時一不小心就很有可能感染雜菌..

⑽ 用甘油凍存的細菌如何進行復甦

復甦：

1、無菌操作台滅菌30min後，75%酒精棉球消毒包括手在內的所有物品。

2、用滅菌接種環扣取試管中的冷凍菌塊放入3mlLB液體培養基中，37℃150rpm過夜培養。

3、將過夜菌液重新按照步驟2活化一次。

4、活化2次後的菌液即可用於實驗。

目的

微生物在使用和傳代過程中容易發生污染、變異甚至死亡，因而常常造成菌種的衰退，並有可能使優良菌種丟失。菌種保藏的重要意義就在於盡可能保持其原有性狀和活力的穩定，確保菌種不死亡、不變異、不被污染，保持菌株優良性狀不退化，保持優良菌株存活，以達到便於研究、交換和使用等諸方面的需要。