Ⅰ 進行微生物的危險度評估的最主要考慮因素是
進行微生物的危險度評估的最主要考慮因素是:微生物危險度等級。
風險控制措施
1.菌種保存不當:菌種保存應設置生物安全員專人負責保管,保存菌種的低溫冰箱設置雙人雙鎖。每次拿放菌種需要做相應的登記,由實驗室人員和生物安全員雙方簽字確認。
2.菌株傳代:菌株傳代應有完善的作業指導書和菌株傳代拍告記錄,標准儲備菌株應在規定的時間內轉種傳代,並做相應的確認試驗,記錄相關原始數據存檔保存。
4.廢棄物處理不當:對於實驗室用過的帶菌的、污染過的培養基、李指試劑條襲擾明、槍頭、接種環、玻璃器皿等廢棄物要採用相應的消毒劑滅菌或者121℃,30min以上高溫高壓滅菌,廢棄物的處理應有相應的制度和廢棄物處置記錄。
5.參與微生物檢測的人員應具備微生物相關專業知識,學歷、工作經驗應符合檢驗檢測要求,實驗室人員應熟悉生物檢測安全操作知識和消毒滅菌知識。
Ⅱ 食品微生物檢驗如何進行質量控制
食品微生物檢驗如何進行質量控制
在食品微生物檢驗工作中,檢驗流程包括檢驗思路的確定、標准檢驗方法的使用、培養基的配製、樣品前處理、檢驗結果的判斷、原始記錄、報告等許多環節,其中手工操作也較多,影響結果准確性的因素也較多,實驗室必須通過行之有效的質量控制措施,持續地加以監督和控制,並結合必要的室間質量控制手段,才能確保檢驗結果的准確性。下面是我為大家帶來的關於食品微生物檢驗如何進行質量控制的知識,歡迎閱讀。
主要可從下幾方面進行質量控制:
1檢驗人員方面:實驗室的檢驗水平與檢驗人員素質密切相關,業務技術水平和工作責任心是檢驗人員素質的核心所在。這就要求檢驗人員必須具備扎實的理論基礎知識和熟練的操作技能,要求檢驗人員具備高度的工作責任心和工作熱情。實驗室可通過培訓和繼續教育、實驗室間的交流,必要時進行考核等手段,來不斷提高檢驗人員的業務水平,在實驗室質量體系文件中強調檢驗人員工作責任心的`重要性,通過制定的獎懲制度來規范檢驗人員的工作行為。
2儀器設備方面:實驗室所有儀器均應在檢定有效期內使用,必要時還要進行期間核查。在此基礎上可通過一些監控手段來確保儀器設備保持最佳性能,如高壓蒸汽滅菌器,可用生物指示劑嗜熱脂肪桿菌ATCC7953(2)或化學指示劑如變色膠帶監視滅菌效果;需要控制溫度的儀器,應在工作前和工作後做好溫度的記錄,不符合應及時調整;生物安全櫃要定期由專業人員更換濾網,對紫外線消毒設備必須三個月檢查一次其消毒性能等等。
3檢驗耗材方面:如培養基:目前大多數實驗室都是使用市售乾粉培養基,這些來自著名公司的培養基,質量比較穩定,但在購買和使用前首先要對外觀色澤和均一性、pH值、水分含量、批次或批號、瓊脂凝膠的硬度、選擇性等進行初次評估。用質控菌株進行預測,確保培養基、試劑達到預期效果。
在使用市售培養基時應注意以下幾方面:
(1)選用國內外知名品牌和信譽度好的產品;
(2)要根據培養基儲存條件儲存,盡量少包裝;
(3)要根據日常工作需要作為計劃,控制在有效期內用完;
(4)購回試劑應對品名、生產日期、保質期做好記錄,檢查密封性、標簽牢固性;(5)在配置時應仔細檢查原料,如發現結塊、變色嚴禁使用;
(6)所有培養基要有配製稱量時要有記錄,把剩餘培養基密閉好;
(7)嚴禁使用過期的、污染的、失了水的培養基。
標准菌株:必須做好明確的作業指導書,實施標准菌株的規范管理,做好菌株的傳代驗證,這樣才能確保標准菌株在實驗中應起的作用等等。
4樣品採集方面:因樣品採集並非實驗人員進行,樣本採集是否合格規范要求,是實驗成敗的又一關鍵因素。因此,從事食品微生物檢驗的工作人員,要注意加強與采樣人員的溝通,向樣品採集者講解採集樣本的方法、要求,指導他們規范採集樣本,如無菌要求、隨機方法、種類、數量、採集部分、冷藏或保溫、運送方式、安全要求等。實驗室收到樣本後,應仔細核對檢驗內容與送檢單,對不符合檢驗要求的樣本,註明原因退回。
最後,要求每個食品微生物檢驗工作者都應提高對微生物檢驗質量控制工作的認識,在日常工作中要特別重視實驗室質量控制工作,以確保檢驗結果的准確性和權威性。要求檢驗人員應加強對《質量手冊》和《程序文件》學習,發現問題,及時記錄,作為管理體系文件的修訂、補充、完善的依據。要求檢驗人員對實驗的整個過程應在工作當時予以記錄,不允許事後補記或追記。同時,管理者應防止片面重視專業理論知識和操作技能培訓,輕視思想道德教育和法制觀念教育,要努力打造一支思想過硬、品德高尚、專業扎實、技術精湛的食品微生物檢驗隊伍。
;Ⅲ 微生物檢測手段及注意事項
1. 微生物計量法
1.1 體積測量法
又稱測菌絲濃度法,通過測定一定體積培養液中所含菌絲的量來反映微生物的生長狀況。方法是,取一定量的待測培養液(如10 mL)放在有刻度的離心管中,設定一定的離心時間(如5 min)和轉速(如5000 rpm),離心後,倒出上清夜,測出上清夜體積為v,則菌絲濃度為(10-v)/10。菌絲濃度測定法是大規模工業發酵生產上微生物生長的一個重要監測指標。這種方法比較粗放,簡便,快速,但需要設定一致的處理條件,否則偏差很大,由於離心沉澱物中夾雜有一些固體營養物,結果會有一定偏差。
1.2稱 乾重法
可用離心或過濾法測定。一般乾重為濕重的10~20%。在離心法中,將一定體積待測培養液倒入離心管中,設定一定的離心時間和轉速,進行離心,並用清水離心洗滌1~5次,進行乾燥。乾燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘乾,或採用紅外線烘乾,也可在80 ℃或40 ℃下真空乾燥,乾燥後稱重。如用過濾法,絲狀真菌可用濾紙過濾,細菌可用醋酸纖維膜等濾膜過濾,過濾後用少量水洗滌,在40 ℃下進行真空乾燥。稱乾重發法較為煩瑣,通常獲取的微生物產品為菌體時,常採用這種方法,如活性乾酵母(Activity Dry Yeast, ADY),一些以微生物菌體為活性物質的飼料和肥料。
1.3 比濁法
微生物的生長引起培養物混濁度的增高。通過紫外分光光度計測定一定波長下的吸光值,判斷微生物的生長狀況。對某一培養物內的菌體生長作定時跟蹤時,可採用一種特製的有側臂的三角燒瓶。將側臂插入光電比色計的比色座孔中,即可隨時測定其生長情況,而不必取菌液。該法主要用於發酵工業菌體生長監測。如使用UNICO公司的紫外-可見分光光度計,在波長600 nm處用比色管定時測定發酵液的吸光光度值OD600,以此監控E.coli的生長及誘導時間。
1.4 菌絲長度測量法
對於絲狀真菌和一些放線菌,可以在培養基上測定一定時間內菌絲生長的長度,或是利用一隻一端開口並帶有刻度的細玻璃管,到入合適的培養基,卧放,在開口的一端接種微生物,一段時間後記錄其菌絲生長長度,藉此衡量絲狀微生物的生長。
2. 微生物計數法
2.1 血球計數板法
血球計數板是一種有特別結構刻度和厚度的厚玻璃片,玻片上有四條溝和兩條嵴,中央有一短橫溝和兩個平台,兩嵴的表比兩平台的表面高0.1 mm,每個平台上刻有不同規格的格網,中央0.1 mm2面積上刻有400個小方格。通過油鏡觀察,統計一定大格內微生物的數量,即可算出1 mL菌液中所含的菌體數。這種方法簡便,直觀,快捷,但只適宜於單細胞狀態的微生物或絲狀微生物所產生的孢子進行計數,並且所得結果是包括死細胞在內的總菌數。
2.2 染色計數法
為了彌補一些微生物在油鏡下不易觀察計數,而直接用血球計數板法又無法區分死細胞和活細胞的不足,人們發明了染色計數法。藉助不同的染料對菌體進行適當的染色,可以更方便的在顯微鏡下進行活菌計數。如酵母活細胞計數可用美藍染色液,染色後在顯微鏡下觀察,活細胞為無色,而死細胞為藍色。
2.3 比例計數法
將已知顆粒(如黴菌孢子或紅細胞)濃度的液體與一待測細胞濃度的菌液按一定比例均勻混合,在顯微鏡視野中數出各自的數目,即可得未知菌液的細胞濃度。這種計數方法比較粗放。並且需要配製已知顆粒濃度的懸液做標准。
2.4 液體稀釋法
對未知菌樣做連續十倍系列稀釋,根據估計數,從最適宜的三個連續的10倍稀釋液中各取5 mL試樣,接種1 mL到3組共15隻裝培養液的試管中,經培養後記錄每個稀釋度出現生長的試管數,然後查最大或然數表MPN(Most Probable Number)得出菌樣的含菌數,根據樣品稀釋倍數計算出活菌含量。該法常用於食品中微生物的檢測,例如飲用水和牛奶的微生物限量檢查。
2.5 平板菌落計數法
這是一種最常用的活菌計數法。將待測菌液進行梯度稀釋,取一定體積的稀釋菌液與合適的固體培養基在凝固前均勻混合,或將菌液塗布於已凝固的固體培養基平板上。保溫培養後,用平板上出現的菌落數乘以菌液稀釋度,即可算出原菌液的含菌數。一般以直徑9 cm的平板上出現50~500個菌落為宜。但方法比較麻煩,操作者需有熟練的技術。平板菌落計數法不僅可以得出菌液中活菌的含菌數,而且同時將菌液中的'細菌進行了一次分離培養,獲得了單克隆。
2.6 試劑紙
在平板計數法的基礎上,發展了小型商品化產品以供快速計數用。形式有小型厚濾紙片,瓊脂片等。在濾紙和瓊脂片中吸有合適的培養基,其中加入活性指示劑2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑(TTC,無色)待蘸取測試菌液後置密封包裝袋中培養。短期培養後在濾紙上出現一定密度的玫瑰色微小菌落與標准紙色板上圖譜比較即可估算出樣品的含菌量。試劑紙法計數快捷准確,相比而言避免了平板計數法的人為操作誤差。
2.7 膜過濾法
用特殊的濾膜過濾一定體積的含菌樣品,經丫叮橙染色,在紫外顯微鏡下觀察細胞的熒光,活細胞會發橙色熒光,而死細胞則發綠色熒光。
3. 間接測定法
微生物的生長伴隨著一系列生理指標發生變化,例如酸鹼度,發酵液中的含氮量,含糖量,產氣量等,與生長量相平行的生理指標很多,它們可作為生長測定的相對值。因此可利用生理指標等間接參數來測定生物量。
3.1 測定含氮量
大多數細菌的含氮量為乾重的12.5%,酵母為7.5%,黴菌為6.0%。根據含氮量×6.25,即可測定粗蛋白的含量。含氮量的測定方法有很多,如用硫酸,過氯酸,碘酸,磷酸等消化法和Dumas測N2氣法。Dumas測N2氣法是將樣品與CuO混合,在CO2氣流中加熱後產生氮氣,收集在呼吸計中,用KOH吸去CO2後即可測出N2的量。
3.2 測定含碳量
將少量(乾重0.2~2.0 mg)生物材料混入1 mL水或無機緩沖液中,用2 mL 2%的K2Cr2O7溶液在100 ℃下加熱30分鍾後冷卻。加水稀釋至5 mL,在580 nm的波長下讀取吸光光度值,即可推算出生長量。需用試劑做空白對照,用標准樣品做標准曲線。
3.3還原糖測定法
還原糖通常是指單糖或寡糖,可以被微生物直接利用,通過還原糖的測定可間接反映微生物的生長狀況,常用於大規模工業發酵生產上微生物生長的常規監測。方法是,離心發酵液,取上清液,加入斐林試劑,沸水浴煮沸3分鍾,取出加少許鹽酸酸化,加入Na2S2O3臨近終點時加入澱粉溶液,繼續加Na2S2O3至終點,查表讀出還原糖的含量。
3.4 氨基氮的測定
離心發酵液,取上清液,加入甲基紅和鹽酸作指示劑,加入0.02 mol/L的NaOH調色至顏色剛剛褪去,加入底物18%的中性甲醛,反應數刻,加入0.02 mol/L的使之變色,根據NaOH的用量折算出氨基氮的含量。根據培養液中氨基氮的含量,可間接反映微生物的生長狀況。
3.5 其他生理物質的測定
P,DNA,RNA,ATP,NAM(乙醯胞壁酸)等含量以及產酸,產氣,產CO2(用標記葡萄糖做基質),耗氧,黏度,產熱等指標,都可用於生長量的測定。也可以根據反應前後的基質濃度變化,最終產氣量,微生物活性三方面的測定反映微生物的生長。如在BMP-2的發酵生產上,隨時監測溶氧量的變化和酸鹼度的變化,判斷細菌的長勢。
4. 商業化快速微生物檢測法
微生物的檢測,其發展方向是快速,准確,簡便,自動化,當前很多生物製品公司利用傳統微生物檢測原理,結合不同的檢測方法,設計了形式各異的微生物檢測儀器設備,正逐步廣泛應用於醫學微生物檢測和科學研究領域。例如:
4.1 試劑盒,培養基等手段
抗干擾培養基和微生物數量快速檢測技術結合解決了傳統微生物檢測手段不能解決的難題,為建立一套完整的抗干擾微生物檢測系統奠定了堅實的基礎。如:抗干擾微生物培養基,新型生化鑒定管,微生物計數卡,環境質量檢測試劑盒等,可方便的用於多項檢測。
4.2 藉助新型先進儀器
BACTOMETER全自動各類總菌數及快速細菌檢測系統可以數小時內獲得監測結果,樣本顏色及光學特徵都不影響讀數,對酵母和黴菌檢測同樣高度敏感原理是利用電阻抗法(Impedance Technology)將待測樣本與培養基置於反應試劑盒內,底部有一對不銹鋼電極,測定因微生物生長而產生阻抗改變。如微生物生長時可將培養基中的大分子營養物經代謝轉變為活躍小分子,電阻抗法可測試這種微弱變化,從而比傳統平板法更快速監測微生物的存在及數量。測定項目包括總生菌數,酵母菌,大腸桿菌群,黴菌,乳酸菌,嗜熱菌,革蘭氏陰性菌,金黃色葡萄球菌等。
微生物OD值是反映菌體生長狀態的一個指標,OD是Optical Density(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度。通常400~700 nm 都是微生物測定的范圍,需要紫外分光光度計測最大吸收波長。用得最多的是:505 nm測菌絲菌體、560 nm測酵母、600 nm測細菌。用測OD方法畫微生物生長曲線時,同一株菌的起始培養濃度可以准備多管(根據檢測點的需要,如需檢測10個點,就准備10管),然後每個點取一管出來測OD值就行了。
一般測菌體密度的OD的波長范圍是580 nm-660 nm,如枯草芽孢桿菌用600 nm,已經屬於可見光區(200 nm~400 nm為紫外光區,400 nm~800 nm為可見光區)。空白如用水做,需要離心洗滌菌體;空白如用不接種的培養基做就不需要洗滌,但是不接種的培養基要和接種的同時培養以求條件一致,最後注意一般OD值在控制在0.1~0.4最好,在這個區內的值就可靠,如果OD大於1.0,一般要稀釋後再測,因為OD太大,分光光度計的靈敏度就會顯著降低。
一般都測吸光值,而且最好是整個實驗過程中,保持發酵液或菌體的稀釋倍數一致,吸光值與稀釋倍數不一定成正比,可保證整個實驗點有可比性。且取值的時候要連續讀數,重復3次的數最好。
另,用分光光度計測微生物的OD值為什麼要把波長設為600 nm
這個波長其實只是針對濁度,而分光光度計在600 nm處對濁度的反應比較靈敏。測吸收峰的實際意義並不大,比如LB搖瓶培養過夜的大腸桿菌,其實在400多納米處的吸收最大,但那很可能是培養液的吸收峰。
Ⅳ 微生物檢驗取樣數量如何確定
問題不夠清楚哦,你要測定什麼,微生物限度,還是已知菌的檢測?我只能舉例說明哦,是關於葯品的。不明白的你可以Hi我,或追問。我根據你的問題按步驟來回答。一、取樣1、供試品應隨機抽樣。一般抽樣量(2個以上最小包裝單位)為檢驗量的3倍量。2、對異常的供試品應針對性的抽樣。抽樣時,凡發現有異常或可疑的樣品,應選取有疑問的樣品,但機械損傷、明顯破裂的包裝不得作為樣品。凡能從葯品、瓶口(外蓋內側及瓶口周圍)、外觀看出長蟎、發霉、蟲蛀及變質的葯品,可直接判為不合格,無需在抽樣檢驗。不能以外觀有上述情況而檢查內容物合格,來判斷該葯品合格。3、供試品收檢後應及時檢驗,若有困難,應存放在該品種規定的儲存條件下(一般為陰涼乾燥處),勿冷藏或冷凍,以防供試品內污染菌因保存條件不妥引起致死、損傷或繁殖。4、供試品在檢驗之前,應保持原包裝狀態,嚴禁開啟,包裝已開啟的樣品不得作為供試品。5、供試品的取樣必須在凈化條件下無菌操作,嚴防再污染。(原料葯、裝量大的葯)6、有劑型檢驗量均需取自2個以上包裝單位(中葯蜜丸、膜劑,除需取自2個以上包裝外,還應取4丸、片以上樣品)。7、固體及半固體(粘稠性供試品)制劑檢驗量為10克。8、液體制劑檢驗量為10毫升。9、膜劑除另有規定外,中葯膜劑檢驗量為30~50cm2 ,化學膜劑及生化葯膜劑檢驗量為 100cm2 。10、貴重的或微量包裝的供試品檢驗量可以酌減,除另有規定外,口服固體制劑不低於3克,液體制劑採用原液者不得少於6毫升,採用供試液者不得少於3毫升,外用葯品不得少於5克。二、培養基的制定1、一般如果是微生物限度的話,有兩種培養基:檢測細菌用營養瓊脂培養基,檢測黴菌及酵母菌用玫瑰紅鈉瓊脂培養基。2、另外,如果還有致病菌要求的話,通常革蘭氏陰性腸道菌用伊紅美藍瓊脂培養基(EMB瓊脂),沙門氏菌用沙門氏志賀氏菌屬瓊脂(SS 瓊脂),霍亂弧菌用硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖瓊脂培養基(TCBS瓊脂),等等……3、最後的觀察:通常是計數,如樓上所說的數個數。然後就是菌落形態的觀察,主要有大小、顏色、厚度、邊緣狀態等等。不過看到你對樓上的追問,我在想,你是不是想問對未知微生物的鑒定,譬如泥土裡的微生物種類、空氣中的微生物種類等?那是微生物的分離和鑒定,不叫檢測吧。那樣的話一般是用營養瓊脂培養基和馬丁氏瓊脂培養基。
Ⅳ 微生物檢驗中菌落總數的不確定度如何評定
微生物檢驗中菌落總數的不確定度如何評定
在ISO/IEC17025《校準和檢測實驗室能力的通用要求》中明確指出實驗室出具的檢測報告應包含有關評定校準或測試結果的不確定度說明,故對測量結果進行不確定度的評定成為檢測實驗室的重要內容。下面是我為大家帶來的關於微生物檢驗中菌落總數的不確定度如何評定的知識,歡迎閱讀。
1 .檢驗方法
依據 GB 4789.2-2010 《食品安全國家標准 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》中要求以無菌操作取檢樣25 g(ml)剪碎放於含有225 ml滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液中,經振搖或研磨做成1︰10的均勻稀釋樣液,按照標准要求制備10倍系列稀釋樣品勻液。根據污染情況的估計,選擇2~3個稀釋度,每個稀釋度作2個平皿,每個平皿注入培養基約15~20 ml,並轉動培養皿使混合均勻,待瓊脂凝固後,翻轉平板,置36℃±1℃溫箱內培養48 h±2 h。計數後以同稀釋度的各平板平均菌落總數報告。
2. 數學模型
設菌落總數為A,檢測結果為X,則A=X CFU/g(ml)。
3 .計算不確定度
3.1 在微生物檢驗中,樣品中細菌分布的均勻性和重復測量帶來的不確定度是影響檢驗結果准確度的主要原因,而B類不確定度分量對合成不確定度影響較少。按 GB 4789.2-2010 《食品安全國家標准 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》中方法,同一樣品每個稀釋度作兩個平衡樣,因此可以採用合並樣本標准差求檢測結果的不確定度 見表1。
3.2 從檢驗結果可知,如直接用貝塞爾公式計算合並樣本標准差,由於數據的.散發性較大,計算出的合並樣本標准差很大,當樣本均值較小時其不確定度則會過大,此時可以對上述數據取對數後,計算出樣本檢驗結果對數值的均值和殘差,將中間計算結果 見表2。根據貝賽爾公式,可計算出檢測結果對數值的合並樣本標准差:
取置信水平P=95%,自由度ν=19,查t分布表得:
分布於X±0.043之間。當檢測結果以平衡樣結果平均值表示時,相對於對數值的取值再取反對數得其取值區間。這個取值區間適合於任何一次檢測。
3.3 例1:3#樣品,對數值的平均值為2.708,取值區間為2.665~2.751,取反對數得平衡樣平均值的取值區間為462~564 cfu/g(ml),菌落總數的取值區間為460~560 cfu/g(ml)。
例2:12#樣品,對數值的平均值為3.203,取值區間為3.160~3.246,取反對數得平衡樣平均值的取值區間為1445~1762u/g(ml),菌落總數的取值區間為1400~1800 cfu/g(ml)。
例3:18#樣品,對數值的平均值為4.0115,取值區間為3.9685~4.0545,取反對數得平衡樣平均值的取值區間為9 300~11 337 u/g(ml),菌落總數的取值區間為9 300~11 000 cfu/g(ml)。
4 .小結
從以上計算結果可知,由於檢驗結果的散發性較大,如直接用貝賽爾公式計算合並樣本標准差所得到的不確定度不適合每一個樣本。當檢驗結果取對數後,用合並樣本標准差求檢驗結果的不確定度則使用方便,並且適合於每一個樣本。隨著檢驗結果的不斷增加,可隨時加入到合並樣本中,重新計算合並樣本標准差,更新其不確定度的取值范圍。
;Ⅵ 測定微生物的生物量有哪些主要方法
測定微生物的生物量有哪些主要方法
測定的方法主要有四種:
1.直接計數測定:根據微生物種類,有血球計數板和細菌計數板;
2.比濁法:根據菌懸液的濃度在一定范圍內與光密度成正比,可以用分光光度計測OD值,用OD值表示樣品菌液濃度;
3.核酸計數法:熒光定量PCR技術;
4.活菌計數法:MPN和平板計數法由於測定方法的限制。新鮮土樣經氯仿熏蒸後(24h),土壤微生物死亡細胞發生裂解,釋放出微生物生物量碳,用一定體積的LK2SO4溶液提取土壤,借用有機碳自動分析儀測定微生物生物量碳含量。根據熏蒸土壤與未熏蒸土壤測定有機碳的差值及轉換系數(KEC),從而計算土壤微生物生物量碳。
Ⅶ 抗菌葯物微生物送檢率年度分析是哪個科室總結
抗菌葯物微生物送檢率年度分析通常由醫院感染管理科或者臨床微生物實驗室進行總結。這兩個科室都與抗菌碼岩辯葯物使用和微生物檢測有關,醫院感染管理科負責制定和實施醫院感染控制策略,包括抗菌葯物的合理使用和微生物檢測等方面;臨床微生物實驗室則負責對患者樣本進行微生物檢測,包括細菌、真菌等的培養和鑒定,以及對抗菌葯物的敏感性測試等方面。因此,這兩個科遲缺室都具備對抗菌葯物微生物送檢率年度分析進行總結的能力和責任棗租。
Ⅷ 測定微生物數量的方法有哪些
測定微生物數量的方法有:直接計數測定,根據微生物種類,用血球計數板和細菌計數板計數。比濁法,根據菌懸液的濃度在一定范圍內與光密度成正比,可以用分光光度計測OD值,用OD值表示樣品菌液濃度。
直接計數測定是檢測細胞增殖的方法之一,簡單易操作,也逗雀非常公認,只是耗費時間長,所需細胞量多。比濁法又稱濁度測定法。為測量透過懸浮質點介質的光強度來確定懸浮物質濃度的方法,這是一種光散射測量技術。是利用透射光強度(I)與入射襪指乎光強度(Io)的比值I/Io,或用散射光強度(Is)與入射光強度(告悉Io)的比值Is/Io,測定懸濁物質含量的方法。
Ⅸ 生物膜反應器的生物膜反應器微生物量的測量
在正常運行狀況下,復合生物反應器下部是固定生物膜濾床,上部是移動床,其微生物量為:
1、CBBR混合液SS為1 604 mg/L,總量約為2.456 g。
2、固定填料生物膜總量為12.036 g。
3、移動床懸浮填料生物膜總量為1.428 g。
4、CBBR微生物總量約為15.92 g。
該工藝對污水除臭起到了很大作用,它的除臭工藝簡單且效果顯出。復合生物反應器與其他污水處理設備相結合,降低污水處理難度,從而改善周邊環境,有效遏制病菌的傳播。隨著醫療技術的不斷提高,新型葯劑的產生將繼續加大污水處理難度,所以水處理技術仍需隨之提升,滿足時代發展需求。
4 MBR研究進展
目前,MBR的研究主要集中在以下幾個方面:(1)降低膜污染,提高膜通量;(2)探求合適的工作條件和工藝參數;(3)降低處理工藝的運行成本。
張少輝, 鄭平, 華玉妹〔1〕用反硝化生物膜啟動厭氧氨氧化反應器的研究等選取不同截留分子量的聚醚碸膜(PES),採用板框式膜組件構成的厭氧MBR對高濃度食品廢水進行處理,考察了截留分子量對膜通量和出水效果的影響。
王榮昌,文湘華,錢易〔2〕 分析了生物膜反應器中好氧顆粒污泥形成機理,研究了MBR運行條件對膜過濾特性的影響。
楊玉旺〔3〕研究了移動床生物膜反應器處理污水的研究應用進展。
邢傳宏等進行了管式MBR(分置式)處理城市污水的工藝設計,認為運行成本主要由電費、葯劑費和人工費等3部分組成。其中電費是最主要的,電耗為2.3kW·h/m3。
魯敏,曾慶福,張躍武〔4〕對一種新型生物膜反應器處理污水的研究發生了濃厚興趣。
王亞娥等分析了影響超濾膜通量和過濾阻力的主要因素。
楊磊等對MBR運行過程中的膜污染和清洗進行了較詳盡的試驗。
李軍, 彭永臻, 楊秀山 ,王寶貞 ,楊海燕〔5〕著重研究了序批式生物膜法反硝化除磷特性及其機理。
姜蘇等〔6〕研究了一體化A/O生物膜法處理生活污水。
白宇等〔7〕研究分析了污水深度處理生物濾層中菌群的時空分布特徵。
陳壁波等〔8〕對移動床生物膜反應器及對造紙廢水處理的意義進行了卓有成效的研究論證。
Cote P 研究了浸沒式膜系統的電耗,包括抽吸泵及曝氣2部分。每立方米產水僅耗電0.3~0.6 kW·h,而電耗是運行費用的主要部分。
榮宏偉等〔9〕在實驗室條件下對序批式生物膜法生物除磷進行了試驗研究,得出了令人期待的結論。
Wang L-Choo Ho等比較了浸沒式和分置式MBR工藝運行時的電耗,結果是,在通量為18L/(m2·h)的情況下,前者電耗僅為0.2~0.4 kW·h /m3,而後者電耗為2~10 kW·h /m3。
鮑立寧等〔10〕在電極生物膜脫氮工藝中反硝化菌相分析方面進行了研究。
MBR因自身特殊的工藝也要求了不同於一般的超、微濾膜材料,但制備針對於MBR所用的膜材料的研究還很少。顯然選擇合適的膜材料是降低膜污染的一個重要方法,這還有待於進一步研究。
5 MBR應用實例
隨著研究的深入,國內外已有了MBR應用的實例。實踐表明,膜污染嚴重、水通量低,是限制MBR推廣應用最主要的原因。
加拿大Cote P等 報道了北美洲在20世紀90年代MBR發展的概況。其中ZENON環保公司在1996年推出了組件膜面積為46m2、體積密度為63m2/m3的ZW-500型膜生物反應器,該設備已成功地應用於市政污水處理。目前以小規模裝置為主,處理能力為10~200m3/d,主要在辦公樓、購物中心、學校、醫院和療養地推廣使用。裝置的水力停留時間(HRT)為24h,SRT為1~2年。濾出液經過紫外線消毒或活性炭吸附後,用作廁所沖洗水。在安大略省建成的日處理污水3 800m3的MBR裝置,安裝了ZW-500型膜組件144個,總膜面積6624m2。曝氣池體積440m3,正常HRT為3.8h;厭氧反應池體積為380m3,HRT為2.4h。運行期間的MLSS濃度為12 000~20 000mg/L,MLVSS濃度僅為MLSS的55%~70%。運行9個月以來出水BOD和有機磷的去除率都接近100%。
日本自1998年以來,著重推廣了中水道系統的開發利用。其目的主要是將以廚房排水、洗臉及洗澡後的排水為主體的樓房排水進行處理,然後作為廁所沖洗水再利用。比如,日立工廠建設公司用高濃度活性污泥法和旋轉平板超濾膜裝置組合而成的系統作為大樓中水道的回用系統。因為膜板旋轉,使膜表面的污泥被攪拌,從而可控制膜面污染。
天津清華德人環境公司和天津大學共同研製的MBR已有了一些的應用實例。以處理天津某寫字樓排放的污水為例,該寫字樓的建築面積約為17 000m2,採用了日處理能力為25m3 的裝置,設備本體佔地3.2m2,投資10餘萬元,能耗為0.8kW·h/m3。處理出水可用作沖廁、綠化及洗車等。
鄭斐等〔11〕研製出生物膜法的新工藝—無泡曝氣膜生物反應器。
呂曉輝等〔12〕對移動床生物膜反應器脫氮除磷技術情有獨衷,使脫氮除磷效率又有了較大的發展。
6結語 1 MBR綜合了膜分離技術和生物處理技術的優點,超、微濾膜組件能替代CAS中的二沉池,更有效地進行泥水分離,並延長SRT,提高微生物對污水中有機物的處理能力。經超、微濾膜處理後出水水質好可以直接用於非飲用水回用。系統佔地面積小,幾乎不排剩餘污泥,具有較高的抗沖擊能力。 2 MBR具有一定的實用性,但膜污染仍是制約MBR推廣應用的最主要因素。因為MBR中膜材料既要面臨活性污泥、污水中固體顆粒的污染,又要面臨活性污泥中微生物的侵蝕。雖可以通過控制抽停時間、曝氣量等工藝參數以及採用適當的清洗技術來減少膜面的污染,但最有效、最根本的方法是研製出一種抗污染、耐微生物侵蝕的新的膜材料及對膜進行適當的改性。 3 在應用MBR技術處理市政、生活污水並實現中水回用時,還要考慮另外一個關鍵因素,即運行成本。因此,在研究中要始終將運行成本。作為考慮試驗方案和確定試驗結果的主要出發點。 7參考文獻
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12呂曉輝, 胡龍興. 移動床生物膜反應器脫氮除磷技術. 化學工程師,2004,108(9):20~22