如何提高微生物質量

『壹』 如何進行微生物檢驗分析中的質量控制

如何進行微生物檢驗分析中的質量控制

質量控制對檢驗結果的保證非常重要，而質量控制也貫穿檢驗工作的整個過程。中國合格評定國家認可委員會(CNAS)於2012年9月13日發布的CNAS-CL42在2014年4月21日進行了第1次修訂，並於2014年11月1日實施。其中明確了微生物檢驗在分析過程中質量控制需要滿足如下要求。下面是我為大家帶來的如何進行微生物檢驗分析中的質量控制的知識，歡迎閱讀。

一、診斷性抗血清試劑，實驗當日至少應做多價血清陰性和陽性質控：

定性試驗試劑每次檢測時應至少包括陽性和陰性質控菌株。不含內質控的直接抗原檢測試劑，實驗當日應檢測陽性和陰性質控。使用的染色劑(革蘭染色、特殊染色和熒光染色)，至少每周(若檢測頻率小於每周1此，則實驗當日)用已知陽性和陰性(適用時)的質控菌株檢測。凝固酶、過氧化氫酶、氧化酶、β-內醯胺酶，實驗當日應做陰性和陽性質控，商業頭孢菌素試劑的β-內醯胺酶試驗可遵循製造商的建議。

二、實驗室採用的抗菌葯物敏感性試驗方法的質控：

應以質控標准菌株連續檢測20—30天，每一組葯物/細菌超出參考范圍(抑菌圈直徑或MIC)的頻率應不超過(≤)1/20或1/30;也可採用替代質控方案，即連續5天，每天對每一組葯物/細菌重復測定3次，每次單獨制備接種物，15個數據超出參考范圍(抑菌圈直徑或MIC)的結果應不超過(≤)1個，若失控結果為2-3個，則如前述，再進行5天，每天3次重復試驗，30個數據失控結果應不超過(≤)3個。此後，應每周使用標准菌株進行質控。若檢測頻率小於每周1次，則每個檢測日應進行質控。採用自動或者半自動儀器檢測MIC值時，應按照製造商的要求進行質控。

三、厭氧菌培養：

還需要使用有效的方法檢測厭氧培養環境(如以亞甲蘭試條、厭氧菌或其它適當方法)。分枝桿菌檢測：抗酸染色應在實驗當日用適當的`陰性和陽性質控驗證;熒光染色應每次實驗以陰性和陽性質控驗證。真菌檢測：直接染色(如：抗酸染色，PAS，吉姆薩染色，墨汁染色)檢查患者樣品時，應在實驗當日做陰性和陽性質控(某些染色如吉姆薩染色，玻片本身作為陰性質控。KOH制備的玻片不需要質控)。病毒：連續細胞傳代時應定期監測支原體污染(宜監測陰性未傳代的質控株，而不是培養支原體);應監測用於細胞生長培養液的動物血清的細胞毒性;應具備相應的細胞株用於病毒培養。

『貳』 試舉例說明可以採取哪些方法提高分離目標微生物效率

一般有以下五種方法：

1、傾注平板法 首先把微生物懸液通過一系列稀釋，取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40~50°左右的營養瓊脂培養基充分混合，然後把這混合液傾注到無菌的培養皿中，待凝固之後，把這平板倒置在恆箱中培養。單一細胞經過多次增殖後形成一個菌落，取單個菌落製成懸液，重復上述步驟數次，便可得到純培養物。

2、塗布平板法 首先把微生物懸液通過適當的稀釋，取一定量的稀釋液放在無菌的已經凝固的營養瓊脂平板上，然後用無菌的玻璃刮刀把稀釋液均勻地塗布在培養基表面上，經恆溫培養便可以得到單個菌落。

3、平板劃線法 最簡單的分離微生物的方法是平板劃線法。用無菌的接種環取培養物少許在平板上進行劃線。劃線的方法很多，常見的比較容易出現單個菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、放射法、四格法等。當接種環在培養基表面上往後移動時，接種環上的菌液逐漸稀釋，最後在所劃的線上分散著單個細胞，經培養，每一個細胞長成一個菌落。

4、富集培養法 富集培養法的方法和原理非常簡單。我們可以創造一些條件只讓所需的微生物生長，在這些條件下，所需要的微生物能有效地與其他微生物進行競爭，在生長能力方面遠遠超過其他微生物。所創造的條件包括選擇最適的碳源、能源、溫度、光、pH、滲透壓和氫受體等。在相同的培養基和培養條件下，經過多次重復移種，最後富集的菌株很容易在固體培養基上長出單菌落。如果要分離一些專性寄生菌，就必須把樣品接種到相應敏感宿主細胞群體中，使其大量生長。通過多次重復移種便可以得到純的寄生菌。

5、厭氧法 在實驗室中，為了分離某些厭氧菌，可以利用裝有原培養基的試管作為培養容器，把這支試管放在沸水0浴中加熱數分鍾，以便逐出培養基中的溶解氧。然後快速冷卻，並進行接種。接種後，加入無菌的石蠟於培養基表面，使培養基與空氣隔絕。另一種方法是，在接種後，利用N2或CO2取代培養基中的氣體，然後在火焰上把試管口密封。有時為了更有效地分離某些厭氧菌，可以把所分離的樣品接種於培養基上，然後再把培養皿放在完全密封的厭氧培養裝置中。

『叄』 食品微生物控制方法

一般食品中的微生物污染主要由原料自帶、環境污染、生產過程不衛生、從業人員不注意個人衛生、儲運條件不達標等，應該針對各種情況進行控制。

1.首先要注意原材料的選擇與處理，減少微生物的來源。

2.食品工廠應建在遠離重工業區，周圍不應有農葯廠、化肥工廠、垃圾場、糞場、污水坑及大醫院等。以免受到廢水、廢氣、廢渣和病原微生物及其它污染物的污染，對食品加工廠本身的污染物也必須進行無害化處理。

3.食品生產的場所，應符合衛生要求，易於清洗消毒，空間可採用空氣過濾器，造成潔凈的生產環境;保持生產車間四周牆壁、天花板和地面等六面清潔，生產設備應該經常清洗消毒，以減少微生物孳生的場所;嚴格執行各項生產衛生制度。生產中應注意簡化工藝，縮短生產流程，做到生產自動化、密閉化和連續化，盡量減少食品在空間暴露的時間，做到不接觸或少接觸人手和其他未經消毒的物品，這是降低微生物污染食品，提高食品質量的有效措施;加強用水的管理和處理。

4.食品從業人員必須身體健康，並經常對從業人員進行有針對性的體檢，以便及時排除患者及病原菌攜帶者對消費者健康的威脅。從業人員應勤理發、剪指甲、洗手、洗澡，保持個人衛生;工作衣帽、口罩等要經常清洗，保持清潔，特別是操作前雙手的清洗和消毒更為重要。

5.應該嚴格按照相關標准儲運食物，防止霉變。

『肆』 如何提高工業微生物菌種的生產性能

工業微生物都是上大罐生產，為了獲得最好的效益，一般通過三步來提高生產菌株的性能：
1，出發菌株的誘變育種：上罐發酵是一個逐級放大的過程，如果在實驗室能夠誘變獲得一株遺傳穩定性好、發酵效價高的菌株，經過發酵放大，最終的效果是驚人的，目前主要都是紫外誘變、基因組重排、推理育種等方法結合。
2，發酵培養基的優化：實驗室常用培養基效果雖好但是用在大規模生產上成本偏高，採用價格低廉的玉米粉、豆餅粉、棉籽粉這些碳氮源不僅能夠顯著降低成本，經過優化後其發酵效價也能達到要求。
3，發酵條件在線優化：大罐發酵時，培養溫度，通風量，攪拌速度，罐壓，接種量，這些條件的最優化結果能夠顯著提高菌株的產能。

『伍』 增加土壤微生物的土方法 增加土壤微生物的土方法是什麼

1、合理使用化學肥料，合理：什麼叫合理，怎樣做才算合理，到底用多少化肥是最合理的，我想這個問題沒人能夠100%肯定。

2、施用化肥時要注意根據土壤、作物的缺肥情況來定，缺什麼補什麼，缺多少補多少，不能為了產量過度施肥。最好是能夠做到測土施肥，這樣能做到氮磷鉀比較精準的投入。

3、增加有機肥料的投入。土壤的肥力好不好要看土壤中有機質的含量有多少，施入有機肥可以補充土壤有機質。有機肥料含有大量的有機質，是各種微生物生長繁育的地方。據研究深耕配合施用有機肥，土壤固氮菌比對照增加近一倍，纖維分解菌增加近2倍，其它微生物群落也有明顯增加，所以施有機肥能大大促進新開墾土地的熟化進程。有機肥料有較強的陽離子代換能力，可以吸收更多的鉀、銨、鎂、鋅等營養元素悉蠢李，防止淋濕，提高土壤保肥能力。此外，有機肥還具有很強的緩沖能力，可防止因長期施用化肥而引起土壤的酸度變化和土壤板結，可提高土壤自身的抗逆性，保證土壤良好的生態環境。

4、向土壤施入有益生睜遲物菌肥料，通過微生物的生命活動，可以增加土壤團粒結構的離子交換頻率，減少土壤的相對質量，從而增加農作物與土壤有機物質的接觸率，改善了土壤的結構。其次，微生物可以通過生命活動，形成代謝，從而有效的吸收土壤中原有的有害物質，並形成新的微生物系統；這樣可以改善土壤環境，減少土壤病菌。

5、增加土壤調理劑施用。土壤調理劑對於土壤的主要有疏鬆土壤、改善土壤團粒結構，調節土壤酸鹼度的特殊作用，土壤調理劑雖然對土壤有改良和調理作用，但選用的時候一定要了解是針對哪類土壤的，有些是針對鹼性土壤，檔嘩有些是針對酸性土壤，而且用量要合理把握，使用過量會出現另外的副作用。

6、夏至雖然跟芒種相差不了多久，但氣溫已經明顯的提高，很多地區夏至之後，氣溫會驟然的高升，節氣一過真正就步入了炎熱的夏季，也被稱之為上蒸下煮。

7、這期間蒸騰作用非常的大，栽植紅薯的成活率會降低好多，而且這期間種植的紅薯，為了生存，更多的是要發展根系，從而會降低紅薯的產出，也被俗稱夏至栽薯光長根，但夏至之後也並非絕對不能種植紅薯，也要根據實際情況而定的。

『陸』 如何提升食品微生物檢測質量

目前，隨著食品檢驗事業的飛速發展，各級食品實驗室也得到了很大的改觀，人員素質提高，實驗室設備更新換代，提高了檢驗結果的准確性和精密性，滿足了食品檢驗的需要，食品實驗室成為食品檢驗監督不可缺少的依賴。各實驗室為了提高本實驗室的檢驗質量，競相開展了質量控制工作，也確實收到了良好的效果，但在質量控制工作的實施過程中，並非盡如人意，還存在著許多問題。 一是儀器設備的性能與運行狀態。進行期間核查，重點是對那些不太穩定、使用頻率高、使用條件惡劣、容易產生漂移、因出現過載可能造成損壞的、能力驗證結果有問題、對檢測數據有疑問、單純校準不能保證在有效期內正確可靠的儀器設備、計量參考物質或標准物質，核查其可信度和可靠性。方法：（1）用參考標准進行核查；（2）參加能力驗證或其他實驗室之間的比對；（3）使用有證標准物質；（4）相同儀器比對；（5）同一樣品不同儀器檢測結果的比對；（6）對保留樣品的再檢測；（7）協議標准和方法。

『柒』 怎樣做好微生物檢驗質量控制

怎樣做好微生物檢驗質量控制
微生物學檢驗室內質量控制包括：①對細菌檢驗人員的要求；②操作手冊；③儀器設備的功能監測；④培養基的質量控制；⑤試劑、染色液及抗血清的質量控制；⑥標本檢驗的質量控制；⑦標准菌株的來源和保存及室內質量的全面控制七個方面。
質量控制：滿足質量要求的操作技術和活動。
質量保證：為了滿足實驗室質量要求
，制定相應的計劃，實施證明（記錄）所進行的一系列的系統活動。
外部質量控制：通過互相校準和/或檢驗對實驗室的操作和結果所進行的控制。
內部質量控制：實驗室內部採取的以對比分析、跟蹤以及相關方法，對實驗室工作的連續性控制計劃。

『捌』 舉例說明可以採取哪些方法提高分離目標微生物效率

要想提高分離目標微生物效率，我們都會選擇一種篩選的方法，這個方法我們通常形象的稱為「篩子」。
方法有很多，但是一般不是單獨使用的，而是會結合在一起使用。
1、最基礎的方法：選擇一個較優的「篩子」。這個篩子是很難界定的，不同的目的有不同的篩子。如透明圈法、生長圈法、抑制圈法、紙片培養顯色法。
2、針對已知微生物的優化分離：誘變。誘變後可以通過菌落形體的變化來大致定性。
3、高通量篩選。
想要提高分離目標微生物效率，上述三個方法目前是缺一不可的。

『玖』 如何利用代謝調控提高微生物產物的產量

一般改變微生物代謝調節的方法有如下幾種:

第一種 是採用物理化學誘變，獲得營養缺陷型

第二種方法是應用抗反饋調節突變法。

第三種就是控制發酵條件，改變細胞的滲透性。

一、應用營養缺陷型菌株以解除正常的反饋調節

這是氨基酸生產菌育種的最有效的辦法。營養缺陷型是指某菌種失去合成某種物質的能力，即合成途徑中某一步發生突變，使合成反應不能完成，最終產物不能積累到引起反饋調節的濃度，從而有利於中間產物的積累。例如，用高絲氨酸缺陷型生產菌進行賴氨酸發酵。一般在形成賴氨酸的過程中有3種產物生成，只有賴氨酸和蘇氨酸都達到一定濃度時，才能形成反饋抑制，從高絲氨酸切斷這兩個分支後，不能形成蘇氨酸，也就不能形成反饋抑制。最後使賴氨酸的大量積累，這是打破代謝調節的第一種方法。

在直線式的合成途徑中，營養缺陷型突變株只能累積中間代謝物而不能累積最終代謝物。

在分支代謝途徑中，通過解除某種反饋調節，就可以使某一分支途徑的末端產物得到累積。

二、應用抗反饋調節的突變株解除反饋調節

抗反饋調節突變菌株，指對反饋抑制不敏感或對阻遏有抗性的組成型菌株，或兼而有之的菌株。在這類菌株中，因其反饋抑制或阻遏已解除，或是反饋抑制和阻遏已同時解除，所以能分泌大量的末端代謝產物。

例如，當把（鈍齒棒桿菌）培養在含蘇氨酸和異

亮氨酸的結構類似物AHV（α-氨基-β-羥基戊酸）的培養基上時，由於AHV可干擾該菌高絲氨酸脫氫酶、蘇氨酸脫氫酶以及二羧酸脫水酶，所以抑制了該菌的正常生長。如果採用誘變（如用亞硝基胍作為誘變劑）後所獲得的抗AHV突變株進行發酵，就能分泌較多的蘇氨酸和異亮氨酸。這是因為，該突變株的高絲氨酸脫氫酶或蘇氨酸脫氫酶和二羧酸脫水酶的結構基因發生了突變，故不再受蘇氨酸或異亮氨酸的反饋抑制，於是有大量的蘇氨酸和異亮氨酸的累積。如進一步再選育出甲硫氨酸缺陷型菌株，則其蘇氨酸產量還可進一步提高，原因是甲硫氨酸合成途徑上的兩個反饋阻遏也被解除了。

三、控制細胞膜的滲透性

微生物的細胞膜對於細胞內外物質的運輸具有高度選擇性。 細胞內的代謝產物高濃度累積著，並自然地通過反饋阻遏限制了它們的進一步合成。採取生理學或遺傳學方法，改變細胞膜的透性，使細胞內的代謝產物迅速滲漏到細胞外。這種解除末端產物反饋抑製作用的菌株，可以提高發酵產物的產量。

1．通過生理學手段控制細胞膜的滲透性在谷氨酸發酵生產中，生物素的濃度對谷氨酸的累積有著明顯的影響，只有把生物素的濃度控制在亞適量情況下，才能分泌出大量的谷氨酸。

生物素影響細胞膜滲透性的原因，是由於它是脂肪酸生物合成中乙醯CoA羧化酶的輔基此酶可催化乙醯CoA的羧化並生成丙二酸單醯輔酶A，進而合成細胞膜磷脂的主要成分——脂肪酸。因此，控制生物素的含量就可以改變細胞膜的成分，進而改變膜的透性和影響谷氨酸的分泌。當培養液內生物素含量很高時，只要添加適量的青黴素也有提高谷氨酸產量的效果。其原因是青黴素可抑制細菌細胞壁肽聚糖合成中轉肽酶的活性，結果引起其結構中肽橋間無法進行交聯，造成細胞壁的缺損。這種細胞的細胞膜在細胞膨壓的作用下，利於代謝產物的外滲，並因此降低了谷氨酸的反饋抑制和提高了產量。

2．通過細胞膜缺損突變而控制其滲透性應用谷氨酸產生菌的油酸缺陷型菌株，在限量添加油酸的培養基中，也能因細胞膜發生滲漏而提高谷氨酸的產量。這是因為油酸是一種含有一個雙鍵的不飽和脂肪酸（十八碳烯酸），它是細菌細胞膜磷脂中的重要脂肪酸。油酸缺陷型突變株因其不能合成油酸而使細胞膜缺損。另一種可以利用石油發酵產生谷氨酸的（解烴棒桿菌）的甘油缺陷型突變株，由於缺乏a-磷酸甘油脫氫酶，故無法合成甘油和磷脂。其細胞內的磷脂含量不到親株含量的一半，但當供應適量甘油（200μg/ml）時，菌體即能合成大量谷氨酸（72g/L），且不受高濃度生物素或油酸的干擾。

『拾』 食品微生物檢驗如何進行質量控制

食品微生物檢驗如何進行質量控制

在食品微生物檢驗工作中，檢驗流程包括檢驗思路的確定、標准檢驗方法的使用、培養基的配製、樣品前處理、檢驗結果的判斷、原始記錄、報告等許多環節，其中手工操作也較多，影響結果准確性的因素也較多，實驗室必須通過行之有效的質量控制措施，持續地加以監督和控制，並結合必要的室間質量控制手段，才能確保檢驗結果的准確性。下面是我為大家帶來的關於食品微生物檢驗如何進行質量控制的知識，歡迎閱讀。

主要可從下幾方面進行質量控制：

1檢驗人員方面：實驗室的檢驗水平與檢驗人員素質密切相關，業務技術水平和工作責任心是檢驗人員素質的核心所在。這就要求檢驗人員必須具備扎實的理論基礎知識和熟練的操作技能，要求檢驗人員具備高度的工作責任心和工作熱情。實驗室可通過培訓和繼續教育、實驗室間的交流，必要時進行考核等手段，來不斷提高檢驗人員的業務水平，在實驗室質量體系文件中強調檢驗人員工作責任心的`重要性，通過制定的獎懲制度來規范檢驗人員的工作行為。

2儀器設備方面：實驗室所有儀器均應在檢定有效期內使用，必要時還要進行期間核查。在此基礎上可通過一些監控手段來確保儀器設備保持最佳性能，如高壓蒸汽滅菌器，可用生物指示劑嗜熱脂肪桿菌ATCC7953(2)或化學指示劑如變色膠帶監視滅菌效果;需要控制溫度的儀器，應在工作前和工作後做好溫度的記錄，不符合應及時調整;生物安全櫃要定期由專業人員更換濾網，對紫外線消毒設備必須三個月檢查一次其消毒性能等等。

3檢驗耗材方面：如培養基：目前大多數實驗室都是使用市售乾粉培養基，這些來自著名公司的培養基，質量比較穩定，但在購買和使用前首先要對外觀色澤和均一性、pH值、水分含量、批次或批號、瓊脂凝膠的硬度、選擇性等進行初次評估。用質控菌株進行預測，確保培養基、試劑達到預期效果。

在使用市售培養基時應注意以下幾方面：

(1)選用國內外知名品牌和信譽度好的產品;

(2)要根據培養基儲存條件儲存，盡量少包裝;

(3)要根據日常工作需要作為計劃，控制在有效期內用完;

(4)購回試劑應對品名、生產日期、保質期做好記錄，檢查密封性、標簽牢固性;(5)在配置時應仔細檢查原料，如發現結塊、變色嚴禁使用;

(6)所有培養基要有配製稱量時要有記錄，把剩餘培養基密閉好;

(7)嚴禁使用過期的、污染的、失了水的培養基。

標准菌株：必須做好明確的作業指導書，實施標准菌株的規范管理，做好菌株的傳代驗證，這樣才能確保標准菌株在實驗中應起的作用等等。

4樣品採集方面：因樣品採集並非實驗人員進行，樣本採集是否合格規范要求，是實驗成敗的又一關鍵因素。因此，從事食品微生物檢驗的工作人員，要注意加強與采樣人員的溝通，向樣品採集者講解採集樣本的方法、要求，指導他們規范採集樣本，如無菌要求、隨機方法、種類、數量、採集部分、冷藏或保溫、運送方式、安全要求等。實驗室收到樣本後，應仔細核對檢驗內容與送檢單，對不符合檢驗要求的樣本，註明原因退回。

最後，要求每個食品微生物檢驗工作者都應提高對微生物檢驗質量控制工作的認識，在日常工作中要特別重視實驗室質量控制工作，以確保檢驗結果的准確性和權威性。要求檢驗人員應加強對《質量手冊》和《程序文件》學習，發現問題，及時記錄，作為管理體系文件的修訂、補充、完善的依據。要求檢驗人員對實驗的整個過程應在工作當時予以記錄，不允許事後補記或追記。同時，管理者應防止片面重視專業理論知識和操作技能培訓，輕視思想道德教育和法制觀念教育，要努力打造一支思想過硬、品德高尚、專業扎實、技術精湛的食品微生物檢驗隊伍。