微生物大腸怎麼計數

① 大腸菌群平板計數法怎麼做

用無菌吸管吸取稀釋度樣品1 mL，然後將其放入無菌培養皿中，再加入溫度於 45℃下的CDLJ JD 顯色培養基中10 mL的量，並進行培養皿中溶液均勻混合，可以通過快速轉動培養皿的方式，等溶液凝固以後，加入5 mL左右 ，使其均勻覆蓋平板表面，凝固後翻轉培養基，在37℃培養24h左右。

然後觀察其形態，顏色等變化。除此之外，平行設置兩個稀釋度培養基，步驟是先稀釋樣本，通過稀釋後，微生物可以分散為單個細胞，然後進行一定環境條件下培養，直到其長成菌落為止，然後進行計算大腸桿菌的數量，通過稀釋度和樣本數量進行計算

平板計數法操作簡便，較適用於菌體大小和質量都相近的類群，如細菌、酵母菌等的計數。但它只能測定那些可培養的微生物，而且干擾因素很多，且採用的培養基或培養條件有選擇性，難以平等地區分所有的微生物。

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發酵法檢測大腸桿菌；可以進行統計學估計原來樣品中的菌落。主要步驟包括發酵、分離培養、二次發酵、顯微鏡觀察等，要點有：

1、在44.5℃下的培養基上進行大腸桿菌的培養，該培養基含有熒光底物，需要培養 24 h。

2、對熒光底物進行釋放，需要採用葡萄糖醛酸進行，讓培養基能夠在紫外光的照射下發出熒光。

② 微生物計數方法有哪些

測定微生物細胞數目的方法有很多，介紹幾種

1.血細胞計數法

將稀釋的菌液樣品滴在血細胞計數板上，在顯微鏡下計算4~5個中格的細菌數，並求出每個小格所含細菌的平均數，再以此為依據，估算總菌數。

①此法的缺點是不能區分死菌和活菌。

②對壓在小方格界線上的細菌，應當取平均值計數。

③此法可用於測定培養液中酵母菌種群數量的變化

2.稀釋塗布平板法

原理：每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落。培養基表面生長的一個菌落，來源於樣品稀釋液中的一個活菌。

①這一方法常用來統計樣品中活菌的數目

②統計的菌落數往往比活菌的實際數目低，原因是當兩個活多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。因此統計結果一般用菌落數而不是用活菌數來表示。

③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含細菌、酵母、芽孢與孢子等的數量均可用此法測定。但不適於測定樣品中絲狀體微生物，例如放線菌或絲狀真菌或絲狀藍細菌等的營養體等。

④此法若不培養成菌落，可通過將一定量的菌液均勻地塗布在玻片上的一定面積上，經固定染色後在顯微鏡下計數，這樣又稱塗片計數法。染色可用台盼藍，台盼藍能使死細胞染成藍色，可分別計數死細胞和活細胞。

3.濾膜法

濾膜法是當樣品中菌數很低時，可將一定體積的湖水、海水或飲用水燈樣品通過膜過濾器。然後將濾膜乾燥、染色，並經處理使膜透明，再在顯微鏡下計算膜上（或一定面積上）的細菌數。

此法也可以通過培養觀察形成的菌落數來推算樣品中的菌數。例如測定飲用水中大腸桿菌的數目：將已知體積的水過濾後，將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養。在該培養基上大腸桿菌的菌落呈現黑色，可根據培養基上黑色菌落的數目，計算出水樣中大腸桿菌的數目。

此法也是統計樣品中活菌的數目。

4.比濁法

原理是在一定范圍內，菌是懸液中細胞濃度與混濁度成正比，即與光密度成正比，菌越多，光密度越大。因此可藉助與分光光度計，在一定波長下，測定菌懸液的光密度，以光密度表示菌量。實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內，否則不準確。

5.顯微鏡直接計數法

在課本生物選修1生物技術實踐P22中「除了上述活菌計數法外，顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法。」這里說的顯微鏡直接計數，我認為應該是在稀釋塗布的基礎上不培養成菌落而通過染色的方法在顯微鏡下直接計數。再如濾膜法也一樣，可以有兩種情況。

另外，微生物計數法發展迅速，多種多樣的快速、簡易、自動化的儀器和裝置等方法可以用來統計微生物的數目。

③ 微生物檢驗中飲料的大腸菌群平板計數法具體操作步驟是怎樣的

兩個平板總共挑選10個典型菌落或者是可疑菌落（是五五分還是四六分這個全憑你心情了），有的菌落長的在10個以下的就有幾個接種幾管就OK了。
每次接種前將典型和可疑菌落分類，哪個多就多接種幾管，少的就少接種幾管，每個樣品只需選15-150菌落間的稀釋度接種BGLB管。
接種的目的是看是否產氣且是否有大腸。