微生物紙片法中的紙片怎麼驗收

㈠ 微生物的抗菌譜法實驗濾紙片和濾紙條法

濾紙片法抑菌試驗原理是將含有定量抗菌葯物的濾紙片貼在已接種了測試菌的瓊脂表面上，紙片中的葯物在瓊脂中擴散，隨著擴散距離的增加，抗菌葯物的濃度呈對數減少，從而在紙片的周圍形成濃度梯度。
紙片周圍抑菌濃度范圍內的菌株不能生長，二抑菌范圍外的菌株則可以生長，從而在紙片的周圍形成透明頃攜的抑菌圈，不同的抑菌葯物的抑菌圈直徑因受葯物在瓊脂中擴散速度的影響而可能不同，抑菌圈的大小可以反映測試菌對葯物的敏感程度，並與該葯物對測試菌的MIC呈雀裂伏源滲負相關。

㈡ 微生物實驗紙片法測定測定抗生素效價方法的整套實驗步驟

實驗前准備：4個培養皿，2支移液管，1支塗布棒，並將培養皿包好滅菌，取一定的蒸餾水滅菌製成無菌水。
1、配製營養瓊脂培養緩段基：稱取營養瓊脂9.6g，加入300ml蒸餾水，加熱煮沸後將培養基導入錐形瓶，然後包紮滅菌(121°C，20min)。
2、倒平板：在無菌環境操作下，將上述培養基倒入4個平板，並編號1，2,，3，4.
3、制菌懸液：用5ml無菌移液管在無菌操作下，吸取3ml無菌水到菌種斜面，用接種環輕刮下菌苔，搗碎，塞上棉塞，振盪片刻。
4、將抗生素稀釋成10-3,10-4，10-5,10-6四種不同稀釋度的梯度液。
5、取直徑1cm圓形濾紙若干，取4個圓形濾紙分別放入10-3,10-4，10-5,10-6的抗生素溶液中浸泡一會。
6、待平板凝固後接種，各取0.2ml菌懸液倒入平板中，用塗布棒抹勻。
7、在1,2,3,4,號已接種的平板中分別放入4個浸泡在10-3,10-4，10-5,10-6抗生素溶液中的濾紙擾燃譽片，並注意個紙片間的距離應較大。
8、培養，放入37°c恆溫箱中培養24h。
9、觀察測量並記錄數據，觀察抗生素濾紙周圍的透明抑菌圈，測量16個抑菌圈的大小，求算不同濃度抗生素段空濾紙抑菌圈的大小。

㈢ 檢驗的五大程序是什麼就是化學檢驗,食品檢驗等

食品檢驗操作規范
一、 步驟和方法
1樣品採集
1.1按照國家采樣規定,每件樣品採集200克.
1.2採集樣品需在無菌操作下,用已滅菌的鑷子、匙、試管、剪子等工具進行.
1.3採集樣品後要及時做微生物檢驗,一般不超過3小時.
2樣品檢驗
2.1大廈一般只做常規化驗,即雜菌總數、大腸菌群測定.
2.2所用培養基和試劑為：70%濃度的酒精、0.85%鹽水（可自行配製,定量分裝玻璃瓶和試管內,滅菌後方可使用）祥頃、快速檢驗紙片.
3冷葷、冷飲食品檢驗操作步驟
3.1將檢樣25G（或25ML）剪碎或搗碎放於含有225ML滅菌鹽水中,經過振搖為1:10的均勻稀釋度.
3.2用滅菌吸管吸取1:10稀釋液1ML,注入含有9ML滅菌生理鹽水試管中,振搖混合均勻為1:100的稀釋度.
3.3按以上操作程序,做10倍遞增的稀釋液,每遞增一次,即更換一次1ML滅菌吸管.
3.4選擇2-3個適宜稀釋度,分別移入細胞總數檢驗紙片內.
3.5將檢驗紙片置於37℃溫箱內培養24小時後取出.
3.6計算檢驗紙片內菌落數目,將菌落數目乘以稀釋倍數,即得到每克樣品所含雜菌總數.
3.7檢驗紙片與對照相同,出現紫色或紫紅色菌落,但紙片顏色辯宴蘆不變為大腸菌群陽性；紙片變藍但無紫紅色菌落為大腸菌群陰性.
3.8檢驗紙片出現紫紅色菌落且周圍有黃圈；或紙片攜帶出現紅、黃、藍三種混合色；或紙片變藍出現紫紅色菌落均為大腸菌群陽性.
4餐具檢驗操作步驟
4.1將檢驗紙片用滅菌生理鹽水浸濕後,立即貼於碗、盆、杯等餐具內側表面,30秒後取下,放入滅菌塑料袋內.
4.2將檢驗紙片用滅菌生理鹽水浸濕後,立即抹拭筷子進口端約5CM處（筷子以5支為一件樣品檢驗）,放入滅菌塑料袋內.
4.3將檢驗紙片置於37℃溫箱內培養15小時後取出.
4.4檢驗紙片保持青紫色或淡綠色為陰性；紙片出現紫紅色菌落且周圍有黃圈為陽性.
5檢驗員填寫《食品檢驗報告單》、《物表塗抹微生物檢驗報告單》,並擬定檢驗報告.
二、質量標准
1洗刷：按清洗、消毒、洗滌、清洗、擦乾的程序進行.
2分類：分別用報紙包起來待乾燥消毒.
3消毒：在120℃乾燥箱內消毒40分鍾.
4儲存：放在滅菌後的乾燥箱儲存待用.

㈣ 紙片法和管碟法測定微生物對抗菌葯物敏感性試驗的原理

紙片法和管碟法測定微生物對抗菌葯物敏感性試驗的原理：將菌製成菌懸液用無菌棉檔搜爛簽蘸取菌液在管壁上擠去多餘菌液，塗布整個M2H平板表面，反復3次，每次將平板旋轉60度，保證塗布均勻，35℃培養後菌落呈半漏悶融合狀態，否則影響葯敏結果。

紙片取出後須放室溫10min後方可打開，否則空氣中的水份冷凝在紙片上易潮解，使葯物失效影響葯敏試驗結果。

應用直徑90cm平皿，在水平的無菌台上傾倒，准確量取高壓滅菌後的M2H瓊脂液25ml，使之瓊脂板厚度為4mm。否則厚度過高，使含葯物紙片的葯物半球形擴散的體積加大，導致假耐葯；反之導致假敏感。

管碟法抗生素效行漏價測量

是以抗生素對微生物的抗菌效力作為效價的衡量標准，具有與應用原理相一致、用量少和靈敏度高等優點。管碟法是瓊脂擴散法中的一種，已被各國葯典廣泛採用，作為法定的抗生素生物檢定方法。管碟法抗生素效價測量實驗包括配製試驗所需的樣品及葯品、加註培養基、放置小鋼管、滴加抗生素溶液、雙碟中菌株的培養、抑菌圈測量六個步驟。

㈤ 微生物實驗紙片法測定測定抗生素效價方法的整套實驗步驟

1、配知頃制營養瓊脂培養基
2、倒平板四個並編號1、2、3、4.
3、制菌懸液。4、將抗生素稀釋成不同稀釋度的梯度液。
5、取直徑1cm
圓形濾紙若干，取四個分別放入不同梯度的抗生素溶液中浸泡一會。
6、平板凝固後接種。7、在平板中分別放入四個薯皮浸泡在抗生素溶液的濾紙片，間距適中
8、培養。數猛差9、觀察

㈥ 紙片法測定細菌 應該注意哪些問題

1.細菌的濃度要固定：用接種環挑取菌落，懸浮於NS中，振盪混勻後，調整濁度與0.5麥氏標准比濁管相同，相當於10（8次方）CFU/ml。
2.一般細菌固定用MH培養基
3.制備的菌液必須在15min內使用。
4.接種菌液要均勻：用滅菌棉拭蘸取菌液,在管壁上擠拍拿壓幾次，去掉過多的飢笑菌液。用拭子塗布整個培養基表面，反復幾襲肢搭次，每次將平板旋轉60℃，最後沿平皿周邊繞兩圈，保證塗布均勻。
5.貼紙片：須平板上的水分被瓊脂完全吸收後進行。用鑷子取紙片一張，貼在平板表面。紙片間距不少於24mm，中心距平皿邊緣不少於15mm。
6.貼上紙片後，須在15min內放35℃孵箱培養。不可放在CO2環境中。
7.判定結果：培養後取出平板，測量抑菌環的直徑。抑菌環的邊緣以肉眼見不到細菌明顯生長為限。按抑菌環直徑判斷細菌的敏感性