A. 如何從污水(或土壤)中提取微生物
把污水加蒸餾水分別稀釋10,100,1000倍,然後加入培養基中培養,如果培養出來菌落重合,菌非常多,無法分離,就加大稀釋倍數,直至獲得清晰可分離的菌落,有時甚至是非常小的菌落,要用倒置顯微鏡操作。而培養基則根據要分離的菌的營養類型進行配置,若要獲得多種微生物就要配置多種培養基進行如上操作。對於土壤加水溶解,對溶解液進行如上操作,不溶的部分就不用管了
B. 1.土壤微生物分離計數時主要採用什麼方法
為研究土壤中細菌、真菌、放線菌森坦的數目,我們利用選擇培養基,以便在土壤水溶液中選出目的菌種,在用分濃度梯度法在選擇培養基上培養出但菌落,以便計數。計數時可以根據不同菌種的不同形態學特徵來分辨,如果出現與上述三種以外特性的菌種可以用革蘭氏染色鑒別。
一、主要的實驗葯品與儀器
(1)實驗葯品:牛肉膏,蛋白腖,NaCl,瓊脂;1mol/L NaOH, 1mol/L HCl, 可溶性澱粉 , KNO3 , K2HPO4, MgSO4 ,FeSO4,KH2PO4,葡萄糖
(2)實驗儀器:試管,三角燒瓶,燒杯,量筒,玻棒,培養基分裝器,扭力天平,牛角匙,高壓蒸汽滅菌鍋,pH試紙(pH 5.5—9.0),棉花,牛皮紙,記號筆,麻繩,紗布等。
二、實驗方法
1、細菌分離:取土樣1g,加入99ml無菌水中,震盪10min,製成10-2 土壤稀釋液,再取0.5ml 10-2 土壤稀釋液加入4.5ml無菌水中,製成10-3 土壤稀釋液,以此類推··· ···。取10-5 ,10-6 ,10-7 土壤稀釋液0.1ml加入相應編號培養基中,塗平板,每個稀釋度兩個平板。在30度恆溫培養箱中培養24h後觀察結果。
2、放線菌分離:取土樣1g,加入99ml無菌水中,震盪5min,製成10-2 土壤稀釋液,再取0.5ml 10-2 土壤稀釋液加入4.5ml無菌水中,製成10-3 土壤稀釋液,以此類推··· ···。取10-3 ,10-4 ,10-5 土壤稀釋液0.1ml加入相應編號培養基中,塗平板,每個稀釋度兩個平板。在28度恆溫培養箱中培養5~7d後觀察結果。
3、黴菌分離:取土樣5g,加入95ml無菌水中,震盪5min,製成10-2 土壤稀釋液,再取0.5ml 10-2 土壤稀釋液加入4.5ml無菌水中,製成10-3 土壤稀釋液,以此類推··· ···。將以滅菌的培養基融化,加入鏈黴素溶液,但培養正悄基凝固後,取10-2 ,10-3 ,10-4 土壤稀釋液0.1ml加入相應編號培養基中,塗平板,每個稀釋度兩個平板。在28度恆溫培養箱中培養3~5d後觀察結果。
三、結果與討論 當培養結束後,觀察培養基上的菌落,由於本次試驗的各種經濟,效果,作用等等方面的原因,培養基並不能完全分離土壤中的各種菌類,例如,土壤中除了細菌,黴菌,放線菌舉春渣外還有大量的雜菌,如:酵母菌、真菌、藻類等,微生物,如:各種寄生蟲(卵)等,所以我們要根據細菌,放線菌,黴菌的宏觀物理特性來分別。當進行顯微觀察時,黴菌不用染色,放線菌、細菌要進行簡單的染色,然後再顯微鏡下觀察菌體形態。
C. 土壤中微生物怎樣分離純化培養
1、土樣採集:取10cm左右深層土壤10g備用。
2、制備土壤稀釋液:稱取土壤1g,放入有99mL無菌水的三角瓶中,振盪均勻,即為稀釋10-2的土壤懸液。然後進行十倍梯度稀釋,依次制備 10-3、10-4、10-5
、10-6 、10-7 稀釋度的土壤稀釋液。 3、培養基平板制備:按培養基配方各配置牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基、馬丁氏培養基、高氏Ⅰ號培養基各100ml。滅菌後分別倒3個平板。(高氏Ⅰ號培養基滅菌前加入10滴10%苯酚;馬丁氏培養基倒平板前加入2ml去氧膽酸鈉(2%)和0.4ml 1萬單位/ml鏈黴素)
4、接種:用無菌吸管吸取0.1ml相應濃度土壤稀釋液,以無菌操作技術接種在平板上,塗布均勻。細菌選用10-4、10-5、10-6 三個稀釋度接種於牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基,放線菌與黴菌選用10-2 、10-3、10-4 三個稀釋度,分別接種於高氏Ⅰ號培養基、馬丁氏培養基。(一個稀釋度一個平板)
5、培養:細菌平板於37℃恆溫培養1~2d,放線菌於30℃培養2~3d,黴菌於30℃培養3~5d ,觀察。
6、計數:用稀釋水樣檢測平板的菌落計數方法進行計數,報告細菌總數/(CFU·ml-1)
7、純化:挑取典型菌落接種於相應平板,培養條件同上,培養純化。
D. 如何從土壤中分離純化某種微生物
先取土樣,然後提純稀釋,放在選擇培養基上.例如豎枯分離純化能分解纖維素的微生物,就放在以纖維素為唯首慶一碳源的培養基上.能存活的就是你要的了者纖握.
純手打
E. 土壤微生物的分離方法
取土壤配好適當濃度的溶液,然後稀釋成十的負七次方或者六次方這樣。
用微生物接種的方法在酒精燈邊上稀釋液拿微滴管取500微升置入固體培養基,然後加入玻璃小球搖晃,這是為了讓稀釋液均勻分布。然後37度培養一天到兩天就行了,不能太久不然會長雜菌。
就是這樣吧,抱歉細節沒有寫,太長了。注意過程無菌
F. 如何從復雜的土壤樣本中分離我們所需要的目標微生物
如何從復雜的土壤樣本中分離我們所需要的目標微生物?
有機肥之中有機質的分解轉化是一個復雜的過程,微生物活動在分解轉化過程之中起著重要作用。土壤環境非常適合微生物活動,所以土壤之中天然微生物數量最多。因為土壤之中微生物種類繁多,數量大;一克土壤之中,微生物有幾十種到幾百種,幾億到幾十億個,土壤微生物繁殖迅速,在有機質的轉化和分解之中起著重要作用。土壤微生物包括細菌、放線菌、真菌和藻類。
(1)細菌
細菌是一種單細胞微生物,是土壤之中分布最廣、數量最多的微生物。細菌有三種基本形態:球形、桿狀和螺旋形;有球菌、桿菌和螺旋體(40種);包括弧菌&41;三種類型。土壤細菌按其營養類型可分為自養菌、兼性自養菌和異養菌。
(2) 真菌
土壤真菌分布廣泛,適應廣泛的酸性條件,在PH4.0條件之下生長良好,對森林土壤有機質的轉化起著重要作用。土壤真菌是異養的。它們必須從土壤有機質之中獲取能量和碳源,並在發育過程之中需要良好的供氧。根據真菌與樹木的關系及其營養類型,真菌可分為腐生真菌、寄生真菌和共生真菌。
(3) 放線菌
放線菌是細長的菌絲體,呈分枝狀或放射狀。它們在土壤之中僅次於細菌。大多數是腐生植物。許多放線菌能分解纖維素、澱粉、脂肪、木質素和蛋白質。
G. 土壤中篩選微生物的具體步驟
在100ml培養基(含1.5%的NaCl)中加入1.5克土壤進行初步富集培養。富集培養1星期後取出1.5ml的菌液加入到100ml的培養基中再次富集培養一星期,再取出1.5ml的菌液加入到100ml的培養基中富集培養一星期。取出50ul富集培養菌液塗板,挑取單菌落在試管中富集培養。
H. 如何從土壤中分離得到一個微生物的純培養體
首先你需要確定你分離的是什麼微生物,然後按照以下步驟
1.
選擇合適的富集培養基,加入土壤把目標菌屬富集
2.
選擇合適的選擇性培養基把目標菌屬分離出來。
3.
通過稀釋平板塗布,培養三天後,觀察不同的菌落,在平板反面用記號筆編號不同的菌落。
4.
把標記的菌落在培養基上劃線分離,每一個編號劃線三個平板
5.
待平板長出單菌落後,顯微鏡鏡檢,觀察目標菌是否單一。
單一菌落即為微生物的純培養體。