㈠ 紫外分光光度法的專屬性實驗怎麼做
實驗內容及操作步驟:
1.比色皿的配對性 將蒸餾水注入到缺沖比色亞中,以其中一個比色業作空白,在440 nm 波長處分別測定其他各比色業中的透光率。
2. 波長精度的檢查 用KMn0,溶液的最大吸收波長 525nm 為標准,在待測儀器上測繪 KMnO,溶握扮戚液的吸收曲線,若測得的最大吸收波長在525土 1nm 以內,則儀器的波長精度符合使用要求。
3. 重復性以段陵0.02mol/L的Hs0.溶液的透光率為100%,用同一KCr.0-溶液連續測定7次,求出極差,如小於0.5%,則重復性符合要求,
4. 吸收值的准確度考察,取KaCr.0,溶液,在以下波長處測定並計算其吸收系數,並與規定的吸收系數比較,如下表所示,其相對偏差在士1%以內,則吸收值的准確度符合要求。
㈡ 我是做ELISA實驗的初學者,最近在建立雙抗體夾心法的檢測方法,不知道如何確定包被濃度和抗原濃度,謝謝!
你是不知道包被的濃度還是不知道怎樣配治包被液啊?
我這里有份ELISA的實驗過程。不過是除掉前兩部的。
1、 加被檢抗原(重組蛋白或自然樣品):用稀釋液(DS01、AS01、AS02、AS03、AS04)將被檢抗原按實驗設計稀釋,每孔100µl,同時用稀釋液作空白對照。封板膜封板,室溫放置兩小時。
2、 洗滌:到盡板孔中的液體,加滿洗滌液(WS03),靜止放十秒,洗四次,最後在毛巾或吸水紙上拍干板子:
3、 加檢測抗體:將生物素標記的檢測抗體稀釋適當濃度(稀釋液DS01),每孔100 µl封板膜做姿封板,室溫放置一小時:
4、 洗滌:到盡板孔中的液體培升,加滿洗滌液(WS03),靜止放十秒,洗四次,最後在毛巾或吸水紙上拍干板子:
5、 加親和素-辣根過氧化酶(HRP)稀純中絕釋適當濃度(稀釋液HD01)每孔100µl,封板膜封板,室溫放置30分鍾:
6、 加底物:新鮮配製的四甲基聯苯胺溶液(TMB),每孔100µl,室溫暗處放置30分鍾:
7、 加終止液(SS01):每孔100µl,立即讀值:
8、 觀察結果:用酶標儀記錄450nm讀數.
㈢ 分光光度計使用時為什麼要用空白調0和100的透光率,為什麼超過1的數值不能用,為什麼要做空白試驗。
空白也有可能會吸收部分光的,因此需要調零,以扣除空白的影響,樣品與空白間吸光值的差值才會與樣品中被測物質含量成正比。一般來說超過1後OD與樣品濃度就不成線性了。超過1說明透光率在10%以下,一般來說在分析儀器量程的頭和尾准確度都較低。
100%-200%的用法,除了上面這種情況外,還有試驗經常會用一定濃度的物質(不一定透明)作空白的,然後加另一種物質反應,可能生成透明裂春的物質,透光率就大於100%,當然事先可能不確定,所以0-200%的測量范圍很有用。提高試驗效率,特別是杜絕浪費實驗材料。
(3)生物素實驗透光率怎麼做擴展閱讀:
空白實驗是在不加樣品的情況下,用測定樣品相同的方法、步驟進行定量分析,把所得結果作為空白值,從樣品的分析結果中扣除。這樣可以消除由於試劑不純或試劑干擾等所造成的系統誤差。其是分析化學實驗中常用的一種方法,它可以減小實驗誤差。納碧
比如在溴酸鉀法測定苯酚的實驗中,由於溴的易揮發洞源舉性在相同的實驗下,將溴酸鉀(含有溴化鉀)加入另一試劑瓶中,待測溶液苯酚用去離子水代替,其它條件保持不變。這樣可以減少由於溴的揮發損失等因素而引起的誤差。
㈣ 吸光度a與透光率t之間的關系如何分光光度法測定時,a值取什麼范圍為宜為什麼
吸光度A與透光率T之間的關系:
分光光度法測定時,一般要求吸光度A在0.2-0.8之間,因為當吸光度在0.187-0.824之間時,濃度的相對誤差在2%以內。
㈤ 生物:設計一個植物趨光性的實驗步驟
一.植物向光性實驗
1.取若干小麥種子放溫水中浸泡一天,使它充分吸水膨脹。然後將其播在墊有吸水紙的培養皿中,(澆上一些清水,以保持濕潤),放在溫暖的暗處培養,要定時向培養皿中澆水,不讓乾燥,幾天後,胚芽鞘長出
3~5
cm,注意在第一片真葉長出胚芽鞘之前做以下實驗。
2.設計幾組不同實驗:
(1)選5株左右幼苗,在其胚芽鞘尖端套上鋁箔帽。(把鋁箔剪成1cm見方的小塊,包在大號針上控成小管子成為箔套)。鄭氏
(2)選5株左右幼苗,在其胚芽鞘尖端廳姿套上鋁箔會。(把鋁箔剪成1cm見方的小塊,
製成為箔套)。
(3)選
5株左右的幼苗將其胚芽鞘尖端
0.5
cm切去。
(4)其餘幼苗作為對照。
3.將上過培養皿放入一側開有小孔的小盒內,讓有孔一側朝向光源,使光能從小孔射入,經24小時後,觀察三種不同處理的幼苗對單側光照的反應喊伏散和胚芽鞘生長的狀況。
根據幼苗變化情況填表:
類別
生長與否
彎曲與否
解釋
套上錫箔紙帽
套上錫箔紙環
切去尖端
未做處理
4.驗證向光性形成的原因。
二.①用剪刀在不透光的紙盒一側挖一個直徑為1cm的孔,待模擬單側光照時使用。②將幾株長勢相同但真葉尚未長出胚芽鞘的小麥幼苗依次排開,分別栽種在兩個花盆中。在幼苗的旁邊插一根火柴桿,作為對比的參照物。③將製作好的遮光罩扣住花盆(一組用不透光的紙盒,另一組用一側帶小孔的紙盒),白天將裝置置於陽光充足的地方,夜間以台燈代替光源,並使光從小孔中透入紙盒。④每天打開紙盒,觀察幼苗的生長情況。記錄下高度、傾斜角及當日溫度、天氣等情況,並間斷地拍照,保留圖片記錄。但是要注意,打開紙盒觀察實驗現象的時間盡可能的短,並保持透光孔的方向與前次一致。⑤分析實驗結果,並得出結論。