1. 微生物是怎麼樣被克隆的
一．實驗目的
在油鏡下觀察糞便中微生物的個體形態
二．實驗原理
微生物的細胞小且透明，在普通光學顯微鏡下不易識別，必須對它們進行染色，使經染色後的菌體與背景形成明顯的色差，從而能更清楚地觀察到其形態和結構。因此，微生物染色技術是觀察微生物形態結構的重要手段。
革蘭氏染色反應是細菌分類和鑒定的重要性狀。它是1884年由丹麥醫師gram創立的。革蘭氏染色法（gram
stain）不僅能觀察到細菌的形態，而且還可將所有細菌區分為兩大類：染色反應呈藍紫色的稱為革蘭氏陽性細菌，用g
表示；染色反應呈紅色（復染顏色）的稱為革蘭氏陰性細菌，用g-表示。細菌對革蘭氏染色的不同反應，是由於它們細胞壁的成分和結構不同而造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由肽聚糖形成的網狀結構組成的，在染色過程中，當用乙醇處理時，由於脫水而引起網狀結構中的孔徑變小，通透性降低，使結晶紫-碘復合物被保留在細胞內而不易脫色，因此，呈現藍紫色；革蘭氏陰性細菌的細胞壁中肽聚糖含量低，而脂類物質含量高，當用乙醇處理時，脂類物質溶解，細胞壁的通透性增加，使結晶紫-碘復合物易被乙醇抽出而脫色，然後又被染上了復染液（番紅）的顏色，因此呈現紅色。
革蘭氏染色需用四種不同的溶液：鹼性染料（basic
dye）初染液；媒染劑（mordant）；脫色劑（decolorising
agent）和復染液（counterstain）。鹼性染料初染液的象在細菌的單染色法基本原理中所述的那樣，而用於革蘭氏染色的初染液一般是結晶紫（crystal
violet）。媒染劑的作用是增加染料和細胞之間的親和性或附著力，即以某種方式幫助染料固定在細胞上，使不易脫落，碘（iodine
）是常用的媒染劑。脫色劑是將被染色的細胞進行脫色，不同類型的細胞脫色反應不同，有的能被脫色，有的則不能，脫色劑常用95%的酒精（ethanol）。復染液也是一種鹼性染料，其顏色不同於初染液，復染的目的是使被脫色的細胞染上不同於初染液的顏色，而未被脫色的細胞仍然保持初染的顏色，而且將細胞區分成g
和g-兩大類群，常用的復染液為番紅。
三．實驗材料
1．菌種：？？？
2．器材：顯微鏡，載玻片，染色缸等
3．染色液：草酸銨結晶紫染色液，路哥氏（lugol）碘液，95%乙醇，0.5%沙黃染色液
四．實驗步驟
1．
塗片
取糞便少許，用蒸餾水將其浸泡，將一滴浸泡液滴到載玻片，乾燥、固定。固定時通過火焰1—2次即可，不可過熱，以載玻片不燙手為宜。
2．
染色
（1）初染
加草酸銨結晶紫一滴，約一分鍾，水洗。
（2）媒染
滴加碘液沖去殘水，並覆蓋約一分鍾，水洗。
（3）脫色
將載玻片上的水甩凈，並襯以白背景，用95%酒精滴洗至流出酒精剛剛不出現紫色時為止，約20—30分鍾，立即用水沖凈酒精。
（4）復染
用番紅液染1—2分鍾，水洗。
（5）鏡檢
乾燥後，置油鏡觀察。革蘭氏陰性菌呈紅色，革蘭氏陽性菌呈紫色。以分散開的細菌的革蘭氏染色反應為准，過於密集的細菌，常常呈假陽性。
革蘭氏染色的關鍵在於嚴格掌握酒精脫色程度，如脫色過度，則陽性菌可被誤染為陰性菌；而脫色不夠時，陰性菌可被誤染為陽性菌。此外，菌齡也影響染色結果，如陽性菌培養時間過長，或已死亡及部分菌自行溶解了，都常呈陰性反應。
五．注意事項
1．
革蘭氏染色成敗的關鍵是脫色時間，如脫色過度，革蘭氏陽性菌也可被脫色而被誤認為是革蘭氏陰性菌；如脫色時間過短，革蘭氏陰性菌也會被誤認為是革蘭氏陽性菌。因此必須嚴格把握脫色時間。
2．
選用培養18—24小時菌齡的細菌為宜，若細菌太老，由於菌體死亡或自溶常使革蘭氏陽性菌轉呈陰性反應。
糞便中主要的細菌是大腸桿菌。
2. 怎樣克隆生物
克隆技術
克隆技術即無性繁殖技術。通常的有性生殖是由雌雄交配，精子和卵子結合發育成胚胎，經妊娠後產出新的個體。克隆技術不需要雌雄交配，不需要精子和卵子的結合，只需從動物身上提取一個單細胞，用人工的方法將其培養成胚胎，再將胚胎植入雌性動物體內，就可孕育出新的個體。這種以單細胞培養出來的克隆動物，具有與單細胞供體完全相同的特徵，是單細胞供體的「復製品」。英國英格蘭科學家和美國俄勒岡科學家先後培養出了「克隆羊」和「克隆猴」。克隆技術的成功，被人們稱為「歷史性的事件，科學的創舉」。有人甚至認為，克隆技術可以同當年原子彈的問世相提並論。
克隆技術可以用來生產「克隆人」，可以用來「復制」人，因而引起了全世界的廣泛關注。對人類來說，克隆技術是悲是喜，是禍是福？唯物辯證法認為，世界上的任何事物都是矛盾的統一體，都是一分為二的。克隆技術也是這樣。如果克隆技術被用於「復制」像希特勒之類的戰爭狂人，那會給人類社會帶來什麼呢？即使是用於「復制」普通的人，也會帶來一系列的倫理道德問題。如果把克隆技術應用於畜牧業生產，將會使優良牲畜品種的培育與繁殖發生根本性的變革。若將克隆技術用於基因治療的研究，就極有可能攻克那些危及人類生命健康的癌症、艾滋病等頑疾。克隆技術猶如原子能技術，是一把雙刃劍，劍柄掌握在人類手中。人類應該採取聯合行動，避免「克隆人」的出現，使克隆技術造福於人類社會。
——《素質教育新學案》
克隆技術的危害？
...盡管如此，克隆技術的巨大理論意義和實用價值促使科學家們加快了研究的步伐，從而使動物克隆技術的研究與開發進入一個高潮。 ... ...這些成果說明克隆技術有可能成為保護和拯救瀕危動物的一條新途徑。 四、克隆技術的應用前景 克隆技術已展示出廣闊的應...
寒冰163 - 2005-12-7 19:38 - 最佳回答者: 十字軍刀客 - 教育/科學 > 自然科學
克隆技術是怎麼回事？
克隆技術 克隆技術即無性繁殖技術。通常的有性生殖是由雌雄交配，精子和卵子結合發育成胚胎，經妊娠後產出新的個體。克隆技術不需要雌雄交配，不需要精子和卵子的結合，只需從動物身上提取一個單細胞，用人工的方法將其培養成胚胎，再將胚胎植入雌性動...
sfn123 - 2005-12-19 17:52 - 最佳回答者: 272928861ml - 教育/科學
克隆技術有關資料
...科學家把人工遺傳操作動、植物的繁殖過程叫克隆，這門生物技術叫克隆技術。 克隆技術的設想是由德國胚胎學家於1938年首次提 出的，1952年，科學家首先用青蛙開展克隆實驗，之後不斷有人利用各種動物進行克隆技術研究。由於該項技術幾乎沒有取得進展，研究...
jywjyw333 - 2006-3-5 13:42 - 最佳回答者: leijunyu - 教育/科學 > 學習幫助
我國的克隆技術是世界前列嗎?
... 動物克隆技術被生物科學家譽為「生物原子彈」，各國都在競相發展。動物克隆技術分胚胎克隆和體細胞克隆。相比而言，體細胞克隆... ... 西北農林科技大學動物克隆技術科研群體，在1990年就掌握了胚胎克隆技術，繁育出世界首批克隆山羊。1995年又利用胚胎克隆技術，...
仙人指3 - 2005-9-21 13:01 - 最佳回答者: 我字不帥 - 教育/科學 > 自然科學
以現在的克隆技術能把一個死去的人克隆出來嗎????
只有有這個人的活細胞。提取這個細胞的DNA，然後通過RNA復制出千千萬萬個細胞。以現在的克隆技術是可以做到的。以前這個人某處... ...目前的克隆技術，只能克隆生命的肉體而已，並不能克隆生命的「靈魂」。也就是說，克隆出來的人無感情，以前學過的東西、遇過的...
shundechaoren - 2006-2-20 18:10 - 最佳回答者: kingkongs - 教育/科學 > 自然科學
克隆技術和第一隻克隆羊的情況
...它的誕生被視為20世紀末最重要的科學成就之一，它引發了全世界科學家研究克隆技術的熱潮，也導致了大量技術和倫理方面的爭論。 ... ...當時，曾領導克隆多利的研究的伊恩·威爾穆特教授曾表示，多利患有關節炎可能意味著克隆技術「效率低」，需要進一步研究。(完) ...
5072159 - 2005-10-9 20:36 - 最佳回答者: 晉山河 - 社會/文化
克隆技術是什麼東西
克隆技術其實就是從動物A上拿一個細胞，取出細胞核！再到同種動物B的身上拿一個細胞，去掉細胞核！把取出來的細胞核放到另一個去掉細胞核的細胞中！再把它放到同種動物母體C的子宮中！這樣將C將會生出一個和A一模一樣的動物來！還有就是直接拿一種動物的細胞...
wasong - 2005-10-7 16:18 - 最佳回答者: 紫色殘雲 - 教育/科學 > 入學信息
能不能用克隆技術增加大熊貓的數量?為什麼?
...而克隆技術則不能增加大熊貓的進化過程。 自上世紀90年代以來，北京動物園、四川大熊貓繁育中心、卧龍自然保護區的大熊貓繁育中心等幾個地方都比較成功地繁殖了大熊貓；而在秦嶺650平方公里的地方，大約150隻大熊貓在13年的時間內始終處於相對穩定的狀...
小小花生 - 2005-12-28 21:42 - 最佳回答者: 我是張楚 - 教育/科學 > 自然科學
克隆技術會在生活中應用嗎？為什麼？
看運用在什麼地方因為現在的克隆技術還不是很發達，掌握得也不是很到位，所以容易出些差錯。如果運用得好的話，可以運用到人體重要器官的移植以及對稀有動物的繁衍但對人的克隆還在爭論中，因為這樣不利於人的辨認與管理。容易出現政治問題
409257127 - 2005-11-4 20:39 - 最佳回答者:匿名 - 教育/科學 > 自然科學
法律更有利於控制克隆技術的惡性發展
不是法律有利於干嗎，而是制定相應規制的法律更有利於控制克隆技術惡性發展。
克隆」是從英文「clone」音譯而來，在生物學領域有3個不同層次的含義。
1．在分子水平，克隆一般指DNA克隆(也叫分子克隆)。含義是將某一特定DNA片斷通過重組DNA技術插入到一個載體(如質粒和病毒等)中，然後在宿主細胞中進行自我復制所得到的大量完全相同的該DNA片斷的「群體」。
2．在細胞水平，克隆實質由一個單一的共同祖先細胞分裂所形成的一個細胞群體。其中每個細胞的基因都相同。比如，使一個細胞在體外的培養液中分裂若干代所形成的一個遺傳背景完全相同的細胞集體即為一個細胞克隆。又如，在脊椎動物體內，當有外源物(如細菌或病毒)侵入時，會通過免疫反應產生特異的識別抗體。產生某一特定抗體的所有漿細胞都是由一個B細胞分裂而成，這樣的一個漿細胞群體也是一個細胞克隆。細胞克隆是一種低級的生殖方式－無性繁殖，即不經過兩性結合，子代和親代具有相同的遺傳性。生物進化的層次越低，越有可能採取這種繁殖方式。
3．在個體水平，克隆是指基因型完全相同的兩個或更多的個體組成的一個群體。比如，兩個同卵雙胞胎即為一個克隆！因為他（她）們來自同一個卵細胞，所以遺傳背景完全一樣。按此定義，「多利」並不能說成是一個克隆！因為「多利」只是孤單的一個。只有當那些英國胚胎學家能將兩個以上完全相同的細胞核移植到兩個以上完全相同的去核卵細胞中，得到兩個以上遺傳背景完全相同的「多利」時才能用克隆這個詞來描述。所以在那篇發表於1997年2月出版在《Nature》雜志上的轟動性論文中，作者並沒有把「多利」說成是一個克隆。
另外，克隆也可以做動詞用，意思是指獲得以上所言DNA、細胞或個體群體的過程。
二、克隆技術
1．DNA克隆
現在進行DNA克隆的方法多種多樣，其基本過程如下圖所示(未按比例)
可見，這樣得到的DNA可以應用於生物學研究的很多方面，包括對特異DNA的鹼基順序的分析和處理，以及生物技術工業中有價值蛋白質的大量生產等等。
2．生物個體的克隆
(1)植物個體的克隆
在20世紀50年代，植物學家用胡蘿卜為模型材料，研究了分化的植物細胞中遺傳物質是否丟失問題，他們驚奇地發現，從一個單一已經高度分化的胡蘿卜細胞
可以發育形成一棵完整的植株!由此，他們認為植物細胞具有全能性。從一棵胡蘿卜中的兩個以上的體細胞發育而成的胡蘿卜群體的遺傳背景完全一樣，故為一個克隆。如此的植物的克隆過程是一個完全的無性繁殖過程!
(2)動物個體的克隆
① 「多利」的誕生
1997年2月27日英國愛丁堡羅斯林(Roslin)研究所的伊恩·維爾莫特科學研究小組向世界宣布，世界上第一頭克隆綿羊「多利」(Dolly)誕生，這一消息立刻轟動了全世界。
「多莉」的產生與三隻母羊有關。一隻是懷孕三個月的芬蘭多塞特母綿羊，兩只是蘇格蘭黑面母綿羊。芬蘭多塞特母綿羊提供了全套遺傳信息，即提供了細胞核（稱之為供體）；一隻蘇格蘭黑面母綿羊提供無細胞核的卵細胞；另一隻蘇格蘭黑面母綿羊提供羊胚胎的發育環境——子宮，是「多莉」羊的「生」母。其整個克隆過程簡述如下：
從芬蘭多塞特母綿羊的乳腺中取出乳腺細胞，將其放入低濃度的營養培養液中，細胞逐漸停止了分裂，此細胞稱之為供體細胞；給一頭蘇格蘭黑面母綿羊注射促性腺素，促使它排卵，取出未受精的卵細胞，並立即將其細胞核除去，留下一個無核的卵細胞，此細胞稱之為受體細胞；利用電脈沖的方法，使供體細胞和受體細胞發生融合，最後形成了融合細胞，由於電脈沖還可以產生類似於自然受精過程中的一系列反應，使融合細胞也能象受精卵一樣進行細胞分裂、分化，從而形成胚胎細胞；將胚胎細胞轉移到另一隻蘇格蘭黑面母綿羊的子宮內，胚胎細胞進一步分化和發育，最後形成一隻小綿羊。出生的「多莉」小綿羊與多塞特母綿羊具有完全相同的外貌。
一年以後，另一組科學家報道了將小鼠卵丘細胞(圍繞在卵母細胞外周的高度分化細胞)的細胞核移植到去除了細胞核的卵母細胞中得到20多隻發育完全的小鼠。如呆「多利」因為只有一隻，還不夠叫做克隆羊的話，這些小鼠
就是名副其實的克隆鼠了。
② 通過細胞核移植克隆小鼠的基本過程
在本實驗中，卵丘細胞是經如下過程得到的：通過連續幾次注射絨毛膜促性腺激素，使雌鼠誘導成高產卵量狀態。然後從雌鼠輸卵管中收集卵丘細胞與卵母細胞的復合體。經透明質酸處理使卵丘細胞散開。選擇直徑為10－12微米的卵丘細胞用作細胞核供體（前期實驗表明，若用直徑更小或更大的卵丘細胞的細胞核，經過細胞核移植的卵母細胞很少發育到8細胞期）。所選擇的卵丘細胞保持在一定的溶液環境中，在3小時內進行細胞核移植（與此不同的是，在獲得「多利」時用作細胞核供體的乳腺細胞先在培養液中傳代了3－6次）
卵母細胞（一般處於減數分裂中期 II ）通過與上面描述類似的方法，從不同種的雌鼠中收集。在顯微鏡下小心地用直徑大約7微米的細管取出卵母細胞的細胞核，盡量不取出細胞質。同樣小心取出卵丘細胞的細胞核，也盡量去除所帶的細胞質（通過使取出的細胞核在玻璃管中往復運動數次，以去除所帶的少量的細胞質）。在細胞核被取出後5分鍾之內，直接注射到已經去除了細胞核的卵母細胞中。進行了細胞核移植的卵母細胞先放在一種特製的溶液中1－6小時，然後加入二價的鍶離子（Sr2+）和細胞分裂抑素B。前者使卵母細胞激活，後者抑制極體的形成和染色體的排除。再取出處理過的卵母細胞，放在沒有鍶和細胞分裂抑素B的特製的溶液中使細胞分裂形成胚胎。
不同階段的胚胎（從2細胞期到胚泡期）被分別植入幾天前與已經結扎雄鼠交配過的假孕母鼠的輸卵管或子宮中發育。發育完全的胎兒鼠在大約19天後通過手術取出。
目前胚胎細胞核移植克隆的動物有小鼠、兔、山羊、綿羊、豬、牛和猴子等。在中國，除猴子以外，其他克隆動物都有，也能連續核移植克隆山羊，該技術比胚胎分割技術更進一步，將克隆出更多的動物。因胚胎分割次數越多，每份細胞越少，發育成的個體的能力越差。體細胞核移植克隆的動物只有一個，就是「多利」羊。
三、克隆技術的福音
1． 克隆技術與遺傳育種
在農業方面，人們利用「克隆」技術培育出大量具有抗旱、抗倒伏、抗病蟲害的優質高產品種，大大提高了糧食產量。在這方面我國已邁入世界最先進的前列。
2． 克隆技術與瀕危生物保護
克隆技術對保護物種特別是珍稀、瀕危物種來講是一個福音，具有很大的應用前景。從生物學的角度看，這也是克隆技術最有價值的地方之一。
3． 克隆技術與醫學
在當代，醫生幾乎能在所有人類器官和組織上施行移植手術。但就科學技術而言，器官移植中的排斥反應仍是最為頭痛的事。排斥反應的原因是組織不配型導致相容性差。如果把「克隆人」的器官提供給「原版人」，作器官移植之用，則絕對沒有排斥反應之慮，因為二者基因相配，組織也相配。問題是，利用「克隆人」作為器官供體合不合乎人道？是否合法？經濟是否合算？
克隆技術還可用來大量繁殖有價值的基因，例如，在醫學方面，人們正是通過「克隆」技術生產出治療糖尿病的胰島素、使侏儒症患者重新長高的生長激素和能抗多種病毒感染的干撓素，等等。
克隆技術即無性繁殖技術。通常的有性生殖是由雌雄交配，精子和卵子結合發育成胚胎，經妊娠後產出新的個體。克隆技術不需要雌雄交配，不需要精子和卵子的結合，只需從動物身上提取一個單細胞，用人工的方法將其培養成胚胎，再將胚胎植入雌性動物體內，就可孕育出新的個體。這種以單細胞培養出來的克隆動物，具有與單細胞供體完全相同的特徵，是單細胞供體的「復製品」。英國英格蘭科學家和美國俄勒岡科學家先後培養出了「克隆羊」和「克隆猴」。克隆技術的成功，被人們稱為「歷史性的事件，科學的創舉」。有人甚至認為，克隆技術可以同當年原子彈的問世相提並論。
克隆技術可以用來生產「克隆人」，可以用來「復制」人，因而引起了全世界的廣泛關注。對人類來說，克隆技術是悲是喜，是禍是福？唯物辯證法認為，世界上的任何事物都是矛盾的統一體，都是一分為二的。克隆技術也是這樣。如果克隆技術被用於「復制」像希特勒之類的戰爭狂人，那會給人類社會帶來什麼呢？即使是用於「復制」普通的人，也會帶來一系列的倫理道德問題。如果把克隆技術應用於畜牧業生產，將會使優良牲畜品種的培育與繁殖發生根本性的變革。若將克隆技術用於基因治療的研究，就極有可能攻克那些危及人類生命健康的癌症、艾滋病等頑疾。克隆技術猶如原子能技術，是一把雙刃劍，劍柄掌握在人類手中。人類應該採取聯合行動，避免「克隆人」的出現，使克隆技術造福於人類社會。
克隆（clone）是指通過無性生殖而產生的遺傳上均一的生物群，即具有完全相同的遺傳組成的一群細胞或者生物的個體。克隆在希臘語中是「小樹枝葉」的意思，用以指無性增殖物。現在則指個體、細胞、基因等不同水平上的無性增殖物。（1）個體水平：在植物的無性增殖中，植物的發芽、插條等由同一個體通過無性生殖而增長的個體群均被視為克隆。採用組織培養方法可使植物細胞培養發育成完全的個體（愈傷組織），採用這種方法得到的具有相同基因型的個體群，也被稱為克隆；在動物的無性增殖中，典型的例子是採用核移植實驗方法，把分化細胞的核移植到一個事先去核的蛙卵中，讓其發育並得到克隆蛙。克隆動物具有均一遺傳性質，在研究環境條件對發育、分化的影響以及葯物的檢測方面都是重要的實驗材料。在哺乳動物中，由於細胞分化，核異質化的程度加劇，因此核移植尚無成功的例子。（2）細胞水平：由一個細胞經過有絲分裂生成的細胞群叫克隆。但如果培養細胞發生轉化，則很容易引起染色體變異。（3）基因水平：利用基因重組操作技術，使特定的基因與載體結合，在細菌等宿主中進行增殖，有可能得到均勻的基因群。克隆基因在基因功能與精細結構的關系等基礎研究及在有用物質的生產方面，均已得到應用。
在上述3種水平上，增殖並分離獲得單一的克隆群稱為克隆化。此時，克隆一詞也可作為動詞理解。克隆是重組DNA技術的核心部分。事實上，克隆技術現已被人們用來通過營養方式繁殖病毒等微生物和植物的純種，從而保證了這些生物基因組的准確連續性。現在，克隆這個詞還包括單個自主遺傳因子的分離與保存。細胞生物的克隆只需要營養培養基，而基因的克隆則需要某種載體復制子、特定的寄主細胞和營養培養基。各種類型生物的克隆技術在生物工程中均有其重要作用。