A. 跪求:微生物保存方法,各種保存方法的保存時間
1斜面低溫保藏法:有芽孢細菌存半年,無則一個月。2液體石蠟保藏:兩年。3沙土保藏:十年。4麩皮保藏:一年。5懸液保藏:一到兩年。6冷凍真空乾燥法:五到十五年。7液氮超低溫法:十到二十年。8低溫保藏法:一年。9甘油保藏法:半年
B. 生物樣品如何保存
1.必要時添加穩定劑。穩定劑通常對於保存純的蛋白是必需的。
2.血清、培養物的上清和腹水應當分裝成小份後保存在-20度或-70度。
3.避免反復凍融或凍干/重溶解過程,這樣很可能會降低生物活性。
4.避免接近穩定極限的條件,如pH值或鹽濃度、還原劑或螯合劑等。
5.存放於密閉容器中保存在4°C可以減少細菌生長並降低蛋白酶活性。如果在4°C超過24小 時,可添加防腐劑。
6.疊氮化鈉可干擾多種偶聯方法和生物學檢測,並且有毒,可用脫鹽柱除去。
注意這些都是常規建議,不適用於所有的生物樣品。在採用這些建議之前要參考樣品特定的性質以及計劃的用途。
C. 生物製品是怎樣進行保存和運輸的呢
1各生產單位應有冷藏設備,供儲存半成品及成品之用。2 下列各項半成品、成品須分別儲存。如條件可能時應單設儲存庫,否則亦應隔開放置,以免混淆。2.1尚未或正在除菌、滅活、解毒之半成品,必須由製品部門隔離儲存。2.2已經除菌、滅活或解毒之半成品,在尚未得出檢定結果前,仍由製造部門分別儲存。2.3 待分裝製品及分裝後在檢定中或檢定合格尚未包裝之製品,由分、包裝室分別儲存。
2.4 已經檢定合格包裝後之製品,應交成品庫。3 儲存的半成品、成品的容器應有明顯標志,注冊品種、規格、數量,以及貯存日期。4 儲存的半成品、成品應填寫庫存貨位卡及分類帳,由專人負責保管、整理,進出均需及時填寫並簽字。5 各種半成品瓶口須嚴密包紮或封口。6 各種半成品、成品按各該製品製造及檢定規程所規定的溫度、濕度及避光要求儲存,應定時檢查和記錄儲存庫的溫度。7 半成品、成品儲存庫應指定專人負責管理。
8 有疑問之半成品或成品須加明顯標志註明「保留」字樣,待決定後再作處理。9 檢定不合格而應予廢棄之半成品或成品,應及時處理。10 超過規定儲存時間之半成品(如菌苗原液等)或已過有效期之成品,應及時廢棄。
11 生物製品在運輸期間應遵守下列原則:
11.1 盡量採用最快速的運輸方法,以縮短運輸時間。11.2 盡量用冷藏方法運輸,盡量避免夏季運送製品。11.3 冬季運輸應注意防止製品發生凍結。
D. 有什麼方法能使生物體不經石化作用而保存下來
木乃伊不就是嗎?沒有經過石化,但生物體保存下來了。
在醫學上,通常是用甲醛浸泡,也是可以的。
另外還有一些生物標本的製作方法,各有各的門道。
琥珀中的小動物就是沒有經過石化保存下來的生物體。
E. 關於生物試劑的存放和運輸
乾冰是固體二氧化碳,溫度為零下78℃,濕冰就是冰的溫度,一般為冷凍條件的溫度,如在零下20℃冷凍的冰的溫度為零下20℃。對於一些酶類等蛋白產品,需要乾冰運輸,其他大多數生化試劑採用濕冰即可;
運輸常溫試劑的時候,不需要冰。對於需要冷藏的試劑,在用冰運輸的時候,要把試劑同冰之間有隔離物,不能直接接觸試劑包裝,如試劑外面加裝盒子,在盒子外面加冰,基本都採用冰塊,不能直接用水結成的冰,因為冰融化後會形成水,容易污染試劑。加冰塊的量沒有嚴格限制,以試劑四周都處於冰塊包圍為宜。
不要小看生物試劑的量,很多抗體類試劑、酶類試劑是很貴的,可以達到上千元/mg(即每公斤幾百,上千萬元),其保存條件也是很嚴格的,否則容易失去活性。運輸的時候建議使用冰塊,而非碎冰,主要原因:1)碎冰的溫度高,而冰塊的溫度更低;2)冰塊可以更長時間的保持低溫;3)碎冰容易化成水。
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生物製品由蛋白質、脂肪、糖和核酸組成,在保存和運輸過程中須防止失活。
主要影響因素:
①水:促進化學反應
②熱:溫度每升高10度,反應速度加快一倍。生物活性物質:-10℃保存;病毒-70℃保存。
③氧:參與化學反應,應隔氧保存。
④光:某些化學反應激發能的潛在來源。需避光保存。
⑤微生物:利用活性物質生長繁殖。
一、生物製品的保存與運輸溫度
多數生物製品都是對溫度敏感,保存和運輸生物製品時往往對溫度有一定要求。疫苗:從製造疫苗部門直至使用疫苗的現場之間的各個環節,疫苗均應存在規定的保冷狀態下,這一保冷系統,在EPI活動在中稱為冷鏈系統。衛生部頒布的《計劃免疫工作技術管理規程》對不同疫苗保存運輸溫度做了統一規定。
二、冷凍乾燥技術
生物製品以水溶液或混懸液狀態存在並起活性作用。隨著溶液溫度升高,分子擁有較多能量易於外界物質起化學反應,導致變性失活。除去溶液水分常用方法:
常溫或高溫下蒸發,缺點:會加速生物活性物質破壞,改變物質在乾燥後溶解性能,故不能使用。
冷凍乾燥:溶液低溫乾燥→降低溫度水溶液凍結→水的蒸汽壓力降低,難以揮發→降低氣壓→使結成冰的水直接升華成為水蒸氣→使其附著於一個溫度更低的金屬表面→再凝結成冰→使活性物質中的固態水分不斷升華,不斷凝結在冷凝器上,直至乾燥。
三、保護劑的作用
1.保護劑的種類
凍干保護劑:能防止活細胞在冷凍乾燥時受到破壞的物質。
據作用機制分為兩大類:
①滲透劑,如DMSO、甘油、蔗糖等,能滲入細胞內,降低因冷凍而增加的滲透壓,防止細胞內脫水,可保護細胞因慢凍可能產生的損害。
②非滲透劑,如PVP、蛋白質等,能防止細胞由內向外滲漏溶質,可保護細胞在速凍和溶解時可能受到的損害。
2.保護劑的效用
①對生物活性物質保護劑防止生物活性物質失去結合水;防止結構水形成結晶,造成生物活性物質的活性損害;一些含經基的有機保護劑,能代替部分結構水,與蛋白質中的默基或氨
基結合,保持其三級和四級結構。
②對活細胞
保護劑降低細胞內外滲透壓差,防止細胞損壞;防止因細胞內水分結晶而改變膜或分子立體結構;若保護劑系細胞的營養物質,則可使細胞在復甦時能迅速修復細胞膜所受的損傷。
F. 生物製品最適的保存條件是
由於生物製品是用微生物及其代謝產物製成,從化學成分上看,多為蛋白質,而且有些製品就是活的細菌,因此,一般都怕熱、怕光,有些還怕凍。保存條件直接影響到製品的質量。一般溫度愈高,保存時間愈短。最適宜的保存條件為2~10℃乾燥暗處。除痘苗、小兒麻痹等活疫苗及乾燥製品不怕凍結外,其他製品一般不能在攝氏零度以下保存,否則會因凍結造成蛋白變性,而影響免疫效果,甚至會加重接種後的反應。
G. 單體和引發劑在保存過程中應注意什麼
陰涼乾燥。單體和引發劑都是容易受熱分解,遇水會發生反應,所以是忌祥含鄭潮濕的,應該謹頌放在陰涼乾燥處老念進行保存。
H. 生物製品的保存及運輸
凡是從微生物、原蟲、動物材料直接制備或用現代生物技術、化學方法製成,作為預防、治療、診斷特定傳染病或其他疾病的制劑,通稱為生物製品。生物製品按所用的材料、製法或用途,一般分為以下幾類:
(1)細菌性疫苗是利用病原性細菌本身,經人工加工處理除去或減弱其致病作用而製成的。菌苗可以分為兩類:一類是用化學葯品或物理方法將病原菌殺死,製成死菌苗,如豬丹毒和豬肺疫氫氧化鋁甲醛菌苗,這類菌苗的優點是,容易保存,保存時間長;缺點是用量大,產生免疫力需要的時間較長,免疫期較短。另一類是用無毒或毒力減弱的活菌製成的活菌苗,如豬丹毒弱毒菌苗、仔豬副傷寒弱毒菌苗、口服豬肺疫弱毒菌苗等。它的優點是產生免疫力需要的時間較短,免疫期長,用量也小;缺點是不易保存,有效期短。(2)病毒性疫苗是用病毒本身製成疫苗,除去或減弱了病毒對動物的致病作用而製成的,只可用於預防傳染病。病毒性疫苗也可分為兩類:一類是活的弱毒疫苗,如豬瘟兔化弱毒疫苗、乙型腦炎弱毒疫苗、細小病毒弱毒疫苗、偽狂犬病弱毒疫苗等;另一類是死疫苗或滅活疫苗,如偽狂犬病油佐劑疫苗、細小病毒油佐劑疫苗等。這兩類疫苗的優缺點與菌苗大致相同。(3)類毒素某些病原菌經人工培養,使它產生大量外毒素,除去細菌,得到不含細菌的外毒素濾液,再在外毒素中加適量甲醛處理,成為無毒而保持有使動物產生抵抗力的制劑,這種制劑叫做類毒素。它能刺激機體產生大量抗毒素,故能用於預防疾病。如破傷風明礬沉澱類毒素,就是其中的一種。
以上三類製品都是富含免疫原性的抗原,動物接種後可預防疾病的發生,因此,又稱預防製品。(4)抗毒素動物經過反復多次注射某種病原菌的類毒素或毒素後,就會產生抵抗這種毒素的能力。採取這種動物的血液,提取的血清,經過處理就是抗毒素。如破傷風抗毒素(也可叫破傷風抗毒素血清),就是其中的一種。(5)免疫血清用疫(菌)苗反復多次免疫動物後,動物就會產生抗這種病原微生物的免疫血清,採取這些動物血液,分離血清,再加入一定量的防腐劑製成的。如抗豬瘟血清、抗豬丹毒血清等。
抗毒素和免疫血清,具有很高的特異性,常用作治療和被動免疫,是緊急預防和減少患傳染病動物死亡的有效制劑。(6)診斷液利用微生物和微生物在生長繁殖過程中的產物,或具有特異性抗體的血清製造出來的專供診斷各種畜禽傳染病用的生物葯品都叫診斷液。
生物製品不同於普通的化學葯品,從化學成分上看多為蛋白質,有些製品還是活的微生物。因此,它們一般怕光、怕熱,有些還怕凍結。保存和運送條件要求嚴格和細致,否則可直接影響到它們的質量,所以要嚴格遵照生物葯品廠的要求,進行保存和運輸。一般需注意以下幾點:
第一,疫(菌)苗應保存在乾燥陰暗處,避免陽光照射。
第二,溫度條件對生物製品的影響特別重要,溫度急劇變化,容易損害疫(菌)苗和血清的效能。疫(菌)苗應放在冷庫或冰箱中保存。最適宜保存的溫度是2~8℃,溫度越低保存的時間越長。有些製品須在低溫下保存,才能更好地保持它的效力。如乾燥豬瘟兔化弱毒疫苗,在-15℃可以保存一年以上,在0~8℃只能保存6個月,而在10~25℃時,最多不超過10天即可失效。
第三,運輸活疫(菌)苗時,應將活疫(菌)苗裝入有冰的廣口保溫瓶中,途中避免日曬和其他高溫,要盡快送到目的地,縮短運輸時間。
第四,在使用前應仔細檢查,注意苗瓶有無破損,瓶口及膠蓋應封固。瓶簽上有關葯品名稱、批號、有效日期、檢驗號、用法及用量等應保持完整清楚,以便查考。
第五,過期的生物葯品,以及瓶內有異物、凝塊等異常變化者都不能使用。
第六,按規定的濃度及稀釋液進行稀釋。活苗稀釋後必須當天用完,用不完的應當廢棄,千萬避免放置過久,以免注射後無效。切忌用熱的稀釋液稀釋疫苗。
第七,使用生物葯品所需的器械,如注射器、針頭、滴管等,在使用前後都需洗凈和消毒。
第八,廢棄的生物葯品要妥善處理,活疫(菌)苗必須煮沸或倒在火內燒掉;死苗倒在深坑內埋掉。裝疫(菌)苗的小瓶必須經過消毒處理後再用。
表38 豬常用的生物葯品(續)-2296275名稱 用途與用法 免疫期 豬O型口蹄疫滅活 預防豬O型口蹄疫,10~25千克豬肌 6個月 疫苗 肉注射2毫升,25千克以上豬肌肉注射3毫升 豬偽狂犬病基因缺失 預防豬偽狂犬病,成年豬肌肉注射2 1年 苗 毫升,3月齡以上豬注射1毫升 豬偽狂犬病滅活苗 預防豬偽狂犬病,仔豬肌肉注射1.5毫升,種豬3毫升 豬傳染性萎縮性鼻炎 預防萎縮性鼻炎,妊娠母豬產仔前皮 6個月 滅活苗 下注射2毫升,仔豬1周齡和3~4周齡皮下分別注射0.2毫升和0.4毫升 破傷風血清(抗毒 治療:20000單位肌肉或皮下注射 14天 素) 預防:3000單位肌肉或皮下注射 抗豬瘟血清 預防:20~100毫升皮下或靜脈注射 治療:為預防量的1倍 14天 抗豬丹毒血清 預防:10~30毫升皮下或靜脈注射 治療:20~75毫升 14天 抗豬肺疫血清 預防:20~40毫升皮下或靜脈注射 治療:為預防量的1倍 14天