微生物實驗室有哪些注意事項

① 微生物實驗室的溫度和濕度有何要求

一般溫度為：18-26度，濕度：45%-65%。《GB 4789.1—2016 食品安全國家標准食品微生物學檢驗總則》該標准作為了食品微生物學檢驗基本原則和要求，對檢測環境提出了一些要求，內容如下：

1、實驗室環境不應影響檢驗結果的准確性；就食品微生物實驗室而言，比較容易受到環境影響的操作有無菌檢測，如果在潔凈室內進行，那麼潔凈室容易受到外界環境污染，潔凈室設計是否合理，如遠離污染區、潔凈室與外界環境是否有二級緩沖間隔離、試驗人員進入潔凈室是否更換潔凈服，佩戴口罩，手套等等。

2、實驗室區域應與辦公區域明顯分開；實驗室辦公室與試驗區不得在同一區域，即辦公室不得設置在實驗室內部，這是實驗室設計時需要特別注意的一個要求。

3、實驗室工作面積和總體布局應能滿足從事檢驗工作的需要，實驗室布局宜採用單方向工作流程，避免交叉污染；食品微生物實驗室應配備足夠的功能區，如：准備室、潔凈室、生化室（BSL-2實驗室配置生物安全櫃）、培養室、洗消室等，且房間的布局因用單向工作流程，潔凈區與非潔凈區分布兼具合理性、科學性、實用性，一個設計優秀的微生物實驗室，是微生物檢測准確性的有力保液亮凳障。

4、實驗室內環境的溫度、濕度、潔凈度及照度、噪音等應符合工作要求；該標准未准確提出相關的技術參數，以下是個人總結的一些技術文件對微生物實驗室溫度、濕度、照度、雜訊和潔凈度的技術要求，可參考作為實驗室設計、日常環境監控時的判定值。

(1)微生物實驗室有哪些注意事項擴展閱讀

微生物實驗室建設時應具備良好的自然通風，必要時應配備抽風機。接種、分離及鑒定細菌等操作應在生物安全櫃中進行，對結核桿菌等傳染性極強的微生物學檢驗時必須在100%外臨床微生物學實驗室接觸多種有害微生物，為了防止交叉污染，保護工作人員健康，實驗室應至少劃分成3個區：

一、清潔區

包括：辦公室、休息室、培養基配製室與試劑儲藏室。此區域禁止帶人細菌檢驗標本。

二、操作區

(1) 整潔：微生物操作區是各種病原菌相對集中的地方，為了減少粉塵流動，防止交叉污染，操作區應與外界分開。實驗室工作人員進入操作區應換鞋，送標本人員不進入操作區，操作區地面用專用拖把每天拖1次，每周用消毒劑擦洗1次。每天早上工作前，用紫外線照射30min，或每天工作後，用紫外線照射60min，對整個操作區進行消毒；下午工作結束後用消毒液消毒工作檯面，以保證工作環境的安全清鍵檔潔。

(2) 光線：細菌培養的細小菌落及血清試驗凝集顆粒的觀察，都需要有充足的光線。操作區除設置常規照明燈外，還必須安裝操作台燈，以保證實驗結果的正確判斷。

(3) 通風：由於各種病原菌集中，空氣污濁，實驗室要求保持排的生物安全櫃中進行。

(4) 溫度和濕度：由於無菌操作的要求，實驗過程中經常使用酒精燈，因此，微生物實驗室不能安裝吊扇。為了達到實驗所需的適宜溫度，尤其：滿足某些儀器對溫度濕度的要求，實驗室應安裝空調。

(5) 電源：要求提供穩壓、恆頻的電源;根據儀器設備要求，必要時配備不間斷電源。

(6) 水源：操作區內須設置水源。用於標本處理(如，細菌染色) 的水槽與工作人員洗手用的水槽不能混用。

(7) 污染物處理：操作區須備有消毒缸，以處理沾有活菌的玻片等污染物品。檢驗剩餘的標本及使用過的帶菌平板、試管均須集中地點安全放置，經消毒滅菌處理後再洗滌或丟鬧旅棄。

二、無菌區

(1) 無菌室應完全封閉，進出無菌室至少要經兩道門，中間隔有緩沖間，無菌室與外間設置一個可開閉的窗口，用於傳遞器具。

(2) 無菌室必須保持整潔。工作人員進入無菌室應換專用鞋、專用衣。無菌室使用前須用紫外線消毒30min，操作結束後清潔檯面，再用紫外線消毒30min。定期用乳酸或甲醛熏蒸，徹底消毒。

(3) 無菌室僅用於培養基分裝等無菌操作，不能進行有菌標本的操作。操作人員操作時應嚴格關門並戴好專用的口罩與帽子。

(4)無菌室內應有空氣過濾裝置，並安裝空調。

② 微生物日常檢驗過程中的注意事項

微生物日常檢驗過程中的注意事項

在微生物檢驗操作過程中，要保證檢測環境(如超凈台、檢測室)以及所用工器具的潔凈程度，同時保證人員各種操作的規范性，盡量保證其無菌性，防止因人為原因操作失誤而出現誤差結果，同時在適宜溫度進行培養，為合理決策和指導生產提供依據。下面是我為大家帶來的關於微生物日常檢驗過程中的注意事項的知識，歡迎閱讀。

培養基的滅菌及使用

1.每次配製時，要注意其生產日期是否在保質期內，查看其開瓶日期及瓶口密封性，保證其未變質，並且未吸潮。

2.培養基配製時，稱量要准確，包括鹽水的分裝要准確。

3.一定要保證現配製現滅菌，未滅菌的配好培養基不能長時間放置，更不可隔夜。

4.滅菌時要保證恆溫、恆壓，同時要保證有效的滅菌時間。

5.滅菌過的培養基要冰箱保存，可保存一周，一般不超過 3 天。而且要遵循“先入先出”原則，先配製的要先使用。

6.在使用時，要根據當班次的使用量，用水浴鍋先將培養基溶化為液態，然後及時調低水浴溫度(先化好的可從水浴取出，放在水浴鍋鍋蓋上)待用，千萬不可長時間使培養基處於高溫狀態。

7.做產品微生物檢測時，傾倒培養基溫度在 45℃左右，不可過燙，避免將菌燙死;也不可過涼，化好的培養基又結塊凝固，不便於觀察結果。

8.每瓶培養基均要做空白。

9.盡量集中做樣，避免頻繁打開同一瓶培養基瓶塞，增大培養基的污染幾率，出現誤差結果。

10.培養基剩餘過少時，可先將其傾倒成空白用板。

檢測環境的維持

一、大環境(檢測室)

1.檢測時，窗戶和空調要關閉，或用酒精對房間進行噴霧消毒，避免房間內空氣流通影響超凈台內部環境(最好在有通排風系統的恆溫恆濕無菌間進行操作)。

2.如果在原來的原料微生物檢測室進行檢測，要定期開啟紫外燈，對房間進行殺菌。

二、小環境(超凈工作台)

1.定期清潔初效過濾器，要及時更換。

2.檢測前，將超凈台內部進行清潔，用 75%酒精進行擦拭消毒，並提前半小時將超凈台紫外燈打開，對超凈台內部環境進行殺菌。

3.關紫外燈，開風機，調整合適進風量，風量不可過低。

4.每次檢測後，要對超凈台內部進行清理、清潔，並用 75%酒精進行擦拭消毒。

5.紫外燈根據其使用壽命要及時更換。

6.檢測同時，要做上相應菌落檢測的`環境空白。

7.檢測區域的選擇：

a、一般在距離超凈台外沿的 1/3-2/3 區域進行無菌操作;

b、要在酒精燈火焰的外焰保護區域進行操作。

工器具的潔凈度

1.玻璃器皿：採用乾熱滅菌方式進行滅菌。

2.檢測用剪刀、勺子等物品要做到檢測專用，不可與其它操作器具混用，使用時，先用75%酒精消毒，再採用灼燒方式進行滅菌。

3.接種針(環)採用灼燒方式進行滅菌，但要注意檢測時要先將接種針(環)進行冷卻。

樣品的採集及檢測

一、保證采樣器具的無菌性

1.玻璃器皿：採用乾熱滅菌方式進行滅菌，保證恆溫、時間足夠(但不可時間過長，容易導致玻璃器皿易裂紋而報廢)。

2.取樣筐：使用前要用75%酒精進行噴灑消毒。

3.取樣勺：要保證其清潔消毒，清潔後用75%酒精進行擦拭消毒。

4.取樣袋：可先用酒精進行擦拭消毒，再在超凈台用紫外燈照射消毒，(包裝車間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒)。

5.電子稱表面用 75%酒精消毒。

二、人員操作

1.保證手部的清洗、消毒：取樣前及檢測前都要先洗手再消毒。

2.取樣要具有代表性(隨機樣、目的樣、綜合樣)且要標示清楚。

3.取樣完畢，不可在車間逗留，要及時將樣品放入超凈台，對其外表面進行紫外燈照射消毒。

4.在要求的檢測區域進行操作。

5.檢測前，要用 75%酒精棉球對樣品袋口部進行擦拭消毒，再開口。

6.往鹽水瓶加樣品時，要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口。

7.樣品計量要准確，稀釋倍數也要准確(1mL 吸管不允許將管口敲掉)，進行 100 倍稀釋時，1mL 吸管要伸入鹽水中，不可以將樣品從管壁流下去，同時要避免將管底部捅破。

8.鹽水溫度以 40℃左右為宜，不能過熱，會將部分微生物燙死;也不能溫度太低，不能將樣品溶解完全。

9.進行稀釋時，要搖勻，保證溶液的均一性。

10.傾倒平皿時，要注意培養基瓶口不要接觸到平皿;傾倒的培養基要適量，不可以太少，在培養過程中易幹掉，微生物亦死亡，以 15mL 左右為宜。

11.做大腸菌群樣時，要提前將乳糖膽鹽培養基培養管按需要量備好，放入超凈台對外表面進行紫外線滅菌。

12.接二步時，要注意先將接種針(環)進行冷卻，避免出現接不上菌落的情況，導致無法判斷、確認。

13.檢測完畢，及時放入相應培養箱進行培養，並清理清潔超凈台。

微生物的培養

1.在培養過程中，要隨時監控培養箱溫度，保證其在適宜的溫度進行培養。

2.要按照《微生物檢驗規范》要求及時觀察結果，出現異常，要及時分析原因進行反饋。

③ 微生物實驗室是如何保證安全和避免污染的

BSL3實驗室是用來研究那些對個體危險高（一旦感染容易導致嚴重後果），對群體危險較低（不易大范圍高效傳播）的活病原體的場所，這些病原體包括鼠疫、高致病性禽流感、狂犬病毒、SARS、黃熱病毒、結核桿菌等等。BSL3實驗室必須遵循強制標准（生物安全實驗室建築技術規范GB 50346-2011）建設，通過中國合格評定國家認可委員會驗收之後才能根據所批準的研究范圍掛牌運行。整潔：微生物操作區是各種病原菌相對集中的地方,為了減少粉塵流動,防止交叉污染,操作區應與外界分開.實驗室工作人員進入操作區應換鞋,送標本人員不進入操作區,操作區地面用專用拖把每天拖1 次,每周用消毒劑擦洗1 次.每天早上工作前,用紫外線照射30 min ,或每天工作後,用紫外線照射60 min ,對整個操作區進行消毒；下午工作結束後用消毒液消毒工作檯面,以保證工作環境的安全清潔.光線：細菌培養的細小菌落及血清試驗凝集顆粒的觀察,都需要有充足的光線.操作區除設置常規照明燈外,還必須安裝操作台燈,以保證實驗結果的正確判斷。溫度和濕度：由於無菌操作的要求,實驗過程中經常使用酒精燈,因此,微生物學實驗室不能安裝吊扇.為了達到實驗所需的適宜溫度,尤其是滿足某些儀器對溫度濕度的要求,實驗室應安裝空調.

④ 微生物實驗室儀器擺放要注意什麼

微生物實驗室儀器擺放要注意什麼
微生物實驗室是生物學領域必備實驗室。如何配置才能成就一個完備的微生物實驗室，哪些儀器必不可少，哪些儀器可有可無？
(1)超凈工作台
微生物的培養都是在特定培養基中進行無菌培養，那麼無菌培養必然需要超凈工作台提供一個無菌的工作環境。超凈工作台的用途是微生物的接種及處理時的無菌操作。

(2)培養箱
培養箱有多種類型，它的作用在於為微生物的生長提供一個適宜的環境。 培養箱有多種類型，包括生化培養箱，黴菌培養箱，厭氧培養箱等。具體來說區別如下： a. 生化培養箱只能控制溫度。可作為一般細菌的平板培養。 b. 黴菌培養箱可以控制溫度和濕度。可作為黴菌的培養。 c. CO2培養箱適用於厭氧微生物的培養，例如雙歧桿菌。
(3)天平
天平用於精確稱量各類試劑。實驗室常用的是電子天平，電子天平按照精度不同有不同的級別。
(4)微生物均質器
用於從固體樣品中提取細菌。用微生物均質器制備微生物檢測樣本具有樣品無污染、無損傷、不升溫、不需要滅菌處理，不需洗刷器皿等特點，是微生物實驗中使用較為方便的儀器。
(5)菌落計數器
菌落計數儀可協助操作者計數菌落數量。通過放大，拍照，計數等方式准確的獲取菌落的數量。有些高性能的菌落計數器還可連接電腦完成自動計數的操作。
(6)微波爐/電爐
用於溶液的快速加熱，微生物固體培養基的加熱溶化。
(7)高壓滅菌鍋
微生物學所用到的大部分實驗物品、試劑、培養基都應嚴格消毒滅菌。滅菌鍋也有不同大小型號，有些是手動的，有些是全自動的。用戶需要根據自己的需要選購。
(8)移液器
液體量器用於精密量取各類液體。常見的液體量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度試管、燒杯。
(9)冰箱
冰箱是實驗室保存試劑和樣品必不可少的儀器。微生物學實驗中用到的試劑有些要求是4度保存，有些要求是負20度保存，實驗人員一定要看清試劑的保存條件，放置在恰當的溫度下保存。具體來說，不同溫度下保存的物品如下： a. 4℃適合儲存某些溶液、試劑、葯品等。 b. -20℃適用於某些試劑、葯品、配好的抗生素等。 c. -80℃適合某些長期低溫保存的樣品、大腸桿菌菌種、感受態等的保存。
(10)生物安全櫃
微生物實驗中涉及的試劑和樣品微生物有些是有毒的，對於操作人員來說傷害較大。為了防止有害懸浮微粒、氣溶膠的擴散，可以利用生物安全櫃對操作人員、樣品及樣品間交叉感染和環境提供安全保護。
(11)搖床
搖床是實驗室常用的一種儀器，在微生物實驗操作過程中，液體培養基培養細菌時需要在特定溫度下振盪使用。
(12)純水裝置
純水裝置包括蒸餾水器和純水機。蒸餾水器的價格便宜，但在造水過程中需要有人值守;純水機價格高些，但是使用方便，可以儲存一定量的純水。純水使用也有不同的級別，實驗中配製試劑，配製培養基均需用純水。
(13)生物顯微鏡
由於微生物體積較小，所以在觀察時需要藉助生物顯微鏡。生物顯微鏡用於微生物和微小物品結構，形態等的觀察。
(14)冷凍乾燥機
主要適用於細菌、微生物、酵母等的乾燥。用於乾燥保存易脫水的產品，在加水以後能夠再次恢復原材料的特性，不影響其生物活性等。通過冷凍乾燥，細菌之類的材料成為乾燥狀態，從而不會發生化學改變。
(15)分光光度計
分光光度計在微生物試驗中用於測定微生物懸液的濃度，可以正確選取合適的培養時間。一般是在600nm波長測定菌液濃度。
(16)恆溫乾燥箱
恆溫乾燥箱是用於滅菌和洗滌後的物品烘乾。烘箱有不同的控溫范圍，用戶可以根據實驗需求進行選擇。例如，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中進行烘乾，一般玻璃用具的烘乾可以選擇60℃。
(17)恆溫水浴鍋
水浴鍋是一種控溫裝置，水浴控溫對於樣品來說比較快速且接觸充分。有些微生物反應需要在37度，42度，56度下水浴進行，所以恆溫水浴鍋可以提供需要的溫度。
(18)酸度計
用於配置試劑時精確測量PH值，從而保證配置的溶液的精確性。有時也需要利用pH計測定樣品溶液的酸鹼度。
(19)離心機
用於收集微生物菌體以及其他沉澱物。離心機有冷凍和常溫之分。有些樣品由於在常溫下不太穩定，需要低溫環境，要視樣品的種類而定。
(20)液氮罐
液氮罐儲存液氮，可用於細菌、酵母、黴菌和大型真菌等各種微生物的長期保存。以上介紹的是微生物實驗室的基本儀器配置，在組建實驗室時還需要其他一些耗材，例如酒精燈，試管架，三角瓶，量筒，玻璃試管，滅菌吸管，涼干架，剪刀，鑷子，脫脂棉，紗布，試管筐，無菌采樣及稱樣袋，接種環，過濾器等。實驗人員可以根據自己的需求為微生物實驗室配置合適的儀器和耗材。
微生物實驗室管理制度
一、實驗室管理制度
1.實驗室應制定儀器配備管理、使用制度，葯品管理、使用制度，玻璃器皿管理、使用制度，並根據安全制度和環境條件的要求，本室工作人員應嚴格掌握，認真執行。