1. 如何安全使用生物安全櫃
在實驗室中使用生物安全櫃
1. 位置 空氣通過前面開口進入生物安全櫃的速度大約為0.45m/s。這樣速度的定向氣 流是極易受到干擾的，包括人員走近生物安全櫃所形成的氣流，打開窗戶，送 風系統調整以及開關門等都可能造成影響。
因此，最為理想的是，生物安全櫃應位於人員活動，物品流動以及可能會擾亂 氣流的地方。在安全櫃的後方以及每一個側面要盡可能留有30cm的空間，以利 用對安全櫃的維護。在安全櫃的上面應留有30-35cm的空間，以便准確測量空 氣通過排風過濾器的速度，並便於排風過濾器的更換。
2. 操作人員 生物安全櫃如果使用不當，其防護作用就可能大大地受到影響。操作人員在移 動雙臂進出安全櫃時，需要小心維持前面開口處氣流的完整性，雙臂應該垂直 地緩慢進出前面的開口。
手和雙臂伸入到生物安全櫃中等待大約一分鍾，以便安全櫃調整完畢並且讓里 面的空氣「掃過」手和雙臂的表面以後，才可以開始對物品進行處理。要在開 始實驗之前將所有必須的物品置於安全櫃內，以盡可能減少雙臂進出前面開口 的次數。
BSC
BSC Biological Safety Cabinet
Return Air Grille
Personnel Traffic
Barrier Airflow
BSC BSC
Air Inlet
BSC
BSC
Fig 8. 典型II級生物安全櫃的安裝
A typical Class II Cabinet Installation
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生物安全和生物安全櫃指南
3.物品放置 二級生物安全櫃前面的進氣格柵不能被紙，儀器設備或其他物品阻擋。放入安 全櫃內的物品應採用70%酒精來消除表面污染。可以在消毒劑浸濕的毛巾上進 行實驗，以吸收可能濺出的液滴。
所有物品應盡可能地放在工作台後部靠近工作台邊緣的位置，並使其在操作中 不會阻擋候補格柵。可產生氣溶膠的設備(例如混勻器，離心機等)應靠近安全 櫃的後部放置。像有生物危害性的廢棄物袋，盛放廢棄吸管的盤子以及吸濾瓶 等體積較大的物品，應該放在安全櫃內的某一側。在工作檯面上的實驗操作應 該按照從清潔區到污染區的方向進行。
耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤不應放在安全櫃的外面，否 則在使用這些物品時雙臂就必須頻繁進出安全櫃，這樣會干擾安全櫃空氣屏障 的完整性，從而影響對人員和物品的防護。
4.操作和維護 大多數生物安全櫃的設計允許全天24小時工作。研究人員還發現，連續工作有 助於控制實驗室中灰塵和顆粒的水平。向房間中排風或通過套管介面與專門的 排風管相連接的一級A1和A2型生物安全櫃，在不使用時是可以關閉的。其他如 二級B1和二級B2型生物安全櫃，是通過硬管安裝的，就必須始終保持空氣流動 以維持房間空氣的平衡。
在開始工作以前以及完成工作以後，應至少讓安全櫃工作5分鍾來完成「凈 化」的過程，應即應留在將污染的空氣派出安全櫃的時間。
生物安全櫃的所有維修工作應該由有資質的專業人員來進行。在生物安全櫃操 作中出現的任何故障都應該報告，並應在再次使用之前進行維修。
5.紫外燈 生物安全櫃中不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話，應該每周進行清潔，以除 去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。在安全櫃重新認證時，要檢查紫外線的 強度，以確保有適當的光發射量。房間中有人時一定要關閉紫外燈，以保護眼 睛和皮膚，避免因不慎暴露而造成傷害。
6.明火 在生物安全櫃內所形成的幾乎沒有微生物的環境中，應避免使用明火。使用明 火會對氣流產生影響，並且在處理揮發性物品和易燃物品時，也易造成危險。 在對接種環進行滅菌時，可以使用微型燃燒器或電爐，而不應使用明火。
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7. 溢出 實驗室中要張貼如何處理溢出物的實驗室操作規則，每一位使用實驗室的成員 都要閱讀並理解這些規程。一旦在生物安全櫃中發生由生物學危害的物品溢 出時，應在安全櫃出於工作狀態下立即進行清理。要使用有效的消毒劑，並在 處理過程中盡可能減少氣溶膠的生成。所有接觸溢出物品的材料都要進行消 毒/或高壓滅菌。
8. 認證 在安裝是一季每隔一定時間以後，應由有資質的專業人員按照生產商的說明對 每一台生物安全櫃的運行性能以及完整性進行認證，以檢查其是否符合國家及 國際的性能標准。安全櫃防護效果的評估應該包括對安全櫃的完整性，HEPA過 濾器的泄漏，向下氣流的速度，正面氣流的速度，負壓/換氣次數，氣流的煙 霧模式以及警報和互鎖系統進行測試。
還可以選擇進行漏電，光照度，紫外線強度，雜訊水平以及震動性的測試。在 進行這些測試時，檢測人員要經過專門的培訓，採用專門的技術和儀器設備。 強烈建議由有資質的專業人員來進行測試。
9. 清潔和消毒 由於剩餘的培養基可能會使微生物生長繁殖，因此在實驗結束時，包括儀器設 備在內的生物安全櫃里的所有物品都應清楚表面污染，並移出安全櫃。
在每次使用前後，要清除生物安全櫃內表面的污染。工作檯面和內壁要用消毒 劑進行擦拭，所用的消毒劑要能夠殺死安全櫃里可能發現的任何微生物。在每 天試驗結束時，應擦拭生物安全櫃的工作檯面，四周以及玻璃的內外側等部位 來清除表面的污染。在對目標生物體有效時，可以採用漂白劑溶液或70%酒精 來消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑後，還必須用無菌水再次進行擦拭。
推薦將安全櫃一直維持運行狀態。如果要關閉的話，則應在關機前運行5分鍾 以凈化內部的氣體。
10. 清除污染 生物安全櫃在移動以及更換過濾器之前，必須清除污染。最常用的方法是採用 甲醛蒸汽熏蒸。應該由有資質的專業人員來清除生物安全櫃的污染。
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11.個體防護裝備 在使用生物安全櫃時應穿著個體防護服。在進行一級和二級生物安全水平的操 作時，可穿著普通試驗服。前面加固處理的反背式試驗隔離衣具有更好的防護 效果，應在進行三級和四級生物安全水平（防護服型實驗室除外）的操作時使 用。手套應套在隔離衣的外面，可以戴加有松緊帶的套袖來保護研究人員的手 腕。有些操作可能還需要戴口罩和安全眼鏡。
12.警報器 可以在兩種警報器中選擇一種來裝備生物安全櫃。窗式警報器只能裝在帶有滑 動窗的安全櫃上。發出警報時表明操作者將滑動窗移到了不當的位置。處理這 種警報時，只要將滑動窗移到適宜的位置就可以了。氣流警報器報警時，表明 安全櫃的正常氣流模式受到了干擾，操作者或物品當即處於危險狀態。當氣流 警報響起時，應立刻停止工作，並通知實驗室主管。生產商的說明手冊中將提 供更詳細的資料，在生物安全櫃的使用培訓中也應包括這一方面的內容。
13.補充資料 選擇正確類型的生物安全櫃，進行安裝並正確使用，同時每年進行認證，這是 一個復雜的程序。強烈推薦在經過良好培訓並具有豐富生物安全操作經驗的專 家監督下來進行上述工作。該專家應非常熟悉「參考文獻」部分中所列出的相 關文獻，並且經過了有關生物安全櫃各方面的培訓。操作者應接受生物安全櫃 操作和使用的正規培訓。
2. 如何正確的使用生物安全櫃
1、操作前應將本次操作所需的全部物品移入安全櫃，避免雙臂頻繁穿過氣幕破壞氣流；並且在移入前用70%酒精擦拭表面消毒，以去除污染。
2、打開風機5～10分鍾，待櫃內空氣凈化並氣流穩定後再進行實驗操作。將雙臂緩緩伸入安全櫃內，至少靜止1分鍾，使櫃內氣流穩定後再進行操作。
3、生物安全櫃內不放與本次實驗無關的物品。櫃內物品擺放應做到清潔區、半污染區與污染區基本分開，操作過程中物品取用方便，且三區之間無交叉。物品應盡量靠後放置，但不得擋住氣道口，以免干擾氣流正常流動。
4、操作時應按照從清潔區到污染區進行，以避免交叉污染。為防可能濺出的液滴，可在檯面上鋪一用消毒劑浸泡過的毛巾或紗布，但不能覆蓋住安全櫃格柵。
5、櫃內操作期間，嚴禁使用酒精燈等明火，以避免產生的熱量產生氣流，干擾櫃內氣流穩定；且明火可能損壞HEPA濾器。
6、工作時盡量減少背後人員走動以及快速開關房門，以防止安全櫃內氣流不穩定。
7、在實驗操作時，不可打開玻璃視窗，應保證操作者臉部在工作窗口之上。在櫃內操作時動作應輕柔、舒緩，防止影響櫃內氣流。
8、安全櫃應定期進行檢測與保養，以保證其正常工作。工作中一旦發現安全櫃工作異常，應立即停止工作，採取相應處理措施，並通知相關人員。
9、工作完全後，關閉玻璃窗，保持風機繼續運轉10～15分鍾，同時打開紫外燈，照射30分鍾。
10、安全櫃應定期進行清潔消毒，櫃內檯面污染物可在工作完成且紫外燈消毒後用2%的84消毒液擦拭。櫃體外表面則應每天用1%的84消毒液擦拭。
11、櫃內使用的物品應在消毒後再取出，以防止將病原微生物帶出而污染環境。