❶ 微生物實驗紙片法測定測定抗生素效價方法的整套實驗步驟
實驗前准備:4個培養皿,2支移液管,1支塗布棒,並將培養皿包好滅菌,取一定的蒸餾水滅菌製成無菌水。
1、配製營養瓊脂培養緩段基:稱取營養瓊脂9.6g,加入300ml蒸餾水,加熱煮沸後將培養基導入錐形瓶,然後包紮滅菌(121°C,20min)。
2、倒平板:在無菌環境操作下,將上述培養基倒入4個平板,並編號1,2,,3,4.
3、制菌懸液:用5ml無菌移液管在無菌操作下,吸取3ml無菌水到菌種斜面,用接種環輕刮下菌苔,搗碎,塞上棉塞,振盪片刻。
4、將抗生素稀釋成10-3,10-4,10-5,10-6四種不同稀釋度的梯度液。
5、取直徑1cm圓形濾紙若干,取4個圓形濾紙分別放入10-3,10-4,10-5,10-6的抗生素溶液中浸泡一會。
6、待平板凝固後接種,各取0.2ml菌懸液倒入平板中,用塗布棒抹勻。
7、在1,2,3,4,號已接種的平板中分別放入4個浸泡在10-3,10-4,10-5,10-6抗生素溶液中的濾紙擾燃譽片,並注意個紙片間的距離應較大。
8、培養,放入37°c恆溫箱中培養24h。
9、觀察測量並記錄數據,觀察抗生素濾紙周圍的透明抑菌圈,測量16個抑菌圈的大小,求算不同濃度抗生素段空濾紙抑菌圈的大小。
❷ 微生物檢測包括哪些啊
食品中微生物指標的常見檢驗項目如下:菌落總數、大腸菌群計數、大腸桿菌計數、腸道致病菌(沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌)、副溶血性弧菌、單核細胞增生李斯特氏菌、雙岐桿菌、空腸彎麴菌、黴菌計數和酵母計數。
一般食品中活菌數達到108cfu.g⁻¹時,則可認為食品處於初期腐敗階段。
(2)抗生素微生物鑒定法包括哪些擴展閱讀
微生物檢驗方法包括顯微鏡檢、染色技術、培養基制備技術、接種、分離純化和培養技術等。
接種,將微生物接到適於它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程。
分離純化,在進行菌種鑒定時,所用的微生物一般均要求為純的培養物。得到純培養的過程。
培養,根據培養時是否需要氧氣,可分為好氧培養和厭氧培養。根據培養基的物理狀態,可分為固體培養和液體培養兩大類。
❸ 6.抗生素微生物檢定包括哪兩種方法並分別介紹概念、分類以及其作用原理。
醫學微生物,有細菌,真菌,病毒,衣原體,支原體,螺旋體,立克次體,放線菌。
最重要的就是按照這幾個條目來學,最重要的是細菌病毒四體和真菌
然後記住每一條目的分類以及分類的依據,然後記住相應分類下的微生物,就可以記住相應的微生物了。
一些特殊的微生物的特點單獨記憶學習,比如溶血鏈球菌導致蜂窩織炎,葡萄球菌導致化膿性炎。
就是微觀的世界。我們醫生,大多是檢驗科醫生以後都會用到,用顯微鏡觀察常人看不到的細菌。
學習微生物,一定要根據書本來,學好書本知識,然後自己歸納總結。比如說,某個標本裡面常見的致病菌有哪些,比如大腸桿菌,你就要記住,菌落形態、革蘭陽性還是陰性,革蘭染色鏡下會是什麼樣,還有有哪些生化反應。什麼條件下它會治病:如大腸桿菌大便中最常見,如果在尿液或者痰液中培養出來那就屬於致病菌。這些都是需要熟記的
❹ 微生物檢測或鑒定技術或方法有哪些
微生物檢測或鑒定技術或方法有哪些
通過顯微鏡直接觀察。一般來說,在一定的培養條件下(相同的培養基、溫度以及培養時間),同種微生物表現出穩定的菌落特徵。這些特徵包括菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等方面。(見高中生物選系1《生物技術實踐》圖2-8)因此可以通過顯微鏡觀察菌落特徵對微生物種類進行判斷。
使用選擇培養基培養微生物或人為提供有利於目的菌株生長的條件。選擇培養基,顧名思義其作用是允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他微生物生長。例如,使用以尿素作為唯一氮源的培養基能夠培養出可合成脲酶的微生物;在培養基中PH調至酸性有利於黴菌的生長繁殖(抑制細菌的生命活動)等。選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特徵進行間接判斷,得到的微生物往往並不只有一種,但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。
使用鑒別培養基。即根據微生物的代謝特點,在培養基中加入某種指示劑或化學葯品。例如,水質檢驗中大腸桿菌的檢驗(大腸桿菌的存在數量用以衡量水被糞便污染的程度)就用到了伊紅—美藍試劑,該試劑與水或乳製品中的大腸桿菌反應出現深紫色且帶有金屬光澤,屬於大腸桿菌的特徵反應。與選擇培養相比,鑒別培養基的鑒別所得結果的范圍比較小,一般可直接測定某微生物的種類。
❺ 病原微生物中細菌常見檢測方法有哪些
1、快速測試片技術法
快速測試片是指以紙片、紙膜、膠片等作為培養基載體,將特定的培養基和顯色物質附著在上面,通過微生物在上面的生長、顯色來測定食品中微生物的方法。
細菌總數檢測紙片的研製始於 20 世紀 80 年代,其主要優點是簡便、實用、經濟、操作性強。近年來以濾紙和美國某公司的 Petrifilm 為載體的測試片已開始被廣泛應用。
2、生物電化學方法
生物電化學方法是指通過電極測定微生物產生或消耗的電荷,從而提供分析信號的方法。微生物在滋生代謝過程中,培養基的電化學性質如電流、電位、電阻和電導等會發生變化,所以可以通過檢測分析這些電化學參量的變化來實現對微生物的快速測定。
常見的有:阻抗分析法、電位分析法、電流分析法等。生物電化學方法具有測量快速、直觀、操作簡單、測量設備成本低和信號的可控性等特點。
3、微菌落技術
微菌落是指細菌生長繁殖早期在固相載體上所形成的只能藉助於顯微鏡觀察的微小菌落。微菌落技術具有快速、經濟、實用的特點,其研究始於 20 世紀50年代,定量測定技術從 20 世紀 70 年代開始,國外已有報道將該法應用於水、食品中細菌總數的快速檢測。
4、氣相色譜法
氣相色譜應用到微生物的檢測中,主要是依據不同微生物的化學組成或其產生的代謝產物各異,利用上述色譜檢測可直接分析各種體液中的細菌代謝產物、細胞中的脂肪酸、蛋白質、氨基酸、多肽、多糖等,以確定病原微生物的特異性化學標志成分,協助病原診斷和檢測。
5、高效液相色譜法
利用高效液相色譜檢測可分析各種體液中的細菌代謝產物、病原微生物等,以確定病原微生物的特異性化學標志成分,協助病原診斷和檢測。