葉酸和生物素怎麼滅菌

⑴ 生物素是維持人體生長和人體機能所必須的水溶性維生素，生物素有什麼作用

生物素屬於維生素B族，是水溶性維生素，是合成維生素C所必需的虛擬物質，也是蛋白質和脂肪正常代謝不可缺少的物質，是維持人體正常生長發育、維持人體正常功能的營養物質。生物素有助於脂肪、肝糖和氨基酸的合成和代謝，促進汗腺、神經組織、皮膚和頭發的正常生長，減輕皮炎和濕疹的症狀。緩解肌肉疼痛，預防脫發和白發，治療禿頂。

生物素是脂肪和蛋白質正常代謝不可缺少的物質，在維持皮膚健康方面也起著重要作用。生物素是脂肪和蛋白質代謝不可缺少的物質，也是維持正常生長、發育和健康所必需的營養物質，不能人工合成。生物素是糖原異生、脂肪酸綜合作用和某些氨基酸代謝的關鍵調節元素，通過幫助產生能量來促進某些蛋白質的合成。生物素保持皮膚和頭發的正常運行和生長。

⑵ 植物組織培養常見問題解析

1. 培養基的配製注意事項

植物組織培養最常用到MS培養基，包含十幾種化合物。因為有些化合物相遇會發生化學反應產生沉澱，影響培養基的營養成分，准備MS培養基需要配製多種高倍母液。且配製母液時，尤其涉及大量元素的母液時，一定要等一種成分溶解之後，再緩慢的添加另一種成分，切記「一鍋煮」，即不能將各種化合物一齊添加進去。可選用Coolaber的MS培養基基鹽（PM1011）在自行加入蔗糖和瓊脂配製MS培養基，既經濟，更高效。

2. 滅菌後培養基不凝膠或者凝膠偏軟

植物凝膠、瓊脂都對酸性條件敏感，pH值低於5很難成膠或凝膠偏軟，切記高壓滅菌前調節培養基pH值（5.5-6.0）。植物凝膠對二價陽離子濃度有要求，也就是相對於MS培養基，1/2MS培養基中植物凝膠要適當增加用量。另外滅菌後，倒出培養基前一定將培養基搖勻（ 帶防燙手套 ），因為是瓊脂密度大底層含量高，容易造成培養基強度不均勻。選擇Coolaber改良MS培養基（PM10121，pH5.8±0.2）含蔗糖和 瓊脂/植物凝膠 ，可以省去調pH步驟。

3. 水解酪蛋白有酸水解和酶水解之分，在使用過程中有無區別？

水解酪蛋白對胚狀體、不定芽的分化有良好的促進作用，通常用量在500mg/L，不管是酸解還是酶解，作用都是一樣的，酶解更有利於發揮其作用。

4. 怎麼溶解組培常用植物激素？

IAA、IBA、GA、玉米素、多效唑等應先溶解於少量95%的乙醇中，再加水定容配製成母液；如有結晶析出，可考慮用1/10體積的乙醇溶解後再定容；2，4-D易溶於鹼性水溶液，可用少量1mol/L的NaOH溶液溶解後再慢慢加水定容；KT和6-BA先用少量的HCL溶解，再加水定容到一定的濃度。

5. 細胞分裂素使用濃度？

一般情況下在培養基中加入0.1 10.0mg/L的細胞分裂素（6-BA/KT/ZT)，多數用1.0 2.0mg/L，KT濃度為0.5~2mg/L，這個也要根據實驗材料來調整。細胞分裂素可以單獨使用也可以與細胞生長素配合使用。

6. 哪些植物激素能高壓滅菌，哪些不能高壓滅菌。

IBA、NAA、6-BA、2,4-D可高溫高壓滅菌。 IAA、GA3、茉莉酸等不可高溫高壓滅菌，否則會分解失效，該類植物激素配製母液後需用0.22微孔濾膜過濾除菌，待培養基冷卻（50-60℃）後尚未凝膠前加入混勻。

7. 培養基的pH值會凝膠硬度有無影響。

有影響。若將培養基pH值調的過高（大於6），則培養基偏硬，增加接種的阻力，會對外植體造成損傷。若將培養基pH值調的過低（小於4.5），則培養基不能凝固，起不到固定外植體的作用。一般將培養基的pH調節至5.5~6.0為宜。

8. 滅菌過程會否影響培養基的pH值？

培養基中的蔗糖和激素在高溫滅菌過程中容易酸化，培養基pH值滅菌後會有所下降，滅菌前培養基的pH值偏低可能導致培養基不凝或偏軟。要求偏酸性的培養基可適當增加瓊脂或植物凝膠的用量。

9. 應用75%的酒精進行種子消毒的過程中需要注意的問題

種子在消毒過程中使用75%的酒精使用應慎重，酒精滲透力極強，消毒時間過長會直接影響種子發芽率，所以建議消毒時間不應超過1min。

10. 原始繁殖材料的消毒

組培中，作為原始繁殖材料的外植體消毒，直接影響整個培養過程的進行。從室外採回來的外植體需進行消毒，首先用自來水沖洗外植體，沖洗時間可根據採集部位不同而定，一般在5 15分鍾即可；關鍵在於在超凈台中進行葯劑的處理，常用的葯劑處理有70%的乙醇溶液、9%的次氯酸鈉溶液、和0.1 0.2%的升汞溶液，具體可根據實驗材料罩鉛而定。應注意的是經升汞滅菌的外植體必須用無菌水沖洗6~8次。

11. 怎麼處理植物組織培養過程中出現的各種污染？

植物組織培養過程中的污染來源主要分為3種，真菌、細菌和組織培養過程中的污染源。在操作過程中，難免有菌落入培養基或植物材料上，而導致污染。另外，不正確操作也會增加污染機率。預防蔽悶胡措施：通風，保持室內空氣乾燥，紫外宏攔殺菌等。污染物品和污染培養基不要在培養室近距離開瓶洗刷。

污染原因判斷：

（1） 培養基污染 若污染菌類是零星分散在培養基中，則可確定是人為引起的污染。比如培養基滅菌不徹底，開瓶時間過長，滅菌後存放時間過長等； 高溫蒸汽滅菌器的溫度、壓力、時間沒有正確設置；過濾滅菌過程中濾膜孔徑選擇、過濾滅菌器的滅菌處理、過濾滅菌操作等均會影響培養基的滅菌效果。

措施：嚴格按照實驗要求，滅菌規程操作。

（2）外植體污染 若污染菌類是從材料周圍長起，且發生在5天以後，則說明是材料帶的內生菌。可能是接種用具滅菌不徹底，接種時材料被污染；若從培養基以下開始長菌，發生時間較早，且有從里向外的趨勢，則說明是切口引起的污染，原因可能是未剪去兩個切口或者雖剪去切口但是所用器具帶菌；或者是未及時發現污染苗，接種過程中引起交叉污染；

措施：取材時應仔細選擇，以減少污染的發生。

（3）操作環節污染 接種室是否清潔、乾燥、密封，是否經常用紫外燈照射、甲醛熏蒸、70%的酒精噴霧殺菌等；超凈工作台擺放物品雜亂，長時間不換濾網，導致凈化能力降低；接種用具滅菌不徹底引起污染；操作不正確等。

措施：每次接種前半個小時，用****20%****的新潔爾擦洗室內設備、工作檯面，再用紫外燈照射****20min****。還可以噴灑****70%****的乙醇進行消毒。除了培養基、接種材料、器具和用具保證無菌外，同時在接種時還需要嚴格進行無菌操作。

出現污染後處理措施：

（1）真菌污染後，如果已形成孢子，則必須經高壓滅菌後扔掉；若使細菌污染，只要及時發現，將材料上部未感染菌的部分剪下轉接，材料仍可以用。

（2）用抗生素等殺菌葯劑的處理。但至今還未發現哪種抗生素能夠對各種菌都有效，並且常常也會影響植物材料的正常生長分化。另一些葯劑，雖有的殺菌效果好，但往往容易引起鹽害，也無法利用。

12. 外植體的選擇

為了使接種後的誘導得以成功，選擇的外植體應該是幼嫩的，處於生長旺盛時期的，而且選擇的外植體的體積不能過小，如若過小則會影響愈傷組織的形成，從而影響進一步的分化。因此，一般接種的外植體體積在0.5~1.0cm 2 的范圍內即可。最適的為莖尖、帶芽莖段，也可以利用葉子、子葉、根段、花器官組織等。

13. 植物莖段組織培養需要注意哪些問題

以莖段進行組織培養比較容易，一般取植物的嫩莖切段作為外植體，切成0.5~1cm長的小段進行接種，保證每個莖段有一個芽點和一片葉子，將芽點部位以下垂直插入培養基凝膠中進行生根培養。

14.外植體接種需要注意的操作事項

接種前首先進行滅菌消毒，接種所用的鑷子、解剖刀、剪刀等工具需要提前高溫高壓滅菌，提前10分鍾打開超凈工作台，滅紫外15~20min，操作人員要用75%的酒精棉球擦手、工作台和器皿，解剖刀和鑷子等隨時擦酒精灼燒，晾涼後備用。在無菌培養皿中或濾紙上切割外植體，接種到培養基表面，注意瓶口傾斜接近酒精燈火焰。

15. 組織培養中材料褐化現象

不同品種以及生理狀態引起的褐化狀態不同。培養基過高濃度的無機鹽及高水平細胞分裂素會使褐化現象加重。培養條件不當，例如光照過強、溫度過高、培養時間過長等，均可使多酚氧化酶的活性提高，從而加重外植體的褐變程度。

防治措施： 選擇合適的外植體。選擇生長處於旺盛的外植體，可以使褐變現象明顯減輕。合適的培養條件，無機鹽成分、植物生長物質水平、適宜溫度、及時繼代培養均可以減輕材料的褐變現象。使用抗氧化劑，在培養基中，使用半胱氨酸、抗壞血酸、PVP等抗氧化劑能夠較為有效地避免或減輕很多外植體的褐變現象。另外使用0.1% 0.5%的活性炭對防止褐變也有較為明顯的效果。連續轉移，對容易褐變的材料可間隔12 24小時的培養後，再轉移到新的培養基上，這樣經過連續處理7~10天後，褐變現象便會得到控制或大為減輕。

16. 材料玻璃化問題

植物材料不斷地進行離體繁殖時，有些培養物的嫩莖、葉片往往會呈半透明狀，呈水跡狀，這種現象通常稱為玻璃化。玻璃化為試管苗的生理失調症，試管苗生長緩慢、玻璃化的嫩莖不宜誘導生根，繁殖系數有所下降。當培養基上細胞分裂素水平較高時，容易出現玻璃化現象。愈傷組織的玻璃化問題主要表現在培養過程中愈傷組織鬆散，脆易碎。葉子或是長出的愈傷一段時間後在其周圍出現水漬化，繼而影響整個培養基。

防治措施: 在培養基中添加少量聚乙烯醇、脫落酸等物質，降低培養基中細胞分裂素含量及含氮化合物的用量，選用低NH 4 + 水平的B5培養基，都能夠在一定程度上減輕玻璃化的現象發生。增加光照，對減輕試管苗玻璃化的現象有明顯的作用；在培養基中添加活性炭、馬鈴薯汁、間苯三酚等可有效的減輕和防止玻璃化。

**17. 材料水浸狀、變色、壞死、莖斷面附近乾枯 **

可能原因： 表面殺菌劑過量，消毒時間過長，外植體選用不當（部位或時期）。

改進措施： 調換其他殺菌劑或降低濃度，縮短消毒時間，試用其他部位，生長初期取材。

18. 材料長期培養幾乎無反應

可能原因： 培養基不適合，生長素的選擇和用量不當，植物激素對生長發育和生理過程的調節作用，往往不是某一種植物激素的單獨效果。環境溫度不適宜。

改進措施： 更換培養基或調整培養基成分，尤其是調整鹽離子濃度；調整激素的種類與配比，增加生長素用量，例如使用人工合成的生長素類似物2，4-D等可有效促進細胞分裂和伸長，新器官的分化和形成；調整培養溫度等環境條件。

19. 愈傷組織生長過旺疏鬆

可能原因 ： 由於培養基中激素添加過量，培養室溫度偏高，礦物質等無機鹽含量不當等因素引起的。

改進措施 ：根據不同的品種、不同組織、不同器官，應適當減少激素用量，適當降低培養溫度，調整無機鹽（尤其是銨鹽）含量，適當提高瓊脂用量增加培養基硬度，避免愈傷組織生長過旺和疏鬆現象發生。

20. 愈傷組織生長緩慢太緊密

可能原因：細胞分裂素和生長素的用量過多，糖濃度過高。

改進措施：減少細胞分裂素用量，調整細胞分裂素與生長素比例，降低糖濃度。

21. 愈傷組織分化率低，畸形，分化出的芽多為葉狀芽或叢芽，芽生長困難，不易成苗。培養時間長時，再次愈傷組織化

可能原因 ：生長素用量偏高，溫度偏高。

改進措施 ：減少生長素用量，可以通過分化培養時在培養基中添加GA 3 （濃度在0.5~2mg/L之間）解決，並適當降低愈傷組織的培養溫度。

22 叢生苗過於細弱，不適於生根或移栽

可能原因：細胞分裂素濃度過高或赤黴素使用不當，產生過多的不定芽；溫度過高，光照短，光強不足；不及時的轉移和分切，生長空間小。

改進措施：減少細胞分裂素用量，免用赤黴素；延長光照時間，增強光照；及時轉接；降低接種密度；更換透氣的封口膜等。

23. 組織培養過程中出現黃化

引起黃化的主要原因是培養基中Fe的含量不足，各種礦質營養不均衡；培養環境通氣不良，瓶內有害氣體積累（乙烯、氨氣、甲醛）等會引起植物材料黃化脫落；激素配比不當；糖用量不足或長時間不轉移；pH值變化過大；培養溫度不適；光照不足等。

改進措施： 改善組培條件，在配製培養基過程中檢查儀器設備是否准確；降低組培苗的接種密度，及時轉接培養物；使用透氣的封口膜改善瓶內通氣狀況；適當調節pH值、激素配比和無機鹽濃度；控制培養室內溫度，適當增加光照。

24. 植物組培培養基都有哪些？

MS培養基 ：1962年穆拉辛格和斯庫格為煙草細胞培養而設計，其中硝酸鹽的濃度高，適合植物原生質體、細胞和組織培養。 B5培養基：1968年甘伯爾格為大豆細胞培養而設計，銨的濃度低。適合木本植物的組織和細胞培養。
富鹽平衡培養基 ：是目前使用最廣泛的一類，特點是：無機鹽濃度高，微量元素種類齊全，濃度高；元素間比例適當，離子平衡性好，具有較強的緩沖能力、穩定性好、營養豐富，一般培養時無需再加入有機成分。
高硝態氮培養基 ：代表性培養基有B5、N6、SH。特點是：硝酸鉀濃度高，氨態氮濃度低，含有較高濃度的硫胺素（VB1）。
中鹽培養基 ：大多是在MS培養基基礎上進行改良設計。特點是：大量元素無機鹽為MS的一半，微量元素種類減少、含量增高。維生素種類比MS增多，例如增加了生物素、葉酸等。
低鹽培養基 ：特點是：無機鹽、有機成分含量濃度低，多用作生根培養的培養基。

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25. 木本植物（油料植物）組織培養中遇到再生苗無法生根時怎麼辦？

一般常用的1/2MS或者1/2WPM基本能夠滿足。如果增殖用的基本都生產正常，到生根的時候出現落葉，只能通過排除法一樣樣分析。首先看下是不是培養溫度太高，使用瓶蓋後透氣性差，導致乙烯積累。其次，可以適當添加少量分裂素，或者更換生長素，以及多種生長素混合使用。

26. 培養基中添加糖類作為碳源物質，有何重要作用？

同樣作為碳源為植物細胞提供能量來源，蔗糖較葡萄糖能更好地調節培養基內的滲透壓。微生物生長所需的碳源最常用的是葡萄糖，採用蔗糖作為培養基的碳源，可一定程度上減少微生物的污染。生長素和蔗糖濃度決定愈傷組織中維管束的類型與數量。

27. 用於植物原生質體制備的材料，以及常用的滲透壓調節劑

用於植物原生質體的材料需要選取生長旺盛的細胞，幼嫩的組織。無菌試管苗的葉片、胚軸及子葉、花葯，以及愈傷組織（懸浮細胞）等。常用的調節原生質體滲透壓的穩定劑主要有甘露醇、山梨醇、葡萄糖、蔗糖等。滲透壓濃度一般為0.3~0.8 mol/L。

28. 組培苗移栽需要注意的問題

在移栽前打開三角瓶的封口膜，煉苗3 5d後取出小苗，用流水洗凈根部的培養基，然後移栽到盛有滅過菌的蛭石的營養缽中過度一下，但要注意不可直接向營養缽中澆營養液（容易長菌），用透明的塑料薄膜罩住小苗3 5d後移栽到土裡。

29. 光照強度多少lux是如何計算的

光照強度=光通量/單位面積。Lux的換算比較抽象，一般以燭光為計算單位，現在所用的以電源發光的光源，記作國際燭光，即25瓦特的電燈其光強度等於25國際燭光。1標准燭光=10.76 Lux。

30. LED光源在植物組織培養中的選擇

光是植物生長中最重要的環境因子之一，並不是所有的光都有助於植物的光合作用。LED光源460nm左右的藍光和660nm左右的紅光是植物最需要的光波，對植物的生長發育起著關鍵性的作用。

⑶ 維生素、葉酸和維生素C鐵有什麼關系

葉酸是維生素的一種，鐵屬於礦物質。 維生素是維持人體正常生命活動所必須的一類有機化合物. 維生素分為: 脂溶性維生素:A,D,E,K 水溶性維生素:Vc,Vb族(B 1,B 2,B6,B12),VPP(煙酸),泛酸,葉酸,VH(生物素),膽鹼。 礦物質分為： 常量元素:鈣、磷、鈉、鉀、氯、鎂、鋶 微量元素:除常量元素外都是微量元素,如:鐵、碘、鋅、硒、氟

⑷ 求助，生物素可否高壓滅菌

生物素本身是有活性的，經過高壓滅菌生物素的活性也就喪失了。所以生物素不能高壓滅菌。

⑸ 生物素是什麼意思及作用

一、生物素的定義：生物素又稱維生素H、輔酶R，是水溶性維生素，也屬於維生素B族，B7。它是合成維生素C的必要物質，是脂肪和蛋白質正常代謝不可或缺的物質。是一種維持人體自然生長、發育和正常人體機能健康必要的營養素。

生物素是20世紀30年代在研究酵母生長因子和根瘤菌的生長與呼吸促進因子時，從肝中發現的一種可以防治由於餵食生雞蛋蛋白誘導的大鼠脫毛和皮膚損傷的因子。

二、生物素的用途：生物素，即人們所熟知的維生素H，它能使身體將食物轉化為自身能量。生物素有利於細胞的健康和再生。糖尿病患者可以通過生物素改善血糖的調節。頭發和指甲的健康也需要生物素。

（1）保健用途

糖尿病。補充生物素，生物素通過改善胰島素和血糖的使用幫助改善血糖的調節。頭發和指甲。補充生物素可以修復薄弱爆裂的腳趾甲和手指甲，改善頭發的健康。生物素也可以修復那些由於生物素水平偏低引起過早的灰白頭發。

（2）美容用途

生物素具有出色的美容作用，可保持皮膚嫩白、指甲光滑等。這個發現也為生物素產品開拓了一大新葯業用途。美容化妝品行業是國際大產業之一，美容化妝品的國際市場總銷售額遠遠高於葯品的銷售額，生物素在美膚、美甲（指甲）及美發上的新應用必將導致葯用級生物素銷量的上升。

（3）科研用途

生物素可以用作核酸探針的標記物，它能與核酸分子的UTP或dUTP 5『位上的C相結合，並可與親和素結合而被檢測。在檢測的過程中，生物素只用作固定連接，而不用作信號檢測。

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生物素的食物來源：

（1）在牛奶、牛肝、蛋黃、動物腎臟、草莓、柚子、葡萄等水果、瘦肉、糙米、啤酒、小麥中都含有生物素。在復合維生素B和多種維生素的制劑中，通常都含有維生素H。

（2）富含該維生素的美食：芥末雙脆、 蟹肉西蘭花、芥茉菠菜、魚香腰花、油燜鱔魚、素炒三絲、蛋黃南瓜、芒果柳橙蘋果汁、胡蘿卜燉羊肉、松花淡菜粥、清燉蘿卜牛肉、銀杞明目湯、雞肝胡蘿卜粥、牛肉蔬

（3）菜濃湯、芒果葡萄柚汁、芒果柳橙蘋果汁、木瓜生薑汁、蘆薈檸檬汁、甜橙檸檬汁、杏獼猴桃汁。