❶ 微生物學的研究方法和技術有哪些
微生物學的研究方法和技術有:
顯微技術,純種培養技術,無菌技術,純種分離純化技術和微生物保藏技術。
顯微技術(micros):顯微技術是利用光學系統或電子光學系統設備,觀察肉眼所不能分辨的微小物體形態結構及其特性的技術。包括:①各種顯微鏡的基本原理、操作和應用的技術;②顯微鏡樣品的制備技術;③觀察結果的記錄、分析和處理的技術。
純培養:純培養最重要的是在於微生物的生理研究,方法是依靠滅菌和分離,是由巴斯德(L.Pasteur)和柯赫(R.Koch)建立起來的。在自然界中,有的培養條件很困難,特別是具有密切共生關系的生物及進行寄生性營養的生物;也有一些在理論上不可能進行純粹培養的生物。純培養(pure culture)——微生物學中把從一個細胞或一群相同的細胞經過培養繁殖而得到的後代,稱純培養。
無菌技術:無菌技術是在醫療護理操作過程中,保持無菌物品、無菌區域不被污染、防止病原微生物 侵入人體的一系列操作技術。無菌技術(aseptic technique) 是指在執行醫療、護理技術過程中,防止一切微生物侵入機體和保持無菌物品及無菌區域不被污染的操作技術和管理方法。
純化:純化是將多糖混合物分離為單一多糖的過程。在進行菌種鑒定時,所用的微生物一般均要求為純的培養物。得到純培養的過程稱為分離純化。
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❷ 微生物細胞生長的測定方法
微生物生長的測定方法有多種,根據研究對象或目的選擇。(一)微生物細胞數目的檢測方法1.總細胞計數法 顯微鏡直接記數法和比濁法(1)血球計數板法 血球汁數板中央有一個體積一定的計數室( 0.1mm3)。將菌懸液或孢子懸液在顯微鏡下計數,然後再按一定公式計算出細菌總數。 (2)塗片計數法 將一定體積(0.1ml)的樣品,均勻地塗在載片的一定面積內(1cm2)。在顯微鏡下計算細胞數量,推算1cm2所含細胞數目。(3)比濁法:菌體細胞培養液混濁,在一定范圍內,菌體數量與渾濁成正比,故可通過分光光度計或比色計求出渾濁度,通過與標准曲線對比,求出樣品中菌液濃度,算出個體數。特點:所得結果包括死菌和活菌。2. 活菌計數法(平板菌落記數法):是通過測定樣品在培養基上形成的菌落數來間接確定其活菌數的方法.故又稱平板計數法。特點:計算的結果是活菌落。注意:樣品稀釋度。一個活細胞形成一個菌落。(1)塗布平板法 用滅菌的塗布器將一定體積(不大於0.1ml)的適當稀釋度的菌液塗布在瓊脂培養基的表面,然後保溫培養有到菌落出現,記錄菌落的數目並換算成每毫升試樣中的活細胞數量。(2)倒平板法 將樣品稀釋到一定濃度,取一定體積(0.1—1ml)倒入冷卻至45℃的固體培養基混合,製成平板,培養後,出現菌落,由菌落數推算出的菌總數。3 濾膜過濾法:樣品同過微孔濾膜後,細菌收集在濾膜上,然後將濾膜放在培養基中培養,通過菌落計數求出樣品活菌落。 (二)微生物生長量和生理指標的測定方法測定微生物生長量及相關的生理指標,常用以下方法:1.濕重法:將單位體積微生物培養液離心,收集沉澱物,然後再稱重。2.乾重法:將離心得到的細胞沉澱物,置於100---105℃的烘箱中乾燥過夜除去水分,然後再稱重。特點:適合與菌體濃度高的樣品。表示菌體生長量。3、測定細胞內菌種化學成分:方法難,操做困難,但較准確。細胞內菌種化學成分多少(∝),反映群體中菌體數量的多少。(1) 測定含氮量:N在細胞內穩定,測定總N量,粗蛋白=N*6.25g。(2) 測定DNA:微生物細胞DNA含量穩定,採用熒光指示劑或染色劑與菌體DNA作用熒光比色或分光光度法測得DNA的含量。(3) 其他生理指標:如測定碳、磷、RNA、ATP、DAP(二氨基庚二酸)的含量等。 (二)絲狀微生物菌絲長度的測定方法 對於絲狀微生物。特別是絲狀真菌,通常是通過測定菌絲的長度變化來反映它們的生長速率。方法有: 1.培養基表面菌體生長速率測定法 主要測定一定時間內在瓊脂培養基表面的菌落直徑的增加值。 2.培養料中菌體速率測定法主要測定一定時間內在固體培養料中菌絲體向前延伸的距離。如:栽培食用菌的培養料。 3.單個菌絲頂端生長速率測定法 在顯微鏡下藉助目鏡測微尺測定在一定時間內單個菌絲的伸長長度。
❸ 微生物培養的方法有哪些
微生物培養法是在人為條件下繁殖微生物的方法。根據微生物的種類以及對養料、溫度、氧氣、水分、酸鹼度等環境條件的要求不同,並聯系生產和實驗上的具體要求,可有不同的培養方法。可分好氣培養法和厭氣培養法兩類。中海生物技術的培養基一是好氣微生物培養法,常用:
①搖床培養法,即將微生物接種於盛有液體培養基的三角瓶後,放在恆溫培養室中的搖床上作有節奏的振盪,使空氣不斷進入培養液中,促其良好生長;
②淺盤培養法,又稱表面培養法,在盤內放一淺層培養基,使微生物能夠充分接觸空氣,而有利於生長繁殖,但此法所需空間大,並且容易污染雜菌;
③深層培養法,適用於好氣微生物的大規模發酵培養,在大容積的液體培養基中,通入無菌空氣,並不斷攪拌,可使微生物充分接觸空氣,迅速繁殖並積累代謝產物。二是厭氣微生物培養法,實驗室常用化學還原劑或抽氣機吸除培養基中的分子氧,也有用靜止狀態的深層培養法。在生產中常用密封式發酵罐或不通風的固體發酵法。
❹ 微生物研究方法
主要為如下:
一、顯微技術研究
二、無菌操作技術研究
三、純種培養技術
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❺ 研究微生物生長的兩個先決條件是
研究微生物生長的兩個先決條件是純培養和同步生長。
微生物指的是低等植物的一大類,其不開花,沒有莖和葉子,不含葉綠素,不能自己製造養料,靠寄生生活,種類很多如細菌、真菌等。
「純培養」和「同步生長」分詞解釋:
純培養:
微生物學中把從一個細胞或一群相同的細胞經過培養繁殖而得到的後代,稱純培養。
純培養最重要的是在於微生物的生理研究,方法是依靠滅菌和分離,是由巴斯德(L.Pasteur)和柯赫(R.Koch)建立起來的。
在自然界中,有的培養條件很困難,特別是具有密切共生關系禪橋的生物及進行寄生性營養的生物;也有一些在理論上不可能進行純粹培養的生物。
同步生長:
培養物中的所有細胞都處於同一生輪顫長階段,能同時分裂的生長形式。
獲得同步生長的方法有兩種,一種是選擇法,將處於不同生長階段的細胞通過差異離心法或過濾法將它們分開;另一種是誘導法,控制環境條件如溫度、營養物等,使細胞繼續生長,但抑制細胞分裂,然後將環境條件恢復到最適,大多數細胞就同時出現分裂。
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❻ 微生物培養方法
微生物培養法是在人為條件下繁殖微生物的方法。根據微生物的種類以及對養料、溫度、氧氣、水分、酸鹼度等環境條件的要求不同,並聯系生產和實驗上的具體要求,可有不同的培養方法。可分好氣培養法和厭氣培養法兩類。中海生物技術的培養基一是好氣微生物培養法,常用:①搖床培養法,即將微生物接種於盛有液體培養基的三角瓶後,放在恆溫培養室中的搖床上作有節奏的振盪,使空氣不斷進入培養液中,促其良好生長;②淺盤培養法,又稱表面培養法,在盤內放一淺層培養基,使微生物能夠充分接觸空氣,而有利於生長繁殖,但此法所需空間大,並且容易污染雜菌;③深層培養法,適用於好氣微生物的大規模發酵培養,在大容積的液體培養基中,通入無菌空氣,並不斷攪拌,可使微生物充分接觸空氣,迅速繁殖並積累代謝產物。二是厭氣微生物培養法,實驗室常用化學還原劑或抽氣機吸除培養基中的分子氧,也有用靜止狀態的深層培養法。在生產中常用密封式發酵罐或不通風的固體發酵法。