微生物實驗步驟怎麼寫

『壹』 培養微生物的方法步驟介紹

微生物培養所培養的微生物通常是病菌、細菌、放線菌、真菌等，屬於生物培養的一種。

微生物培養步驟：

1.配置不同濃度的營養液稀釋液:取營養液1ml溶於9ml無菌水中,振盪 5min配成10%的溶液.

2.將容器口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰用吸管從此溶液中吸取1ml加入到裝有9ml無菌水的試管中.以此類推製成1%,0.1%,0.01%等不同濃度的稀釋液.

3.將試管口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰,左手拿試管,右手托培養皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰).將溶液倒入培養皿中,在各培養皿上標上濃度.

4.將有細菌生長的樣品容器口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰,用接種環挑取菌落上的少量菌體加入10%的營養液中.把接種環放在酒精燈上灼燒滅菌,再次取樣加入盛1%的營養液的培養皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰)中.重復這個操作,將各濃度的營養液接上種.

5.輕輕搖勻接上種的培養皿,置於恆溫箱內37攝氏度保存,3天後就有菌落出現.

微生物培養的基本條件：

1、影響微生物生長的因素

微生物的生長，除了受本身的遺傳特性決定外，還受到外界許多因素的影響。影響微生物生長的因素很多，簡要介紹如下。

1） 營養物濃度

細菌的生長率與營養物的濃度有關:μ=μmax*C/(K+C) ，營養物濃度與生長率的關系曲線是典型的雙曲線。

K值是細菌生長的很基本的特性常數。它的數值很小，表明細菌所需要的營養濃度非常之低，所以在自然界中，它們到處生長。然而營養太低時，細菌生長就會遇到困難，甚至還會死亡。這是因為除了生長需要能量以外，細菌還需要能量來維持它的生存。這種能量稱為維持能。另一方面，隨著營養物濃度的增加，生長率愈接近最大值。

2）溫度

在一定的溫度范圍內，每種微生物都有自已的生長溫度三基點：最低生長溫度、最適生長溫度和最高生長溫度。在生長溫度三基點內，微生物都能生長，但生長速率不一樣。微生物只有處於最適生長溫度時，生長速度才最快，代時最短。超過最低生長溫度，微生物不會生長，溫度太低，甚至會死亡。超過最高生長溫度，微生物也要停止生長，溫度過高。也會死亡。一般情況下，每種微生物的生長溫度三基點是恆定的。但也常受其它環境條件的影響而發生變化。

根據微生物最適生長溫度的不同，可將它們分為三個類型：

a.嗜冷微生物：其是適生長溫度多數在-10℃－20℃之間

b.中溫微生物：其最適生長溫度一般在20℃－45℃之間

c.嗜熱微生物：生長溫度在45℃以上。

3）水分

水分是微生物進行生長的必要條件。芽孢、孢子萌發，首先需要水分。微生物是不能脫離水而生存的。但是微生物只能在水溶液中生長，而不能生活在純水中。各種微生物在不能生長發育的水分活性范圍內，均具有狹小的適當的水分活性區域。

4）氧氣

按照微生物對氧氣的需要情況，可將它們分為以下五個類型。

a.需氧微生物：這類微生物需要氧氣供呼吸之用。沒有氧氣，便不能生長，但是高濃度的氧氣對需氧微生物也是有毒的。很多需氧微生物不能在氧氣濃度大於大氣中氧氣濃度的條件下生長。絕大多數微生物都屬於這個類型。

『貳』 微生物檢驗樣品採集步驟

微生物檢驗樣品採集步驟

樣品的採集是微生物檢驗的重要組成部分，用於檢驗的樣品數量和狀況具有重要意義。這對取樣人員和制樣人員提出了很高的專業要求，既要保證樣品的代表性和一致性，又要保證整個微生物檢驗過程在無菌操作的條件下進行。微生物檢驗樣品的採集大致分為取樣、包裝密封、標識、樣品的運輸、接收、保存幾個環節。下面是我為大家帶來的微生物檢驗樣品的採集步驟的知識，歡迎閱讀。

樣品的取樣

取樣是指在一定質量或數量的產品中，取一個或多個代表性樣品，用於感官、微生物和理化檢驗的全過程。

首先在取樣之前應確認貨、證是否相符。其次取樣工具要達到無菌的要求，對取樣具和一些試劑材料應提前准備、滅菌。如果使用不合適的採集工具，可能會破壞樣品的完整性，甚至使樣品採集毫無意義。

應根據不同的樣品特徵和取樣環境，對取樣物品和試劑進行事先准備和滅菌等操作。另外要保證樣品能夠代表整批產品，其檢測結果應具有統計學有效性，樣品到達實驗室時的狀況應能反映出取樣時產品的真實情況。

取樣時應根據不同的產品類型、產品狀態等選擇不同的取樣方法和標准。

① 包裝食品：對於直接食用的小包裝食品，盡可能取原包裝，直到檢驗前不要開封，以防污染。對於桶裝或大容器包裝的液體食品，取樣前應搖動或用滅菌棒攪拌液體，盡量使其達到均質;取樣時應先將取樣用具浸入液體內略加漂洗，然後再取所需量的樣品，裝入滅菌容器的量不應超過其容量的3/4，以便於檢驗前將樣品搖勻;取完樣品後，應用消毒的溫度計插入液體內測量食品的溫度，並作記錄。盡可能不用水銀溫度計測量，以防溫度計破碎後水銀污染食品;如為非冷藏易腐食品，應迅速將所取樣品冷卻至0～4℃。對於大塊的桶裝或大容器包裝的冷凍食品，應從幾個不同部位用滅菌工具取樣，使樣品具有充分的代表性;在將樣品送達實驗室前，要始終保持樣品處於冷凍狀態樣品一旦融化，不可使其再凍，保持冷卻即可。

②並梁 生產過程中的取樣：劃分檢驗批次，應注意同批產品質量的均一性;如用固定在貯液桶或流水作業線上的取樣龍頭取樣時，應事先將龍頭消毒;當用自動取樣器取不需要冷卻的粉狀或固體食品時，必須履行相應的管理辦法，保證產品的代表性不被人為地破壞。

③ 液體產品：通常情況下，則蔽旁液態產品較容易獲得代表性樣品。液態產品一般盛放在大罐中，取樣時，可連續或間歇攪拌，對於較小的容器，可在取樣前將液體上下顛倒，使其完全混勻。較大的樣品(100～500ml)要放在已滅菌的容器中送往實驗室，實驗室在取樣檢測之前應將液體再徹底混勻一次。

④ 固體樣品：固態樣品常用的取樣工具有滅菌的解剖刀、勺子、軟木鑽、鋸子和鉗子等。麵粉或奶粉等易於混勻的食品，其成品質量均勻、穩定，可以抽取小樣品檢測(如100 g)。但散裝樣品就必須從多個點取樣，且每個樣品都要單獨處理，在檢測前徹底混勻，並從中取一份樣品進行檢測。肉類、魚類的食品既要在表皮取樣叉要在深層取樣。深層取樣時要小心不要被表面污染。有些食品，如鮮肉或熟肉可用滅菌的解剖刀或鉗子取樣;冷凍食品可在未解凍的狀態下可用鋸子、木鑽或電鑽(一般斜角鑽人)等獲取深層取樣樣品;全蛋粉等粉末狀樣品取樣時，可用滅菌的取樣器斜角插入箱底，樣品填滿取樣器後提出箱外，再用滅菌小勺從上、中、下部位取樣。

⑤ 表面取樣：通過惰性載體可以將表面樣品上的微生物轉移到合適的培養基中進行微生物檢驗，這種惰性載體既不能引起微生物死亡，也不應使其增殖。這樣的載體包括清水、拭子、膠帶等。取樣後，要使微生物長期保存在載體上，既不死亡又不增殖十分困難，所以應盡早地將微生物轉接到適當的培養基中。轉移前耽誤的時間越長，品質評價的可靠性就越差。表面取樣技術只能直接轉移菌體，不能做系列稀釋，只有在菌體數量較多時才適用。其最大優點是檢測時不破壞樣品。

⑥ 空氣樣品的採取：空氣的取樣方法有直接沉孫橡降法和過濾法。在檢驗空氣中細菌含量的各種沉降法中，平皿法是最早的方法之一，到目前為止，這種方法在判斷空氣中浮游微生物分次自沉現象方面仍具有一定的意義。過濾法是使定量的空氣通過吸收劑，然後將吸收劑培養，計算出菌落數。

樣品的包裝密封

為保證樣品的完整性，裝有樣品的包裝物應進行封口，以證實其可靠性，即從取樣地點至實驗室這段時間不發生任何變化。可採用自粘膠、特製的紙黏著劑或者石蠟等封口，封口處應留有填寫日期、檢驗人員和貨主簽字的地方，然後蓋上專用的印章。

樣品的標識

取樣過程中應對所取樣品進行及時、准確的標記。取樣結束後，應由取樣人寫出完整的取樣報告。樣品應盡可能在原有狀態下迅速運送或發送到實驗室。

保存的樣品應進行必要的清晰的標記，內容包括：樣品名稱，樣品描述，樣品批號，企業名稱，地址，取樣人，取樣時間，取樣地點，取樣溫度(必要時)，測試目的等。標記應牢固並具防水性，確保字跡不會被擦掉或脫色。所有盛樣容器必須有和樣品一致的標記。在標記上應記明產品標志與號碼和樣品順序號以及其他需要說明的`情況。標記應牢固並具防水性，確保字跡不會被擦掉或脫色。當樣品需要托運或由非專職取樣人員運送時，必須封死樣品容器。

樣品的運輸

取樣結束後應盡快將樣品送往實驗室檢驗。如不能及時運送，冷凍樣品應存放在-15℃以下的冰箱或冷庫內;冷藏和易腐食品存放在0～4℃ 冰箱或冷藏庫內;其他食品可放在常溫暗處。微生物檢驗樣品應在取樣後6 h以內送達實驗室進行檢驗。

樣品的運輸過程必須有適當的保護措施(如密封、冷藏等)，以保證樣品的微生物指標不發生變化。運送冷凍和易腐樣品應在包裝容器內加適量的冷卻劑或冷凍劑，但樣品不可與冷卻劑或冷凍劑直接接觸，保證途中樣品不升溫或不融化，必要時可於途中補加冷卻劑或冷凍劑。運送水樣時應避免玻璃瓶搖動，水樣溢出後又迴流瓶內，從而增加污染。如不能由專人攜帶送樣時，也可托運。托運前必須將樣品包裝好，應能防破損，防凍結或防易腐和冷凍樣品升溫或融化。在包裝上應註明“防碎”、“易腐”、“冷藏”等字樣。同時做好樣品運送記錄，寫明運送條件、日期、到達地點及其他需要說明的情況，並由運送人簽字。

樣品的接收

在接收樣品時，實驗室應與送樣人共同相互確認樣品與委託單上的內容是否一致。確認內容一般包括：品名;檢驗目的;檢驗項目;形狀和包裝狀況(同體、粉狀、冷凍、冷藏、零售、批發、無菌包裝等都不同);抽樣數量(個數和質量);抽樣日期及送達日期;抽樣地點;隨貨樣附帶的許可申請單編號;生產國或者生產廠家名稱(進口商品);抽樣者的單位、姓名及有無封印;其他搬運、儲存、檢驗時的注意事項。

樣品的保存

實驗室接到樣品後應在36 h內進行檢測(貝類樣品通常要在6 h內檢測)，對不能立即進行檢測的樣品，要採取適當的方式保存，使樣品在檢測之前維持取樣時的狀態，即樣品的檢測結果能夠代表整個產品。實驗室應有足夠和適當的樣品保存設施(如冰箱或冰櫃等)。保存的樣品應進行必要和清晰的標記，內容包括：樣品名稱，樣品描述，樣品批號，企業名稱、地址，取樣人，取樣時間，取樣地點，取樣溫度(必要時)，測試目的等;樣品在保存過程中應保持密封性，防止引起樣品pH值的變化。

不同類型的樣品，保存方法不同：

① 易腐樣品：要用保溫箱或採取必要的措施使樣品處於低溫狀態(0～4℃)，應在取樣後盡快送至實驗室，並保證樣品送至實驗室時不變質。易腐的非冷凍食品檢測前不應冷凍保存(除非不能及時檢測)。如需要短時間保存，應在0～4℃ 冷藏保存，但應盡快檢驗(一般不應超過36h)，因為保存時間過長會造成樣品中嗜冷細菌的生長和嗜中溫細菌的死亡。

② 冷凍樣品：要用保溫箱或採取必要的措施使樣品處於冷凍狀態，送至實驗室前樣品不能融解、變質。冰凍樣品要密閉後置於冷凍冰箱(通常為-l8℃)，檢測前要始終保持冷凍狀態，防止樣品暴露在二氧化碳氣體中。

③ 其他樣品：應用塑料袋或類似的材料密封保存，注意不能使其吸潮或水分散失，並要保證從取樣到實驗室進行檢驗的過程中其品質不變。必要時可使用冷藏設備。

『叄』 微生物實驗紙片法測定測定抗生素效價方法的整套實驗步驟

實驗前准備：4個培養皿，2支移液管，1支塗布棒，並將培養皿包好滅菌，取一定的蒸餾水滅菌製成無菌水。
1、配製營養瓊脂培養緩段基：稱取營養瓊脂9.6g，加入300ml蒸餾水，加熱煮沸後將培養基導入錐形瓶，然後包紮滅菌(121°C，20min)。
2、倒平板：在無菌環境操作下，將上述培養基倒入4個平板，並編號1，2,，3，4.
3、制菌懸液：用5ml無菌移液管在無菌操作下，吸取3ml無菌水到菌種斜面，用接種環輕刮下菌苔，搗碎，塞上棉塞，振盪片刻。
4、將抗生素稀釋成10-3,10-4，10-5,10-6四種不同稀釋度的梯度液。
5、取直徑1cm圓形濾紙若干，取4個圓形濾紙分別放入10-3,10-4，10-5,10-6的抗生素溶液中浸泡一會。
6、待平板凝固後接種，各取0.2ml菌懸液倒入平板中，用塗布棒抹勻。
7、在1,2,3,4,號已接種的平板中分別放入4個浸泡在10-3,10-4，10-5,10-6抗生素溶液中的濾紙擾燃譽片，並注意個紙片間的距離應較大。
8、培養，放入37°c恆溫箱中培養24h。
9、觀察測量並記錄數據，觀察抗生素濾紙周圍的透明抑菌圈，測量16個抑菌圈的大小，求算不同濃度抗生素段空濾紙抑菌圈的大小。

『肆』 怎麼用瓊脂培養微生物（實驗方法,步驟) 現有材料：培養皿，瓊脂粉，各種細菌

大多數細菌可在蛋白腖牛肉膏培養中生長，就是蛋白腖牛肉膏培養基為例實驗步驟如下：
1、培養皿用報紙包起來，滅菌
2、配製培養基，培養基完全溶於水後，調PH值7.2-7.4之間。
3、配製好並調完PH值的培養基中，按1.5%的比例加入瓊脂粉。（教材上寫要加熱溶解後再滅菌，根據工作經驗，加入培養基中，直接滅菌，高溫狀態下，瓊脂自然就溶解了）
4、滅菌後的培養基倒入平板中，瓊脂凝固後，倒置。
5、接種環在酒精燈的火焰上燒紅後，降溫，取一環菌，在平板上劃線。
6、劃線後的平板，倒置放入培養箱中培養。
7、培養24小時後，觀察菌苔形態、菌生長情況。
以上是我工作的步驟，可能與書上有出入，因工作時間長了，有些細節就不太注意了。還是要以微生物實驗書以主。

『伍』 常見微生物實驗步驟怎麼寫

1、葯敏試驗：主要是通過測定抑菌圈的范圍來確定葯物的療效。
2、血凝實驗：通過測定病毒與紅細胞反應的濃度測定其抗體效價。
3、PCR：細菌主要通過16srRNA確定其細菌的種類。
4、中和實驗：主要測定病毒的稀釋濃度。
5、革蘭氏染色：確定是革蘭氏陽性還是陰性
6、瑞氏染色：主要是對細菌染色。

『陸』 怎樣設計一個微生物實驗

科普性的？有滅菌鍋不？
簡單地搞一個：培養與觀察手指和空氣中的微生物
需要：滅菌鍋、培養皿、250ml三角瓶、酵母膏、蛋白腖、NaCl、瓊脂、NaOH、瓊脂粉、pH試紙、酒精燈、培養箱。
步驟：
1，按照
蛋白腖
10g/L、酵母粉
5g/L、NaCl
5g/L的量配置培養基，NaOH調pH到7.0，分裝到三角瓶中，然後分別加入15g/L的瓊脂粉；用報紙或牛皮紙包好培養皿。
2，在滅菌鍋中121℃滅菌培養基、培養皿20分鍾；
3，
混勻培養基，稍等到60℃左右，酒精燈火焰周圍將培養基倒到培養皿里，每皿內厚度約0.6cm。
4，
等培養基凝固好就可以實驗了。
5，
每人在培養基上按手印，另外將幾個培養皿打開蓋子放在空氣中15分鍾左右，或者根據學生興趣自己在培養基上接種（口水、臉、頭屑、泥土等等）。
6，包好接種完的培養皿，37℃培養14h左右。
7，觀察培養皿上各種顏色、不同形態菌落的微生物。
8，
有條件的話再挑菌落，塗到載玻片上，進行顯微鏡下的觀察。