1. 高中生物實驗中常用的染料有哪些
1、龍膽紫,又名甲紫、結晶紫
甲紫屬於三苯甲烷類染料消毒劑,和微生物酶系統發生氫離子的競爭性對抗,使酶成為無活性的氧化狀態,從而發揮殺菌作用。主要對革蘭氏陽性菌如葡萄球菌、白喉桿菌,以及綠膿桿菌、白念珠菌、表皮癬菌有殺滅作用,對其他革蘭氏陰性菌和抗酸菌幾乎無作用。
2、醋酸洋紅
在塗抹法與壓碎法中,醋酸洋紅常被用作核、染色體的固定和染色劑。在煮沸的45%醋酸中加洋紅使之飽和,再加入微量的鐵離子,便使醋酸洋紅材料在為醋酸固定的同時,洋紅將核或染色體染成紅色。PH呈酸性。
3、斐林試劑
二價銅離子的酒石酸鉀鈉配合物,可以被脂肪醛或還原性糖還原為氧化亞銅。斐林試劑為深藍色溶液, 在與脂肪醛或還原性糖共熱時, 藍色消失,析出紅色的氧化亞銅沉澱。在氧化亞銅析出過程中, 反應液的顏色可能經過由藍色→綠色→黃色→紅色沉澱的逐漸變化,反應較快時,直接觀察到紅色沉澱。
它與可溶性的還原性糖(葡萄糖、果糖和麥芽糖)在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的氧化亞銅沉澱。因此,斐林試劑常用於鑒定可溶性的還原性糖的存在與否。
4、班氏試劑
本尼迪特試劑,也稱班氏試劑、本尼迪克試劑、本尼迪克試液或班乃德試劑,是一種淺藍色化學試劑。本尼迪特試劑是斐林試劑的改良試劑,它與醛或醛糖反應生成紅黃色沉澱。它是由硫酸銅、檸檬酸鈉和無水碳酸鈉配置成的藍色溶液,可以存放備用,避免斐林溶液必須現配現用的缺點。
5、酚酞
酚酞是一種常用酸鹼指示劑,廣泛應用於酸鹼滴定過程中。通常情況下酚酞遇酸溶液不變色,遇中性溶液也不變色,遇鹼溶液變紅色。
6、溴麝香草酚藍
溴麝香草酚藍(Bromothymol Blue),又名溴百里香酚藍。英文簡稱BTB。溴麝香草酚藍是一種酸鹼指示劑、吸附指示劑。 在生物學實驗中常用作水生生物的呼吸試劑。
2. 微生物實驗室常用試劑有那些往XDJM指點一二
微生物學實驗室常用試劑與培養基
第一節 常用試劑及其使用方法
一、診斷用紙片
⑴ 桿菌肽紙片(0.04U/片):抑菌圈>10mm為敏感。質控菌株: D群鏈球菌陰性, A群鏈球菌陽性。
⑵ SMZ紙片(1.25μg/片、23.75μg/片):出現抑菌圈即為敏感。質控菌株:D群鏈球菌陽性, A群鏈球菌陰性。
⑶ 新生黴素紙片(5.0μg/片):抑菌圈≥16mm為敏感。質控菌株:表皮葡萄球菌陽性,腐生葡萄球菌陰性。
⑷ O129紙片、奧普托欣(Optochin)紙片:參見第五節《生化試驗培養基》。
二、診斷用血清
1.沙門菌屬診斷血清
⑴ A-F群O多價診斷血清。
⑵ 特異O群因子診斷血清:常用的有O2,O4,O7,O9,O10診斷血清。
⑶ 特異H因子診斷血清 常用的有Ha,Hb,Hc,Hd,Hgm,Hi,Hf、Vi因子診斷血清。
2.志賀菌屬診斷血清
志賀菌屬4種多價血清:痢疾志賀菌Ⅰ、Ⅱ血清,福氏志賀菌多價血清及分型血清(1~6型),宋內志賀菌診斷血清,鮑氏志賀菌多價血清及分型血清。
3.致病性大腸埃希菌診斷血清
腸致病性大腸埃希菌(EPEC)診斷血清,產腸毒素大腸埃希菌(ETEC)診斷血清,腸侵襲性大腸埃希菌(EIEC)診斷血清,腸出血性大腸埃希菌(EHEC)診斷血清O157: H 7。
4.霍亂弧菌O1、O139混合多價診斷血清及稻葉、小川、彥島O139分型血清
5.腦膜炎奈瑟菌多價血清及分群血清
6.鏈球菌分類診斷血清
7.肺炎鏈球菌診斷血清
8.耶爾森菌診斷血清
三、常用染色液
1.革蘭染色液
⑴ 結晶紫溶液 A液:結晶紫 20g,95%乙醇20 ml; B液:草酸銨 0.8g, 蒸餾水80 ml。
染色前24h將A液、 B液混合,過濾後裝入試劑瓶內備用。
⑵ 碘液:碘1g,碘化鉀2g,蒸餾水300ml。
將碘與碘化鉀混合並研磨,加入幾毫升蒸餾水, 使其逐漸溶解,然後研磨,繼續加入少量蒸餾水至碘、碘化鉀完全溶解。最後補足水量。也可用少量蒸餾水將碘化鉀完全溶解,再加入碘片,待完全溶解後,加水至300ml。
⑶ 脫色液:95%乙醇
⑷ 復染液:沙黃2.5g,95%乙醇100ml為貯存液,取貯存液10ml,加蒸餾水90ml為應用液。
2.抗酸染色液
⑴ 鹼性復紅染色液: ①萋納石炭酸復紅溶液:鹼性復紅乙醇飽和溶液10ml,5%石炭酸溶液90ml。 ②脫色液:濃鹽酸3ml,95%乙醇97ml。③復染液(呂弗勒美藍液):美藍乙醇飽和溶液30ml,100g/L氫氧化鉀溶液0.1ml,蒸餾水100ml。
⑵ 金胺O-羅丹明B染色液: ①羅丹明B液:羅丹明B 0.1g加蒸餾水100ml。②1g/L金胺O液:金胺O液0.1g加蒸餾水95ml,再加入純石炭酸 5ml,混勻。③3%鹽酸乙醇。④稀釋美藍液:呂弗勒美藍液100ml,加蒸餾水90ml,混勻。
3.鞭毛染色液(改良Ryu法)
A液:5%石炭酸10ml,鞣酸2g,飽和硫酸鋁鉀溶液 10ml; B液:結晶紫乙醇飽和液。應用液A液10份,B液1份,混合,室溫存放備用。
4.異染顆粒染色液
甲液:甲苯胺藍 0.15g,孔雀綠 2g/L, 95% 乙醇2.0ml,蒸餾水100ml。乙液:碘 2g,碘化鉀3g,蒸餾水300ml。
先將碘化鉀加入少許蒸餾水(約2ml),充分振搖,待完全溶解,再加入碘,使完全溶解後, 加蒸餾水至300ml。
5.莢膜染色液
⑴ 印度墨汁或50g/L黑色素水溶液
⑵ 5g/L苯胺藍水溶液。
第二節 基礎培養基
一、液體基礎培養基
1.蛋白腖水
[用途]
用於細菌靛基質試驗;一般細菌培養和傳代。
[配法]
蛋白腖(或胰蛋白腖)10g,氯化鈉 5g,蒸餾水1L。
將上述成分溶於水中,校正pH 至7.2,分裝試管,每管2~3ml,置121℃滅菌15min備用。
[質量控制]
大腸埃希菌生長良好,靛基質陽性;傷寒沙門菌生長良好,靛基質陰性。
2.營養肉湯
[用途]
一般細菌的增菌培養,加入1%的瓊脂粉亦可作營養瓊脂。
[配法]
蛋白腖10g,牛肉膏3g,氯化鈉5g,蒸餾水1L。
將上述成分稱量混合溶解於水中,校正pH至7.4,按用途不同分裝於燒瓶或試管內。經121℃滅菌15min,作無菌試驗後冷藏備用。
[質量控制]
金黃色葡萄球菌、傷寒沙門菌、化膿性鏈球菌生長良好。
[保存]
置冰箱3周內用完。
3.牛肉浸液培養基
[用途]
細菌培養最基礎的培養基,除用於一般細菌的培養外,又可以作營養瓊脂及其它培養基的基礎。
[配法]
新鮮除脂牛肉 500g,氯化鈉5g
蛋白腖10g,蒸餾水1L。
先將牛肉清洗,除脂肪、肌腱,並切塊絞碎。稱取500g置容器加入蒸餾水1L,攪勻後置冰箱過夜,次日煮沸加熱30min,並用玻棒不時攪拌用絨布或麻布進行粗過濾,再用脫脂棉過濾即成。在過濾中加入蛋白腖10g、氯化鈉5g溶解後,用氫氧化鈉溶液校正pH至7.6~7.8,並加熱煮沸10min,補充蒸餾水至1L,最後用濾紙過濾,呈清晰透明、淡黃色液體,經121℃15min滅菌備用。
[用法]
根據用途不同可以製成營養肉湯,以此為基礎製成其它培養基。如製作固體培養基,加入瓊脂15 ~20g/L即可。
[質量控制]
金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、傷寒沙門菌、痢疾志賀菌等均生長良好。
[保存]
置4℃冰箱內可以使用較長時間。
注:商品牛肉浸膏粉,一般使用量為3~5g/L。
二、固體基礎培養基
1.營養瓊脂
[用途]
一般細菌和菌株的純化及傳種。 [配法]
蛋白腖10g,牛肉膏3g,氯化鈉5g,瓊脂粉(優質)12g,蒸餾水1L。
將上述成分(除瓊脂外)溶於水中,校正pH 7.2~7.4後加入瓊脂,煮沸溶解,根據用途不同進行分裝,經121℃滅菌15min,傾注平板或製成斜面,冷藏備用。
[質量控制]
金黃色葡萄球菌菌落呈淺黃色; 痢疾志賀菌菌落無色;銅綠假單胞菌 菌落無色或淺綠色。
[保存]
置4℃冰箱保存,2周內用完。
2.血瓊脂培養基
[用途]
一般病原菌的分離培養和溶血性鑒別及保存菌種。
[配法]
pH 7.4~7.6牛肉浸液瓊脂 100ml,脫纖維羊血(或兔血) 5~10ml。
將血瓊脂基礎經121℃滅菌15min,待冷卻至50℃左右以無菌手續加入羊血,搖勻後立即傾注滅菌平皿內,待凝固後,經無菌實驗冷藏備用。
[質量控制]
化膿性鏈球菌ATCC 19615生長良好,β-溶血;肺炎鏈球菌ATCC 6303生長良好,α-溶血;表皮葡萄球菌ATCC 12228 生長良好,不溶血。
[保存]
置4℃冰箱,1周內用完。
3.巧克力瓊脂培養基
[用途]
主要用於嗜血桿菌的分離培養,亦可用於奈瑟菌的增殖培養。
[配法]
鮮牛肉浸出液1L, 蛋白腖10g,
氯化鈉5g,瓊脂粉12g,無菌脫纖維
羊血或兔血100ml。
將上述成分(除兔血外)加熱溶解,調pH至7.2,置121℃15min高壓滅菌,待冷至約85℃,以無菌方式加入兔血,搖勻後置85℃水浴中,維持該溫度10min,使之成巧克力色。取出置室溫冷至約50℃,傾注平板或製成斜面備用。
[質量控制]
流感嗜血桿菌ATCC 10211、肺炎鏈球菌ATCC 6305生長良好,菌落典型。
[保存]
置4℃冰箱,1周內用完。
4.胱氨酸胰化酪蛋白瓊脂
[用途]
常用於測定腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌以及營養要求較高細菌的糖發酵試驗。
[配法]
胱氨酸0.5g, 胰化酪蛋白20g,氯化鈉5g,亞硫酸鈉0.3g,瓊脂3.5g,酚紅0.0175g,蒸餾水1L。
將上述成分(酚紅除外)混合溶解,調pH至7.2,加入酚紅指示劑。分裝試管,115℃滅菌15min。
[用法]
用於測定糖發酵時,按需要加入各種糖溶液,將待檢標本直接種於培養基管內,置35℃孵箱,18~24h觀察結果。培養基由紅色變為黃色為陽性,不變色為陰性。
第三節 保存和增菌培養基
一、菌種保存培養基
[配法]
蛋白腖10g,牛肉膏5g,氯化鈉3g,磷酸氫二鈉2g,瓊脂粉4.5g,蒸餾水1L 。
將上述成分混合於水中,加熱溶解,調pH至7.4~7.6,分裝試管2/3左右高度,121℃高壓滅菌15min,成為半固體培養基,備用。
[質量控制]
培養基呈淡黃色半固體狀。大腸埃希菌(ATCC 25922)生長良好,動力陽性;福氏志賀菌(ATCC 12022)生長良好,動力陰性;金黃色葡萄球菌(ATCC 25923)生長良好,動力陰性。
二、增菌培養基
1.葡萄糖肉湯
[用途]
用於血液增菌。
[配法]
蛋白腖(或月示 腖)10g,氯化鈉5g,肉浸液(或心浸液)1L,葡萄糖3g,枸櫞酸鈉3g,5g/L對氨基苯甲酸水溶液10ml,1mol/L硫酸鎂溶液20ml,青黴素酶1000 U。
將蛋白腖、氯化鈉混合於肉浸液中加熱溶解,再加入葡萄糖、枸櫞酸鈉、對氨苯甲酸及硫酸鎂,繼續煮沸5min,並補足失水,調整pH至7.8。
過濾分裝,每瓶50ml,高壓滅菌115℃20min後,每瓶加入青黴素酶50 U,經無菌試驗合格後,冷卻備用。
[用法]
將採取的血液標本,以無菌手續注入培養瓶中(血液1ml,培養液10ml),置35℃培養箱內,每天1次取出觀察結果。如有細菌生長,可出現數種不同的表現,應隨時作分離培養,可選用血瓊脂、伊紅美藍瓊脂及巧克力瓊脂平板等。無細菌生長表現的培養瓶,需連續觀察7d,仍無細菌生長方可棄去。在觀察的過程中,至少應作兩次分離培養。
注:
⑴ 枸櫞酸鈉為抗凝劑,可使血液加入培養基中不凝固。
⑵ 對氨基苯甲酸主要中和血液中磺胺類葯物的抑菌作用。
⑶ 硫酸鎂主要抑制血液中存在的四環素、金黴素、新黴素、多粘菌素及鏈黴素的抑菌作用。
⑷ 本培養基近年來有許多改良配方,如加入0.3%~0.5%酵母浸膏以增加營養;加0.2%核酸刺激細菌生長;加0.1%粘液素能被覆於細菌的表面,保護細菌免受抗體破壞;加入聚茴香腦磺酸鈉(SPS)能中和補體的抗葯作用從而提高檢出率。
2.血液增菌培養基
[用途]
血液和骨髓液病原菌的增菌培養。
[配法]
蛋白腖10g,氯化鈉5g,牛肉膏3g,葡萄糖1g,酵母膏粉3g,枸櫞酸鈉3g,磷酸氫二鉀2g,5g/L對氨基苯甲酸溶液5ml,1mol/L硫酸鎂溶液20ml, 4g/L酚紅溶液6ml,青黴素酶50 U,聚茴香腦磺酸鈉(SPS) 0.3g,蒸餾水1L。
將上述成分(除酚紅指示劑、青黴素酶外)混合加熱溶解,校正pH至7.4,再加酚紅,過濾分裝每瓶30~50ml,經121℃滅菌15min和35℃24h無菌試驗備用。臨用時每瓶加入1.5~2.5 U青黴素酶。
[質量控制]
傷寒沙門菌ATCC 50096、白色念珠菌ATCC 10231、化膿性鏈球菌ATCC 19615、肺炎鏈球菌ATCC 6305、金黃色葡萄菌ATCC 25923、銅綠假單胞菌ATCC 27853均生長良好。
3.亞硒酸鹽增菌培養基
[用途]
沙門菌增菌培養。
[配法]
蛋白腖5g,乳糖4g,磷酸氫二鈉4.5g,磷酸二氫鈉5.5g,亞硒酸氫鈉4g,蒸餾水1L。
先將亞硒酸鹽加到200ml蒸餾水中,充分搖勻溶解。其它成分稱量混合,加入蒸餾水800ml,加熱溶解,待冷卻後兩液混合,充分搖勻,校正pH 7.0~7.1(通過調整磷酸鹽緩沖對的比例來校正pH值)。最後分裝於15×150mm的試管內,每管10ml。置水浴隔水煮沸10~15min,立即冷卻,置4℃冰箱保存備用。
[用法]
取新鮮標本1g或棉拭子采樣直接種於該培養管內。搖動後置35℃培養過夜。如發現均勻混濁,管底有紅色沉澱物,表示細菌生長。然後取培養物分離在選擇性培養基上,如SS瓊脂、麥康凱瓊脂平板等,進行培養。
[質量控制]
培養基應呈淡黃色或無色,透明無沉澱物。增菌靈敏度:傷寒沙門菌1×10-5,鼠傷寒及副傷寒沙門菌1×10-7。
[保存]
4℃保存,1周內用完。
註:
⑴ 亞硒酸鹽,包括亞硒酸鈉、亞硒酸氫鈉均可使用,但以亞硒酸氫鈉效果為好。
⑵ 磷酸鹽緩沖對中,兩者的用量比例與亞硒酸鹽及蛋白腖的品種有關。制備前應進行調試,其總量為10g/L。
⑶ 在制備過程中,亞硒酸鹽不能直接加熱。隔水煮沸時間亦不能超過規定時間,否則亞硒酸鹽會變質,生成紅色沉澱物。
⑷ 培養基應呈淡黃色,有紅色沉澱物出現時不可再用。
4.SS增菌液
[用途]
用於沙門、志賀菌的增菌。
[配法]
月示 腖 2g,蛋白腖8g,牛肉膏3.5g,酵母膏2g,葡萄糖2g,枸櫞酸鐵10g,硫代硫酸鈉10g,亞硫酸鈉0.7g,膽鹽5.5g,磷酸氫二鈉4g,磷酸二氫鉀0.1g,去氧膽酸鈉(進口) 1.5g,煌綠0.005g,蒸餾水1L。
將上述成分加熱溶於水中,調pH至7.1,分裝試管(15×150mm),每管5~7ml,隔水煮沸5min備用。
[用法]
取糞便標本1g直接種於增菌液內,35℃16~18h培養,取出轉種於分離培養基即可。
[質量控制]
培養基應呈淡黃色或略呈淡綠色。傷寒沙門菌ATCC 50096、福氏志賀菌ATCC 12022 生長良好;大腸埃希菌ATCC 25922 生長抑制。
註:
⑴ 切勿高壓,隔水煮沸時間不超過5min。
⑵ 煌綠用量應根據不同產品批號酌情增減。
5.鹼性蛋白腖水
[用途]
霍亂弧菌增菌培養。
[配法]
蛋白腖 20g,氯化鈉5g,蒸餾水100ml。
將上述成分溶解於水中,校正pH 至8.6,分裝於試管8~10ml,經121℃滅菌15min備用。
[用法]
將待檢標本接種到鹼性腖水中,置35℃培養6~8h,霍亂弧菌呈均勻混濁生長,表面有菌膜出現。取表面菌液一白金環移種到鹼性瓊脂、慶大瓊脂或TCBS瓊脂平板上。必要時做第二次增菌。
[質量控制]
有條件的實驗室可用標准菌株,一般臨床實驗室可用非01群弧菌,培養後生長良好者方可使用。霍亂弧菌E1-Tor生物型和副溶血弧菌生長良好(6h);大腸埃希菌ATCC 25922不生長(6h)。
[保存]
置4℃冰箱,2周內用完。
註:若在每升鹼性腖水中加入1%亞碲酸鉀溶液0.5~1.0 ml,則成為亞碲酸鉀鹼性腖水,其增菌效果更為理想。
第四節 分離培養基
一、革蘭陽性桿菌分離培養基
1.羅-琴改良培養基
[用途]
用於結核分枝桿菌培養。
[配法]
磷酸二氫鉀2.4g,硫酸鎂0.24g,枸櫞酸鎂(或枸櫞酸鈉) 0.6g,天門冬素3.6g,甘油12ml,蒸餾水600ml,馬鈴薯澱粉30g,新鮮雞卵液1L,2%孔雀綠水溶液20ml。
先將磷酸鹽、硫酸鎂、枸櫞酸鎂、天門冬素及甘油,加熱溶解於600ml蒸餾水中。再添放馬鈴薯粉,邊放邊攪,並繼續置沸水中加熱30min,待冷卻至60℃左右時,加入雞卵液1L及孔雀綠溶液20ml,充分混勻後,用無菌操作分裝於滅菌試管,每支5~6ml,塞緊橡皮塞(最好是翻口塞),置於血清凝固器內製成斜面,經85℃1h間歇滅菌2次(或高壓滅菌115℃20min),待凝固後經無菌試驗,4℃冷藏備用。
[用法]
取晨咳痰或其它體液標本,經消化處理和離心沉澱的濃縮液0.1ml(約2滴)滴種於培養基的斜面上,盡量搖晃,置35℃5%~10%二氧化碳溫箱內培養1~4周,觀察結果。凡在1周內發現生長的菌落,一般不可能是結核分枝桿菌;在2周後生長的菌落,奶油狀,略呈黃色,粗糙突起,不透明,即取菌進行塗片染色鏡檢及鑒定。
[質量控制]
用結核分枝桿菌菌株作陽性培養試驗。
[保存]
置4℃冰箱內2~4周有效。
註:
⑴ 本培養基由Lowenstein-Jenden設計的基礎上改良。
(2)本培養基pH約為6.0左右,一般無須校正。
(3)間歇滅菌的溫度不宜超過90℃。
2.血清斜面培養基(呂氏血清斜面)
[用途]
用於白喉棒狀桿菌培養。
[配法]
1%葡萄糖肉湯(pH 7.6)100ml,無菌動物血清(牛、羊、豬、兔) 300ml。
將上述成分混合後,分裝於試管內,每管約4~5ml。斜插在血清凝固器內(或蒸籠)加熱80~85℃30min,使血清凝固成斜面,冷卻後放4℃冰箱內。取出後採用間歇滅菌法,85℃滅菌30min,連續3天,經無菌試驗證明無雜菌生長即可應用。
微生物學實驗室常用試劑與培養基 第一節 常用試劑及其使用方法 分類:默認欄目2006.2.21 20:54 作者:hbmzhsh | 評論:2 | 閱讀:1037
微生物學實驗室常用試劑與培養基
第一節 常用試劑及其使用方法
一、診斷用紙片
⑴ 桿菌肽紙片(0.04U/片):抑菌圈>10mm為敏感。質控菌株: D群鏈球菌陰性, A群鏈球菌陽性。
⑵ SMZ紙片(1.25μg/片、23.75μg/片):出現抑菌圈即為敏感。質控菌株:D群鏈球菌陽性, A群鏈球菌陰性。
⑶ 新生黴素紙片(5.0μg/片):抑菌圈≥16mm為敏感。質控菌株:表皮葡萄球菌陽性,腐生葡萄球菌陰性。
⑷ O129紙片、奧普托欣(Optochin)紙片:參見第五節《生化試驗培養基》。
二、診斷用血清
1.沙門菌屬診斷血清
⑴ A-F群O多價診斷血清。
⑵ 特異O群因子診斷血清:常用的有O2,O4,O7,O9,O10診斷血清。
⑶ 特異H因子診斷血清 常用的有Ha,Hb,Hc,Hd,Hgm,Hi,Hf、Vi因子診斷血清。
2.志賀菌屬診斷血清
志賀菌屬4種多價血清:痢疾志賀菌Ⅰ、Ⅱ血清,福氏志賀菌多價血清及分型血清(1~6型),宋內志賀菌診斷血清,鮑氏志賀菌多價血清及分型血清。
3.致病性大腸埃希菌診斷血清
腸致病性大腸埃希菌(EPEC)診斷血清,產腸毒素大腸埃希菌(ETEC)診斷血清,腸侵襲性大腸埃希菌(EIEC)診斷血清,腸出血性大腸埃希菌(EHEC)診斷血清O157: H 7。
4.霍亂弧菌O1、O139混合多價診斷血清及稻葉、小川、彥島O139分型血清
5.腦膜炎奈瑟菌多價血清及分群血清
6.鏈球菌分類診斷血清
7.肺炎鏈球菌診斷血清
8.耶爾森菌診斷血清
三、常用染色液
1.革蘭染色液
⑴ 結晶紫溶液 A液:結晶紫 20g,95%乙醇20 ml; B液:草酸銨 0.8g, 蒸餾水80 ml。
染色前24h將A液、 B液混合,過濾後裝入試劑瓶內備用。
⑵ 碘液:碘1g,碘化鉀2g,蒸餾水300ml。
將碘與碘化鉀混合並研磨,加入幾毫升蒸餾水, 使其逐漸溶解,然後研磨,繼續加入少量蒸餾水至碘、碘化鉀完全溶解。最後補足水量。也可用少量蒸餾水將碘化鉀完全溶解,再加入碘片,待完全溶解後,加水至300ml。
⑶ 脫色液:95%乙醇
⑷ 復染液:沙黃2.5g,95%乙醇100ml為貯存液,取貯存液10ml,加蒸餾水90ml為應用液。
2.抗酸染色液
⑴ 鹼性復紅染色液: ①萋納石炭酸復紅溶液:鹼性復紅乙醇飽和溶液10ml,5%石炭酸溶液90ml。 ②脫色液:濃鹽酸3ml,95%乙醇97ml。③復染液(呂弗勒美藍液):美藍乙醇飽和溶液30ml,100g/L氫氧化鉀溶液0.1ml,蒸餾水100ml。
⑵ 金胺O-羅丹明B染色液: ①羅丹明B液:羅丹明B 0.1g加蒸餾水100ml。②1g/L金胺O液:金胺O液0.1g加蒸餾水95ml,再加入純石炭酸 5ml,混勻。③3%鹽酸乙醇。④稀釋美藍液:呂弗勒美藍液100ml,加蒸餾水90ml,混勻。
3.鞭毛染色液(改良Ryu法)
A液:5%石炭酸10ml,鞣酸2g,飽和硫酸鋁鉀溶液 10ml; B液:結晶紫乙醇飽和液。應用液A液10份,B液1份,混合,室溫存放備用。
4.異染顆粒染色液
甲液:甲苯胺藍 0.15g,孔雀綠 2g/L, 95% 乙醇2.0ml,蒸餾水100ml。乙液:碘 2g,碘化鉀3g,蒸餾水300ml。
先將碘化鉀加入少許蒸餾水(約2ml),充分振搖,待完全溶解,再加入碘,使完全溶解後, 加蒸餾水至300ml。
5.莢膜染色液
⑴ 印度墨汁或50g/L黑色素水溶液
⑵ 5g/L苯胺藍水溶液。
3. 高中生物常用檢測試劑有哪些
一、與顏色反應有關的試劑1、斐林試劑:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液).用法:將斐林試劑甲液和乙液等體積混合,再將混合後的斐林試劑倒入待測液,水浴加熱或直接加熱,如待測液中存在還原糖,則呈磚紅色.2、班氏糖定性試劑:為藍色溶液.和葡萄糖混合後沸水浴會出現磚紅色沉澱.用於尿糖的測定.3、雙縮脲試劑:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液).用法:向待測液中先加入2ml甲液,搖勻,再向其中加入3~4滴乙液,搖勻.如待測中存在蛋白質,則呈現紫色.4、蘇丹Ⅲ:用法:取蘇丹Ⅲ顆粒溶於95%的酒精中,搖勻.用於檢測脂肪.可將脂肪染成橘黃色(被蘇丹Ⅳ染成紅色).5、二苯胺:用於鑒定DNA.DNA遇二苯胺(沸水浴)會被染成藍色.6、甲基綠:用於鑒定DNA.DNA遇甲基綠(常溫)會被染成藍綠色.7、碘液:用於鑒定澱粉的存在.遇澱粉變藍.8、龍膽紫溶液:(濃度為0.01g/ml或0.02g/ml)用於染色體著色,可將染色體染成紫色,通常染色3~5分鍾.(也可以用醋酸洋紅染色,可將染色體染成紅色)9、伊紅—美藍試劑:大腸桿菌鑒定,與其中有機酸反應產生深紫色,有金屬光澤.10、結晶紫染液:用於自生固氮微生物的鑒定,染色,利於觀察.11、重鉻酸鉀:酸性條件下與酒精反應,由橙紅變為灰綠.12、溴麝香草酚藍:與二氧化碳反應由藍變綠,在變黃.13、健那綠:與線粒體反應,將線粒體染成藍綠色.14、甲基綠:與DNA反應,將DNA染成綠色.15、吡羅紅:與RNA反應,將RNA染成綠色.二、作為溶劑的試劑1、酒精在不同實驗中的作用(1)50%的酒精溶液:在脂肪鑒定中,用蘇丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色.(2)75%的酒精溶液:用於殺菌消毒,75%的酒精能滲入細胞內,使蛋白質凝固變性.低於這個濃度,酒精的滲透脫水作用減弱,殺菌力不強;而高於這個濃度,則會使細菌表面蛋白質迅速脫水,凝固成膜,妨礙酒精透入,削弱殺菌能力.75%的酒精溶液常用於手術前、打針、換葯、針灸前皮膚脫碘消毒以及機械消毒等.(3)95%的酒精溶液:冷卻的體積分數為95%的酒精可用於凝集DNA.用於DNA的粗提取實驗.(4)95%的酒精溶液和15%的鹽酸等體積混合可用於解離根尖.用於植物根尖分生區有絲分裂的實驗觀察,作為解離液可以將植物細胞分離開.2、丙酮(酒精):用於提取葉綠體中的色素.使色素在有機溶劑丙酮中溶解,便於溶解.3、層析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93號汽油)可用於色素的層析,即將色素在濾紙上分離開.4、0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液:與雞血混合,防凝血.用於DNA的粗提取實驗.5、氯化鈉溶液:(1)可用於溶解DNA.當氯化鈉濃度為2mol/L、 0.015mol/L時DNA的溶解度最高,在氯化鈉濃度為0.14 mol/L時,DNA溶解度最高.(2)濃度為0.9%時可作為生理鹽水.(3)高濃度食鹽:選擇培養基,金黃色葡萄球菌可以生存.三、作為培養基的成分1、青黴素:選擇培養基,使黴菌,酵母菌可以生存,殺死細菌和放線菌.2、牛肉膏,蛋白腖:微生物培養基中的C源、N源和生長因子,作為培養異養型微生物的原料.3、瓊脂:固體培養基成分;生長素生理功能(溫特實驗) 四、育種中使用的試劑1、胰蛋白酶:可用來分解蛋白質,可用於動物細胞培養時分解組織使組織細胞分散.2、纖維素酶、果膠酶:可用於植物細胞培養時分解組織使組織細胞分散.3、秋水仙素:人工誘導多倍體試劑.用於萌發的種子或幼苗,可使染色體組加倍,原理是可抑制正在分裂的細胞紡錘體的形成.4、氯化鈣:增加細菌細胞壁的通透性(用於基因工程的轉化,使細胞處於感受態)5、細胞工程促溶劑:(1)PEG(聚乙二醇):動物細胞及植物細胞工程中,用於細胞的融合.(2)滅活(仙台)病毒:動物細胞工程中,用於細胞的融合.6、硫酸二乙酯:生物人工誘變劑,可以導致生物基因突變.7、亞硝酸(鹽):(1)化學致癌因子,導致細胞癌變.(2)生物人工誘變劑,可以導致生物基因突變.五、其他1、20%的肝臟、3%的過氧化氫、3.5%的氯化鐵:用於比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率.(新鮮的肝臟中含有過氧化氫酶)2、蔗糖(1)3%的蔗糖溶液、3%的可溶性澱粉溶液、2%的新鮮澱粉酶溶液:用於探索澱粉酶對澱粉和蔗糖的作用實驗.(2)植物組織培養的人工合成培養基的原料之一.(3)0.3g/mL的蔗糖溶液:相當於30%的蔗糖溶液,比植物細胞液的濃度大,可用於質壁分離實驗.3、色素提取:(1)二氧化硅:在色素的提取的分離實驗中研磨綠色葉片時加入,可使研磨充分.(2)碳酸鈣:研磨綠色葉片時加入,可中和有機酸,防止在研磨時葉綠體中的色素受破壞.4、過氧化氫溶液:(1)用來作為驗證酶的高效性實驗(2)一定濃度的該溶液可以作為消毒劑,有一定的腐蝕性.
4. 高中生物中實驗試劑一共有哪些,其對應的實驗是什麼,實驗中有哪些要注意的,還有其試劑的組成成分是什麼
新課標人教版必修1:
1.
斐林試劑:
成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。
用法:將斐林試劑甲液和乙液混合,再將混合後的斐林試劑倒入待測液,水浴加熱,如待測液中存在還原糖,則呈磚紅色。
2.班氏糖定性試劑:
為藍色溶液。和葡萄糖混合後沸水浴會出現磚紅色沉澱。用於尿糖的測定。
3.雙縮脲試劑:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法:向待測液中先加入2ml甲液,搖勻,再向其中加入3~4滴乙液,搖勻。如待測中存在蛋白質,則呈現紫色。
4.蘇丹Ⅲ:用法:取蘇丹Ⅲ顆粒溶於95%的酒精中,搖勻。用於檢測脂肪。可將脂肪染成橘黃色
(被蘇丹Ⅳ染成紅色)。
5.二苯胺:用於鑒定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)會被染成藍色。
6.甲基綠:用於鑒定DNA。DNA遇甲基綠(常溫)會被染成藍綠色。
吡羅紅:檢測RNA,呈紅色
7、50%的酒精溶液:用於洗去蘇丹Ⅲ在脂肪上的浮色。
8、70%的酒精溶液:用於醫學臨床上的消毒滅菌。
9、95%的酒精溶液:冷卻的體積分數為95%的酒精可用於凝集DNA
10、15%的鹽酸:和95%的酒精溶液等體積混合可用於解離根尖。
11.龍膽紫溶液或醋酸洋紅:鹼性染料,用於染色體染色時,前者呈深藍色,後者呈紅色
改良苯酚品紅染液:檢測染色體,紅色
健那綠:檢測線粒體,專一性讓線粒體染色呈藍綠色
12.20%的肝臟、3%的過氧化氫、3.5%的氯化鐵:用於比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率。(新鮮的肝臟中含有過氧化氫酶)
13、3%的可溶性澱粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鮮澱粉酶溶液:用於探索澱粉酶對澱粉和蔗糖的作用實驗。
14.碘液:用於鑒定澱粉的存在。遇澱粉變藍。遇糖原變紅
15.丙酮:用於提取葉綠體中的色素
16.層析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93號汽油)
可用於色素的層析,即將色素在濾紙上分離開。
17.二氧化硅:在色素的提取的分離實驗中研磨綠色葉片時加入,可使研磨充分。
18.碳酸鈣:研磨綠色葉片時加入,可中和有機酸,防止在研磨時葉綠體中的色素受破壞。
19、0.3g/mL的蔗糖溶液:相當於30%的蔗糖溶液,比植物細胞液的濃度大,可用於質壁分離實驗。
20、0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液:與雞血混合,防凝血
21、氯化鈉溶液:①可用於溶解DNA。當氯化鈉濃度為2mol/L、0.015mol/L時DNA的溶解度最高,在氯化鈉濃度為0.14 mol/L時,DNA溶解度最低。②濃度為0.9%時可作為生理鹽水。
22、胰蛋白酶:①可用來分解蛋白質。②可用於動物細胞培養時分解組織使組織細胞分散於。
23、秋水仙素:人工誘導多倍體試劑。用於萌發的種子或幼苗,可使染色體組加倍,原理是可抑制正在分裂的細胞紡綞體的形成。
24、氯化鈣:增強細菌細胞壁的通透性,可用於基因工程。
25.石磊試劑:檢驗溶液酸鹼性→判斷光合速率與呼吸速率快慢的關系;
26、NaHCO3/ Na2CO3 Na2HPO4/ NaH2PO4:酸鹼緩沖對→調節PH
27.NaCl:配製生理鹽水(0.9%)或用於提取DNA(0.14M或2M)
28.溴麝香草酚藍水溶液:檢測CO2,由藍變綠再變黃
5. 什麼是生化試劑生化試劑有哪些種類,活化凝血液體試劑是生物試劑嗎
生化診斷是指利用蘭伯-比爾定律,通過各種生化反應,在體外測定各種無機元素、蛋白質和非蛋白質氮、酶、糖類、脂類等生化指標的一種體外診斷方法。常用的檢查項目如肝功能、腎功能、血糖、血脂等都屬於生化診斷。臨床生化診斷試劑與生化分析儀配合使用,運用化學、酶學、免疫學等相關技術原理,對人體的臨床生化指標進行診斷。通過試劑與相關待測物的特定反應給出特定的光學信號,由生化儀器記錄,並與校準器進行比較,得出相關待測物的水平。生化診斷是目前最常用的體外診斷方法之一,也是國內外最早、最成熟的IVD細分領域。
色譜試劑:色譜試劑是指用於色譜分析、色譜分離和色譜制備的化學試劑。化學試劑有200多種,包括甲醇、乙腈、四氫呋喃、二甲亞碸、叔丁基甲醚、聚乙二醇等。
表面活性劑:表面活性劑是指加入少量能使溶液體系界面狀態發生明顯變化的物質,包括陽離子表面活性劑和陰離子表面活性劑、非離子表面活性劑、兩性表面活性劑、復合表面活性劑和其他表面活性劑。硬脂酸、十二烷基苯磺酸鈉是常用的陰離子表面活性劑,烷基葡糖苷(APG)、脂肪酸甘油三酯、脂肪酸山梨醇(pan)、聚山梨醇(Twain)等為非離子表面活性劑。
6. 怎樣區分化學試劑與生物試劑
沒法區分 化學試劑包含生物試劑的概念。
給化學試劑一個准確的定義還是一件很困難的事情.早期的化學試劑只是指化學分析中為測定物質的組分或組成而使用的純粹化學葯品.後來又被擴展為為實現化學反應而使用的化學葯品,而現在的化學試劑所指的化學葯品早已超出了這一范疇.有人認為在科學實驗中使用的化學葯品都可稱為化學試劑,因此本人認為凡與實驗有關的化學葯品都可稱為化學試劑.
化學試劑(chemical regent)是進行化學研究、成分分析的相對標准物質,是科技進步的重要條件,廣泛用於物質的合成、分離、定性和定量分析,可以說是化學工作者的眼睛,在工廠、學校、醫院和研究所的日常工作中,均離不開化學試劑.
對化學試劑,我們習慣上有許多混亂的稱謂:
以含量為基礎的稱謂:標准物質、標准溶液、標准雜質溶液、標准對照品、標准樣品、行標試劑、指示試劑、基準物質、基準試劑、化學基準、化學標准、儀器標准、分析試劑、一類試劑、二類試劑、超純試劑、高純試劑、當量試劑、醫葯標准、農葯標准、光譜純、色譜純、電子純、鋼鐵標樣、生鐵標樣、煤標樣、礦石標樣等……
以用途為基礎的稱謂:化學試劑、通用試劑、分析試劑、診斷試劑、教學試劑、實驗試劑、分離工具、緩沖溶液、指示試劑、生物染色素、感光材料、合成試劑、中間體、化工原料、水質分析、殘留農葯測試、分子生物學試劑……
以來源為基礎的稱謂:進口試劑、天然物提取、浸膏、乾粉、提取物…… 以習慣為基礎的稱謂:化學葯品、精細化學品、葯品、冷偏試劑、特種試劑、一類試劑、二類試劑、三類試劑、小品種試劑……
以性質為基礎的稱謂:無機試劑、有機試劑、同位素及標記化合物、生化試劑、氨基酸及其衍生物、蛋白質與多肽、核苷酸及其衍生物、單糖與多糖、酶和輔酶、抗生素、維生素、染料及色素、培養基、層析介質、電泳介質、生物緩沖劑……
化學試劑的門類基本上是按照用途或學科性劃分的,國外八十年代增添了不少新門類.德國伊默克(E.Merck)公司分為20大類,88小類.美國貝克(J.T.Baker)公司則有75個大類,124個小類.隨著科學技術的發展,化學試劑的品種日益繁多,門類劃分的趨勢越來越細,而且達到品種系列化、配套化.
這裡麵包括了生物試劑的概念