❶ 高中生物常用的實驗方法有哪些
1.實驗方法
實驗方法是整個實驗設計的精髓,是做好實驗設計的關鍵所在.現將與中學實驗有關的一些最常見的經典的實驗方法匯總如下:
(1)化學物質的檢測方法:
①澱粉——碘液
②還原糖——斐林試劑、班氏試劑
③CO2——Ca(OH)2溶液或酸鹼指示劑
④乳酸——pH試紙
⑤O2——余燼復燃
⑥無O2——火焰熄滅
⑦蛋白質——雙縮脲試劑
⑧染色體——龍膽紫、醋酸洋紅溶液
⑨DNA——二苯胺試劑
⑩脂肪——蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液
(2)實驗結果的顯示方法:
①光合速率——O2釋放量或CO2吸收量或澱粉產生量
②呼吸速率——O2吸收量或CO2釋放量或澱粉減少量
③原子途徑——放射性同位素示蹤法
④細胞液濃度大小——質壁分離
⑤細胞是否死亡——質壁分離
⑥甲狀腺激素作用——動物耗氧量,發育速度等
⑦生長激素作用——生長速度(體重變化,身高變化)
⑧胰島素作用——動物活動狀態
⑨菌量——菌落數或亞甲基藍溶液褪色程度
⑩大腸桿菌——伊紅—美藍瓊脂培養基
(3)實驗條件的控制方法:
①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物
②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水
③除去容器中CO2——NaOH溶液
④除去葉片中原有澱粉——置於黑暗環境
⑤除去葉片中葉綠素——酒精隔水加熱
⑥除去光合作用對呼吸作用的干擾——給植株遮光
⑦如何得到單色光——棱鏡色散或彩色薄膜濾光
⑧血液抗凝——加入檸檬酸鈉
⑨線粒體提取——細胞勻漿離心
⑩骨的脫鈣——鹽酸溶液
⑾滅菌方法——微生物培養的關鍵在於滅菌,對不同材料,滅菌方法不同:培養基用高壓蒸氣滅菌;接種環用火焰灼燒滅菌;雙手用肥皂洗凈,擦乾後用75%酒精消毒;整個接種過程都在實驗室無菌區進行.
(4)實驗中控制溫度的方法:
①還原糖鑒定:水浴煮沸加熱
②酶促反應:水浴保溫
③用酒精溶解葉中的葉綠素:酒精要隔水加熱
④DNA的鑒定:水浴煮沸加熱
⑤細胞和組織培養以及微生物培養:恆溫培養
2.斐林試劑、班氏試劑與尿糖試紙
這三種物質均可用來檢驗含醛基的有機物的存在,在醫學上用來檢驗糖尿病,其原理均是利用了Cu2+的氧化性把醛基氧化,但成分略有不同:
斐林試劑:即硫酸銅、氫氧化鈉和酒石酸鉀鈉組成的藍色混合溶液.分為斐林試劑A和斐林試劑B,A為CuSO4溶液,B為氫氧化鈉和酒石酸鉀鈉的混合溶液,使用時將A、B等體積混合即成斐林試劑.
班氏試劑:即硫酸銅、碳酸鈉和檸檬酸鈉組成的混合液,又叫本尼迪克特(Benedict)試劑,它與醛反應的結果是與斐林試劑一致的,只是比斐林試劑更穩定,所以在臨床化驗中更常使用.
尿糖試紙:又叫硫酸銅試紙,呈白色,帶藍色斑點,用於糖尿病患者的尿糖測試.每片含硫酸銅20毫克,枸櫞酸300毫克,碳酸鈉80毫克,氫氧化鈉235毫克.尿糖試紙法快速、方便,試紙的正確使用方法為:將試紙條放在尿液中浸濕,一秒鍾後取出,在一分鍾內觀察試紙的顏色,並與標准色板對照,根據不同的顏色來確定尿糖陽性的程度.
3.斐林試劑和雙縮脲試劑的比較
相同點:①都由NaOH溶液和CuSO4溶液構成;
②斐林試劑甲液和雙縮脲試劑A都為0.1g/mLNaOH溶液.
不同點:①CuSO4溶液濃度不一樣:斐林試劑乙液為0.05g/mLCuSO4溶液,
雙縮脲試劑B為0.01g/mLCuSO4溶液.
②配製比例不一樣.
③使用方法不一樣:斐林試劑是甲、乙液一起混合後再使用,
雙縮脲試劑則是先向待鑒定材料加入A試劑搖勻後,再加入試劑B.
④鑒定的對象不一樣:斐林試劑鑒定的是還原糖,雙縮脲試劑鑒定的是蛋白質.
⑤反應本質及顏色反應不一樣.
4.蘇丹Ⅲ染液與蘇丹Ⅳ染液的比較
都是用來鑒定脂肪.蘇丹Ⅳ染液更易溶於脂肪,所以染色更深,同時要求染色時間更短.
生物學中常用的試劑:
1、斐林試劑: 成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液).用法:將斐林試劑甲液和乙液等體積混合,再將混合後的斐林試劑倒入待測液,水浴加熱或直接加熱,如待測液中存在還原糖,則呈磚紅色.
2、班氏糖定性試劑:為藍色溶液.和葡萄糖混合後沸水浴會出現磚紅色沉澱.用於尿糖的測定.
3、雙縮脲試劑:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液).用法:向待測液中先加入2ml甲液,搖勻,再向其中加入3~4滴乙液,搖勻.如待測中存在蛋白質,則呈現紫色.
4、蘇丹Ⅲ:用法:取蘇丹Ⅲ顆粒溶於95%的酒精中,搖勻.用於檢測脂肪.可將脂肪染成橘黃色(被蘇丹Ⅳ染成紅色).
5、二苯胺:用於鑒定DNA.DNA遇二苯胺(沸水浴)會被染成藍色.
6、甲基綠:用於鑒定DNA.DNA遇甲基綠(常溫)會被染成藍綠色.(甲基綠使DNA呈現綠色,吡羅紅使RNA呈現紅色.)
7、50%的酒精溶液:在脂肪鑒定中,用蘇丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色.
8、75%的酒精溶液:用於殺菌消毒,75%的酒精能滲入細胞內,使蛋白質凝固變性.低於這個濃度,酒精的滲透脫水作用減弱,殺菌力不強;而高於這個濃度,則會使細菌表面蛋白質迅速脫水,凝固成膜,妨礙酒精透入,削弱殺菌能力.75%的酒精溶液常用於手術前、打針、換葯、針灸前皮膚脫碘消毒以及機械消毒等.
9、95%的酒精溶液:冷卻的體積分數為95%的酒精可用於凝集DNA.
10、15%的鹽酸:和95%的酒精溶液等體積混合可用於解離根尖.
11、龍膽紫溶液:(濃度為0.01g/ml或0.02g/ml)用於染色體著色,可將染色體染成紫色,通常染色3~5分鍾.(也可以用醋酸洋紅染色)
12、20%的肝臟、3%的過氧化氫、3.5%的氯化鐵:用於比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率.(新鮮的肝臟中含有過氧化氫酶)
13、3%的可溶性澱粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鮮澱粉酶溶液:用於探索澱粉酶對澱粉和蔗糖的作用實驗.
14、碘液:用於鑒定澱粉的存在.遇澱粉變藍.
15、丙酮:用於提取葉綠體中的色素.
16、層析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93號汽油)可用於色素的層析,即將色素在濾紙上分離開.
17、二氧化硅:在色素的提取的分離實驗中研磨綠色葉片時加入,可使研磨充分.
18、碳酸鈣:研磨綠色葉片時加入,可中和有機酸,防止在研磨時葉綠體中的色素受破壞.
19、0.3g/mL的蔗糖溶液:相當於30%的蔗糖溶液,比植物細胞液的濃度大,可用於質壁分離實驗.
20、0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液:與雞血混合,防凝血.
21、氯化鈉溶液:①可用於溶解DNA.當氯化鈉濃度為2mol/L、 0.015mol/L時DNA的溶解度最高,在氯化鈉濃度為0.14 mol/L時,DNA溶解度最低.②濃度為0.9%時可作為生理鹽水.
❷ 高中生物中實驗試劑一共有哪些,其對應的實驗是什麼,實驗中有哪些要注意的,還有其試劑的組成成分是什麼
新課標人教版必修1:
1.
斐林試劑:
成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。
用法:將斐林試劑甲液和乙液混合,再將混合後的斐林試劑倒入待測液,水浴加熱,如待測液中存在還原糖,則呈磚紅色。
2.班氏糖定性試劑:
為藍色溶液。和葡萄糖混合後沸水浴會出現磚紅色沉澱。用於尿糖的測定。
3.雙縮脲試劑:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法:向待測液中先加入2ml甲液,搖勻,再向其中加入3~4滴乙液,搖勻。如待測中存在蛋白質,則呈現紫色。
4.蘇丹Ⅲ:用法:取蘇丹Ⅲ顆粒溶於95%的酒精中,搖勻。用於檢測脂肪。可將脂肪染成橘黃色
(被蘇丹Ⅳ染成紅色)。
5.二苯胺:用於鑒定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)會被染成藍色。
6.甲基綠:用於鑒定DNA。DNA遇甲基綠(常溫)會被染成藍綠色。
吡羅紅:檢測RNA,呈紅色
7、50%的酒精溶液:用於洗去蘇丹Ⅲ在脂肪上的浮色。
8、70%的酒精溶液:用於醫學臨床上的消毒滅菌。
9、95%的酒精溶液:冷卻的體積分數為95%的酒精可用於凝集DNA
10、15%的鹽酸:和95%的酒精溶液等體積混合可用於解離根尖。
11.龍膽紫溶液或醋酸洋紅:鹼性染料,用於染色體染色時,前者呈深藍色,後者呈紅色
改良苯酚品紅染液:檢測染色體,紅色
健那綠:檢測線粒體,專一性讓線粒體染色呈藍綠色
12.20%的肝臟、3%的過氧化氫、3.5%的氯化鐵:用於比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率。(新鮮的肝臟中含有過氧化氫酶)
13、3%的可溶性澱粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鮮澱粉酶溶液:用於探索澱粉酶對澱粉和蔗糖的作用實驗。
14.碘液:用於鑒定澱粉的存在。遇澱粉變藍。遇糖原變紅
15.丙酮:用於提取葉綠體中的色素
16.層析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93號汽油)
可用於色素的層析,即將色素在濾紙上分離開。
17.二氧化硅:在色素的提取的分離實驗中研磨綠色葉片時加入,可使研磨充分。
18.碳酸鈣:研磨綠色葉片時加入,可中和有機酸,防止在研磨時葉綠體中的色素受破壞。
19、0.3g/mL的蔗糖溶液:相當於30%的蔗糖溶液,比植物細胞液的濃度大,可用於質壁分離實驗。
20、0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液:與雞血混合,防凝血
21、氯化鈉溶液:①可用於溶解DNA。當氯化鈉濃度為2mol/L、0.015mol/L時DNA的溶解度最高,在氯化鈉濃度為0.14 mol/L時,DNA溶解度最低。②濃度為0.9%時可作為生理鹽水。
22、胰蛋白酶:①可用來分解蛋白質。②可用於動物細胞培養時分解組織使組織細胞分散於。
23、秋水仙素:人工誘導多倍體試劑。用於萌發的種子或幼苗,可使染色體組加倍,原理是可抑制正在分裂的細胞紡綞體的形成。
24、氯化鈣:增強細菌細胞壁的通透性,可用於基因工程。
25.石磊試劑:檢驗溶液酸鹼性→判斷光合速率與呼吸速率快慢的關系;
26、NaHCO3/ Na2CO3 Na2HPO4/ NaH2PO4:酸鹼緩沖對→調節PH
27.NaCl:配製生理鹽水(0.9%)或用於提取DNA(0.14M或2M)
28.溴麝香草酚藍水溶液:檢測CO2,由藍變綠再變黃