Ⅰ 如何設計實驗方案從環境篩選具有抗細菌作用的微生物
如何設計實驗方案從環境篩選具有抗細菌作用的微生物
1.從環境中大量獲得微生物樣品,以不同稀釋度制備菌懸液 2.將不同稀釋度的不同菌懸液與目標細菌共培養,在平皿上做好標記 3.觀察,篩選出有抗細菌作用的微生物(在微生物周圍出現沒有目標細菌的抑菌圈) 4.進一步純化篩選出來的微生物,再次進行不同濃度下的抑菌試驗,以驗證其抗菌作用。
1,首先要明確准備篩選光譜還是窄譜的抑菌微生物,其次要選好你的指示菌
2,一般採用透明圈法進行抑菌微生物的篩選。
步驟:1,培養基、牛津杯的滅菌;
2,培養基冷卻至不燙死指示菌的溫度後,在其中加入2%左右的指示菌
3,混合均勻後倒平板
4,平板凝固後在其上加入牛津杯,並在牛津杯中加入你篩選的菌懸液
5,培養
6,觀察透明圈大小
7,透明圈有且明顯較大的,其中菌就是擬篩選的菌
Ⅱ 土壤中篩選微生物的具體步驟
在100ml培養基(含1.5%的NaCl)中加入1.5克土壤進行初步富集培養。富集培養1星期後取出1.5ml的菌液加入到100ml的培養基中再次富集培養一星期,再取出1.5ml的菌液加入到100ml的培養基中富集培養一星期。取出50ul富集培養菌液塗板,挑取單菌落在試管中富集培養。
Ⅲ 如何篩選微生物葯物
市面上有很多微生物制劑的菌種,多種多樣,造成在選擇上產生很大困惑,下邊是選擇菌種的方法:
1、微生物菌種選擇
動物消化道微生物具有多樣性和特異性,不同動物種類對菌種的要求不同,同一菌株用於不同動物,產生的效果差異也較大。使用時一定要掌握菌種的特性和功效,選擇不當起不到應有效果,反而會破壞原有菌群,甚至引發疾病
2、微生物菌種應用時間
微生物制劑應用要從子畜開始使用,以保證有益菌優先定植。因為制劑進入體內後要有一段時間進行微生物菌群調整才能定植下來。
一般認為,乳酸菌類在各種動物的各階段添加均較好,芽孢桿菌類在生長期添加較好,在幼齡期可以添加;麴黴菌類在幼齡期,水產動物全期不必添加;酵母菌類在生長期不必添加;在水產動物養殖中,以改善水質為目的時,可將微生物制劑或光合細菌直接灑於水中。
3、微生物菌種添加方式
一般粉狀飼料添加微生物制劑效果較好,顆粒飼料和膨化飼料在加工過程中的高溫可造成10%~30%的芽孢桿菌,90%以上的腸球菌以及99%以上的酵母失活,而乳酸桿菌幾乎全部被殺滅。因此,在顆粒飼料中要使用耐熱,耐擠壓的芽孢桿菌制劑。乳酸菌不耐高溫,應採用凍干後包被或採用噴霧乾燥的方式製成的乳酸菌制劑。使用時最好採用飲水方式,以利於乳酸菌優先粘附於腸壁。
4、微生物菌種劑量與濃度
微生物制劑中必須含有相當數量的活菌才能達到效果。當進入動物腸道食糜中外源菌數大於1000萬個每克時,都會對腸道內原有菌群產生較大的影響。因此,微生物制劑在產品中活菌數含量為10億~20億每克時效果最佳。
我國正式批准生產的微生物制劑中規定每克芽孢桿菌含量要多於5億個。以酵母菌產品為例,目前市場上銷售的產品活菌數從每克幾億到200億不等,在選擇是要認真鑒別。
5、微生物菌種抗生素的影響
細菌類的微生物制劑對抗生素敏感,不宜與抗生素同時使用,使用微生物制劑的前後二天應停止使用抗生素。最好先用抗菌葯物清理腸道,為益生菌的定植和繁殖掃除障礙,然後再飼喂微生物制劑,可提高使用效果。酵母菌類屬於真核生物,生物學活性與細菌完全不同,對抗生素、磺胺類葯物和一些抗菌劑有天然抗性,可與抗生素同時使用。
6、微生物菌種保存條件和期限
微生物制劑均為活菌制劑,由於大多數菌種在飼料加工、運輸中容易失活,應用中要注意保存期限。通常微生物制劑應密封保存於陰涼避光處,儲存時間不宜過長,有效期一般為一年左右,隨著保存時間的延長,活菌數量不斷減少。厭氧菌類暴露在空氣中容易死亡,有的產品對其進行了包被或真空包裝處理,應在打開包裝後規定的時間內用完。酵母類屬於兼性厭氧菌,可以保存較長時間。芽孢桿菌類有效期比其他類型長,可達2年左右。
Ⅳ 從自然界分離篩選微生物菌種的基本程序包括哪些
⑴采樣:從適合微生物生長的環境采樣
⑵富增:根據其特性選擇性的富集目的微生物
;⑶初篩:採用平板對富集的目的微生物純種分離,確定其活性選出高產菌種,一般200株;
⑷復篩:對第一次分離的微生物菌種,再次篩選,一般40株;
⑸二級復篩:從40株選出5株⑹確定菌種,進行生產性能測定.
Ⅳ 海洋微生物的篩選方法有哪些
海洋微生物的篩選方法有哪些
海洋中有自養和異養、光能和化能、好氧和厭氧、寄生和腐生以及浮游和附著等類型的細菌.幾乎所有已知生理類群的細菌,都可在海洋環境中找到.最常見的有:假單胞菌屬 (Pseudomonas)、 弧菌屬(Vibrio)、無色桿菌屬 (Achromobacter)、黃桿菌屬(Flavobacterium)、螺菌屬 (Spirillum)、微球菌屬(Micrococcus)、八疊球菌屬(Sarcina)、芽孢桿菌屬(Bacillus)、棒桿菌屬 (Corynebacterium)、枝動菌屬(Mycoplana)、諾卡氏菌屬 (Nocardia)和鏈黴菌屬(Streptomyces)等十多個屬.在海水中,革蘭氏陰性桿菌占優勢;在遠洋沉積物中,則革蘭氏陽性細菌居多;在大陸架沉積物中,芽孢桿菌屬最為常見.
Ⅵ 微生物問題:營養缺陷性的篩選方法有什麼舉例說明。。
營養缺陷型微生 物是 指經過誘變處理,使某一菌株喪失合成某些 必需 的營養物質(氨基酸、維生素和鹼基等)的能力,從而必須在培養 基中加人相應 的營養成 分才能 正常生 長 的變異菌株。
分離:
1、青黴素濃縮法。
青黴素 能抑 制細菌 細胞壁 的合 成,因此,用青黴素只能殺死生 長繁殖 中的細 菌,而 不能殺死停 止分裂 的細菌。在 只能使野生 型生長而不 能使 突變型 生長 的選 擇性液體 培養 基中加人青黴 素,野生型被 青黴 素殺死,突變 型 則不被 殺死 而得 以 濃縮。
2、菌絲過濾法。
先用 誘變 劑處理 真菌 (如脈 胞菌 ) 的分生抱子,然 後接 種到液體培養基 中,不 斷給營養液通 氣
,刺激分生抱子生長,並 防止它們相互結合在一起。大約 經過l d 的培養,分生抱子萌發,長 出菌絲。然 後用棉 花把 萌發 了的分生抱子過 濾掉,未萌發的分 生抱 子 (死亡 的、需要 較 長 時間萌 發 的和突變為營養缺 陷型 的分 生抱 子 ) 則仍 留在 培養 液 中,以後 每隔一段時間進行過濾
,連續若 干次後,所剩下 的就都是 缺陷 型的或死亡 的分生抱子。通過補充各種成分 鑒定缺陷型
檢出:
影印接種法。採用一種 特製的工具—「印章」 ,將 在完全培養基上長 出的菌 落的平 皿上「印」一 下,然 後分 別在 完全培養基和基本培 養基 的相 應位 置上 各 印一下,若 在 完全 培養基上生長,而在基本培養基上 不生 長,即認為是營養缺 陷型