① 生物活性的活性檢測
材料表面在 SBF 中形成磷灰石的能力能夠反應材料在體內的生物活性,具體檢測方法如下:
1.SBF 配置
由於SBF 溶液對於磷灰石過飽和,所以配備方法不恰當會導致溶液中磷灰石沉澱產生。整個配備過程需要確保溶液無色、透明,容器表面無沉澱出現,如果過程中產生沉澱,倒去溶液,洗凈儀器重新配製。准備一個 1000ml 的塑料燒杯。首先於塑料燒杯中裝好 700ml 離子交換蒸餾水、一個適當大小磁子,杯口密封以蒸發皿或塑料薄膜。攪拌並調節水溫至 36.5±1.5C。
按表1所列順序在 36.5C 恆溫下逐個溶解第一到第八個化合物,溶解過程
表1 配置1000 ml SBF 溶液時試劑添加順序、添加量 Order Reagents Amounts Containers Purities(%) Formula weights 1 NaCl 8.035 Weight paper 99.5 58.4430 2 NaHCO3 0.355 Weight paper 99.5 84.0068 3 KCl 0.225 Weight bottle 99.5 74.5515 4 K2HPO4·3H2O 0.231 Weight bottle 99.0 228.2220 5 MgCl2·6H2O 0.311 Weight bottle 98.0 203.3034 6 1.0 M-HCl 39ml Graated cylinder — — 7 CaCl2 0.292 Weight bottle 95.0 110.9848 8 Na2SO4 0.072 Weight bottle 99.0 142.0428 9 Tris 6.118 Weight paper 99.0 121.1356 10 1.0 M-HCl 0-5ml Syringe — — 2.磷灰石形成能力測試
對於密質薄片材料,測出樣品尺寸並計算樣品表面積精確到 2mm 應用如下公式計算出 SBF 用量:
Vs=Sa/10,
Vs(ml)是 SBF 的體積量,Sa(mm)表示樣品的表面積。
對於多孔材料,SBF 的用量應大於上式計算量准備好塑料瓶或燒杯,裝入計算出的 SBF 體積量加熱到 36.5C, 然後按示意圖往裡放置樣品。 筆記:樣品在容器中放置有兩種情況,如圖 1(a),1(b)。少數情況下,SBF 溶液會生成同 質磷灰石沉積於樣品表面。所以如果樣品放置是圖 A1(b)種情況,表徵實驗應該檢測樣品的 下表面。 四個星期內,分別取出恆溫浸透不同時長的各組樣品,純水輕盈洗凈。然後將樣品放入乾燥 器中常溫乾燥。
圖1 SBF中樣品浸泡示意圖 1.四唑鹽(MTT)比色法:
檢測細胞存活和生長的方法除前面所介紹的方法外,還可用四唑鹽比色法試驗(MTT)。此法的原理是:活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性的MTT還原為難溶性的藍紫色結晶物,並沉積在細胞中,而細胞無此功能。二甲基亞碸(DMSO)能溶解細胞中的藍紫色結晶物,用酶聯免疫檢測,以在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反應活細胞數量。在一定細胞數范圍內,MTT結晶物形成的量與細胞數成正比。
●0.25%胰蛋白酶消化細胞使其成為單細胞,用含0.1%胎牛血清的RPMI培養基配成1x10^9個/L的但細胞懸液,將細胞接種於96孔培養板中,每孔100ul。
●將培養板置CO2培養箱中,在37℃、5%CO2條件下,培養3-5天。
●培養3-5天後,每孔加入MTT溶液10ul,繼續置培養箱孵育3-6h,終止培養,加10%SDS-HCl 100ul/孔,37℃培養數小時,將細胞內與細胞周圍的MTT顆粒充分溶解。
●用酶聯免疫檢測儀測定每孔吸光度(OD),選波長490nm。以時間為橫軸,OD值為縱軸繪制細胞生長曲線。
用此法測細胞活力,為保證結果的准確性,最好在試驗前測定每種細胞的貼比率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線,再確定每孔細胞接種數和培養時間,以保證培養終止時不會過滿。另外,實驗時設空白對照,比色時,以空白孔調零。
3.2.2 CCK-8 法
Cell Counting Kit-8(簡稱CCK-8)試劑可用於簡便而准確的細胞增殖和毒性分析。其基本原理為:該試劑中含有WST-8【化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產物(Formazan dye)。生成的甲瓚物的數量與活細胞的數量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。
● 制備細胞懸液:細胞計數
● 接種到96孔板中:根據合適的鋪板細胞數,每孔約100ul細胞懸液,同樣的樣本可做3個重復。
● 37℃培養箱中培養:細胞接種後貼壁大約需要培養2-4小時,如果不需要貼壁,這步可以省去。
●加入10ul CCK8:由於每孔加入CCK8量比較少,有可能因試劑沾在孔壁上而帶來誤差,建議在加完試劑後輕輕敲擊培養板以幫助混勻。或者直接配置含10%CCK8的培養基,以換液的形式加入。
●培養1-4小時:細胞種類不同,形成的Formazan的量也不一樣。如果顯色不夠的話,可以繼續培養,以確認最佳條件。特別是血液細胞形成的Formazan很少,需要較長的顯色時間(5-6小時)。
●測定450nm吸光度:建議採用雙波長進行測定,檢測波長450-490nm,參比波長600-650nm。
② 高中生物實驗的類型
③ 生物實驗類型有哪些
問題一:目前生物實驗室的種類有哪些 盡管國內外實驗室的組織結構有一些不同,但實驗室服務還是可以概括為以下幾種類型:
1.臨床化學:對人體不同成分濃度的檢測。
2.臨床血液、體液學:對血液、體液及其組成成分進行檢測。
3.臨床免疫學:利用抗原抗體反應對血液、體液、組織中正常和異常成分的檢測。
4.臨床微生物學:對人體內的微生物進行分離鑒定、抗生素敏感性試驗。
5.臨床輸血學:研究血液收集、匹配性和安全性檢測、血液發放等。
6.臨床分子生物學(核酸體外擴增):目前主要採用PCR等核酸體外擴增技術對病原體或基因進行檢測。
問題二:生物學實驗類型生物學實驗都有哪些類型 看你是什麼類型的競賽咯
我參加生物聯賽的就只有植物動物學
一般是動物生理解剖 植物組織顯微鏡觀察 (得動刀子!)
我也參加過生理實驗 有基礎實驗如 鑒定
植物製片 還有個青蛙解剖 挺好玩的!
問題三:高中生物實驗如何分類,有幾類 驗證類實驗
1.使用高倍顯微鏡觀察幾種細胞
2.檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質
3.觀察DNA和RNA在細胞中的分布
5.用高倍顯微鏡觀察葉綠體和線粒體
6.比較過氧化氫酶在不同條件下的分解
7.葉綠體色素的提取和分離
8.細胞大小與物質運輸的關系
9.觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂
10觀察蝗蟲精母細胞減數分裂固定裝片
11.性狀分離比的模擬
12培養液中酵母菌種群數量的變化
探究性實驗
1.植物細胞的吸水和失水
2.影響酶活性的條件
3.探究酵母菌的呼吸方式
4.光照強度對光合作用強度的影響
5.低溫誘導植物染色體數目的變化
6.探索生長素類似物促進插條生根的最適濃度
7.生物體維持PH穩定的機制
設計類實驗
1.體驗制備細胞膜的方法
2.嘗試製作真核細胞的三維結構模型
3.利用廢舊物品製作生物膜模型
4.建立減數分裂中染色體變化的模型
5.設計並製作生態缸 觀察其穩定性
6.土壤微生物的分解作用
問題四:普通生物學實驗 細胞有哪些類型 始看本科物化課本(沒王本變態)我始看南白皮本(於自)精簡才500頁吧附帶本習題南錯;看遍再迅速遍王本兩本結合著看我推薦本Lihninger 化像本科用相經典網電版細胞發哥本啦習題實驗我細胞比較意思吧兩科都重點化三物質代謝考太(沒我預計)重點遺傳物質塊吧細胞信號塊難重要題幾十啊其都難再搞本物書看看既化細胞知識其實相互貫通般化都考低100算高吧細胞120算高敢選科院證明能力啊(或者自毅力信)要堅持底希望(算沒進復試能調廣州其211沒問題前要破釜沉舟啊)希望些考科院用啊------今手點賤說啦.... 查看原帖>>
問題五:生物學實驗類型生物學實驗都有哪些類型 看你是什麼類型的競賽咯
我參加生物聯賽的就只有植物動物學
一般是動物生理解剖 植物組織顯微鏡觀察 (得動刀子!)
我也參加過生理實驗 有基礎實驗如 鑒定
植物製片 還有個青蛙解剖 挺好玩的!
問題六:目前生物實驗室的種類有哪些 盡管國內外實驗室的組織結構有一些不同,但實驗室服務還是可以概括為以下幾種類型:
1.臨床化學:對人體不同成分濃度的檢測。
2.臨床血液、體液學:對血液、體液及其組成成分進行檢測。
3.臨床免疫學:利用抗原抗體反應對血液、體液、組織中正常和異常成分的檢測。
4.臨床微生物學:對人體內的微生物進行分離鑒定、抗生素敏感性試驗。
5.臨床輸血學:研究血液收集、匹配性和安全性檢測、血液發放等。
6.臨床分子生物學(核酸體外擴增):目前主要採用PCR等核酸體外擴增技術對病原體或基因進行檢測。
問題七:高中生物實驗如何分類,有幾類 驗證類實驗
1.使用高倍顯微鏡觀察幾種細胞
2.檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質
3.觀察DNA和RNA在細胞中的分布
5.用高倍顯微鏡觀察葉綠體和線粒體
6.比較過氧化氫酶在不同條件下的分解
7.葉綠體色素的提取和分離
8.細胞大小與物質運輸的關系
9.觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂
10觀察蝗蟲精母細胞減數分裂固定裝片
11.性狀分離比的模擬
12培養液中酵母菌種群數量的變化
探究性實驗
1.植物細胞的吸水和失水
2.影響酶活性的條件
3.探究酵母菌的呼吸方式
4.光照強度對光合作用強度的影響
5.低溫誘導植物染色體數目的變化
6.探索生長素類似物促進插條生根的最適濃度
7.生物體維持PH穩定的機制
設計類實驗
1.體驗制備細胞膜的方法
2.嘗試製作真核細胞的三維結構模型
3.利用廢舊物品製作生物膜模型
4.建立減數分裂中染色體變化的模型
5.設計並製作生態缸 觀察其穩定性
6.土壤微生物的分解作用
問題八:普通生物學實驗 細胞有哪些類型 始看本科物化課本(沒王本變態)我始看南白皮本(於自)精簡才500頁吧附帶本習題南錯;看遍再迅速遍王本兩本結合著看我推薦本Lihninger 化像本科用相經典網電版細胞發哥本啦習題實驗我細胞比較意思吧兩科都重點化三物質代謝考太(沒我預計)重點遺傳物質塊吧細胞信號塊難重要題幾十啊其都難再搞本物書看看既化細胞知識其實相互貫通般化都考低100算高吧細胞120算高敢選科院證明能力啊(或者自毅力信)要堅持底希望(算沒進復試能調廣州其211沒問題前要破釜沉舟啊)希望些考科院用啊------今手點賤說啦.... 查看原帖>>
問題九:生物實驗是什麼專業 生物科學、生物技術、生物工程、生物醫學工程。如果你家境還可以,而且對於生物實驗類學科有著極大的興趣,不妨報考此專業,通過大學的學習,生物專業的孩子動手能力都是很強的。當然,生物專業本科畢業不太好找工作,一般就是實驗員,實驗室操作員等基礎工作,或者你直接轉行。生物專業最好就是繼續讀研、讀博或者出國深造,因為現在雖說是生物的時代,但畢竟生物還是個新興產業,所以國內做生物這一行的不比國外,能出國深造,留學什麼的是很好的。或者你報考師范類專業,以後當一名生物老師,課余時間帶帶生物奧賽輔導班也可以。總之,生物實驗類的專業是一條比較需要耐心、靜心去鑽研的道路,如果你想潛心搞科研,可以去從事此專業,當你穿上實驗服的時候,或者發表SCI的時刻,會有著無法比擬的學術成就感,這個專業會將你打造成一個比較知性的人,前提是如果你真的熱愛這個行業。(生物專業學姐,純手打,歡迎追問~)
④ 生物的實驗方法有哪些
(1)顯微觀察法,如觀察植物細胞有絲分裂、觀察葉綠體和細胞質流動、觀察植物細胞質壁分離和復原實驗等.(2)觀色法,如觀察動物毛色和植物花色的遺傳等.(3)原子示綜法,如噬菌體浸染細菌的實驗,用18O2和14CO2追蹤光合作用中氧原子和碳原子轉移途徑的實驗等.(4)等組實驗法,如小麥澱粉酶催化澱粉水解的實驗,發現生長素的燕麥胚芽鞘實驗等.(5)加法創意法,如用飼喂法研究甲狀腺激素,用注射法研究動物胰島素和生長激素,用移植法研究性激素等.(6)減法創意法,如用閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素和生長激素的實驗,雌蕊受粉後除去正在發育著的種子等.(7)雜交實驗法,如孟德爾發現遺傳定律的植物雜交、測交的實驗,小麥的雜交等.(8)化學分析法,如番茄和水稻對Ca和Si選擇性吸收,葉綠體中色素的提取和分離實驗等.(9)理論分析法,如大、小兩種草履蟲競爭的實驗,植物根向地生長、莖背地生長的實驗,植物向光性實驗等.(10)模擬實驗法,如滲透作用的實驗裝置,分離定律的模擬實驗等
⑤ 測定微生物細胞活性的方法都有哪些
根據每個細胞有一定的重量而設計的。它可以用於單細胞、多細胞以及絲狀體微生物生長的測定。將一定體積的樣品通過離心或過濾將菌體分離出來,經洗滌,再離心後直接稱重,求出濕重,如果是絲狀體微生物,過濾後用濾紙吸去菌絲之間的自由水,再稱重求出濕重。不論是細菌樣品還是絲狀菌樣品,可以將它們放在已知重量的平皿或燒杯內,於105℃烘乾至恆重,取出放入乾燥器內冷卻,再稱量,求出微生物乾重。
如果要測定固體培養基上生長的放線菌或絲狀真菌,可先加熱至50℃,使瓊脂熔化,過濾得菌絲體,再用50℃的生理鹽水洗滌菌絲,然後按上述方法求出菌絲體的濕重或乾重。
除了乾重、濕重反映細胞物質重量外,還可以通過測定細胞中蛋白質或DNA的含量反映細胞物質的量。蛋白質是細胞的主要成分,含量也比較穩定,其中氮是蛋白質的重要組成元素。從一定體積的樣品中分離出細胞,洗滌後,按凱氏定氮法測出總氮量。蛋白質含氮量為16%,細菌中蛋白質含量占細菌固形物的50%一80%,一般以65%為代表,有些細菌則只佔13%一14%,這種變化是由菌齡和培養條件不同所產生的。因此總含氮量與蛋白質總量之間的關系可按下列公式計算:
蛋白質總量=含氮量×6.25
核酸DNA是微生物的重要遺傳物質,每個細菌的DNA含量相當恆定,平均為8.4×`10^(-5)`NG。因此從一定體積的細菌懸液中所含的細菌中提取DNA,求得DNA含量,再計算出這一定體積的細菌懸液所含的細菌總數。
⑥ 檢測細胞生物學活性有哪些方法
根據每細胞定重量設計用於單細胞、細胞及絲狀體微物測定定體積品通離或濾菌體離經洗滌再離直接稱重求濕重絲狀體微物濾用濾紙吸菌絲間自由水再稱重求濕重論細菌品絲狀菌品放已知重量平皿或燒杯內於一05℃烘乾至恆重取放入乾燥器內冷卻再稱量求微物乾重 要測定固體培養基放線菌或絲狀真菌先加熱至50℃使瓊脂熔化濾菌絲體再用50℃理鹽水洗滌菌絲按述求菌絲體濕重或乾重 除乾重、濕重反映細胞物質重量外通測定細胞蛋白質或DNA含量反映細胞物質量蛋白質細胞主要含量比較穩定其氮蛋白質重要組元素定體積品離細胞洗滌按凱氏定氮測總氮量蛋白質含氮量一陸%細菌蛋白質含量占細菌固形物50%吧0%般陸5%代表些細菌則佔一三%一四%種變化由菌齡培養條件同所產總含氮量與蛋白質總量間關系按列公式計算: 蛋白質總量=含氮量×陸.二5 核酸DNA微物重要遺傳物質每細菌DNA含量相恆定平均吧.四×`一0^(-5)`NG定體積細菌懸液所含細菌提取DNA求DNA含量再計算定體積細菌懸液所含細菌總
⑦ 生物實驗有哪些類型
生物實驗有哪些類型;
1.探究生物因素對生物的影響
2.觀察植物細胞,觀察動物細胞(觀察人的口腔上皮細胞)。
3.菜豆和玉米種子的結構
4.探究種子萌發的條件
5.測定種子的發芽率
6.觀察葉片的結構
7.綠葉在光下製造有機物
8.有關呼吸作用的一系列探究實驗:
(1)植物呼吸作用放出二氧化碳的實驗
(2)植物呼吸作用吸收氧的實驗
(3)植物呼吸作用消耗澱粉的實驗
(4)植物呼吸作用是釋放熱量的實驗
9.測定食物中含有能量
10.探究饅頭在口腔中的變化
11.採集和測算空氣中的塵埃粒子
12.尿的形成和排除
實驗的種類很多,從不同的角度可以分為不同的類型。
從實驗內容和目的,通常將化學實驗分為測量數據類實驗、探究性實驗(結論在後,體現發現和探索過程)、驗證性實驗(已經有結論,通過實驗來證實)。
測量數據類實驗是指實驗者為了測量某個或某組數據而有目的地進行的實驗探究活動:拉瓦錫測定空氣組成、酸鹼度測量(ph
測定)實驗均屬於數據測量類實驗。
探究性實驗指實驗者在不知曉實驗結果的前提下,通過自己實驗、探索、分析、研究得出結論,從而形成科學概念的一種認知活動。
驗證性實驗是指對研究對象有了一定了解,並形成了一定認識或提出了某種假說,為驗證這種認識或假說是否正確而進行的一種實驗。
對於同一個實驗來說,是探究性實驗還是驗證性實驗需要依據學生情況和學校實驗條件以及教師教學的目的要求所確定的,也就是說具體的每一個實驗根據需要可以進行改變。例如:水的凈化,可以將驗證性實驗改進為探究性實驗。