消毒滅菌生物監測怎麼布點

㈠ 高壓滅菌的溫度,時間,適用范圍,如何對高壓滅菌效果進行監測

壓力蒸汽滅菌效果監測包括物理監測、化學監測和生物監測。
(1)物理監測：每次滅菌應連續監測並記錄滅菌時的溫度、壓力和時間等滅菌參數。溫度波動范圍在+3℃以內，時間滿足最低滅菌時間的要求，同時應記錄所有臨界點的時間、溫度與壓力值，結果應符合滅菌的要求。
(2)化學監測：包括包外、包內化學指示物監測。具體要求為滅菌包包外應有化學指示物，高度危險性物品包內應放置包內化學指示物，放於包內最難滅菌的部位。通過觀察化學指示物顏色的變化，判定是否達到滅菌合格要求。採用快速壓力蒸汽滅菌程序滅菌時，應直接將包內化學指示物置於待滅菌物品旁進行化學監測。
(3)生物監測：將嗜熱脂肪桿菌芽孢片製成標准生物測試包、生物PCD（滅菌過程驗證裝置），或使用一次性標准生物測試包，對滅菌器的滅菌質量進行生物監測。將生物監測包置於滅菌器最難滅菌的部位，並設陽性對照和陰性對照。根據微生物芽孢的死亡情況來判斷滅菌是否成功，考核滅菌器負荷是否達到無菌保障水平，這是確定壓力蒸汽滅菌是否有效的最可靠的方法

㈡ 3M生物培養指示劑的環氧乙烷滅菌生物監測

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用途:用於環氧乙烷滅菌鍋的生物監測;
機理：芽胞為枯草桿菌黑色變種芽胞, 選用標准抗力儀測試: 存活時間大於或等於15分鍾, 殺滅時間小於或等於60分鍾.
使用方法:
1. 將環氧乙烷滅菌生物培養指示劑放於一標准測試包中;
2. 按照國家規范, 分別將測試包放於鍋內不同位置;
3. 滅菌完畢, 取出生物指示劑;
4. 擠破內含的安瓿, 與一支對照管一起放於37℃培養鍋培養;
5. 48小時後, 閱讀結果。
閱讀方法:
1. 培養後, 滅菌管不變色(呈綠色), 表示滅菌通過;
2. 培養後, 滅菌管變色(呈黃色), 表示滅菌不通過;(必須及時查出滅菌失敗原因)。
3. 同時培養的對照管應為陽性(呈黃色), 如陰性,可能的原因為: 培養條件不符合要求; 生物指示劑問題;(應及時查出陰性原因)。
如何丟棄：陽性的指示劑, 須環氧乙烷滅菌後丟棄.
有效期: 自生產日期起為2年。
保存方法:
1. 貯存於室溫: 15-30℃; 相對濕度為35-60%;
2. 避免靠近滅菌器和化學消毒劑。
注意事項:只有對照管為陽性, 其生物監測結果才能有效。
建議使用:建議每鍋均應放生物指示劑監測, 用於考核整個負荷的滅菌質量。

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3MTM 環氧乙烷滅菌快速生物培養指示劑在與3M ATTEST 閱讀器共同使用時, 能夠迅速可靠地觀察環氧乙烷滅菌過程。
工作原理:
枯草桿菌黑色變種芽胞在特定條件下, 存活時間大於或等於15分鍾，殺滅時間小於或等於60分鍾。
枯草桿菌黑色變種芽胞生長過程中會自然產生－葡萄糖苷酶，採用專門配置的生物指示劑閱讀器可以檢測到酶衰減過程中而產生的熒光物質。經過4個小時的培養，如果檢測到熒光物質，則說明滅菌過程失敗；如果檢測不到熒光物質，則說明滅菌過程成功。
觀察頻度：
應放在適當的測試包和包裹內，用來觀察每次滅菌過程的質量。
使用范圍：
3MTM 環氧乙烷滅菌生物培養指示劑（快速）適用於監測：
1－100%環氧乙烷滅菌過程。
2－所有氟里昂（CFC）和氫化氟里昂（HCFC）與環氧乙烷混合物的滅菌循環。
警告：
生物指示劑塑料管內有一玻璃安瓿。
· 冷卻之前壓碎或過度處理生物指示劑可能導致玻璃安瓿的破碎, 飛濺的碎屑會導致人員受傷。
· 建議從滅菌器內取出生物指示劑時戴防護眼鏡和手套,。
· 壓碎生物指示劑時戴防護眼睛。
· 壓碎和敲擊生物指示劑應關閉帽子。
· 不要用手指壓碎玻璃安瓿。
· 不要在手指間捻搓生物指示劑菌片使其濕潤。
注意事項：
不要用3MTM 環氧乙烷滅菌快速生物培養指示劑監測：
1－壓力蒸汽滅菌過程。
2－乾熱，化學氣體或其它低溫滅菌過程。
使用說明：
1. 在生物指示劑標簽上註明滅菌器, 負載數, 處理日期; 不要在指示劑的瓶或蓋上另貼一個標簽。
2. 按照消毒學技術規范將生物指示劑放於一個合適的測試包內和最難滅菌的位置，避免將指示劑和化學指示卡放在一起，以免引起熒光物質轉移。
3. 將指示劑放在滿負載最難滅菌的位置，通常是負載的中間。
4. 正常裝載。
5. 滅菌過程完畢, 兩種方法取出：
A． 通風前取出指示劑測試包：
按照廠家要求打開滅菌器門，取出測試包。從測試包內取出生物指示劑和化學指示卡。將測試包其餘物品放回鍋內。
B． 通風後取出指示劑測試包：
測試包的通風時間同鍋內其它包裹相同。通風完畢，從測試包內取出生物指示劑和化學指示卡。按照醫院要求丟棄其餘物品。
6 檢查指示劑上的化學標簽。暴露於環氧乙烷滅菌過程的標簽顏色變成綠色。此顏色變化不能表示此過程足夠達到無菌。如果化學指示劑沒有變化, 請檢查滅菌過程。
7 戴上防護眼鏡, 按壓帽下，擠碎安瓿, 抓住指示劑在硬表面敲擊直到菌片被培養基潤濕。然後培養指示劑; 詳細步驟請參閱ATTEST生物指示劑專門的培養器操作說明。
8 每次培養須至少同時培養一個未處理的生物指示劑( 陽性對照)，陽性對照生物指示劑與滅菌過的生物指示劑應該有相同的製造日期和標號。
9 在專門的培養鍋內（372C）培養陽性對照和已滅菌的生物指示劑4小時; 讀出最終結果. 詳細步驟請參閱生物指示劑專用的ATTEST培養器操作說明。2和3小時可早期發現陽性對照和陽性滅菌管。丟棄滅菌過的生物指示劑。
10 要得出視覺上顏色變化, 應在培養鍋內繼續培養48小時; 如培養基變為黃色, 表明生物指示劑為陽性; 如培養基仍為紫色, 表明生物指示劑為陰性。
陽性對照的目的是保證:
· 正確的培養條件。
· 指示劑的活性。
· 快速的培養基及合適的閱讀器。
閱讀結果：
1. 陽性對照的生物指示劑必須得出陽性的熒光結果(紅燈或+); 如陽性對照的生物指示劑讀出陰性熒光結果(綠燈或-), 應檢查培養鍋溫度和紫外燈; 重新試驗得出新的陽性對照生物指示劑，直至為陽性的熒光結果, 滅菌後的指示劑結果才是有效的。對於滅菌後的指示劑, 陽性的熒光結果(紅燈或+)表明滅菌過程失敗; 陰性熒光結果(綠燈或-)表明滅菌過程可以接受。
2. 對任何生物指示劑為陽性的結果，應立即凍結滅菌物品，檢查滅菌過程直至生物指示劑的結果呈陰性。
3. 在丟棄前應對任何陽性生物指示劑進行滅菌。 1298
3M™環氧乙烷快速生物測試包內含有「3MTM環氧乙烷滅菌快速生物培養指示劑」，可對常規的環氧乙烷或其它混合型的環氧乙烷氣體滅菌過程進行監測，用於環氧乙烷滅菌器的裝載過程式控制制。
工作原理:
枯草桿菌黑色變種芽胞在特定條件下, 存活時間大於或等於15分鍾，殺滅時間小於或等於60分鍾。
枯草桿菌黑色變種芽胞生長過程中會自然產生－葡萄糖苷酶，採用專門配置的生物指示劑閱讀器可以檢測到酶衰減過程中而產生的熒光物質。經過4個小時的培養，如果檢測到熒光物質，則說明滅菌過程失敗；如果檢測不到熒光物質，則說明滅菌過程成功。
使用方法：
1-在生物測試包可上註明滅菌器號，裝載號，滅菌日期，將測試包置於滅菌器最難滅菌的位置。
2-最難滅菌的位置，通常是負載的中間。
3-正常裝載。
4-滅菌過程完畢, 取出測試包。
5-檢查3M™環氧乙烷滅菌快速生物培養指示劑上的化學標簽。暴露於環氧乙烷滅菌過程的標簽顏色變成綠色。此顏色變化不能表示此過程足夠達到無菌。如果化學指示劑沒有變化, 請檢查滅菌過程。
6-在生物指示劑標簽上註明滅菌器號, 裝載號, 滅菌日期。
7-丟棄餘下的測試包。如果重復使用該測試包，會導致測試結果無效。
8-戴上防護眼鏡, 按壓帽下，擠碎安瓿, 抓住指示劑在硬表面敲擊直到菌片被培養基潤濕。然後培養指示劑。詳細步驟請參閱3M™環氧乙烷滅菌快速生物培養指示劑專門的培養器操作說明。
9-每次培養須至少同時培養一個未處理的生物指示劑( 陽性對照)，陽性對照生物指示劑與滅菌過的生物指示劑應該有相同的生產日期和批號。
陽性對照的目的是保證:
 正確的培養條件。
 芽孢的生物活性。
 培養基（復甦芽孢的能力）的活性。
10-在專門的培養鍋內（37±2oC）培養陽性對照和已滅菌的生物指示劑4小時; 讀出最終結果。丟棄滅菌過的生物指示劑。詳細步驟請參閱生物指示劑專用的ATTEST培養器操作說明。
閱讀結果：
1. 陽性對照的生物指示劑必須得出陽性的熒光結果(紅燈或+); 如陽性對照的生物指示劑讀出陰性熒光結果(綠燈或-), 應檢查培養鍋溫度和紫外燈; 重新試驗得出新的陽性對照生物指示劑，直至為陽性的熒光結果, 滅菌後的指示劑結果才是有效的。對於滅菌後的指示劑, 陽性的熒光結果(紅燈或+)表明滅菌過程失敗; 陰性熒光結果(綠燈或-)表明滅菌過程可以接受。
2. 對任何生物指示劑為陽性的結果，應立即凍結滅菌物品，檢查滅菌過程直至生物指示劑的結果呈陰性。
3. 在丟棄前應對任何陽性生物指示劑進行滅菌。
注意事項：
1－在滅菌開始前，不要打開測試包。
2－不要用該測試包監測壓力蒸汽滅菌過程、乾熱、化學氣體或其它低溫滅菌過程。
3－只有對照管為陽性, 其生物監測結果才算有效。
保存方法：
貯存於室溫，相對濕度為35%-60%，避免靠近滅菌器和化學消毒劑。

㈢ 怎樣進行高壓滅菌生物監測法

用生物指示劑（自含式）：
1、將自含式生物指示劑置於滅菌最難達到的位置；
2、對負載滅菌，應根據有關規定，放置遍及負載的足夠數量的自含式生物指示劑。註：建議不少於2個，通常每個循環使用10個。
3、使負載暴露於一個滅菌循環；
4、暴露後，在負載冷卻或接觸空氣時盡快取出自含式生物指示劑；
5、壓碎裝有培養基的小玻璃瓶；
6、在適宜條件下培養，達規定時間後進行觀察，讀取結果；
7、若經過一個滅菌周期後，若有芽孢存活，則培養液會變渾濁或由紫色變為黃色；若芽孢被全部殺死，則培養液會保持最初的顏色。
8、記錄試驗結果；
9、陽性樣品需經高壓蒸汽滅菌處理。

自含式生物指示劑是一種帶培養液的生物指示劑，根據其構造的不同可分為兩類，一類是將菌片與裝有培養液的小玻璃安瓿同放在一塑料軟管中，軟管頂端有濾紙封好的通氣孔，滅菌後壓碎安瓿，培養液與菌片混合之後培養觀察；另一類是將培養液與細菌芽孢一同封於小玻璃安瓿中製成，滅菌後直接進行培養觀察。不同類型的自含式生物指示劑適用於不同的滅菌方法、滅菌環境。自含式生物指示劑使用方便，具有無需無菌移種和無菌配製培養基、可避免假陽性結果、且培養時間短等優點，在醫療衛生及工業領域應用廣泛。

㈣ 過氧化氫等離子滅菌，過氧化氫等離子滅菌的質量監測

一、適用范圍

適用於不耐熱、不耐濕的診療器械的滅菌，如電子儀器、光學儀器等診療器械的滅菌，不適用於布類、紙類、水、油類、粉劑等材質的滅菌。

二、滅菌方法

1.在專用的過氧化氫低溫等離子體滅菌器內進行，一次滅菌過程包含若干個循環周期，每個循環周期包括抽真空、過氧化氫注入、擴散、等離子化、通風五個步驟。

2.遵循過氧化氫低溫等離子體滅菌生產廠家的操作使用說明書，根據滅菌物品種類、包裝、裝載量與方式不同，選擇合適的滅菌程序，每種程序應滿足相對應的溫度、過氧化氫濃度和用量、滅菌時間等滅菌參數。

三、監測方法：

1.物理監測法：每次滅菌應連續監測並記錄每個滅菌周期的臨界參數如艙內壓、溫度、過氧化氫的濃度、電源輸入和滅菌時間等滅菌參數。滅菌參數符合滅菌器的使用說明或操作手冊的要求。

2.化學監測法：每個滅菌物品包外應使用包外化學指示物，作為滅菌過程的標志；每包內最難滅菌位置放置包內化學指示物，通過觀察其顏色變化，判定其是否達到滅菌合格要求。

3.生物監測法：

3.1 試驗菌株：嗜熱脂肪桿菌芽胞

3.2 監測方法：將自含式生物指示物（嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片）置於生物測試包內，將其置於滅菌器內最難滅菌的部位，經一個滅菌周期後取出，經 56℃±1℃培養，培養時間按自含式生物指示物產品說明書執行，同時設陽性對照，觀察培養結果。 若一天內進行多次生物監測，且生物指示劑為同一批號，則只設一次陽性對照即可。

3.3 監測頻次：每天至少進行一次。

四、注意事項

1.滅菌物品應清洗干凈、乾燥。

2.滅菌物品的包裝材料應符合 YY/T 0698.2 的非織造布和 YY/T 0698.5 復合型組合袋的要求。

3. 滅菌包不應疊放，不應接觸滅菌腔內壁。

4. 滅菌器應取得衛生部消毒產品衛生許可批件。

5. 新安裝、移位、大修、滅菌失敗、包裝材料或被滅菌物品改變，應對滅菌效果進行重新評價，包括採用物理監測法、化學監測法和生物監測法進行監測(重復三次)，監測合格後，滅菌器方可使用。

參考文獻：

WS/T 367-2012 醫療機構消毒技術規范

WS 310.3-2009 醫院消毒供應中心 第 3 部分：清洗消毒及滅菌效果監測標准

㈤ 請問醫院消毒供應室的工藝監測是什麼

醫院消毒是預防醫院內感染的重要措施之一，消毒效果的監測是評價其消毒方法是否合理、消毒效果是否可靠的手段，因而在醫院消毒工作中至關重要。
醫院消毒效果監測時需遵循以下原則：監測人員需經過專業培訓，掌握一定的消毒知識，具備熟練的檢驗技能；選擇合理的采樣時間(消毒後、使用前)；遵循嚴格的無菌操作。
20.2 熱力滅菌效果的監測方法
20.2.1 壓力蒸汽滅菌效果監測方法
20.2.1 化學監測法
(1)化學指示卡(管)監測方法：將既能指示溫度，又能指示溫度持續時間的化學指示管(卡)放人每一待滅菌的物品包中央，經一個滅菌周期後，取出指示管(卡)，根據其顏色及性狀的改變判斷是否達到滅菌條件。
(2)化學指示膠帶監測法：將化學指示膠帶粘貼於每一待滅菌物品包外，經一個滅菌周期後，觀察其顏色的改變，以指示是否經過滅菌處理。
(3)結果判定：檢測時，所放置的指示管(卡)的性狀或顏色均變至規定的條件，可認為該包滅菌合格。
(4)注意事項：監測所用化學指示劑須經衛生部批准，並在有效期內使用。
20.2.1.2 生物監測法
(1)指示菌株：指示菌株為嗜熱脂肪桿菌芽胞(ATCC7953或SSIK31株)，菌片含菌量為5.0X105-5.0x106cfu/片，在121℃±0.5℃條件下，D值為13-1.9min，殺滅時間(KT值)≤19min，存活時間(ST值)為≥3.9min。
(2)培養基：試驗用培養基為溴甲酚紫蛋白腖水培養基。
(3)檢測方法：將兩個嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片分別裝人滅菌小紙袋內，置於標准試驗包中心部位。
滅菌櫃室內,排氣口上方放置一個標准試驗包(由3件平紋長袖手術衣，4塊小手術巾，2塊中手術巾，1塊大手術中，3O塊10cm x 10cm8層紗布敷料包裹成25cm X 30cm x 30cm大小)。手提壓力蒸汽滅菌器用通氣貯物盒(22cm x 13cm x 6cm)代替標准試驗包，盒內盛滿中試管，指示菌片放於中心部位的兩只滅菌試管內(試管口用滅菌牛皮紙包封)，將貯物盒平放於手提壓力蒸汽滅菌器底部。
經一個滅菌周期後，在無菌條件下，取出標准試驗包或通氣貯物盒中的指示菌片，投人溴甲酚紫蛋白腖水培養基中，經56℃培養7天(自含式生物指示物按說明書執行)，觀察培養基顏色變化。檢測時設陰性對照和陽性對照。
(4)結果判定：每個指示菌片接種的溴甲酚紫蛋白腖水培養基都不變色，判定為滅菌合格；指示菌片之一接種的溴甲酚紫蛋白腖水培養基，由紫色變為黃色時，則滅菌不合格。
(5)注意事項：監測所用菌片須經衛生部認可，並在有效期內使用。
20 .2.2 乾熱滅菌效果監測方法
20.2.2.1 化學檢測法
(1)檢測方法：將既能指示溫度又能指示該溫度持續時間的化學指示劑分別放人待滅菌的物品中。經一個滅菌周期後，取出化學指示劑，據其顏色及性狀的改變判斷是否達到滅菌條件。
(2)結果判定：檢測時，所放置的指示管的顏色及性狀均變至現定的條件，則可認為該包達到滅菌條件。
(3)注意事項：檢測所用的化學指示劑需經衛生部認可，並在有效期內使用。
20.2.2.2 物理檢測法：(熱電偶檢測法)
(l)檢測方法：檢測時，將多點溫度檢測儀的多個探頭分別放於滅菌器各層內、中、外各點。關好櫃門；將導線引出，由記錄儀中觀察溫度上升與持續時間。
(2)結果判定：若所示溫度(曲線)達到預定溫度，則滅菌溫度合格。
20.2.2.3 生物檢測法：
(1)指示菌株：枯草桿菌黑色變種芽胞(ATCC9372)，菌片含菌量為5.0XI05一5.0XI06cfu/片。其抗力應符合以下條件：在溫度160±2℃時，其D值為1.3-1.9min，存活時間≥3.9min，死亡時間 ≤1.9min。
(2)檢測方法：將枯草桿菌芽胞菌片分別裝人滅菌中試管內(1片/管)。滅菌器與每層門把手對角線內，外角處放置2個含菌片的試管，試管帽置於試管旁，關好櫃門，經一個滅菌周期後，待溫度降至80℃時，加蓋試管帽後取出試管。在無菌條件下，加人普通營養肉湯培養基(5ml/管)，以37℃培養48h，觀察初步結果，無菌生長管繼續培養至第七日。
(3)結果判定：若每個指示菌片接種的肉湯管均澄清，判為滅菌合格，若指示菌片之一接種的肉湯管混濁，判為不合格，對難以判定的肉湯管，取0.1ml接種於營養瓊脂平板，用滅菌L棒塗勻，放37℃培養48h，觀察菌落形態，並做塗片染色鏡檢，判斷是否有指示菌生長；若有指示菌生長，判為滅菌不合格；若無指示菌生長，判為滅菌合格。
(4)注意事項：檢測所用的指示菌片需經衛生部認可，並在有效期內使用。
20.3 紫外線消毒效果的監測
20.3.1 紫外線燈管輻照度值的測定
1)檢測方法：開啟紫外線燈5min後，將測定波長為254nm的紫外線輻照計探頭置於被檢紫外線燈下垂直距離1m的中央處，待儀表穩定後，所示數據即為該紫外線燈管的輻照度值。
(2)結果判定：普通30w。直管型紫外線燈，新燈輻照強度≥90Uw/cm2為合格；使用中紫外線燈輻照強度≥70Uw/cm2對為合格；30W高強度紫外線新燈的輻照強度≥180 Uw/cm2行為合格。
(3)注意事項：測定時電壓220v土5v，溫度20一25℃，相對濕度<60%，紫外線輻照計必須在計量部門檢定的有效期內使用。
20.3.2 生物監測法
(1)空氣消毒效果監測：監測按20.7執行。
①表面消毒效果監測：監測按20.6執行。
20.4 醫療器械滅菌效果的監測
20.4.1 采樣時間：在滅菌處理後，存放有效期內采樣。
20.4.2 常規監測
(1)檢測方法：用無菌的方法將擬檢縫合針、針頭、手術刀片等小件醫療器械各5支，分別投人5ml的無茵洗脫液中；注射器則取5副在5ml無菌肉湯中分別抽吸5次；手術鉗、鑷子等大的醫療器械在無菌操作下取2份以上用沾有無菌洗脫液的棉拭子反復塗擦采樣，並將棉拭子投入5ml無菌洗脫液中。將采樣管用力振打80次，用無菌吸管吸取lml待檢樣品放於滅菌平皿內，加人已熔化的45℃-48℃的營養瓊脂15-18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，置37℃溫箱培養48h，計數菌落數。
(2)結果判定：平板上無菌生長為滅菌合格。
(3)注意事項：若消毒因子為化學消毒劑時，采樣液中應加人相應中和劑。
20.4.3 無菌檢驗
20.4.3.1 無菌檢驗前准備

20.4.3.2 無菌操作：取縫合針、針頭、刀片等小件醫療器械5件直接浸人6管需一厭氧培養管(其中一管作陽性對照)與4管黴菌培養管C培養基用量為15ml/管。
取5副注射器，在5ml洗脫液中反復抽吸5次，洗下管內細菌，混和後接種需一厭養菌培養管(共6管，其中1管作陽性對照)與黴菌培養管(共4管)。接種量：lml注射器為0.5ml，2ml注射器為Iml，5-10ml注射器為2ml，20-50ml注射器為5ml，培養基用量：接種量為2ml以下為15ml/管，接種量5ml為40ml/管。
手術鉗、鑷子等大件醫療器械取2件用沾有無菌洗脫液的棉拭子反復塗抹采樣，將棉拭子投人sml無菌洗脫液中，將采樣液混勻，接種於需一厭氧培養管(共6管，其中1管作陽性對照)與黴菌培養基(共4管)。接種量為lml/管，培養基用量為15ml/管。
20.4.3.3 培養：在待檢樣品的需一厭氧培養管中，接種預先准備的金黃色葡萄球菌陽性對照管液1：1000稀釋1ml，將需一厭氧培養管以及陽性與陰性對照管均於30-35℃培養5天，黴菌培養管與陰性對照管於20-25℃培養7天，培養期間逐日檢查是否有菌生長，如加人供試品後培養基出現混濁或沉澱，經培養後不能從外觀上判斷時，可取培養液轉種人另一支相同的培養基中或斜面培養基上，培養48-72h後，觀察是否再現混濁或在外面上有無菌落生長，並在轉種的同時，取培養液少量，塗片染色，用顯微鏡觀察是否有菌生長。
20.4.3.4 結果判定：陽性對照在24h內應有菌生長，陰性對照在培養期間應無菌生長，如需一厭氧菌及黴菌培養管內均為澄清或更顯混濁但經證明並非有菌生長，判為滅菌合格；如需一厭氧菌及黴菌培養管中任何1管顯混濁並證實有菌生長，應重新取樣，分別同法復試2次，除陽性對照外，其他各管均不得有菌生長，否則判為滅菌不合格。
20.4.4 注意事項
(1)送檢時間不得超過6h，若樣品保存於0-4℃，則不超過24h。
(2)被采樣本表面積<100cm2取全部表面；被采樣本表面積 ≥ 100Cm2，取 100cm2。
(3)若消毒因子為兒學消毒劑，采樣液中應加人相應中和劑。
20.4.5 熱原檢查法：
20.4.5.鱟試驗

20.4.5.2 動物試驗法
(1)原理：將一定劑量的供試品，在規定的時間內，觀察家兔體溫升高情況，以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規定。
(2)供試家兔：試驗用的家兎應健康無傷；體重1.7-3.0kg，雌兔應無孕。預測體溫前7日起，即應用同一飼料飼養。在此期間內，體重應不減輕，精神、食慾、排泄等不得有異常現象。未經使用於熱原檢查的家兔，或供試品判定為符合規定，但組內升溫達06T的家兔；或供試品判定為不符合規定，但其組內家兔平均升溫未達0.8℃，且已休息兩周以上的家兔；或三周內未曾使用的家兔，均應在檢查供試品前3-7日內預測體溫，進行挑選。挑選試驗的條件與檢查供試品時相同；僅不注射葯液，每隔lh測量體溫1次，共測4次，4次體溫均在38.0-39.6℃的范圍內，且最高最低體溫的差數不超過0.4℃的家兔，方可供熱原檢查用。用於熱原檢查後的家兔，如供試品判定為符合規定，至少休息2日方可供第2次檢查用。用於熱原檢查後的家兔，如供試品判定為不符合規定，且其組內家兔平均升溫達0.8℃或更高時，則組內全部家兔不再使用，每一家兔的使用次數，用於一般葯品的檢查，不應超過10次。
(3)試驗前的准備：在作熱原檢查前l-2日，供試用家兔應盡可能處於同一溫度的環境中，實驗室和飼養室的溫度相差不得大於5℃，實驗室的溫度應在17-28℃，在試驗全部過程 中，應注意室溫變化不得大於3℃，應避兔噪音干擾。家兔在試驗前至少lh開始停止給食並置於適宜的裝置中，直至試驗完畢c家兔體溫應使用精密度為±0.1℃的肛溫計，或其他同樣精確的測溫裝置。肛溫計插人肛門的深度和時間各兔應相同，深度一般約為6cm，時間不得少於Imin，每隔30-60min測量體溫1次，一般測量2次，兩次體溫之差不得超過0.2℃，以此兩次體溫的平均值作為該兔的正常體溫。當日使用的家兔，正常體溫應在38.0-39.6℃的范圍內，且各兔間正常體溫之差不得超過l℃。
(4)試驗用的注射器、針頭及一切和供試品溶液接觸的器皿，應置烘箱中用250℃加熱30min或用180℃加熱2h，也可用其他適宜的方法除去熱原。
(5)檢查法：取適用的家兔3隻，測定其正常體溫後15min內，自耳靜脈緩緩注人規定劑量並溫熱至約38℃的供試品溶液，然後每隔lh 按前法測量其體溫1次，共測3次，以3次體溫中最高一次減去正常體溫，即為該兔體溫的升高度數。如 3隻家兔中有 1隻體溫升高 0.6℃或0.6℃以上，或 3隻家兔體溫升高均低於 0.6℃，但升高的總數達 l.4℃或 l.4℃以上，應另取 5隻家兔復試，檢查方法同上。
(6)結果判定：在初試3隻家兔隊體溫升高均低於0.6℃，並且3隻家兔體溫升高總數低於1.4℃，或在復試的5隻家兔中，體溫升高0.6℃或0.6℃以上的兔數僅有1隻，並且初試，復試合並8隻家兔的體溫升高總數為3.5℃或3.5℃以下，均認為供試品符合熱原檢查條例規定。
在初試3隻家兔中，體溫升高0.6℃或0.6℃以上的家兔超過1隻，或在復試的5隻家兔中；體溫升高0.6℃或0.6℃以上的兔數超過1隻，或在初試、復合並8隻家兔的體溫升高總數超過3.5℃，均認為供試品的熱原檢查不符合規定。
20.5 手和皮膚粘膜消毒效果監測
20.5.1 采樣時間；在消毒後立即采樣。
20.5.2 采樣方法
(1)手的采樣：被檢人五指並攏，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭子在雙手指屈面從指根到指端往返塗擦2次(一隻手塗擦面積約30cm2)，並隨之轉動采樣棉拭子，剪去操作者手接觸部位，將棉拭子投人10ml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內，立即送檢。
(2)皮膚粘膜采樣：用 5cm × 5crn滅菌現格板，放在被檢皮膚處；用沒有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭子1支，在規格板內橫豎往返均勻塗擦各5次，並隨之轉動棉拭子，剪去手接觸部位後，將棉拭子投人10ml含相應中和劑的無菌洗脫液的試管內，立即送檢。不規則的粘膜皮膚處可用棉拭子直接塗擦采樣。
20.5. 3 檢測方法
(1)細菌總數檢測：將采樣管用力振打80次，用無菌吸管吸取1.0ml待檢樣品接種於滅菌平皿內加人已熔化的45-48℃的營養瓊脂15-18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，置37℃溫箱培養48h，計數菌落數。
采樣結果計算方法：
細菌總數(cfu/cm2)=平板上菌落數×稀釋倍數/采樣面積(cm2)
(2)致病菌檢測：致病菌檢測按2015原則執行。
20.5.4 結果判定
(1)消毒洗手
l、ll類區域工作人員：細菌總數≤5Cfu/Cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。
lll類區域工作人員：細菌總數≤10 Cfu/Cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。
lV類區域工作人員：細菌總數 ≤15 Cfu/Cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。
母嬰同室＼嬰兒室、新生兒室及兒科病房的工作人員手上，不得檢出沙門氏菌及其它致病菌。
(2)皮膚粘膜：參照手的衛生學標准執行。
20.5.5 注意事項
皮膚粘膜采樣處，若表面不足 5cm × 5cm可用相應面積的規格板采樣。
20.6 物品和環境表面消毒效果的監測
20.6.1 采樣時間：在消毒處理後進行采樣。
20.6.2 采樣方法：用5cm×5cm滅菌規格板，放在被檢物體表面，采樣面積≥100cm2，連續采樣4個，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭於1支；在規格板內橫豎往返均勻塗擦各5次，並隨之轉動棉拭子，剪去手接觸部位後，將棉拭子投人10ml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內，立即送檢。
門把手等不規則物體表面用棉拭子直接塗擦采樣。
20.6.3 檢測方法
(1)細菌總數檢測：檢測方法按20.5.3(1)執行。小型物體表面的結果計算，用cfu/件表示。
(2)致病菌檢測：檢測方法按 20 .14執行。
20.6.4 結果判定
l、ll類區域：細菌總數≤5cfu/Cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。
Ill類區域：細菌總數≤10 cfu/Cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。
lV類區域：細菌總數≤15 cfu/Cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。
母嬰同室、早產兒室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的物體表面不得檢出沙門氏菌。
20.6.5 注意事項
(1)送檢時間：按20.4.4(1)執行。
(2)采樣面積；按20.4.4(2)執行。
20.7 空氣消毒效果的監測
20.7.1 采樣時間：在消毒處理後、操作前進行采樣。
20.7.2 采樣方法
(1)布點方法；室內面積≤30Cm2，設內、中、外對角線3點，內、外點布點部位距牆壁IM處；室內面積>30M2，設4角及中央5點，4角的布點部位距牆壁lm處。
(2)平板暴露法：將普通營養瓊脂平板(直徑為9CM)放在室內各采樣點處，采樣高度為距地面1.5m，采樣時將平板蓋打開，扣放於平板旁，暴露5min，蓋好立即送檢。
20.7.3 檢測方法：將送檢的平板置37℃溫箱培養48h，計數菌落數，並分離致病菌。

㈥ 怎樣進行壓力蒸汽滅菌生物監測謝謝

1、檢測方法:
將壓力蒸汽滅菌生物指示劑放於標准測試包中，分別將測試包放於鍋內不同位置，滅菌完畢，取出該生物指示劑，擠破內含的安瓿，於56℃培養鍋內培養，48小時後閱讀結果。
2、結果判定:
每個指示劑接種的溴甲酚紫蛋白腖水培養基都不變色，判定為滅菌合格；指示菌片之一接種的溴甲酚紫蛋白腖水培養基，由紫色變為黃色時，則滅菌過程不合格。
3、注意事項:
監測所用菌片須經衛生部認可，並在有效期內使用。生物指示物監測應1月1次。

㈦ 消毒供應中心生物監測如何進行

監測按滅菌方式不同，監測頻率及使用的指示菌種不同：
壓力蒸汽：嗜熱，每周一次
乾熱：枯黑，每周一次
環氧乙烷滅菌：枯黑，每批次
低溫等離子體（過氧化氫等離子滅菌）和低溫甲醛滅菌：建議都用嗜熱，頻率分別為每天、每周一次。
一天內多次試驗，同一批號，僅進行一次陽性試驗即可。