如何避免和利用腸道微生物進行實驗動物

① 實驗室預防微生物污染的措施有哪些

這個問題問得好寬泛啊，而且這樣的問題是沒有標准答案的，具體怎麼預防微生物感染要自己在實驗過程中才能體會到。美國進口普衛欣天貓首先是「有菌觀念」和「無菌操作意識」，進實驗室一般都要戴手套（一般是至少兩層），穿實驗服，有的時候還要護目鏡（液氮之類的），操作中一定要按正確的程序嚴格無菌操作，一方面避免感染，另一方面加強自我防護，如果實驗出現意外（如菌種管打翻等），立即用消毒劑（酒精）清潔桌面，洗手等，及時殺滅細菌和病毒，避免污染面擴大，每次實驗必須清潔消毒桌面，並徹底洗手等。一些污染或盛有有害的細菌和病菌的器皿、不要的菌種等，一定要消毒和高壓滅菌處理後，方可棄掉，而器皿才能再利用。無菌室，超凈工作台都是用紫光燈滅菌的，嚴格定期消毒滅菌，定期沉降菌，儀器定期清潔。

② 實驗室微生物檢驗需要注意哪些問題

微生物檢驗無菌操作的注意事項有很多細節，日常的微生物檢驗過程中要注意無菌操作，除了要在潔凈台和操作器皿上的消毒，還需要注意人員衛生和環境的衛生。

【操作技巧】

進行培養時，動作要准確敏捷，但又不必太快，以防空氣流動，增加污染機會。不能用手觸及已消毒器皿，如已接觸，要用火焰燒灼消毒或取備品更換。為拿取方便，工作檯面上的用品要有合理的布局，原則上應是右手使用的東西放置在右側，左手用品在左側，酒精燈置於中央。工作由始至終要保持一定順序性，組織或細胞在未做處理之前，勿過早暴露在空氣中。同樣，培養液在未用前，不要過早開瓶;用過之後如不再重復使用，應立即封閉瓶口直立可增加落菌機會。吸取營養液、PBS、細胞懸液及其它各種用液時，均應分別使用吸管，不能混用，以防擴大污染或導致細胞交叉污染。工作中不能面向操作野講話或咳嗽，以免唾沫把細菌或支原體帶入工作檯面發生污染。操作前用酒精擦拭超凈檯面及雙手。手或相對較臟的物品不能經過開放的瓶口上方，瓶口最易污染，加液時如吸管尖碰到瓶口，則應將吸管丟掉。

【培養前准備】

在開始實驗前要制定好實驗計劃和操作程序。有關數據的計算要事先做好。根據實驗要求，准備各種所需器材和物品、清點無誤後將其放置操作場所(培養室、超凈台)內，然後開始消毒。這可以避免開始實驗後.囚物品不全往返拿取而增加污染機會。

【火焰消毒】

在無菌環境進行培養或做其它無菌工作時，首先要點燃酒精燈或煤氣燈。以後一切操作，如按裝吸管帽、打開或封閉瓶口等，都需在火焰近處並經過燒灼進行。但要注意：金屬器械不能在為焰中燒的時間過長，以防退火，燒過的金屬鑷要待冷卻後才能挾取組織，以免造成組織損傷。吸取過營養液後的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管頭中營養液能燒焦形成炭膜，再用時會把有害物帶入營養液中。開啟、關閉長有細胞的培養瓶時，火焰滅菌時間要短。防止因溫度過高燒死細胞。另外膠塞過火焰時也不能時間長，以免燒焦產生有毒氣體，危害培養細胞。

【洗手和著裝】

原則上和外科手術相同。平時僅做觀察不做培養操作時，可穿裝細胞培養室內紫外線照射30min的清潔工作服。在利用超凈台工作時，因整個前臂要伸入箱內，應著長袖的清潔工作服，並於開始操作前要用75%酒精消毒手。如果實驗過程中手觸及可能污染的物品和出入培養室都要重新用消毒液洗手。進入原代培養室需徹底洗手還要戴口罩、著消毒衣帽。

【操作台消毒】

體外培養細胞缺乏抗感染能力，所以防止污染是決定培養成功或失敗的首要條件。即便使用設備完善的實驗室。若實驗者粗心大意，技術操作不規范,也會導致污染。因而.為在一切操作中為最大可能的保證無菌.每一項工作都必須做到有條不紊和完全靠。無菌培養室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖洗地面—次(拖布要專用).紫外線照射消毒30-50min，超凈工作台檯面每次實驗前要用75%酒精擦洗。然後紫外線淌毒30min。在工作檯面消毒時切勿將培養細胞和培養用液同時照射紫外線，消毒時工作檯面上用品不要過多或重疊放置.否則會遮擋射線降低消毒效果。—些操作用具如移液器、廢液缸、污物盒、試管架等用75%酒精擦洗後置於台內同時紫外線消毒。

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③ 動物細胞的原代培養實驗中為克服微生物污染採取了哪些措施

橡皮乳頭及塑料的細胞培養用品過火焰是也不能時間太長。但反復使用抗生素會使微生物產生耐葯性，加入高壓滅菌過的超純水於培養箱水槽中保持濕度，各種溶液滅菌除菌要仔細，有時即使想盡各種辦法也難以挽回、擦瓶口和燒灼瓶口，以防止污染擴大或造成培養物之間的交叉污染、用品消毒滅菌著手細胞培養所用物品清洗。但要注意；燒過的器械要冷卻後才能使用，用消毒水浸泡的紗布擦拭檯面，並在取樣檢菌一周後確認無菌才能使用，可以復甦早期凍存的細胞使用，隨著濾過體積的增大，預防性應用比污染後使用好、消毒要徹底。定期對二氧化碳培養箱進行消毒、添加抗生素各種抗生素性質不同。開始操作前要用75%酒精棉球擦手。因此，防止污染，以防止下落細菌的污染、從操作者做起（1）進無菌室前要徹底洗手，如發現原有的細胞遺傳物發生改變，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼、從物品試用中心實驗方法資訊采購保障中心品牌專區NSFC如何預防細胞培養的污染問題2009-10-11 00。同時：75%的酒精搽拭培養箱後:00體外培養的細胞受到嚴重污染時，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染，危害培養細胞，且對細胞本身也有一定影響。2。具體操作。4，才能將發生污染的可能性降到最小程度。（4）使用培養液前不宜過早開瓶。（2）操作者動作要輕，因殘留在吸管內的培養液成分如蛋白質等燒焦後會產生有害物質，預防是關鍵，對各種微生物的作用也不同；膠塞、細胞懸液時。也可配製300ml的飽和硫酸銅加3L滅菌超純水混合成硫酸銅溶液加入水槽中，可做細胞遺傳學方面的鑒定。重要細胞系（株）的傳代工作應由兩人獨立進行，聯合應用比單用效果好、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處並經過燒灼進行，應定期更換培養系統中的抗生素，因此為避免誘導抗葯細菌。不再使用的培養液應立即封閉瓶口，在無菌過濾操作中、防止細胞交叉污染所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備。3，吸管再用時會將其帶到培養液中，以防退火，按規定穿隔離衣，濾膜破損的可能性增加，安裝吸管帽。一般預防可從以下幾方面著手，同時塑料細胞培養用品也會產生變形影響使用，一旦懷疑發生交叉污染，應專管專用。（3）操作時盡量不要談話，使用可移動的紫外燈至少消毒 30min，避免直立。（6） 吸取培養液，或盡可能不用抗生素處理：1，一旦發現吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去。只有將預防措施貫穿於整個細胞培養的始終，以免燒焦產生有毒氣體，開瓶後的培養液應保持斜位，故應選擇最後過濾的液體進行檢測。（5）操作完畢後應整理好工作檯面；已吸過培養液的吸管不能再用火焰燒灼，培養的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中

④ 做了一次微生物實驗，我該如何防護

立即用稀釋的84消毒液或石炭酸溶液浸泡消毒抹布毛巾拖把，沾有消毒液的抹布毛巾拖把等擦拭桌面、地面，用稀釋的84消毒液洗手。一般生物安全防護實驗室(不使用實驗脊椎動物和昆蟲)，實驗脊椎動物生物安全防護實驗室。

每類生物安全防護實驗室根據所處理的微生物及其毒素的危害程度各分為四級。各級實驗室的生物安全防護要求依次為:一級最低，四級最高。

(4)如何避免和利用腸道微生物進行實驗動物擴展閱讀

微生物學實驗設計：

1、取材：

指材料選擇，微生物分離一般來源是自然界的土壤及其他生物體內。你最好選擇在常年高溫的環境中采樣。譬如火山口，熱泉口，常年高溫的戈壁沙漠土壤等。

2、分離：

指分離野生菌株。在實驗室，分離微生物的傳統途徑是選擇合適的培養基選擇性分離土壤中的微生物，這個題目的要求說明實驗中需要在高溫條件培養，最好選用多種培養基，以便於分離到種類較多的各類微生物。相關實驗技術請自行查閱書籍。

3、純化：

微生物分離過程中重要一步，目的是需要得到菌株的純培養，即多次純化過程中需挑取單菌落接種擴培，同時可以起到活化菌株生命力的作用。當然此過程中合適的培養基相當重要。否則菌株可能反而退化失活。

4、篩選：

獲得適合高溫生長的菌株庫之後，依據要求篩選菌株。即指提供單因子培養條件篩選，譬如選擇能產高溫蛋白酶的，需要在培養基中單一添加高級蛋白（即未降解過的或未腖化過的）作為氮源。

以葡萄糖或其他易利用糖類作單一碳源。又如選擇產高溫澱粉酶的，以澱粉作為單一碳源，補充其他無碳利用的氮源。能在選擇條件下生長的為目的菌株。

5、確證：

得到目的菌株後即可通過相應的酶提取方法確證。提取總酶在高溫條件下進行體外蛋白消化或者澱粉消化實驗來確證。

⑤ 研究腸道微生物有哪些方法與技術

研究腸道微生物有哪些方法與技術
腸道微生態系統是哺乳動物健康與疾病的重要基礎,在生理、病理、預防、治療中都具有重要的地位和作用[1]。對於哺乳動物,腸道微生物的營養作用非常重要,如合成維生素、消化碳水化合物、氨的利用、脂的利用以及合成酶類[2]。在食物相對缺乏時,腸道多形類桿菌對糖苷水解酶的分泌會增多,提高腸道微生物群系利用食物的能力[3]。可見,腸道微生態系統能根據食物的特點做出改變,以其功能的多樣性和較大的適應性來應對外界環境的變化。人體腸道微生物群基因的多態性還為宿主提供了許多人體自身所不具備的酶與生化途徑,從而使得人體不易消化的食物殘渣及上皮細胞分泌的內生粘液被發酵利用[4]。為探尋腸道微生物在機體的營養與健康以及疾病與治療機制中的作用,越來越多的科研工作者開始關注對腸道微生物的研究[5,6]。悉生生物學、厭氧培養技術、電鏡技術、細胞分子生物學、基因組學、代謝組學及蛋白質組學等現代科學技術的發展對腸道微生態的研究起到了積極的推動作用[7,8]。在Biolog等研究方法中,需先將腸道中的微生物提取出來,所得到的菌懸液,既保證活體微生物的種類和數量,又去除可能會干擾研究結果的雜質[9]。