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克隆哪些單細胞微生物

發布時間:2023-07-30 17:25:43

微生物是怎麼樣被克隆的

一.實驗目的
在油鏡下觀察糞便中微生物的個體形態
二.實驗原理
微生物的細胞小且透明,在普通光學顯微鏡下不易識別,必須對它們進行染色,使經染色後的菌體與背景形成明顯的色差,從而能更清楚地觀察到其形態和結構。因此,微生物染色技術是觀察微生物形態結構的重要手段。
革蘭氏染色反應是細菌分類和鑒定的重要性狀。它是1884年由丹麥醫師gram創立的。革蘭氏染色法(gram
stain)不僅能觀察到細菌的形態,而且還可將所有細菌區分為兩大類:染色反應呈藍紫色的稱為革蘭氏陽性細菌,用g
表示;染色反應呈紅色(復染顏色)的稱為革蘭氏陰性細菌,用g-表示。細菌對革蘭氏染色的不同反應,是由於它們細胞壁的成分和結構不同而造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由肽聚糖形成的網狀結構組成的,在染色過程中,當用乙醇處理時,由於脫水而引起網狀結構中的孔徑變小,通透性降低,使結晶紫-碘復合物被保留在細胞內而不易脫色,因此,呈現藍紫色;革蘭氏陰性細菌的細胞壁中肽聚糖含量低,而脂類物質含量高,當用乙醇處理時,脂類物質溶解,細胞壁的通透性增加,使結晶紫-碘復合物易被乙醇抽出而脫色,然後又被染上了復染液(番紅)的顏色,因此呈現紅色。
革蘭氏染色需用四種不同的溶液:鹼性染料(basic
dye)初染液;媒染劑(mordant);脫色劑(decolorising
agent)和復染液(counterstain)。鹼性染料初染液的象在細菌的單染色法基本原理中所述的那樣,而用於革蘭氏染色的初染液一般是結晶紫(crystal
violet)。媒染劑的作用是增加染料和細胞之間的親和性或附著力,即以某種方式幫助染料固定在細胞上,使不易脫落,碘(iodine
)是常用的媒染劑。脫色劑是將被染色的細胞進行脫色,不同類型的細胞脫色反應不同,有的能被脫色,有的則不能,脫色劑常用95%的酒精(ethanol)。復染液也是一種鹼性染料,其顏色不同於初染液,復染的目的是使被脫色的細胞染上不同於初染液的顏色,而未被脫色的細胞仍然保持初染的顏色,而且將細胞區分成g
和g-兩大類群,常用的復染液為番紅。
三.實驗材料
1.菌種:???
2.器材:顯微鏡,載玻片,染色缸等
3.染色液:草酸銨結晶紫染色液,路哥氏(lugol)碘液,95%乙醇,0.5%沙黃染色液
四.實驗步驟
1.
塗片
取糞便少許,用蒸餾水將其浸泡,將一滴浸泡液滴到載玻片,乾燥、固定。固定時通過火焰1—2次即可,不可過熱,以載玻片不燙手為宜。
2.
染色
(1)初染
加草酸銨結晶紫一滴,約一分鍾,水洗。
(2)媒染
滴加碘液沖去殘水,並覆蓋約一分鍾,水洗。
(3)脫色
將載玻片上的水甩凈,並襯以白背景,用95%酒精滴洗至流出酒精剛剛不出現紫色時為止,約20—30分鍾,立即用水沖凈酒精。
(4)復染
用番紅液染1—2分鍾,水洗。
(5)鏡檢
乾燥後,置油鏡觀察。革蘭氏陰性菌呈紅色,革蘭氏陽性菌呈紫色。以分散開的細菌的革蘭氏染色反應為准,過於密集的細菌,常常呈假陽性。
革蘭氏染色的關鍵在於嚴格掌握酒精脫色程度,如脫色過度,則陽性菌可被誤染為陰性菌;而脫色不夠時,陰性菌可被誤染為陽性菌。此外,菌齡也影響染色結果,如陽性菌培養時間過長,或已死亡及部分菌自行溶解了,都常呈陰性反應。
五.注意事項
1.
革蘭氏染色成敗的關鍵是脫色時間,如脫色過度,革蘭氏陽性菌也可被脫色而被誤認為是革蘭氏陰性菌;如脫色時間過短,革蘭氏陰性菌也會被誤認為是革蘭氏陽性菌。因此必須嚴格把握脫色時間。
2.
選用培養18—24小時菌齡的細菌為宜,若細菌太老,由於菌體死亡或自溶常使革蘭氏陽性菌轉呈陰性反應。
糞便中主要的細菌是大腸桿菌。

㈡ 單細胞生物有哪些

1、草履蟲

無脊椎動物,原生動物門,纖毛綱的主要代表動物之一,又稱尾草履蟲。生活在有水草的淡水池沼和水溝中,為最常見的大型原生動物。喜聚集在有機物較多和陽光充足之處,營自由游動生活。

2、酵母菌

真菌門、子囊菌綱、酵母科中的酵母菌屬。圓形、橢圓形或卵形,也有臘腸形,少數種類可形成假菌絲。細胞寬1~5微米,長5~30微米。細胞壁的主要成分是甘露聚糖和葡聚糖。

3、變形蟲

無脊椎動物,原生動物門,肉足蟲綱,變形蟲科。體表無堅韌的表膜,僅有1層薄的質膜。膜內為較透明的細胞質,可明顯區分為內質和外質兩部分。內質又可分為不能移動的凝膠質和可隨蟲體的移動而流動的溶膠質。

4、衣藻

綠藻門、團藻目、衣藻科中的衣藻屬。藻體為單細胞,球形、卵形或橢圓形,細胞前端有2條等長的鞭毛,藻體借鞭毛的擺動而游動。細胞質中多具1個大形杯狀葉綠體,在葉綠體內靠細胞前部有1個紅色眼點,有感光作用。

5、眼蟲

鞭毛綱,眼蟲科。體小,長梭形。前端鈍圓,後端尖削,中央有一大的胞核。體外表膜具細的斜紋。體通常因含大量卵圓形的葉綠體而呈綠色。有鞭毛2條,1條自胞口伸出。

㈢ 請問單細胞生物有哪些

單細胞蛋白質曾被稱為發酵蛋白、生物合成蛋白、生物蛋白、石油蛋白、工業蛋白及菌體蛋白等。目前可供作飼料用的單細胞蛋白質微生物主要有酵母、真菌、藻類及非病原性細菌4大類。第一個單細胞生物出現在35億年前。單細胞生物在整個動物界中屬最低等最原始的生物。根據傳統的分類法,很多動物,植物和真菌多是多細胞生物。變形蟲算作單細胞動物,它的一些種類卻算作黏菌,帶鞭毛的鞭毛蟲如眼蟲有時被歸為單細胞藻類或者是單細胞動物。新的分類法中,所有的真核單細胞生物都算作原生生物。

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