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微生物實驗室常用滅菌方法有哪些

發布時間:2023-08-02 14:59:00

『壹』 滅菌方法分為哪幾種類別

滅菌方法分為:

1、熱滅菌法

熱滅菌法利用高溫使微生物細胞內的一切蛋白質變性,酶活性消失,致使細胞死亡。通常有乾熱、濕熱和間歇加熱滅菌等法。

2、乾熱滅菌

把金屬器械或洗凈的玻璃器皿放入電熱烘箱內,在150~170℃下維持1~2小時後,可達到徹底滅菌(包括細菌的芽孢)的目的。灼燒是一種最徹底的乾熱滅菌法,應用范圍僅限於接種環、接種針的滅菌或帶病原菌的材料、動物屍體的燒毀等。

3、濕熱滅菌

以沸水、蒸氣和蒸氣加壓滅菌。

4、間歇滅菌

間歇滅菌連續3天,每天進行一次蒸氣滅菌的方法。此法適用於不能耐 100℃以上溫度的物質和一些糖類或蛋白質類物質。一般是在正常大氣壓下用蒸氣滅菌1小時。滅菌溫度不超過100℃,不致造成糖類等物質的破壞,而可將間歇培養期間萌發的孢子殺死,從而達到徹底滅菌的目的。



5、輻射滅菌

輻射滅菌在一定條件下利用射線進行滅菌的方法,較常用的有紫外線,其他還有電離輻射。波長在25000~80000納米之間的激光也有強烈的殺菌能力,以波長26500納米最有效。輻射滅菌法僅限於某一定材料,因所需設備復雜,難於廣泛使用。

6、滲透壓滅菌

滲透壓滅菌利用高滲透壓溶液進行滅菌的方法。在高濃度的食鹽或糖溶液中細胞因脫水而發生質壁分離,不能進行正常的新陳代謝,結果導致微生物的死亡。

7、化學試劑滅菌

大多數化學葯劑在低濃度下起抑菌作用,高濃度下起殺菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化學滅菌劑必須有揮發性,以便清除滅菌後材料上殘余的葯物。

『貳』 微生物實驗室常用的滅菌方法有哪些

常用的滅菌方法主要包括以下三種:乾熱滅菌;濕熱滅菌;紫外滅菌
1.乾熱滅菌法
1.1灼燒與火焰滅菌:灼燒主要用於接種工具滅菌,在火焰上灼燒即可達滅菌目的,火焰滅菌通常用於無菌操作中試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等實驗物品的滅菌,防止管口污染。
1.2干烤滅菌:利用熱輻射及乾熱空氣進行滅菌.將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷製品包裝後,在烤箱內加熱至160℃,保溫2h可完全滅菌.但不宜超過170℃.此外降溫過速,驟冷易引起玻璃器皿炸裂.乾熱滅菌時裝入干烤箱內的物品切勿緊密,應有空隙,利於熱空氣流動,過密,致使溫度不均,部分物品滅菌不徹底.
2.濕熱滅菌法
通過加壓提高蒸汽溫度,用高壓蒸汽滅菌,溫度高,滅菌效果最好.
注意事項:1.完全排除高壓滅菌器內的冷空氣.有冷空氣存在時,在同一表壓下所達到的溫度值要低,而冷空氣排出越少,溫度就低得越多.在高壓蒸汽滅菌時,為保證達到規定的溫度,必須將冷空氣完全排除.否則,雖然壓力達到,而溫度達不到規定的要求,滅菌就不徹底.
3.紫外線
殺菌譜廣,但穿透力弱,影響因素多,殺菌效能受到一定限制.
紫外線消毒效果與紫外線強度、照射時間、溫度與濕度等因素有關.紫外燈殺菌的溫度以20~40℃,相對濕度40%~60%為宜.

『叄』 微生物學實驗室常用的滅菌方法有哪些

物理方法

1、溫度


利用溫度進行滅菌、消毒或防腐,是最常用而又方便有效的方法。高溫可使微生物細胞內的蛋白質和酶類發生變性而失活,從而起滅菌作用,低溫通常起抑菌作用。

1 乾熱滅菌法:

a.灼燒滅菌法:利用火焰直接把微生物燒死。此法徹底可靠,滅菌迅速,但易焚毀物品,所以使用范圍有限,只適合於接種針、環、試管口及不能用的污染物品或實驗動物的屍體等的滅菌。


b.乾熱空氣滅菌法:這是實驗室中常用的一種方法,即把待滅菌的物品均勻地放入烘箱中,升溫至160℃,恆溫1小時即可。此法適用於玻璃皿、金屬用具等的滅菌。

2 濕熱滅菌法:

在同樣的溫度下,濕熱滅菌的效果比乾熱滅菌好,這是因為一方面細胞內蛋白質含水量高,容易變性。另一方面高溫水蒸汽對蛋白質有高度的穿透力,從而加速蛋白質變性而迅速死亡。


a.巴氏消毒法:有些食物會因高溫破壞營養成分或影響質量,如牛奶、醬油、啤酒等,所以只能用較低的溫度來殺死其中的病原微生物,這樣既保持食物的營養和風味,又進行了消毒,保證了食品衛生。該法一般在62℃,30分鍾即可達到消毒目的。此法為法國微生物學家巴斯德首創,故名為巴氏消毒法。


b.煮沸消毒法:直接將要消毒的物品放入清水中,煮沸15分鍾,即可殺死細菌的全部營養和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸鈉或2%的石炭酸,則效果更好。此法適用於注射器、毛巾及解剖用具的消毒。


c.間歇滅菌法:上述兩種方法在常壓下,只能起到消毒作用,而很難做到完全無菌。若採用間歇滅菌的方法,就能殺滅物品中所有的微生物。具體做法是:將待滅菌的物品加熱至100℃,15~30分鍾,殺死其中的營養體。然後冷卻,放入37℃恆溫箱中過夜,讓殘留的芽孢萌發成營養體。第2天再重復上述步驟,三次左右,就可達到滅菌的目的。此法不需加壓滅菌鍋,適於推廣,但操作麻煩,所需時間長。


d. 加壓蒸汽滅菌法:這是發酵工業、醫療保健、食品檢測和微生物學實驗室中最常用的一種滅菌方法。它適用於各種耐熱、體積大的培養基的滅菌,也適用於玻璃器皿、工作服等物品的滅菌。


加壓蒸汽滅菌是把待滅菌的物品放在一個可密閉的加壓蒸汽滅菌鍋中進行的,以大量蒸汽使其中壓力升高。由於蒸汽壓的上升,水的沸點也隨之提高。在蒸汽壓達到1.055公斤/厘米2時,加壓蒸汽滅菌鍋內的溫度可達到121℃。在這種情況下,微生物(包括芽孢)在15~20分鍾便會被殺死,而達到滅菌目的。如滅菌的對象是砂土、石蠟油等面積大、含菌多、傳熱差的物品,則應適當延長滅菌時間。


在加壓蒸汽滅菌中,要引起注意的一個問題是,在恆壓之前,一定要排盡滅菌鍋中的冷空氣,否則表上的蒸汽壓與蒸汽溫度之間不具對應關系,這樣會大大降低滅菌效果。

3 影響滅菌的因素:

a.不同的微生物或同種微生物的不同菌齡對高溫的敏感性不同。多數微生物的營養體和病毒在50~65℃,10分鍾就會被殺死;但各種孢子、特別是芽孢最能抗熱,其中抗熱性最強的是嗜熱脂肪芽孢桿菌,要在121℃,12分鍾才被殺死。對同種微生物來講,幼齡菌比老齡菌對熱更敏感。


b.微生物的數量多少顯然會影響滅菌的效果,數量越多,熱死時間越長。


c.培養基的成分與組成也會影響滅菌效果。一般地講,蛋白質、糖或脂肪存在,則提高抗熱性,pH在7附近,抗熱性最強,偏向兩極,則抗熱能力下降,而不同的鹽類可能對滅菌產生不同的影響;固體培養基要比液體培養基滅菌時間長。

04

滅菌對培養基成分的影響:

a.pH值普遍下降。


b.產生混濁或沉澱,這主要是由於一些離子發生化學反應而產生混濁或沉澱。例如Ca+2與PO4-3化合,就會產生磷酸鈣沉澱。


c.不少培養基顏色加深。


d.體積和濃度有所變化。


e.營養成分有時受到破壞。


2、輻射


利用輻射進行滅菌消毒,可以避免高溫滅菌或化學葯劑消毒的缺點,所以應用越來越廣,目前主要應用在以下幾個方面:


1)接種室、手術室、食品、葯物包裝室常應用紫外線殺菌。


2)應用β射線作食品表面殺菌,γ射線用於食品內部殺菌。經輻射後的食品,因大量微生物被殺滅,再用冷凍保藏,可使保存期延長。


3、過濾


採用機械方法,設計一種濾孔比細菌還小的篩子,做成各種過濾器。通過過濾,只讓液體培養基從篩子中流下,而把各種微生物菌體留在篩子上面,從而達到除菌的目的。這種滅菌方法適用於一些對熱不穩定的體積小的液體培養基的滅菌以及氣體的滅菌。它的最大優點是不破壞培養基中各種物質的化學成分。但是比細菌還小的病毒仍然能留在液體培養基內,有時會給實驗帶來一定的麻煩。

二 化學方法

一般化學葯劑無法殺死所有的微生物,而只能殺死其中的病原微生物,所以是起消毒劑的作用,而不是滅菌劑。


能迅速殺滅病原微生物的葯物,稱為消毒劑。能抑制或阻止微生物生長繁殖的葯物,稱為防腐劑。但是一種化學葯物是殺菌還是抑菌,常不易嚴格區分。消毒劑在低濃度時也能殺菌(如1:1000硫柳汞)。由於消毒防腐劑沒有選擇性,因此對一切活細胞都有毒性,不僅能殺死或抑制病原微生物,而且對人體組織細胞也有損傷作用,所以只能用於體表、器械、排泄物和周圍環境的消毒。


常用的化學消毒劑有:石碳酸、來蘇水(甲醛溶液)、氯化汞、碘酒、酒精等。答案來自

『肆』 微生物的幾種滅菌方法

方法較多,方法有化學試劑滅菌、射線滅菌、乾熱滅菌、濕熱滅菌和過濾除菌等。

1、化學滅菌法是指用化學葯品直接作用於微生物而將其殺死的方法。

對微生物具有殺滅作用的化學葯品稱為殺菌劑,可分為氣體滅菌劑和液體滅菌劑。殺菌劑僅對微生物繁殖體有效,不能殺滅芽孢。化學殺菌劑的殺滅效果主要取決於微生物的種類與數量,物體表面的光潔度或多孔性以及殺菌劑的性質等。化學滅菌的目的在於減少微生物的數目,以控制一定的無菌狀態。

2、乾熱滅菌法是指在乾燥環境(如火焰或乾熱空氣)進行滅菌的技術。一般有火焰滅菌法和乾熱空氣滅菌法。適用於乾燥粉末、凡士林、油脂等。

3、過濾除菌法是用物理阻留的方法將液體或空氣的細菌除去,以達到無菌目的。所用的器具是含有微小孔徑的濾菌器。主要用於血清、毒素、抗生素等不耐熱生物製品及空氣的除菌。常用的濾菌器有薄膜濾菌器(0.45μm和0.22μm孔徑)、陶瓷濾菌器、石棉濾菌器、燒結玻璃濾菌器等。

(4)微生物實驗室常用滅菌方法有哪些擴展閱讀:

滅菌的基本要求:

重復使用的診療器械、器具和物品,使用後應先清潔,再進行消毒或滅菌。

被朊病毒、氣性壞疽及突發不明原因的傳染病病原體污染的診療器械、器具和物品,應執行WS/T 367第11章的規定。

耐熱、耐濕的手術器械,應首選壓力蒸汽滅菌,不應採取化學消毒劑浸泡滅菌。

環境與物體表面,一般情況下先清潔,再消毒;當受到患者血液、體液等污染時,先去除污染物,再清潔與消毒。

醫療機構消毒工作中使用的消毒產品應經衛生行政部門批准或符合相應標准技術規范,並應遵循批准使用的范圍、方法和注意事項。

『伍』 常用的滅菌方法有哪些

常用的滅菌方法有:

1、熱滅菌法

熱滅菌法利用高溫使微生物細胞內的一切蛋白質變性,酶活性消失,致使細胞死亡。通常有乾熱、濕熱和間歇加熱滅菌等法。

2、乾熱滅菌

火焰灼燒法或烘箱內熱空氣滅菌法稱為乾熱滅菌法。把金屬器械或洗凈的玻璃器皿放入電熱烘箱內,在150~170℃下維持1~2小時後,可達到徹底滅菌(包括細菌的芽孢)的目的。

3、濕熱滅菌

因最早由法國微生物學家巴斯德用於果酒消毒,故名。這是一種專用於牛奶、啤酒、果酒或醬油等不宜進行高溫滅菌的液態風味食品或調料的低溫消毒方法。

滅菌的原則:

重復使用的診療器械、器具和物品,使用後應先清潔,再進行消毒或滅菌。被朊病毒、氣性壞疽及突發不明原因的傳染病病原體污染的診療器械、器具和物品,應執行WS/T 367第11章的規定。

耐熱、耐濕的手術器械,應首選壓力蒸汽滅菌,不應採取化學消毒劑浸泡滅菌。環境與物體表面,一般情況下先清潔,再消毒;當受到患者血液、體液等污染時,先去除污染物,再清潔與消毒。

醫療機構消毒工作中使用的消毒產品應經衛生行政部門批准或符合相應標准技術規范,並應遵循批准使用的范圍、方法和注意事項。

以上內容參考:網路—滅菌

『陸』 微生物學實驗常用的滅菌方法有哪些

一般分為濕熱滅菌法和乾熱滅菌法兩種。

一、濕熱滅菌法是指用飽和水蒸氣、沸水或流通蒸汽進行滅菌的方法,由於蒸汽潛熱大,穿透力強,容易使蛋白質變性或凝固,所以該法的滅菌效率比乾熱滅菌法高,是最常用的滅菌方法。濕熱滅菌法可分為:煮沸滅菌法、巴氏消毒法、高壓蒸汽滅菌法、流通蒸汽滅菌法、和間歇蒸汽滅菌法。

(1)煮沸滅菌法:將水煮沸至100攝氏度,保持5-10分鍾可殺死細菌繁殖體,保持1-3小時可殺死芽胞。在水中加入百分之一至百分之二的碳酸氫鈉時沸點可達105攝氏度,能增強殺菌作用,還可去污防銹。此法適用於食具、刀箭、載玻片及注射器等。

(2)巴氏消毒法:一種低溫消毒法,因巴斯德首創而得名。有兩種具體方法,一是低溫維持法:62攝氏度維持30分鍾;二是高溫瞬時法:75攝氏度作用15-30秒。該法適用於食品的消毒。

(3)流通蒸氣滅菌法:利用常壓下的流通蒸汽進行滅菌。

(4)間歇蒸汽滅菌法

(5)高壓蒸汽滅菌法:103.4千帕蒸汽壓溫度達121.3攝氏度,維持15-20分鍾。

二、乾熱滅菌法是指在乾燥環境(如火焰或乾熱空氣)進行滅菌的技術。一般有火焰滅菌法和乾熱空氣滅菌法。

(1)火焰滅菌法:是指用火焰直接燒灼的滅菌方法。該方法滅菌迅速、可靠、簡便,適合於耐火焰材料(如金屬、玻璃及瓷器等)物品與用具的滅菌,不適合葯品的滅菌。

(2)乾熱空氣滅菌法:是指用高溫乾熱空氣滅菌的方法。該法適用於耐高溫的玻璃和金屬製品以及不允許濕熱氣體穿透的油脂(如油性軟膏機制、注射用油等)和耐高溫的粉末化學葯品的滅菌,不適合橡膠、塑料及大部分葯品的滅菌。

『柒』 微生物學實驗室常用的滅菌方法有哪些

1 最常用的是高壓蒸汽滅菌,屬於濕熱滅菌;
2 火焰灼燒、高溫烘烤等,乾熱滅菌;
3 化學法滅菌,如福爾馬林、次氯酸鈉、酒精等;
4 過濾除菌,如細菌過濾器;

『捌』 常用6種滅菌方法有哪些,附適用范圍

回答
常用6種滅菌方法有乾熱滅菌法、濕熱滅菌法、間歇滅菌法、輻射滅菌法、過濾除菌法和化學試劑滅菌法。乾熱滅菌法是指在乾燥環境(比如火焰或者乾熱空氣)進行滅菌的技術。濕熱滅菌法是指用飽和水蒸氣、沸水或者流通蒸汽進行滅菌的方法。間歇滅菌法是指利用反復多次的流通蒸汽加熱,從而殺滅所有微生物的方法。
一、常用6種滅菌方法有哪些
1、乾熱滅菌法:是指在乾燥環境(比如火焰或者乾熱空氣)進行滅菌的技術。一般有火焰滅菌法和乾熱空氣滅菌法,適用於乾燥粉末、凡士林、油脂等。火焰滅菌法是指用火焰直接燒灼的滅菌方法;乾熱空氣滅菌法是指用高溫乾熱空氣滅菌的方法。
2、濕熱滅菌法:是指用飽和水蒸氣、沸水或者流通蒸汽進行滅菌的方法,濕熱滅菌法是以高溫高壓水蒸氣為介質,因為蒸汽的潛熱大,而且穿透力強,容易使蛋白質變性或者凝固,從而導致微生物的死亡。該方法的滅菌效率比乾熱滅菌法高,而且還是葯物制劑生產過程中比較常用的滅菌方法。
3、間歇滅菌法:是指利用反復多次的流通蒸汽加熱,從而殺滅所有微生物。間歇滅菌一般在流動蒸汽的滅菌鍋中進行,也可用普通鋁鍋代替。這種方法多用於明膠、牛乳等物質的滅菌,這類物質在100°C以上的溫度下處理比較長時間會被破壞,用間歇滅菌法可以起到殺菌作用,又可以讓被處理的物質免遭破壞。
4、輻射滅菌法:是利用電離輻射殺死大多數物質上的微生物的一種有效方法,它們都可以通過特定的方式控制微生物生長或者殺死微生物,比如微波可以通過熱產生殺死微生物的作用,該方法可以在常溫或者低溫下進行,處理過程食品溫升很小,這樣有利於維持食品的質量;而且輻射過的食品不會留下任何殘留物。
5、過濾除菌法:是用物理阻留的方法將液體或空氣的細菌除去,從而達到無菌目的,過濾除菌的原理有慣性撞擊截留作用、攔截截留作用、布朗擴散截留作用等。
6、化學試劑滅菌法:是指用化學葯品直接作用於微生物而將其殺死的方法,該方法可以分為氣體滅菌法和液體滅菌法,氣體滅菌法是指採用氣態殺菌劑進行滅菌的方法,比如臭氧、甲醛等;液體滅菌法是指採用殺菌劑容易如進行消毒的方法。
二、6種滅菌方法的適用范圍
1、乾熱滅菌法:適用於高溫下不損壞、不變質、不蒸發物品的滅菌,不耐濕熱的器械的滅菌,用於蒸汽或者氣體不能穿透物品的滅菌,比如玻璃、油脂、粉劑和金屬等製品的消毒滅菌。
2、濕熱滅菌法:適用於耐高溫、耐濕熱物品,如培養基、動物屍體等,比如實驗室內常見壓力蒸汽滅菌器。
3、間歇滅菌法:適用於不耐高溫、熱敏感物料和制劑的滅菌。
4、輻射滅菌法:適用於食品、化妝品、葯品、日用品、醫療產品和電子塑膠等領域,主要作用是產品消毒滅菌處理,通過射線作用於產品在不拆外包裝的前提下可以有效降低或者殺滅產品內部不同類形的微生物。
5、過濾除菌法:適用於血清、毒素、抗生素等不耐熱生物製品及空氣除菌。
6、化學試劑滅菌法:適用於環境消毒以及不耐加熱滅菌的醫用器具、設備和設施等的消毒,也用於粉末注射劑。
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