如何測定恆濁培養基中微生物總數

❶ 微生物計數方法有哪些

測定微生物計數的方法有很多,主要有以下幾種：
1.血細胞計數法
將稀釋的菌液樣品滴在血細胞計數板上,在顯微鏡下計算4~5個中格的細菌數,並求出每個小格所含細菌的平均數,再以此為依據,估算總菌數.
①此法的缺點是不能區分死菌和活菌.
②對壓在小方格界線上的細菌,應當取平均值計數.
③此法可用於測定培養液中酵母菌種群數量的變化
2.稀釋塗布平板法
原理：每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落.培養基表面生長的一個菌落,來源於樣品稀釋液中的一個活菌.
①這一方法常用來統計樣品中活菌的數目
②統計的菌落數往往比活菌的實際數目低,原因是當兩個活多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落.因此統計結果一般用菌落數而不是用活菌數來表示.
③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含細菌、酵母、芽孢與孢子等的數量均可用此法測定.但不適於測定樣品中絲狀體微生物,例如放線菌或絲狀真菌或絲狀藍細菌等的營養體等.
④此法若不培養成菌落,可通過將一定量的菌液均勻地塗布在玻片上的一定面積上,經固定染色後在顯微鏡下計數,這樣又稱塗片計數法.染色可用台盼藍,台盼藍能使死細胞染成藍色,可分別計數死細胞和活細胞.
3.濾膜法
濾膜法是當樣品中菌數很低時,可將一定體積的湖水、海水或飲用水燈樣品通過膜過濾器.然後將濾膜乾燥、染色,並經處理使膜透明,再在顯微鏡下計算膜上（或一定面積上）的細菌數.
此法也可以通過培養觀察形成的菌落數來推算樣品中的菌數.例如測定飲用水中大腸桿菌的數目：將已知體積的水過濾後,將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養.在該培養基上大腸桿菌的菌落呈現黑色,可根據培養基上黑色菌落的數目,計算出水樣中大腸桿菌的數目.
此法也是統計樣品中活菌的數目.
4.比濁法
原理是在一定范圍內,菌是懸液中細胞濃度與混濁度成正比,即與光密度成正比,菌越多,光密度越大.因此可藉助與分光光度計,在一定波長下,測定菌懸液的光密度,以光密度表示菌量.實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內,否則不準確.
5.顯微鏡直接計數法
在課本生物選修1生物技術實踐P22中「除了上述活菌計數法外,顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法.」這里說的顯微鏡直接計數,我認為應該是在稀釋塗布的基礎上不培養成菌落而通過染色的方法在顯微鏡下直接計數.再如濾膜法也一樣,可以有兩種情況.
另外,微生物計數法發展迅速,多種多樣的快速、簡易、自動化的儀器和裝置等方法可以用來統計微生物的數目.

❷ 土壤微生物數量的測定方法

取一定重量的土壤，稱取1g，置於100ml無菌水中，充分振盪，然後離心，取上清液，就得到土壤浸出液（可以看做土壤中的微生物全部轉移至水中）。然後做梯度稀釋，取一定稀釋度的溶液，塗平板，培養後數菌落數，然後乘上稀釋倍數，就可得到1g土壤中該微生物的數量。

例如，你在稀釋10的7次方的平板上數出了15個菌落，則1g土壤中微生物數量為1.5×10的8次方個。

❸ 微生物細菌總數測定會用到的所有儀器有什麼

一般用 樣方法。
需要的儀器有：試管（或者培養皿），滴管，死亡的血細胞（數量已知），轉動床（也可手來搖勻），血細胞計數板，顯微鏡。
原理：將死亡的血細胞（數量已知）全部放入試管與微生物細菌混合，並且搖勻。使其均勻分布。然後取一滴試管液稀釋後放入 血細胞計數板。
通過 觀察到的血細胞數目：觀察到的微生物數目=總血細胞數目：總微生物數目 來計算微生物細菌總數。

❹ 如何測定土壤中特定細菌的數量

顯微鏡直接計數法和稀釋平板計數法是測定微生物數量的常用方法。直接計數法中常用的是顯微鏡直接計數法，這種方法是先將待測樣品製成懸液，然後取一定量的懸液放在顯微鏡下進行計數(圖1-3-1)。根據在顯微鏡下觀察到的微生物數目來計算出單位體積內的微生物總數。直接計數法所需設備簡單，可迅速得到結果，而且在計數的同時能觀察到所研究微生物的形態特徵，其缺點是難以計數微小的細菌。這種方法一般適用於純培養懸浮液中各種單細胞菌體的計數。間接計數法最常用的是稀釋平板計數法，它是根據微生物的培養特徵而設計的計數方法。這種方法在樣品中含菌數較少的情形下，也可以完成計數。應用稀釋平板計數法計數時，需要將待測樣品配製成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開。再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布於平板中的培養基內；或是將一定量的稀釋液，與溶化後冷卻至45℃左右的瓊脂培養基混合，傾入無菌培養皿中，搖勻、靜置待凝。經過培養後，就由單個微生物生長繁殖形成菌落，這樣的一個菌落就代表著一個微生物個體。統計培養基中出現的菌落數，即可推算出檢測樣品中的活菌數。FOR EXAMPLE:] 土壤中好氣性細菌的計數土壤中生活的微生物種類和數量是極其豐富的，這些數量眾多的微生物對提高土壤肥力有重要作用。因此，測定土壤中的含菌量可以作為判定土壤肥力的一個重要指標。材料器具土壤樣品；牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基(附錄二)、無菌水；培養皿、移液管、天平、錐形瓶、試管、酒精燈、恆溫培養箱、搖床等。活動程序1.制備土壤稀釋液取土壤表層5～10 cm 處的土樣。准確稱取1 g 土樣，放入盛有99 mL 無菌水的錐形瓶(250 mL，放有小玻璃珠)中，用手或搖床振盪20 min，即製成102 倍的稀釋液。用1 mL無菌移液管，吸取10 2倍稀釋液0.5 mL，移入裝有4.5 mL無菌水的試管中，配製成103 倍稀釋液。用同樣的方法可製成稀釋倍數為104、105、106 的系列稀釋菌液(圖1-3-2)。圖移液時，要將移液管插入液面，吹吸3 次，每次吸上的液面要高於前一次，讓菌液混合均勻並減少稀釋中的誤差。每配一個稀釋度要換用一支移液管。2.取樣及倒平板將無菌培養皿編號，依次為104、105、106，每一號碼設置三個重復。用無菌移液管三支，分別吸取稀釋倍數為104、105、106的土壤稀釋液各0.2 mL，注入到相應編號的培養皿中(每個稀釋倍數各三個培養皿)。將已滅菌牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基溶化，待冷卻至45～50 ℃左右，傾入到無菌培養皿中，每皿約15 mL，輕輕轉動培養皿，使土壤稀釋液與培養基混合均勻。3.培養將上述接種好的平板培養基冷卻後，倒置放入28～30 ℃的恆溫培養箱中培養24～36 h，直至長出菌落為止。4. 觀察記錄將實驗中得到的菌落數填入表1-3-1。結果分析1.選取具有合適菌落數的稀釋倍數並計數。在計算結果時，從接種的3 個稀釋度中選擇一個合適稀釋倍數，統計出菌落數(圖1-3-3)。選擇的原則是：過(1) 細菌、放線菌、酵母菌以每個培養皿內有30～300 個菌落為宜。黴菌以每個培養皿內有10～100 個菌落為宜。(2) 同一稀釋倍數各個重復的菌落數相差不太懸殊。2.將統計出的菌落數按下列公式計算，得出每克樣品菌數。每克土壤樣品菌數= 某稀釋倍數的菌落平均數×稀釋倍數

❺ 微生物計數方法有哪些

測定微生物計數的方法有很多,主要有以下幾種： 1.血細胞計數法 將稀釋的菌液樣品滴在血細胞計數板上,在顯微鏡下計算4~5個中格的細菌數,並求出每個小格所含細菌的平均數,再以此為依據,估算總菌數. ①此法的缺點是不能區分死菌和活菌. ②對壓在小方格界線上的細菌,應當取平均值計數. ③此法可用於測定培養液中酵母菌種群數量的變化 2.稀釋塗布平板法 原理：每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落.培養基表面生長的一個菌落,來源於樣品稀釋液中的一個活菌. ①這一方法常用來統計樣品中活菌的數目 ②統計的菌落數往往比活菌的實際數目低,原因是當兩個活多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落.因此統計結果一般用菌落數而不是用活菌數來表示. ③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含細菌、酵母、芽孢與孢子等的數量均可用此法測定.但不適於測定樣品中絲狀體微生物,例如放線菌或絲狀真菌或絲狀藍細菌等的營養體等. ④此法若不培養成菌落,可通過將一定量的菌液均勻地塗布在玻片上的一定面積上,經固定染色後在顯微鏡下計數,這樣又稱塗片計數法.染色可用台盼藍,台盼藍能使死細胞染成藍色,可分別計數死細胞和活細胞. 3.濾膜法 濾膜法是當樣品中菌數很低時,可將一定體積的湖水、海水或飲用水燈樣品通過膜過濾器.然後將濾膜乾燥、染色,並經處理使膜透明,再在顯微鏡下計算膜上（或一定面積上）的細菌數. 此法也可以通過培養觀察形成的菌落數來推算樣品中的菌數.例如測定飲用水中大腸桿菌的數目：將已知體積的水過濾後,將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養.在該培養基上大腸桿菌的菌落呈現黑色,可根據培養基上黑色菌落的數目,計算出水樣中大腸桿菌的數目. 此法也是統計樣品中活菌的數目. 4.比濁法 原理是在一定范圍內,菌是懸液中細胞濃度與混濁度成正比,即與光密度成正比,菌越多,光密度越大.因此可藉助與分光光度計,在一定波長下,測定菌懸液的光密度,以光密度表示菌量.實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內,否則不準確. 5.顯微鏡直接計數法 在課本生物選修1生物技術實踐P22中「除了上述活菌計數法外,顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法.」這里說的顯微鏡直接計數,我認為應該是在稀釋塗布的基礎上不培養成菌落而通過染色的方法在顯微鏡下直接計數.再如濾膜法也一樣,可以有兩種情況. 另外,微生物計數法發展迅速,多種多樣的快速、簡易、自動化的儀器和裝置等方法可以用來統計微生物的數目.

❻ 如何檢測菌落總數

菌落總數檢測一般步驟為：

采樣 — 樣品制備與稀釋 — 倒平板 — 塗布平板 — 倒置培養 — 菌落計數 — 計算菌落總數

樣品制備，需要對樣品進行均質，根據客戶需要檢測的樣品不同。WIGGENS提供不同的均質設備，如均質機，拍打式均質器等；

樣品的稀釋，國標中採用1:10的十倍稀釋方法，SOCOREX提供各種手動精密移液器，瓶口分液器，移液管控制器為液體操作提供了保證。

倒平板，扒敬使用的培養基為含有瓊脂的固體培養基。培養基在配備的過程中需要經過煮沸和保溫的步驟。WIGGENS紅外加熱磁力攪拌器，直接使用紅外輻射方式進行加熱，1L培養基只需要10分鍾即春運慎可煮沸，極大節約了客戶培養基制備時間。在倒平板之前，需要恆溫培養基46±1 ℃， WIGGENS恆溫水浴鍋，可以為用戶提供的溫度控制和恆溫條件；

塗布平板，培養基在培養皿中冷卻成固態之後，將稀釋後的樣品用移液器取悄頃1mL,滴到培養基表面，用塗布棒塗勻。WIGGENS有專用的培養皿轉盤，可以有效的將樣品液均勻的塗布在培養基表面。

倒置培養，將塗布完畢的平板，放入恆溫培養箱中進行培養，一般培養時間約為48h。WIGGENS恆溫培養箱內容積50-140L各種規格的台式及落地式培養箱，先進的設計及數據介面，可以直接通過電腦編程式控制制及信息處理，非常適合規范化培養要求。

菌落數計算，經過48小時的培養之後，在培養基表面會長出菌斑，每個菌斑代表一個微生物。一般在培養皿中菌落數為30-300個之間，為有效菌落數。低於30個，會因為樣本量不足，隨機性大；超過300個，會因為菌落數太多，過於密集產生菌斑重疊等現象，不利於准確計數。WIGGENS菌落計數器，是帶有非閃爍式環形光源，放大鏡，壓力感測器，計數筆等，可以讓使用者輕松計數。

計算菌落總數，培養皿中的菌落數需要通過公式換算。 WIGGENS菌落計數器，配套軟體可以直接通過壓力感測器進行培養皿中菌落計數，通過軟體內嵌程序直接計算出被檢測樣品中菌落總數。

❼ 測定水中微生物（包括細菌真菌等）數量的方法

器材及培養

材料和試劑
蒸餾水,自來水,取自兒童公園的湖水,牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基.
儀器或其他用具
滅菌三角燒瓶,滅菌帶玻璃塞瓶,滅菌培養皿,滅菌吸管,滅菌量筒.
研究方法
採用平板菌落記數技術測定水中細菌總數.

水樣的採取
自來水
先將自來水水龍頭用火焰灼燒3min滅菌,再開放水龍頭5min後,以滅菌三角燒瓶接取水樣,以待分析.
公園的湖水
應取距水面10~15cm的深層水樣,先將滅菌的帶玻璃塞瓶,瓶口向下浸入水中,然後翻過來,除去玻璃
塞,水即流入瓶中,盛滿後,將瓶塞蓋好,再從水中取出,最好立即檢查,否則需放入冰箱中保存.
細菌總數的測定

• 自來水
  Step1用滅菌吸管吸取1mL水樣,注入滅菌培養皿中.共做兩個平皿.
  Step2分別傾注約15mL已溶化並冷卻到45e左右的肉膏蛋白腖瓊脂培養基.並立即在桌上做平面
  旋搖,使水樣與培養基充分混勻.
  Step3另取一個空的滅菌培養皿,傾注肉膏蛋白腖瓊脂培養基15mL,作對照.
  Step4培養基凝固後,倒置與37e溫箱中,培養24h,進行菌落記數.

• 公園的湖水
  Step1稀釋水樣,取三個滅菌空試管,分別加入9mL滅菌水.取1mL水樣注入第一管9mL滅菌水
  內,搖勻,再自第一管取1mL到下一管滅菌水內,如此稀釋到第三管,稀釋度分別為10-1,10-2,10-3.
  Step2自最後三個稀釋度的試管中各取1mL稀釋水加入空的滅菌培養皿,每一稀釋度共做兩個培養皿.
  Step3各傾注15mL已溶化並冷卻到45e左右的肉膏蛋白腖瓊脂培養基並立即在桌上搖勻.
  Step4凝固後倒置於37e恆溫恆濕培養箱中培養24h.

菌落記數方法
1)計算相同稀釋度的平均菌落數.若有大片菌苔生長時,棄用;以無片菌苔生長的培養皿記數.若片狀菌
苔大小不到培養皿的一半,其餘一半分布均勻,將此一半計數@2.
2)選擇平均菌落數在30~300之間的平板.只有一個符合此范圍時,以該平均菌落數@稀釋倍數.有兩
個在30~300之間時,按兩者菌落總數比值決定,比值小於2,取平均;比值大於2,取較小的菌落數.
3)若所有稀釋度的平均菌落數均大於300,則應按稀釋度最高的平均菌落數@稀釋倍數.
4)若所有稀釋度的平均菌落數均小於30,則按稀釋度的平均數@倍數.
5)若所有稀釋度的平均菌落數均不在30~300之間,則以最近30或300的平均菌落數@稀釋倍數.

微生物的含量能否反應水的營養化程度？

能

歡迎採納希望幫到你

❽ 細菌總數怎麼檢測

細菌總數檢測目前國標規定的方法為平板計數法，其檢驗方法是：

在玻璃平皿內，接種一毫升水樣或祥搭稀釋水樣於加熱液化的營養瓊脂培養基中，冷卻凝固後在37°C培養24小時，培養基上胡宴旦的菌落數或乘以水樣的稀釋倍數即為細菌總數。

有的國家把培養溫度定為35°C或其他溫度，也有把培養時間定為48小時的。這褲擾種方法精度高，但耗時長，難以滿足實際工作需要。

為了簡化檢測程序、縮短檢測時間，國內外學者進行了大量的快速檢測方法的研究，提出了阻抗檢測法、Simplate TM全平器計數法、微菌落技術、紙片法等檢測方法，取得了一定的成果，但檢測時間仍在4 h以上。

本研究在分析了已有研究成果的基礎上，提出了在濾膜上染色後，直接計數的細菌總數檢測方法，具體步驟為：

用集菌儀進行細菌收集→在膜上進行染色→在油鏡下計數→按公式計算出菌液濃度。實驗結果表明，該方法與傳統的平板培養法無顯著性差異，檢測時間約1 h，是一種快速的細菌總數檢測方法。

(8)如何測定恆濁培養基中微生物總數擴展閱讀：

水中通常存在的細菌大致可分為三類：

1、天然水中存在的細菌。普通的是熒光假單孢桿菌、綠膿桿菌，一般認為這類細菌對健康人體是非致病的。

2、土壤細菌。當洪水時期或大雨後地表水中較多。它們在水中生存的時間不長，在水處理過程中容易被去除。腐蝕水管的鐵細菌和硫細菌也屬此類。

3、腸道細菌。它們生存在溫血動物的腸道中，故糞便中大量存在。水體中發現這類細菌，可以認為已受到糞便的污染。致病性腸道細菌有沙門氏桿菌（傷寒和副傷寒菌）、B型炭疽菌、痢疾志賀氏菌和霍亂弧菌等。