『壹』 轉基因的具體步驟,從目的基因的獲得到最後的鑒定,謝謝
1:目的基因的獲取。有三種方法(1)從基因文庫中獲取(2)利用PCR技術擴增目的基因(3)人工合成
2:基因表達載體的構建。這個載體一般是質粒。
3:將目的基因導入受體細胞。這個導入植物細胞一般用農桿菌轉化法,也可用基因槍法或花粉管通道法。
導入動物細胞一般用顯微注射法。
導入微生物細胞一般用感受態細胞吸收DNA分子的方法。
4:目的基因的檢測與鑒定。這個分為4步:(1)用DNA分子雜交技術檢測目的基因是否進入受體細胞(2)用分子雜交技術檢測目的基因是否轉錄出RNA(3)用抗原抗體雜交技術檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(4)進行生物個體水平的鑒定(這步不是一定的,也可不進行)。進行生物個體水平的鑒定舉個例子就是比如讓蟲子去啃食導入抗蟲基因的植株,看是否抗蟲。