Ⅰ 如何分離微生物
采樣,梯度稀釋,塗布,培養,篩選近似目的菌的菌株,轉移,純培養,用選擇性培養基再次篩選,最後確定。
Ⅱ 請問:怎樣分離提純微生物
1. 稀釋塗布平板法
(1) 倒平板 將肉膏蛋白腖瓊脂培養基, 高氏Ⅰ號瓊脂培養基;馬丁氏瓊脂培養基加熱溶化,待冷至55~60℃, 高氏Ⅰ號瓊脂培養基加入10%酚數滴,馬丁氏瓊脂培養基加入鏈黴素溶液。混勻後分別倒平板,每種培養基倒三皿;
(2) 制備土壤稀釋溶液 稱取土樣10g,放入盛有90ml無菌水並帶入玻璃珠的三角燒瓶,振動約20min,使土樣與水分混合,將細胞分散.用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,然後用無菌吸管從此試管中吸取1ml加入另一個盛有9ml無菌水的試管中,混合均勻,以此推製成10-1,10-2,10-3,10-4,10-5,10-6不同稀釋的土壤溶液;
(3) 塗布 將上述每種培養基的三個平板地面分別用記號筆寫上10-4,10-5,10-6三種稀釋度,然後用無菌吸管分別由10-4,10-5,10-6三管土壤稀釋液中各取0.1ml對號放入已寫好室溫下靜置5~10min,使菌液吸附進培養基;
(4) 培養 將高氏Ⅰ號瓊脂培養基平板;馬丁氏瓊脂培養基平板倒置於28℃溫室中培養3~5day,肉膏蛋白腖平板倒置於37℃溫室中培養2~3day;
(5) 挑菌落 將培養後長出的單個菌落分別挑取少許細胞接種到上述三種培養基的斜面上,分別置28℃和37℃溫室培養,大菌苔長出後,檢查其特徵是否一致,同時將細胞塗片染色後用顯微鏡檢查是為單一的微生物。若發現有雜菌,需要再一次進行分離、純化,直到獲得純培養。
2.平板劃線分離法
(1)倒平板 按稀釋塗布平板倒平板,並用記號標明培養基名稱,土樣編號和實驗日期;
(2) 劃線 在近火焰處,左手拿皿底,右手拿接種環,挑取上述的土壤懸液一環在平板上劃線.劃線的方法很多,但無論採用那種方法,其目的都是通過劃線將樣品在平板上進行稀釋,使之形成單個菌落;
(3) 挑菌落 同稀釋塗布平板法,一直到分離的微生物認為純化為止。
Ⅲ 微生物純種分離的方法有哪些
自然界中的微生物總是雜居在一起 即使一粒土或一滴水中也生存著多種微生物 要研究其中某一種微生物 首先必須將它分離出來 下面介紹幾種純種微生物的分離方法
平板劃線分離 將已經熔化的培養基倒入培養皿中製成平板 用接種環沾取少量待分離的材料 在培養基表面平行或分區劃線(圖5-5)然後 將培養皿放入恆溫箱里培養 在線的開始部分 微生物往往連在一起生長 隨著線的延伸 菌數逐漸減少 最後可能形成純種的單個菌落
液體稀釋法 將待分離的樣品經過大量稀釋後 取稀釋液均勻地塗布在培養皿中的培養基表面 培養後就可能得到單個菌落
利用選擇培養基進行分離 不同的微生物對不同的試劑 染料 抗生素等具有不同的抵抗能力 利用這些特點可配製出適合某種微生物生長而限制其他微生物生長的選擇培養基 用這種培養基來培養微生物就可以達到純種分離的目的
菌絲尖端切割 這種方法適於絲狀真菌 用無菌的解剖刀切取位於菌落邊緣的菌絲的尖端 將它們移到合適的培養基上培養後 就能得到新菌落
Ⅳ 如何從自然界中分離純化自己想要的目的微生物
這個過程叫做「篩選」。
首先確定你所要篩選的目的微生物,並設計好「篩子」。以纖維素酶產生菌的篩選為例。
先找可能存在此類微生物的環境,如森林裡的枯枝爛葉和腐質土。採好樣品,拿回實驗室,首先進行擴大培養。就是把樣品中所有的微生物都培養增殖。一般就用全營養培養基。
培養液稀釋不同倍數後,做平板單細胞培養,這時就要用到「篩子」了。對於纖維素酶產生菌,篩子可選用可溶性纖維素。平板培養時,用可溶性纖維素作唯一碳源,不產生纖維素酶的微生物就不能生長(或生長極弱),把生長良好的微生物挑選出來,再進行擴大培養,再用纖維素唯一碳源的培養基進行篩選,並挑選生長優勢菌落,重復以上步驟(可以多挑選幾支進行對比選擇)。幾次以後,用纖維素粉(不溶性的)做唯一碳源的培養基,進行平板培養,纖維素酶產生量越大、活性越高,產生的透明圈直徑就越大。用這種辦法可能對酶產生量大、活性高的菌種做進一步篩選。
其它目的微生物的篩選步驟也差不多。
關鍵是采樣地點的選擇和「篩子」的設計。
希望對你有用。
Ⅳ 固體培養基如何分離微生物
塗布法
劃線法
混菌法
總而言之就是通過這三種方法獲得單菌落,然後再培養再獲得單菌落,一般三次取單菌落後就能得到純種。
Ⅵ 分離純化微生物的方法有哪些各方法適用分離什麼菌種
主要有:劃線法、倒平板法、塗布法,根據分離的菌種選擇不同的培養基。
稀釋混合倒平板法、稀釋塗布平板法、平板劃線分離法、稀釋搖管法、液體培養基分離法、單細胞分離法、選擇培養分離法等。其中前三種方法最為常用,不需要特殊的儀器設備,分離純化效果好。
從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。在分子生物學的研究及應用中,不僅需要通過分離。
分離技術
主要是稀釋和選擇培養,稀釋是在液體中或在固體表面上高度稀釋微生物群體,使單位體積或單位面積僅存留一個單細胞,並使此單細胞增殖為一個新的群體。最常用的為平板劃線法。
如果所要分離的微生物在混雜的微生物群體中數量極少或者增殖過慢而難以稀釋分離時,需要結合使用選擇培養法,即選用僅適合於所要分離的微生物生長繁殖的特殊培養條件來培養混雜菌體,改變群體中各類微生物的比例,以達到分離的目的。為保證分離到的微生物是純培養,分離時必須用。
以上內容參考:網路-微生物分離純化
Ⅶ 如何從環境中分離純化微生物
1、先根據目的菌株的生長特性從環境中採集樣品
2、將樣品加入無菌水中,振盪使菌均勻分布
3、採用梯度稀釋法,選取合適的梯度值於平板上培養
4、挑取目的菌進行平板劃線分離即可
Ⅷ 微生物的分離與純化的常用方法有哪些
分離:
稀釋倒平皿法
平板劃線法
單細胞挑取法
利用選擇培養基分離法
純化:
1、若是你不知道你所要純化的微生物的特徵,最簡單的不知道它的菌落特徵和形態大小,那現根據你要分離菌的特性,找適合的初篩培養基,找到你要純化的菌。如纖維素菌,你在培養基中加纖維素粉或CMC-Na作碳源,這樣就可以篩選出分解纖維素的菌。然後再用下面的方法繼續純化。
2、若你知道目標菌的形態,可以直接挑混合菌劃平板,直到長出當個菌落,並且在鏡下沒有雜菌即可;或者挑菌稀釋塗布得到當個菌落也行。
Ⅸ 如何純化微生物
你可以採取以下兩種方法:
1.若是你不知道你所要純化的微生物的特徵,最簡單的不知道它的菌落特徵和形態大小,那現根據你要分離菌的特性,找適合的初篩培養基,找到你要純化的菌。如纖維素菌,你在培養基中加纖維素粉或CMC-Na作碳源,這樣就可以帥選出分解纖維素的菌。然後再用下面的方法繼續純化。
2.若你知道目標菌的形態,可以直接挑混合菌劃平板,直到長出當個菌落,並且在鏡下沒有雜菌即可;或者挑菌稀釋塗布得到當個菌落也行。
若有不明白可以問我!
Ⅹ 微生物各種分離方法的優缺點
最常用的兩種方法:
1.平板劃線分離法
把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環在平板培養基,通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經培養後生長繁殖成單菌落,通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種
優點:可以觀察菌落特徵,對混合菌進行分離。
缺點:不能計數,一般用於從菌種的分離純化。
例如:篩選大腸桿菌菌種。
2.稀釋塗布平板法
將菌液進行一系列的梯度稀釋,然後將不同稀釋度的菌液分別塗布到瓊脂固體培養基的表面,進行培養。在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養基表面形成單個的菌落。
優點:可以計數,可以觀察菌落特徵。
缺點:吸收量較少,較麻煩,平板不幹燥效果不好,容易蔓延。一般用於平板培養基的回收率計數。
例如:測定純凈水中大腸桿菌的含量。