⑴ 如何對微生物菌種進行活化
有同學已經說的很專業了,我就給你說些簡單實用的。不知道你出於何種目的要進行活化。如果你是用凍存管保存的菌株進行活化,取出2顆小珠放在適宜的固體培養基上,合上蓋讓小珠在平皿上滾動,適宜條件培養就可以了。長出一個菌落,你再繁殖就可以了。如果你是凍乾粉的菌種,准備適宜的液體培養基,少少一點點粉末接種就可以了,根據此菌種一般液體培養所需時間,大概在36-48h,你還可以在觀察到液體渾濁、試管底部有沉澱時(沉澱者也可能為原本死亡的細菌),取100微升液體塗抹在固體培養基上。
一般的話,復甦的菌種需要重復幾次復壯。
⑵ 怎樣將凍乾粉的大腸桿菌復甦
配好LB培養基,常規滅菌,無菌操作把凍乾粉倒進去,37度搖床過夜,第二天去看就復甦好了- -LB培養基1L水加10g peptone,10g NaCl,5g Yeast Extract.用多少培養基看你心情,不過一般要轉接一次確認復甦成功.復甦完了趕快想辦法把菌給保上,甘油斜面隨便你,有條件自己也能做凍干保
⑶ 凍乾粉怎麼做微生物檢測
得看是水針劑使用的還是口服的,或者外用的。
如果水針劑需要進行無菌檢查,把樣品溶解後過濾,然後加入液體培養基,如果長菌即是不合格。
口服的溶劑後加入固體TSA和SDA分別培養。33℃細菌25℃黴菌。控制菌做大腸桿菌和沙門。
如果外用,同微生物限度測試。
⑷ 菌種凍干國內有哪些機構可以做把握一些的,最好能全程參與的。
很多啊,省微生物研究所,各大高校的微生物實驗室,很多生物發酵公司,都有菌種凍干設備。
你想全程參與的話,那就應該找離你近的。
你哪裡的?
我們都在浙江微生物研究所做。
也在福建微生物研究所做過。
都是自己全程參與的。
其實是否可以參與,你可以和對方商談的。
⑸ 我第一次微生物,剛買回來了菌種,但不知道如何復甦和保存,幫幫忙,謝謝
復甦就是挑一點在培養基上培養。保存一般4度冰箱里
⑹ 求關於微生物凍干菌株復甦的一些注意事項,尤其是弧菌
凍干菌株復甦注意事項:
將凍干菌種管外壁用碘酒擦洗消毒、稍干,用75% 乙醇棉擦凈,待干;
無菌操作打開包裝;
用無菌吸管將菌種復甦液體培養基約0.3ml左右注入被啟開的菌種瓶中並吹打,使瓶中的凍干菌種溶解成菌懸液;
將上述菌懸液吸出,分別接種到非選擇性固體斜面或平板如:血平板和菌種復甦培養基中,一般放置在37℃培養箱培養18~24h。對需要特殊培養條件的細菌,如需5%~10%二氧化碳或厭氧條件等,應分別於二氧化碳培養箱或厭氧培養箱中培養;
次日取出培養物,仔細觀察菌苔(落)形態、有無雜菌生長、並進行塗片染色鏡檢,若無異常,轉種1~2代後可使用;
如菌種未生長,應繼續培養至72h;
如發現培養物生長不良或不純,可用選擇性培養基進行平板分離單個菌落後再傳代。不同的細菌對冷凍乾燥的抵抗能力不同,弧菌對冷凍乾燥的抵抗能力相對較弱,在冷凍乾燥過程中菌體細胞容易受傷。因此復甦時應根據其生長特性,選用鹼性蛋白腖水(霍亂弧菌)或3%氯化鈉鹼性蛋白腖水(副溶血性弧菌、創傷弧菌)為復甦培養基,待菌體細胞修復後再接種於適合弧菌生長的非選擇性培養基上培養。
⑺ 如何對微生物菌種進行活化
菌種活化就是將保藏狀態的菌種放入適宜的培養基中培養,逐級擴大培養是為了得到純而壯的培養物,即獲得活力旺盛的、接種數量足夠的培養物。菌種發酵有一般需要2-3代的復壯過程,因為保存時的條件往往和培養時的條件不相同,所以要活化,讓菌種逐漸適應培養環境
要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法。目前國際國內常用的菌種保存方法包括:定期移植法、液體石蠟法、沙土管法、真空冷凍乾燥法、80℃ 冰箱凍結法、液氮超低溫凍結法。
對於不同的保存方式活化的方式也不同:
1 定期移植法的菌種復甦較簡單,直接轉接即可;
2 液體石蠟法保存的菌種在復甦時,挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上,生長繁殖後,再重新轉接一次;
3 沙土管法保存菌種在復甦時,在無菌條件下打開沙土管,取部分沙土粒於適宜的斜面培養基上,長出菌落後再轉接一次。或取沙土粒於適宜的液體培養基中,增殖培養後再轉接斜面;
4 真空冷凍乾燥法保存菌種在復甦時先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,將安瓿管頂部燒熱, 用無菌棉簽沾冷水,在頂部擦一圈,頂部出現裂紋,用挫刀或鑷子頸部輕叩一下,敲下已開裂的安瓿管的頂端,用無菌水或培養液溶解菌塊,使用無菌吸管移入新鮮培養基上,進行適溫培養;
5 -80℃ 冰箱凍結法保存菌種復甦時,從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置38℃-40℃水浴中快速復甦並適當快速搖動。直到內部結冰全部溶解為止,約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內容物移至適宜的培養基上進行培養
6 液氮超低溫凍結法保存菌種復甦與-80℃ 冰箱凍結法保存菌種復甦相似,從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置在38℃-40℃水浴中快速復甦並適當搖動。直到內部結冰全部溶解為止,一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內容物移至適宜的培養基上進行培養。
總結一下菌種活化需要以下幾個步驟:
第一配置菌種適宜生長的培養基
第二將菌種從保藏狀態恢復到室溫狀態,比如將冷凍的菌種解凍
第三將通過操作將保藏的菌種接種到培養基中培養,此步驟稱為菌種復壯
第四步挑選培養基茁壯的菌落,挑選其中部分菌落接種到新的培養基中培養,重復此步驟2-3次,從而得到生長良好的菌落
經過這四個步驟就到達將菌種從保藏狀態活化的目的
希望對你有幫助!
⑻ 菌種冷凍後如何復甦
菌株的復甦
1、 從冰箱取出保存管。不要將保存管解凍。如果同時取出幾支管,可以用冰袋來防止保存管的解凍。
2、 打開蓋子,用無菌的針插入玻璃珠的孔挑出或用鑷子取出玻璃珠
3、 取出的玻璃珠,可以投入一專用的液體培養基,或者立即在一專用的固體培養基上滾動。培養基置合適的條件培養
4、 遵循廢物處理手冊安全地處理該玻璃珠
5、 保存管重新封好,盡快將它置冰箱保存