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如何測水樣微生物

發布時間:2022-05-04 16:53:05

⑴ 如何檢驗環境水中的微生物

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水質微生物

一、水質微生物及指示菌

在各種水體,特別是污染水體中存在有大量的有機物質,適於各種微生物的生長,因此水體是僅次於土壤的第二種微生物天然培養基。水體中的微生物主要來源於土壤,以及人類的動物的排泄物及污染。水體中微生物的數量和種類受各種環境條件的制約。

一般認為,水中微生物以革蘭氏陰性桿菌佔有較大優勢。與其他水體相比,河水及溪水中革蘭氏陽性菌相對較多,這是因為陸地微生物沖洗污染的緣故。

水體中的致病性微生物一般並不是水中原有微生物,大部分是從外界環境污染而來,特別是人和其它溫血動物的糞便污染。水中常見的致病性細菌主要包括:志賀氏菌、沙門氏菌、大腸桿菌、小腸結炎耶爾森氏菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌等。

在實際控制中,對水質衛生質量的評價和控制,是無法對各種可能存在的致病微生物一一進行檢測,而一般利用對指示菌的檢測和控制,來了解水體是否受到過人畜糞便的污染,是否有腸道病原微生物存在的可能,從而評價水的質量,以保證水質的衛生安全。

目前,世界各國一般認為大腸菌群是指示水質受糞便污染較好的指示菌。

我國水質控制也採用大腸菌群作為指示菌,GB5749-85《中華人民共和國國家標准 生活飲用水衛生標准》規定,生活飲用水中大腸菌群每升不得超過3個。

在某些情況下,水體中的細菌總數也可指示水體受糞便等污染物污染的情況。這里的細菌總數其實是指營養瓊脂培養後形成的菌落總數。目前世界各國對於控制飲用水的衛生質量,除採用大腸菌群等指標外,一般還採用細菌總數這個指標。我國GB5749-85《中華人民共和國國家標准 生活飲用水衛生標准》中規定生活飲用水細菌總數每毫升不得超過100個。

二、水質微生物檢驗方法

GB5750-85《中華人民共和國國家標准 生活飲用水標准檢驗法》提供了水質中細菌總數和總大腸菌群的檢測方法。

(一)細菌總數的檢測:

國家標准中,細菌總數是指1ml水樣在營養瓊脂培養基中,於37℃經24h培養後,所生長的細菌菌落的總數。

對生活飲用水,直接吸取1ml水樣於平皿中,加入營養瓊脂後混勻,37℃培養24h,進行計數。

對水源水,根據情況對樣品進行10倍梯度稀釋,選擇適宜稀釋液1ml,加註平皿,營養瓊脂混勻,37℃培養24h,進行計數。

按照規定格式報告每毫升水中細菌總數。

(二)總大腸菌群的檢測:

國家標准中,利用總大腸菌群作為糞便污染的指標。總大腸菌群是指一群需氧及兼性厭氧的,37℃生長時能使乳糖發酵,在24h內產酸產氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。水樣中總大腸菌群數的含量,表明水被糞便污染的程度,而且間接地表明有腸道致病菌存在的可能。

國家標准提供了多管發酵法及濾膜法檢測總大腸菌群的方法。

多管發酵法檢測總大腸菌群,分為三步:初發酵試驗,平板分離,復發酵證實試驗。初發酵試驗,採用乳糖蛋白腖培養液37℃培養24h,觀察產酸產氣情況。對陽性管培養物,接種於品紅亞硫酸鈉培養基或伊紅美藍培養基,觀察菌落特徵,並進行革蘭氏染色和鏡檢。對典型和可疑菌落,接種於乳糖蛋白腖培養液,進行復發酵證實試驗,並根據標准所附檢數表報告結果。

其中,對生活飲用水,初發酵試驗接種水樣總量300ml,即100ml接種2管,10ml接種10管,採用兩個稀釋度,12支發酵管。對水源水,初發酵試驗接種水樣總量55.5ml,即10ml接種5管,1ml接種5管,0.1ml接種10管,共採用三個稀釋度,15支發酵管。兩種接種方法,所用的檢數表是不同的。

濾膜法檢測總大腸菌群,就是利用微孔濾膜,過濾一定量水樣,將水樣中含有的細菌截留在濾膜上,然後將濾膜帖放在選擇性培養基上(如品紅亞硫酸鈉培養基),經培養和證實試驗後,直接計數濾膜上生長的典型大腸菌群菌落,並計算出每升水樣中含有的總大腸菌群數。

三、說明:

1.菌落總數測定中,應選擇合適的稀釋度進行。生活飲用水,國家標准規定每毫升不得超過100個,因此可以直接吸取1毫升到平板進行培養。

2.培養時間。與食品中菌落計數不同,測定水中細菌總數,培養時間採用24h。

3.總大腸菌群的測定方法,由於飲用水和水源水可能的污染程度不同,因此採用不同的接種量,檢數表也不相同。

4.當接種量超過1毫升時,一般採用多倍濃度培養液。如配製3倍濃縮乳糖蛋白腖培養液50mL,加入100mL水樣後,總體積為150mL,培養液恢復到正常濃度。

5.濾膜法檢測總大腸菌群,一般在檢測較大量低濁度水樣時採用,大量水樣濾過濾膜後,水中所含有的所有細菌均截留在濾膜上。

⑵ 測定水中微生物(包括細菌真菌等)數量的方法

器材及培養

材料和試劑
蒸餾水,自來水,取自兒童公園的湖水,牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基.
儀器或其他用具
滅菌三角燒瓶,滅菌帶玻璃塞瓶,滅菌培養皿,滅菌吸管,滅菌量筒.
研究方法
採用平板菌落記數技術測定水中細菌總數.

水樣的採取
自來水
先將自來水水龍頭用火焰灼燒3min滅菌,再開放水龍頭5min後,以滅菌三角燒瓶接取水樣,以待分析.
公園的湖水
應取距水面10~15cm的深層水樣,先將滅菌的帶玻璃塞瓶,瓶口向下浸入水中,然後翻過來,除去玻璃
塞,水即流入瓶中,盛滿後,將瓶塞蓋好,再從水中取出,最好立即檢查,否則需放入冰箱中保存.
細菌總數的測定



菌落記數方法
1)計算相同稀釋度的平均菌落數.若有大片菌苔生長時,棄用;以無片菌苔生長的培養皿記數.若片狀菌
苔大小不到培養皿的一半,其餘一半分布均勻,將此一半計數@2.
2)選擇平均菌落數在30~300之間的平板.只有一個符合此范圍時,以該平均菌落數@稀釋倍數.有兩
個在30~300之間時,按兩者菌落總數比值決定,比值小於2,取平均;比值大於2,取較小的菌落數.
3)若所有稀釋度的平均菌落數均大於300,則應按稀釋度最高的平均菌落數@稀釋倍數.
4)若所有稀釋度的平均菌落數均小於30,則按稀釋度的平均數@倍數.
5)若所有稀釋度的平均菌落數均不在30~300之間,則以最近30或300的平均菌落數@稀釋倍數.

微生物的含量能否反應水的營養化程度?

歡迎採納希望幫到你

⑶ 如何檢測自來水中的微生物

(1)采水樣 先將自來水籠頭用火焰燒3分鍾滅菌,再擰開水
籠頭使水流5分鍾後,以無菌容器接取水樣.
(2)用無菌吸管取水樣1ml,注入兩個無菌培養皿中,
並分別傾料15ml已溶化並冷卻到45℃左右的普通瓊脂培養基,
並通過平面旋搖使水樣與培養基充分混勻,蓋上皿蓋.另取一空
的無菌培養皿,傾注入15ml普通瓊脂培養基,做空白對照.分別
做好標記,置37℃培養箱中培養24h,觀察是否有微生物生長.
計算菌落數,並觀察菌落特徵.

⑷ 純化水中的微生物檢測怎麼做 要詳細

1檢測前的准備
1.1儀器:微生物限度檢驗儀
微生物限度培養器
1.2培養基:TGYA瓊脂培養基、R2A瓊脂培養基
上述培養基均須做培養基的促生長試驗,TGYA瓊脂培養基的促生長試驗參見微生物計數操作檢查法SOP07-QC-3-017,R2A瓊脂培養基促生長試驗中選擇的菌種是銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄糖球菌,操作方法同微生物計數操作檢查法SOP07-QC-3-017中培養基的促生長試驗。
75%的酒精
1.3開啟凈化工作台,把微生物限度檢驗儀連接電源。

2檢測
2.1薄膜過濾法
使用孔徑大小不超過0.45μm的薄膜過濾器。
2.2在凈化工作台下,用火焰噴槍對泵頭端面和過濾片進行消毒。把微生物限度培養器固定在微生物限度檢驗儀上,打開微生物限度培養器蓋子。
2.3取50ml的純化水,倒入微生物限度培養器中,打開微生物限度檢驗儀開關,立即過濾。過濾完成後,取下過濾器,在過濾器膜的另一面中,傾注TGYA瓊脂培養基,蓋上蓋子。
2.4取50ml的純化水,倒入微生物限度培養器中,打開微生物限度檢驗儀開關,立即過濾。過濾完成後,取下過濾器,在過濾器膜的另一面中,傾注R2A瓊脂培養基,蓋上蓋子。
2.5每個樣品過濾後均做2單個培養,檢測完畢,取一微生物限度培養器固定在微生物限度檢驗儀上,注入100ml的75%酒精過濾,關閉儀器、電源。

3培養
傾注TGYA瓊脂培養基的,在30℃-35℃培養48h-72h,並計數。傾注R2A瓊脂培養基的,在20℃-25℃培養5d-7d,並計數。
分別計算和報告兩種培養基每1ml純化水中的cfu值。

⑸ 如何用顯微鏡觀察水樣中微生物 就是有採集回來的水樣需要用顯微鏡進行觀察其中的微生物,怎樣觀察准確

我教你
要看微生物就弄點海水,河水,自來水就不用了,海水的微生物特別多,你在找一塊玻璃,用手粘一滴海水,滴在玻璃上,在放到顯微鏡里去看,你就會看到非常多的微生物,但是,你要看清它們是很不容易的,因為他們各個都是游泳健將,你看到它們,它們一下子就遊走了.
知道了嗎?

⑹ 純凈水微生物檢測方法

電導率越低,水越純。電導率很低是不是說明水中的微生物也不存在了呢?微生物檢測等很長時間才出結果,要是能夠通過這樣的方法檢測純凈水的話,那就可以省了很多微生物檢測步驟.

在現代食品安全速測技術中確實有利用電導變化原理來測量微生物含量的方法,叫做:Bactometer系統,是一種用於估計微生物數量的新方法
比較快速的方法是有的,設備也比較先進,可能用的並不多
例如:直接外熒光濾過技術(DEFT)
即用膠系統(SimPlate)
Bactometer系統
Malthus微生物快速測試儀
ATP生物發光技術(BL)
微量量熱法
接觸酶測定儀
放射測量法

奧地利Sy-Lab公司的BacTrac4300和BioTrac4200自動微生物快速檢測系統可以根據微生物在生長過程中利用低電導率的大分子物質(如蛋白質,多肽及碳水化合物等)進行新陳代謝,生成低分子帶電荷的分解物,使電導率發生變化,電信號經放大後顯示並記錄,檢測系統每10分鍾檢測一次電導率的變化,由計算機實時監控並自動給出結果。因此,只要先用標准方法對比做出標准曲線,就可以達到快速定量檢測菌數的目的。對於致病菌或某些特殊應用場合,則不需要做標准曲線,如有電導率顯著突變,則可以判斷為初篩陽性,用標准方法進一步確認。

其特點是:
1。採用獨創的測量培養基電導(M值)和電極電導(E值)結合的方法,測量相對電導率變化,使靈敏度大大提高,E值測量法尤其適用於一些高鹽分(高電導率)的選擇性增菌培養基,使電導率法用於致病菌快速初篩成為可能。
2。對於難以測量電導變化的微生物,如酵母和黴菌,直接電導測量經常會出現假陰性。Sylab公司採用測間接電導率的方法,通過測量KOH吸收微生物代謝產生CO2後電導率的變化反映微生物的生長情況,檢測靈敏度大大提高,杜絕假陰性可能。
3。靈敏度高。最低可檢測出0.2-1個/mL(克)樣品。
4。可檢測樣品種類廣。可檢測常見的各種食品、化妝品、葯品、環境拭子等,還可用於微生物代謝、防腐及消毒效果研究等。
5。檢測的微生物項目多。可檢測常規微生物項目(菌落總數、大腸菌群、酵母和黴菌總數)及致病微生物(沙門氏菌、李斯特菌、金黃色葡萄球菌等)。
6。檢測速度快。樣品含菌量越高,出結果越快,只需4-24小時即給出結果。大腸菌群最長12小時出結果。
7。檢測步驟簡單。廠家提供特殊配方的培養基,您只需制備好培養基,將樣品加入培養基中,放入儀器,然後啟動程序即可自動出結果。對於液體樣品無需復雜前處理,固體樣品只需進行必要的均質和稀釋即可。不需要將樣品進行梯度稀釋,不需要人工計數,輕松完成每天繁瑣的微生物檢測工作,省時省力。
8。針對中國市場,廠家可以只提供乾燥培養基,單次檢測成本低廉,特別適合中國國情。
9。基於Windows系統的智能化軟體,可對單個檢測瓶進行控制,特別適合HACCP企業進行風險評估分析。
10。與標准方法相比,符合率達到90-97%,完全能滿足檢測機構和企業對快速檢測的需要。
11。該方法通過歐洲各國的認證。

⑺ 如何檢測水中的細菌

如果水中細菌密度較小,就該應用無菌技術將待測水樣通過專門過濾細菌的濾紙,這樣細菌就都留在濾紙上了,再將濾紙鋪到倒好平板的培養基中培養,長出菌落後數菌落數,數量除以過濾水的體積,就得出單位水樣里的細菌數

⑻ 生產用水的微生物檢測標准與采水樣的方法是什麼

我做過用固體培養基測水樣中微生物含量,菌落數要求在30~300個才可以計數。你的培養基中菌落數太少,你檢查一下你的取樣方法和操作步驟有沒有規范,不行就減小稀釋倍數試試。而且一般每一個稀釋濃度下要做三組平行試驗。
計算時,先計算每一稀釋濃度下三組平行試驗的平均數,把不同濃度下的平均數進行比較,首先選擇平均菌落數在30—300之間的,當只有一個稀釋度的平均菌落數符合此范圍時,則以該平均菌落數乘其稀釋倍數即為該水樣的細菌總數。

⑼ 怎樣測量生活飲用水中的微生物

取一定量水,按比例稀釋(十倍稀釋法),然後塗布到培養基上,培養一天,觀察菌落形態數量,乘以稀釋倍數,得出單位體積水中微生物含量。---大概操作過程。
操做要在無菌環境下操作。

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