如何做好一個完美的生物切片

⑴ 如何簡單製作生物顯微鏡切片

如何簡單製作生物顯微鏡切片
1、我們准備一片干凈的載玻片，然後在上面滴一滴蒸餾水，最佳的位置是在載玻片的右邊三分之一出，為什麼呢主要是左邊方便貼標簽

2、把製作好的切片或者需要觀察的培養液滴進蒸餾水中

3、拿著蓋玻片使用約四十五度的角慢慢放下，讓蓋玻片蓋住標本不要有氣泡，被擠出來的多餘的水用吸紙給吸干這樣就算可以完成了

⑵ 中學生生物切片的簡單做法

抱歉，書上只有臨時裝片的做法，我打出來，你認為可以就行。
臨時裝片的過程為七個步驟：擦--滴--取--展--蓋--染--吸
①用紗布將玻片擦拭乾凈；
②在潔凈的載玻片上滴一滴清水（動物細胞用0.9％的生理鹽水），水量不宜過多，也不能太少； ③從生物體上取材，放在水滴中；
④對撕取的薄膜要展平，挑取的材料要塗抹幾下，避免細胞重疊，看不清細胞機構；
⑤用鑷子夾起蓋玻片，使它的一側先接觸載玻片上的水滴（為防止產生氣泡），然後緩緩地蓋在要觀察的材料上；
⑥在蓋玻片的一側滴加染液；
⑦在與滴染液相對的一側用吸水紙吸取多餘的染液。
（純手工碼字，希望滿意）

⑶ 如何製作生物標本切片

最為廣泛應用的方法:石蠟切片 不僅用於觀察正常細胞組織的形態結構，也是病理學和法醫學等學科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態變化的主要方法，而且也已相當廣泛地用於其他許多學科領域的研究中。教學中，光鏡下觀察切片標本多數是石蠟切片法制備的。活的細胞或組織多為無色透明，各種組織間和細胞內各種結構之間均缺乏反差，在一般光鏡下不易清楚區別出；組織離開機體後很快就會死亡和產生組織腐敗，失去原有正常結構，因此，組織要經固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細胞組織死亡，而能清晰辨認其形態結構。

石蠟切片製作基本技術 石蠟切片法包括取材、固定、洗滌和脫水、透明、浸蠟、包埋、切片與粘片、脫蠟、染色、脫水、透明、封片等步驟。一般的組織從取材固定到封片製成玻片標本需要數日，但標本可以長期保存使用，為永久性顯微玻片標本。

⑷ 用顯微鏡觀察生物組織切片的具體步驟

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取載玻片與蓋玻片各一片,用軟布擦乾凈,由於蓋撥片很薄,擦時要小心,可用左手拇指和食指夾住蓋玻片邊緣,把紗布平鋪在右手手掌上,從上下兩面輕輕夾住蓋玻片,平均使用力量慢慢輕擦,這樣才不會把蓋玻片擦碎.
2.用滴管吸取1~2滴清水,放在載玻片中央.
3.用鑷子撕取觀察物體一小片(無論觀察細胞組織或器官,材料必須做成薄片,才能觀察,這些薄片不能過厚,一般一層細胞的厚度為好,如果過厚不但細胞互相重疊,而且光線不易穿透,雖然在顯微鏡下能勉強看到輪廓,但細致的結構很難看清),置於載玻片上的小水滴中,盡量勿使材料皺縮.
4.用鑷子夾取一片干凈的蓋玻片,先以蓋玻片的一邊斜著與小水滴接觸,然後便慢慢放下蓋玻片,將觀察材料全部蓋上,操作時,防止蓋玻片驟然下降,以免發生氣泡,妨礙觀察效果.
5.製作好的玻片,要求蓋玻片與載玻片之間恰好被水分充滿;當水分不足時,可用滴管從蓋玻片一側的邊緣滴少許水分,在另一側用吸水紙吸,從而使蓋玻片與載玻片之間被水分充滿;當水分多餘時,可用吸水紙吸去多餘水分.
6、染色：用滴管從蓋玻片一側的邊緣滴少許碘液,在另一側用吸水紙吸,從而使蓋玻片與載玻片之間被碘液充滿;當碘液多餘時,可用吸水紙吸去多餘碘液.製作好後就可以放到顯微鏡下面觀察了.
初學者可以製作
洋蔥內表皮細胞
准備
1.擦拭載玻片,在上面滴清一滴清水
2.製作臨時裝片
用鑷子撕取洋蔥內表皮
,展平
,放在載玻片上,蓋蓋玻片
3.染色
在載玻片一旁滴一滴碘液,在另一邊用吸水紙吸取
其他的植物也類似,如用鋒利刀片切幼嫩的莖或者葉片,記住要薄,多切幾片,放在清水裡,再用毛筆去蘸取,放在載玻片上,我是學生物的,你有這些儀器已經可以做簡單的顯微觀察了.例如,洋蔥表皮細胞觀察和細胞失水實驗
方法是,現在載波片上滴一滴清水(有條件的用蒸餾水),然後取新鮮的洋蔥,在紫色區用鑷子撕下一小塊表皮,在水滴上展平,蓋上蓋玻片,注意斜著蓋這樣可以不留氣泡,蓋好後就可以放在載物台上進行觀察,注意細胞形態,如果需要更進一步還可以在載玻片一側滴上一滴鹽水或是糖水,將玻片傾斜,讓鹽水將整個洋蔥切片浸潤,然後觀察,可以看到細胞失水;再用清水洗玻片再觀察,細胞重新吸水還原.
1.對光
2.撕取植物表皮薄膜放置載玻片上
3.蓋上蓋玻片(注意從一側,慢慢放下,避免氣泡出現)
4.滴碘酒,再從另一側拿吸水紙吸引
5.可以觀察了!

⑸ 如何製作永久植物玻片標本

石蠟切片（paraffin section） 組織學常規製片技術中最為廣泛應用的方法。石蠟切片不僅用於觀察正常細胞組織的形態結構，也是病理學和法醫學等學科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態變化的主要方法，而且也已相當廣泛地用於其他許多學科領域的研究中。教學中，光鏡下觀察切片標本多數是石蠟切片法制備的。活的細胞或組織多為無色透明，各種組織間和細胞內各種結構之間均缺乏反差，在一般光鏡下不易清楚區別出；組織離開機體後很快就會死亡和產生組織腐敗，失去原有正常結構，因此，組織要經固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細胞組織死亡，而能清晰辨認其形態結構。

石蠟切片製作基本技術 石蠟切片法包括取材、固定、洗滌和脫水、透明、浸蠟、包埋、切片與粘片、脫蠟、染色、脫水、透明、封片等步驟。一般的組織從取材固定到封片製成玻片標本需要數日，但標本可以長期保存使用，為永久性顯微玻片標本。

1.取材 應根據要求選取材料來源及部位。例如植物細胞有絲分裂多選取洋蔥根尖，細胞分裂快又便於切取；豬的肝小葉邊界清晰明確；耳蝸以豚鼠的內耳易於定位和剝離。材料必須新鮮，擱置時間過久則產生蛋白質分解變性，導致細胞自溶及細菌的滋生，而不能反映組織活體時的形態結構。

2.固定 用適當的化學葯液——固定液浸漬切成小塊的新鮮材料，迅速凝固或沉澱細胞和組織中的物質成分、終止細胞的一切代謝過程、防止細胞自溶或組織變化，盡可能保持其活體時的結構。固定能使組織硬化，有利於切片的進行，而且也有媒浸作用，有利於組織著色。固定液的種類很多，其對組織的硬化收縮程度以及組織內蛋白質、脂肪、糖類等物質的作用各不相同。例如純酒精可固定肝糖而能溶解脂肪，甲醛能固定一般組織，但溶解肝糖和色素。固定液可分為單一固定液及混合固定液。前者有甲醛（蟻醛、福爾馬林）、酒精、醋酸或冰醋酸、升汞、鋨酸（四氧化鋨）、重鉻酸鉀及苦味酸等，單一固定液不能固定細胞中的所有成分；混合固定液可以互補不足，常用的混合固定液有Bouin氏液、Zenker氏液、FAA液、Carnoy氏液、SuSa液（配方見有關技術書籍）。因此，應根據所要顯示的內容來選擇適宜的固定液。10％福爾馬林（4％甲醛）或10％磷酸緩沖福爾馬林是病理切片常規使用的固定液，不僅適用於常規HE（蘇木精-伊紅）染色，還可以用於組織學有關的其他技術的切片染色。固定液的用量通常為材料塊的20倍左右，固定時間則根據材料塊的大小及松密程度以及固定液的穿透速度而定，可以從1小時至數天，通常為數小時至24小時。

3.洗滌與脫水 固定後的組織材料需除去留在組織內的固定液及其結晶沉澱，否則會影響以後的染色效果。多數用流水沖洗；使用含有苦味酸的固定液固定的則需用酒精多次浸洗；如果組織經酒精或酒精混合液固定，則不必洗滌，可直接進行脫水。固定後或洗滌後的組織內充滿水分，如不除去水分就無法進行以後的透明、浸蠟與包埋，因為透明劑多數是苯類，苯類和石蠟均不能與水相融合，水分不脫盡，苯類不能浸入。酒精為常用脫水劑，它既能與水相混合，又能與透明劑相混，為了減少組織材料的急劇收縮，應使用從低濃度到高濃度遞增的順序進行，通常從30％或50％酒精開始，經70％、85％、95％直至純酒精（無水乙醇），每次時間為1～數小時，如不能及時進行各級脫水，材料可以放在70％酒精中保存，因高濃度酒精易使組織收縮硬化，不宜處理過久。正丁醇、叔丁醇、丙酮及二氧陸環等也可做脫水劑。

4.透明 純酒精不能與石蠟相溶，還需用能與酒精和石蠟相溶的媒浸液，替換出組織內的酒精。材料塊在這類媒浸液中浸漬，出現透明狀態，此液即稱透明劑，透明劑浸漬過程稱透明。常用的透明劑有二甲苯、苯、氯仿、正丁醇等，各種透明劑均是石蠟的溶劑。通常組織先經純酒精和透明劑各半的混合液浸漬1～2小時，再轉入純透明劑中浸漬。透明劑的浸漬時間則要根據組織材料塊大小及屬於囊腔抑或實質器官而定。如果透明時間過短，則透明不徹底，石蠟難於浸入組織；透明時間過長，則組織硬化變脆，就不易切出完整切片，最長為數小時。

5.浸蠟與包埋 用石蠟取代透明劑，使石蠟浸入組織而起支持作用。通常先把組織材料塊放在熔化的石蠟和二甲苯的等量混合液浸漬1～2小時，再先後移入2個熔化的石蠟液中浸漬3小時左右，浸蠟應在高於石蠟熔點3℃左右的溫箱中進行，以利石蠟浸入組織內。浸蠟後的組織材料塊放在裝有蠟液的容器中（擺好在蠟中的位置），待蠟液表層凝固即迅速放入冷水中冷卻，即做成含有組織塊的蠟塊。容器可用光亮且厚的紙折疊成紙盒或金屬包埋框盒。如果包埋的組織塊數量多，應進行編號，以免差錯。石蠟熔化後應在蠟箱內過濾後使用，以免因含雜質而影響切片質量，且可能損傷切片刀。通常石蠟採用熔點為56～58℃或60～62℃兩種，可根據季節及操作環境溫度來選用。

6.切片 包埋好的蠟塊用刀片修成規整的方形或長方形，以少許熱蠟液將其底部迅速貼附於小木塊上，夾在輪轉式切片機的蠟塊鉗內，使蠟塊切面與切片刀刃平行，旋緊。切片刀的銳利與否、蠟塊硬度適當都直接影響切片質量，可用熱水或冷水等方法適當改變蠟塊硬度。通常切片厚度為4～7微米，切出一片接一片的蠟帶，用毛筆輕托輕放在紙上。

7.貼片與烤片 用粘附劑將展平的蠟片牢附於載玻片上，以免在以後的脫蠟、水化及染色等步驟中二者滑脫開。粘附劑是蛋白甘油。首先在潔凈的載玻片上塗抹薄層蛋白甘油，再將一定長度蠟帶（連續切片）或用刀片斷開成單個蠟片於溫水（45℃左右）中展平後，撈至玻片上鋪正，或直接滴兩滴蒸餾水於載玻片上，再把蠟片放於水滴上，略加溫使蠟片鋪展，最後用濾紙吸除多餘水分，將載玻片放入45℃溫箱中乾燥，也可在37℃溫箱中乾燥，但需適當延長時間。

8.切片脫蠟及水化 乾燥後的切片需脫蠟及水化才能在水溶性染液中進行染色。用二甲苯脫蠟，再逐級經純酒精及梯度酒精直至蒸餾水。如果染料配製於酒精中，則將切片移至與酒精近似濃度時，即可染色。

9.染色 染色的目的是使細胞組織內的不同結構呈現不同的顏色以便於觀察。未經染色的細胞組織其折光率相似，不易辨認。經染色可顯示細胞內不同的細胞器及內含物以及不同類型的細胞組織。染色劑種類繁多，應根據觀察要求及研究內容採用不同的染色劑及染色方法，還要注意選用適宜的固定劑才能取得滿意的結果。經典的蘇木精（Hematoxylin）和伊紅（曙紅，Eosin）染色法是組織學標本及病理切片標本的常規染色，簡稱HE染色。經HE染色後，細胞核被蘇木精染成紫藍色，多數細胞質及非細胞成分被伊紅染成粉紅色。由於蘇木精是帶陽離子的染料，染液呈鹼性，核內染色質及胞質內核糖體等物質對這種染料有親和性，稱嗜鹼性；而帶陰離子的染料伊紅配製的染液呈酸性，對這種染料的親和性，稱嗜酸性。有時不同的組織結構還需要用特殊的染料及染色方法加以顯示，稱特殊染色。有些細胞組織經硝酸銀浸潤後，可使溶液中銀離子還原成金屬銀或銀粒附著在細胞組織上，呈棕黑色，這種性質稱親銀性，而有些細胞組織本身不能使硝酸銀的銀離子還原成金屬銀，還需加還原劑才能將銀離子還原，稱嗜銀性。

10.切片脫水、透明和封片 染色後的切片尚不能在顯微鏡下觀察，需經梯度酒精脫水，在95％及純酒精中的時間可適當加長以保證脫水徹底；如染液為酒精配製，則應縮短在酒精中的時間，以免脫色。二甲苯透明後，迅速擦去材料周圍多餘液體，滴加適量（1～2滴）中性樹膠，再將潔凈蓋玻片傾斜放下，以免出現氣泡，封片後即製成永久性玻片標本，在光鏡下可長期反復觀察。注意有些染料需特定廠家生產的產品。根據各種染色方法、組織類別及切片厚度，掌握適宜的染色時間，才能達到較好的染色效果。

石蠟製片程序及環節繁多，需數日才能完成1個周期，但切片可長期保存，供教學、科研及病理診斷及復察，並可利用蠟塊作其他項目的回顧性研究。病理常規製片過程中已簡化了一些細的環節或縮短了部分處理時間以適應臨床需要（可縮短至2天）。雖然冰凍切片大大快於石蠟切片，但所顯示的形態結構卻不如前者，因此病理醫生最後還需要根據石蠟切片作出准確診斷。近些年來，在病理常規製片過程中採用了微波技術，從而大大縮短了製片過程，而且對形態結構並沒有影響。微波是一種波長很短、頻率卻很高的高頻電磁波〔波長為1米 ～1毫米，頻率為300兆赫（MHz）～300千兆赫（GHz）〕。組織經微波輻射後加速組織內部分子的高速運動，以使液體的運輸加快，增加彌散、滲透和交換效率，從而加速組織的固定、脫水、透明、包埋和染色各個環節。例如常規福爾馬林固定需數小時～1天，而且能引起組織收縮及某些抗原成分不同程度的受到破壞，微波固定僅需1～2分鍾，且可減少抗原的丟失和損害。選擇適當的檔次（功率）、輻射時間和溫度是極為重要的。目前微波技術的應用在國內尚處於起步階段，許多技術應用環節尚需進一步摸索。

⑹ 生物：製作切片時，怎樣避免氣泡快！

你產問製作古臘切片時怎樣避免組織下面出現氣泡吧。
其實很簡單，你只要先將切下的組織薄片放入水中，它就會自然展開，這個過程就稱這為展片。展開後再用一支軟毛的毛筆，輕輕將組織薄片挑出並輔在玻片上，如果組織薄片發生捲曲的話可以適當用毛筆尖多吸點水。待組織薄片輔平後再用干凈的濾紙將玻片上的水吸干，這樣做出來的切片保證你不會出現氣泡。不過也得勤加練習喲，畢竟它也算是一門專業技術耶。

⑺ 為什麼我的生物切片總是不盡人意

別以為切片那麼好做的，想要隨手就能做一個漂亮的切片你起碼切片練習切上萬次。要能切出單細胞層。

⑻ 怎麼製作葉片橫切面的臨時切片 最好與生物數一致

刮鬍刀刀片一片掰斷,或者直接拿兩個,並列好,與主葉脈呈60度角劃幾次,注意手要捏緊刀片.快速地多拉幾次,在清水中把刀片上的葉片洗掉.用毛筆蘸取最薄的,且結構比較完整的一片放在載玻片上,蓋上蓋玻片,吸水即可（如果需要觀察某些特別組織則需染色）

⑼ 電鏡切片的製作過程

摘要 你好，很高興能回復你的問題，透射電鏡目前有兩種制樣技術：

⑽ 生物顯微鏡玻片怎麼做

方法：

塗片：將材料均勻地塗布在載玻片上。

裝片：將生物材料置於載玻片和蓋片之間，施加一定壓力，將組織細胞壓散。

切片：從生物體上切取的薄片製成玻片標本。

當用顯微鏡觀察細胞時，應用薄薄的易碎透明小片，這個小片就是玻片。