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如何進行微生物的分類鑒定

發布時間:2022-05-21 04:30:20

1. 微生物的分類鑒定技術主要有哪些

微生物的分類鑒定技術主要有哪些
革蘭氏陰性菌細胞壁特殊組份 細胞壁較薄,約10~15nm,有1~2層肽聚糖外,約占細胞壁乾重的5~20%.結構比較復雜.尚有特殊組份外膜層位於細胞壁肽聚糖層的外側,包括脂多糖、脂質雙層、脂蛋白三部分.
脂蛋白(Lipoprotein)一端以蛋白質部分共價鍵連接於肽聚糖的四肽側鏈上另一端以脂質部分經共價鍵連接於外膜的磷酸上.其功能是穩定外膜並將之固定於肽聚糖層.
脂質雙層 是革蘭陰性菌細胞壁的主要結構,除了轉運營養物質外,還有屏障作用,能阻止多種物質透過,抵抗許多化學葯物的作用,所以革蘭氏陰性菌對溶菌酶、青黴素等比革蘭氏陽性具有較大的抵抗力.一些化學物質如乙二胺四乙酸(EDTA)與2%十二烷基硫酸鈉(SDS)或45%酚水溶液可以將外膜除去,而留下堅韌的肽聚糖層.此外,外膜蛋白質還可作為某些噬菌體和性菌毛的受體.

2. 微生物是如何分類的

根據細胞的有無以及細胞結構特點的不同,人們把微生物分為三大類,它們是原核細胞型微生物,例如細菌和放線菌;真核細胞型微生物,如真菌;非細胞型微生物,例如病毒等。

3. 微生物如何界定物種

1。16S相似度。16S指的是核糖體小亞基的RNA組分,也就是16S rRNA。長度大約1500nt,不同物種略有差異。這里需要測全長的16S,一般用27F和1492R這對引物。擴出來之後送一代測序,然後去資料庫比對,也就是BLAST。一般認為相似度超過97%的話,就是同一個物種;低於97%的話就是不同物種。這只能用來做初步判斷,因為變形菌門可能相似度達到99%的仍然可能是不同的種(忘了是哪篇文獻了,似乎是討論97%閾值的)。但是這個指標可以簡單的幫我們確定這個菌是哪個屬,或者哪個科。定屬還是靠譜的。

2。形態學觀察。比如這個菌的形狀、大小、鞭毛情況等等。還包括最適生長條件的確定。

3。磷脂脂肪酸鑒定,這個具有屬特異性。

4。呼吸醌。看一下占優勢的呼吸醌是哪種。這個有種特異性。

5。分子雜交。測定基因組序列,草圖就行,然後跟近源物種去比較。相似度超過70%是一個種,低於70%是不同物種。閾值的數值記不清了,大概是65-70%吧。

6。碳源利用情況。看一下能利用哪些碳源。95種碳源的測試。

7。API試劑盒鑒定,生理生化鑒定的一方面。

8。GC含量。

9。革蘭氏染色。

確定了新種之後,需要命名。命名用的是現代拉丁文或者希臘文,因為拉丁文已經是死文字了,語義不會再變化。生物的拉丁名都是有意義的,比如Arthiobotrys oligospora,這是一種真菌,中文名寡孢節叢孢。是節叢孢屬的。種名oligo表示稀少的,spora表示孢子。屬名我不會拆詞,但是節肢動物的名字是Arthropoda,所以可以看出屬名是帶「節」的,表示分節。Pseudomonas aeruginosa,銅綠假單胞菌。pseudo是假的,偽的,monas表示單一的,單個的,aeruginosa表示銅綠,也就是銅銹。需要注意拉丁文和希臘文是分陰陽性的,這個在解釋命名的時候都會有。

4. 微生物有哪些常用的分類鑒定依據和方法

你好,受高中水平的限制,我給出下列方法:

  1. 通過顯微鏡直接觀察。一般來說,在一定的培養條件下(相同的培養基、溫度以及培養時間),同種微生物表現出穩定的菌落特徵。這些特徵包括菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等方面。(見高中生物選系1《生物技術實踐》圖2-8)因此可以通過顯微鏡觀察菌落特徵對微生物種類進行判斷。

  2. 使用選擇培養基培養微生物或人為提供有利於目的菌株生長的條件。選擇培養基,顧名思義其作用是允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他微生物生長。例如,使用以尿素作為唯一氮源的培養基能夠培養出可合成脲酶的微生物;在培養基中PH調至酸性有利於黴菌的生長繁殖(抑制細菌的生命活動)等。選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特徵進行間接判斷,得到的微生物往往並不只有一種,但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。

  3. 使用鑒別培養基。即根據微生物的代謝特點,在培養基中加入某種指示劑或化學葯品。例如,水質檢驗中大腸桿菌的檢驗(大腸桿菌的存在數量用以衡量水被糞便污染的程度)就用到了伊紅—美藍試劑,該試劑與水或乳製品中的大腸桿菌反應出現深紫色且帶有金屬光澤,屬於大腸桿菌的特徵反應。與選擇培養相比,鑒別培養基的鑒別所得結果的范圍比較小,一般可直接測定某微生物的種類。

    以上是個人結合書本某些內容進行的總結,希望能有用。

5. 微生物是如何分類的有哪些特點

微生物的分類依據:形態特徵、生理生化特徵、生態習性、血清學反應、噬菌反應、細胞壁成分、紅外吸收光譜、GC含量、DNA雜合率、核糖體核糖酸(rRNA )相關度、rRNA的鹼基順序。
形態特徵
(1)個體形態鏡檢細胞形狀、大小、排列,革蘭氏染色反應,運動性,鞭毛位置、數目,芽孢有無、形狀和部位,莢膜,細胞內含物;放線菌和真菌的菌絲結構,孢子絲、孢子囊或孢子穗的形狀和結構,孢子的形狀、大小、顏色及表面特徵等。
培養特徵
1)在固體培養基平板上的菌落(colony)和斜面上的菌苔(lawn)性狀(形狀、光澤、透明度、顏色、質地等);
2)在半固體培養基中穿刺接種培養的生長情況;
3)在液體培養基中混濁程度,液面有無菌膜、菌環,管底有無絮狀沉澱,培養液顏色等。

生理生化特徵
(1)能量代謝利用光能還是化學能;
(2)對氧氣的要求專性好氧、微需氧、兼性厭氧及專性厭氧等;
(2)營養和代謝特性所需碳源、氮源的種類,有無特殊營養需要,存在的酶的種類等。

生態習性
生長溫度,酸鹼度,嗜鹽性,致病性,寄生、共生關系等。

血清學反應
用已知菌種、型或菌株製成抗血清,然後根據它們與待鑒定微生物是否發生特異性的血清學反應,來確定未知菌種、型或菌株。

噬菌反應
菌體的寄生有專一性,在有敏感菌的平板上產生噬菌斑,斑的形狀和大小可作為鑒定的依據;在液體培養中,噬菌體的侵染液由混濁變為澄清。噬菌體寄生的專業性有差別,寄生范圍廣的謂多價噬菌體,能侵染同一屬的多種細菌;單價噬菌體只侵染同一種的細菌;極端專業化的噬菌體甚至只對同一種菌的某一菌株有侵染力,故可尋找適當專化的噬菌體作為鑒定各種細菌的生物試劑。

細胞壁成分
革蘭氏陽性細菌的細胞壁含肽聚糖多,脂類少。革蘭陰性細菌與之相反。鏈黴菌屬(Streptomyces)的細胞壁含丙氨酸、谷氨酸、甘氨酸和2,6-氨基庚二酸,而含有阿拉伯糖是諾卡氏菌屬(Nocardia)的特徵。黴菌細胞壁則主要含幾丁質。

紅外吸收光譜
利用紅外吸收譜技術測定微生物細胞的化學成分,了解微生物的化學性質,作為分類依據之一。

GC含量
生物遺傳的物質基礎是核酸,核酸組成上的異同反映生物之間的親緣關系。就一種生物的DNA來說,它的鹼基排列順序是固定的。測定四種鹼基中鳥嘌呤(G)和胞密啶(C)所佔的摩爾百分比,就可了解各種微生物DNA分子不同源性程度。親緣關系接近的微生物,它們的G+G含量相同或近似的兩種微生物,不一定緊密相關,因為它們的DNA的四個鹼基的排列順序不一定相同。

DNA雜合率
要判斷微生物之間的親緣關系,須比較它們的DNA的鹼基順序,最常用的方法是DNA雜合法。其基本原理是DNA解鏈的可逆性和鹼基配對的專一性。提取DNA並使之解鏈,再使互補的鹼基重新配對結合成雙鏈。根據能生成雙鏈的情況,可測知雜合率。雜合率越高,表示兩個DNA之間鹼基順序的相似越高,它們間的親緣關系也就越近。

核糖體核糖酸(rRNA )相關度
在DNA相關度低的菌株之間,rRNA同源性能顯示它們的親緣關系。Rrna-DNA分子雜交試驗可測定Rrna的相關度,揭示Rrna 的同源性。

rRNA的鹼基順序
RNA的鹼基順序由DNA轉錄來的,故完全具有相對應的關系。提取並分離細菌內標記的16SrRNA,以核糖核酸消化,可獲得各種寡核苷酸,測定這些寡核苷酸上的鹼基順序,可作為細菌分類學的一種標記。
核糖體蛋白的組成分析
分離被測細菌的30S和50S核糖體蛋白亞單位,比較其中所含核糖體蛋白的種類及其含量,可將被鑒定的菌株分為若干類群,並繪制系統發生圖。
望採納,謝謝。

6. 微生物怎樣分類

微生物主要分為以下幾類:

一、原核微生物

1、細菌(Bacteria)

2、古菌(Archaea)

二、真核微生物

1、真菌(Fungi)

2、原生動物(protozoan)

3、藻類(algae)

三、無細胞生物

1、病毒(virus)

2、類病毒(virusoid)

3、擬病毒(viroid)

4、朊毒體(亦稱朊病毒、蛋白質質感染性顆粒,prion)

(6)如何進行微生物的分類鑒定擴展閱讀:

微生物的主要特性

1、體積小,面積大。一個體積恆定的物體,被切割的越小,數量越多,其相對表面積越大(有時也稱作比表面積)。微生物體積通常很小,如一個典型的球菌,其體積約1mm³,可是其相對表面積卻很大。正因為有了較高的相對表面積做基礎,微生物才有了一些獨特的特徵,比如能夠快速代謝。

2、吸收多,轉化快。微生物通常具有極其高效的生物化學轉化能力。據研究,乳糖菌在1個小時之內能夠分解其自身重量1000-10000倍的乳糖,產朊假絲酵母菌的蛋白合成能力是大豆蛋白合成能力的100倍。

3、生長旺,繁殖快。相比於大型動物,微生物具有極高的生長繁殖速度,微生物理論上能做到指數級增長。大腸桿菌能夠在12.5-20分鍾內繁殖1次。

4、適應強,易變異。由於其相對表面積大的特點,微生物具有非常靈活的適應性或代謝調節機制。微生物對各種環境條件,尤其是在如同高溫、強酸、高鹽、高輻射、低溫等這樣十分惡劣的環境條件下的適應能力。

5、分布廣,種類多。由於微生物體積小、重量輕、數量多等原因,地球上除了火山中心區域等少數地方外,到處都有它們的蹤跡。微生物種類多主要體現在以下五個方面:物種多樣性;生理代謝類型多樣性;代謝產物多樣性;遺傳基因多樣性;生態類型多樣性。



7. 微生物的哪些形態特徵可作為其分類鑒定的依據

微生物的菌落已具有比較穩定的形態結構,所以可以根據微生物的大小菌落的形態結構以及隆起度,顏色等等,這些都是作為分類的重要依據。

8. 如何對一株細菌進行種屬鑒定

一般來說,對一株從自然界或其他樣品中分離純化的未知菌種的鑒定要做以下幾個方面工作。①個體形態觀察,進行革蘭氏染色,分辨是G(+)菌還是G(-)菌。並觀察其形狀、大小、有無芽孢及其位置等;②菌種形態觀察,主要觀察其形態、大小、邊緣情況、隆起度、透明度、色澤、氣味等特徵;③做動力試驗,看他能否運動及其鞭毛著生類型(端生、周生);④做生理生化反應及做血清學反應實驗。最後根據以上實驗項目的結果,通過查閱微生物分類檢索表,給未知菌進行命名。

9. 微生物分類表或分類的詳細步驟和方法

微生物分類的目的:把各種微生物按照它們的親緣關系分群歸類,排成系統,以便於人們對微生物進行鑒定和交流。
微生物的主要分類單位:界、門、綱、目、科、屬、種、變種、亞種(小種)、型、菌株(品系)
種是最基本的分類單位
種:親緣關系較近的微生物有機體的集合,它們在進化發育階段上有一定的共同形態和生理特徵。現代分類學上規定種內菌株的DNA同源性≥70%
變種:從自然界分離到的微生物純種,如果與典型種之間存在某些特徵的差別,而這些特徵又是穩定遺傳的,則可將這一純種稱為典型種的變種。如枯草芽孢桿菌的黑色變種。
小種(亞種):實驗室中獲得的微生物變異型稱為小種或亞種。
型:自然界存在的差異較小的同種微生物的不同類型,稱為型。如結核分支桿菌依其寄主的不同可分為人型、牛型和禽型。
菌株(品系):來源不同的同種微生物的純培養,均可稱為菌株。
群:有些微生物的特徵介於兩種微生物之間,我們把這兩種微生物及其中間類型統稱為一個群命名的方法:國際法規命名,即林奈所創立的雙名法。
雙名法的規則:微生物的學名依屬和種而命名,由兩個拉丁字或希臘字或拉丁化了的其它文字組成,屬名在前,為名詞,開頭字母大寫,是該微生物的主要特徵。種名在後,為形容詞。如:Stapylococcus
aureus,
Streptomyces
albosporeus(Krainsky)
Waksman
et
Henrici,
Micrococcus
sp.(spp.),
Bacillus
subtilis
var.niger形


征:個體形態(形狀、大小、染色反應等)、群體形態(菌落特徵、液體培養特點等)
生理生化特徵:代謝產物、營養要求、細胞壁成分等的測定
生態特徵:微生物間各種相互關系的利用
遺傳特徵:DNA同源性分析
G+C的含量
其它:全細胞蛋白的分析、多位點酶的分析等
經典分類法:採用雙歧法整理實驗結果
數值分類法:測定100項以上的各種性狀,利用計算機進行菌株的相互比較,並得出總的相似值。一般認為同種微生物菌株之間的相似值≥80%。
遺傳分類法:DNA雜交(液相復性速率法原理與方法)、G+C含量的測定(熱變性法、浮力密度法等)
細菌:伯傑氏鑒定細菌學手冊(第八、第九版)、細菌系統學手冊(第一版)
放線菌:中國科學院微生物研究所編著的放線菌目分科、分屬檢索表
真菌:Smith、
Alexopoulos

Ainsworth的分類系統

10. 微生物檢測或鑒定技術或方法有哪些

微生物檢測或鑒定技術或方法有哪些
通過顯微鏡直接觀察。一般來說,在一定的培養條件下(相同的培養基、溫度以及培養時間),同種微生物表現出穩定的菌落特徵。這些特徵包括菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等方面。(見高中生物選系1《生物技術實踐》圖2-8)因此可以通過顯微鏡觀察菌落特徵對微生物種類進行判斷。
使用選擇培養基培養微生物或人為提供有利於目的菌株生長的條件。選擇培養基,顧名思義其作用是允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他微生物生長。例如,使用以尿素作為唯一氮源的培養基能夠培養出可合成脲酶的微生物;在培養基中PH調至酸性有利於黴菌的生長繁殖(抑制細菌的生命活動)等。選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特徵進行間接判斷,得到的微生物往往並不只有一種,但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。
使用鑒別培養基。即根據微生物的代謝特點,在培養基中加入某種指示劑或化學葯品。例如,水質檢驗中大腸桿菌的檢驗(大腸桿菌的存在數量用以衡量水被糞便污染的程度)就用到了伊紅—美藍試劑,該試劑與水或乳製品中的大腸桿菌反應出現深紫色且帶有金屬光澤,屬於大腸桿菌的特徵反應。與選擇培養相比,鑒別培養基的鑒別所得結果的范圍比較小,一般可直接測定某微生物的種類。

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