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產蛋白酶的微生物菌株如何鑒定

發布時間:2022-05-23 21:50:23

① 檢測菌株是否產蛋白酶還可以選用何種培養基

檢測菌株是否產蛋白酶還可以選用酪素培養基,如果產蛋白酶會出現水解圈。
酪素培養基為微生物培養基的一種,選擇培養基。常用於產蛋白酶菌株篩選。

② 舉例說明如何分離產酶微生物菌種

就說蛋白酶吧。在蛋白質豐富的地方取樣,比如腐乳、豆豉就很好啊,已經本身就是利用的產蛋白酶微生物,或者豆腐坊附件的土壤、水體。接種在牛奶平板(或酪素平板)上。培養。菌落周圍出現透明圈的就是目的菌種了,可以選水解圈與菌落直徑比比較大的。然後需要純化、保存。

③ 如何通過細菌生化試驗鑒定是否產生蛋白酶

自己以前做過相似的實驗,稍微回憶了下:
需要知道的是:蛋白酶能夠水解蛋白質
蛋白合成酶能夠將蛋白質進行水解,實驗的大概過程如下:
將雙歧桿菌培養在含有蛋白質成分的培養基中,培養1~2天後,若出現水解圈,則說明了雙歧桿菌產生蛋白合成酶將培養基中的蛋白質水解,即證明能夠產生蛋白合成酶

④ 酸性蛋白酶產生菌的篩選方法

酸性蛋白酶是一種能在酸性環境下水解蛋白質的酶類,其最適作用pH值為2.5-5.0。由於酸性蛋白酶具有較好的耐酸性,因此被廣泛地應用於食品、醫葯、輕工、皮革工藝以及飼料加工工業中。 目前用於工業化生產的酸性蛋白酶大多為黴菌酸性蛋白酶,此類酶的最適作用pH值為3.0左右,當pH值升高時,酸性蛋白酶的酶活會明顯降低,且此類酶不耐熱,當溫度達到50℃以上時很不穩定,從而限制了酸性蛋白酶的應用范圍。 因此,本研究以開發耐溫偏酸性蛋白酶為目標,進行了以下幾方面的研究: (1)偏酸性蛋白酶產生菌的分離篩選。 (2)偏酸性蛋白酶粗酶酶學性質的研究。 (3)偏酸性蛋白酶固體發酵條件的優化。 (4)偏酸性蛋白酶產生菌P-1007的初步鑒定。 (5)偏酸性蛋白酶在啤酒澄清中的應用。 本論文主要研究結果和結論如下: (1)用常規土壤分離方法,從土壤樣品中篩選到一株產偏酸性蛋白酶的菌株,命名為P-1007。 (2)通過單因素發酵條件實驗和正交實驗的方法得到最佳固體發酵條件為:麥麩15g,黃豆粉8%,葡萄糖3%,NaH2PO41%,CuSO40.2%,水35ml,最佳起始pH7.0,最適發酵溫度為40℃。在此條件下所產酶活可達3700u/g,比原始菌株發酵酶活提高了將近2倍,且產酶穩定性較好。 (3)菌株P-1007所產的偏酸性蛋白酶的最適作用pH值為5.5,最適作用溫度為50℃。酶的pH穩定性和耐溫性較好,50℃、pH5.5條件下保溫8h後剩餘酶活可達83%以上,pH5.5、50℃條件下保溫2h後剩餘酶活仍在70%以上。Mn2+、Cu2+對偏酸性蛋白酶有明顯的激活作用,其它金屬離子則對該酶有不同程度的抑製作用。與目前所得到的酸性蛋白酶相比較,偏酸性蛋白酶具有較高的作用pH值和較好的耐溫性。 (3)從菌株P-1007菌落形態、顯微觀察以及5.8SrDNA-ITS區序列分析可以看出菌株P-1007可能屬於煙麴黴。 (4)從酶學性質上可以看出,菌株P-1007所產的偏酸性蛋白酶的作用條件滿足於啤酒澄清工藝的要求,因此本實驗進行了偏酸性蛋白酶在啤酒澄清中的應用研究以及該酶與釀造復合酶和啤酒用中性蛋白酶作用效果的比較。研究結果表明:經偏酸性蛋白酶作用後,麥汁和發酵液中酪氨酸含量、透光率、總氮量、可凝固性氮含量都有了明顯的提高。麥汁中a-氨基氮含量也增加了,說明偏酸性蛋白酶將凝固性蛋白質水解成了分子量較小的a-氨基氮,為啤酒酵母的生長繁殖提供了氮源。同時發酵液中的a-氨基氮含量卻降低了,分析原因為發酵階段中酵母利用a-氨基氮的速度比偏酸性蛋白酶降解蛋白質的速度快。麥汁和發酵液的pH值都無太大變化,因此不會影響啤酒酵母的生長和繁殖。在與釀造復合酶和啤酒用中性蛋白酶作用效果的比較中發現,三種酶的作用效果大致相同,但從最適作用條件來看,偏酸性蛋白酶比另兩種蛋白酶更適合於啤酒澄清工藝。 以上研究結果表明,本課題篩選到的菌株P-1007所產偏酸性蛋白酶的作用條件特別適合於啤酒澄清工藝,因此在啤酒工業中有較好的應用前景。 關鍵字:煙麴黴,偏酸性蛋白酶,發酵條件優化,酶學性質,rDNA-ITS區序列分析,啤酒澄清

⑤ 如何從環境中分離產蛋白酶的微生物菌株如何對該菌株進行鑒定

用低濃度氨基酸的培養基培養,然後再逐步降低氨基酸濃度到零做富集。最後得到的應該就是能產蛋白酶的菌株

⑥ 產蛋白酶菌株的篩選除了常用的透明圈法,還有哪些

篩選的流程
最好較簡練問題補充:耐酸
而且能產生蛋白酶的菌種
初篩1初篩2:初篩1所得菌種用透明圈法(蛋白酶水解酪素產生透明圈,直徑越大,

⑦ 如何篩選產高溫蛋白酶的微生物

一般是在土壤中篩選的,具體方法如下: 1、取土壤,晾乾,過40目篩,用無菌水梯度稀釋至0.000001g土/1mL水或0.0000001g土/1mL水,待用 2、配酪素培養基(加瓊脂),高壓滅菌,倒平板;配LB培養基或發酵培養基,滅菌,分作液體培養基

⑧ 如何分離高產蛋白酶的菌種,如何分類鑒定

菌的自然突變株ST-91為出發菌株,採用UV誘 變和自然分離純化的方法,篩選出1白酶產生菌黑麴黴CPu菌株,獲得一高產菌株. 其酸性蛋白酶活力比出發菌株提高7359

⑨ 胞外蛋白酶的篩選方法是什麼呀

一般用生長圈法.
利用一些有特別營養要求的微生物作為工具菌,若待分離的菌在缺乏上述營養物的條件下,能合成該營養物,或能分泌酶將該營養物的前體轉化成營養物,那麼,在這些菌的周圍就會有工具菌生長,形成環繞菌落生長的生長圈。該法常用來選育氨基酸、核苷酸和維生素的生產菌。

初篩1:用選擇性培養基,把N源去掉,加入酪素(酪蛋白),其他營養成分照基礎培養基就行了,這樣,產蛋白酶的菌種能將酪素分解成酪氨酸,就有可利用的N源,不產蛋白酶的菌種不能利用酪素,則沒有N源,產蛋白酶的菌種成為優勢菌,挑出,換培養基。

初篩2:初篩1所得菌種用透明圈法(蛋白酶水解酪素產生透明圈,直徑越大,酶活越高,具體步驟自己找)挑出蛋白酶活力高的菌種,接入搖瓶培養

復篩:初篩2所得菌以福林試劑法測酶活(以Folin染色,測吸光度,具體步驟自己找),酶活最高者為最終菌種.

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