⑴ 如何進行農葯抑菌活性測定
我是做微生物的,我想你問的應該是微生物學中的「抑菌試驗」。有幾種:紙片法、牛津杯法等,但原理都是一樣的,紙片法做起來比較簡單,不用特殊的材料,可能比較適合你:
1.把實驗室用的普通濾紙用打孔器打成0.5cm直徑的圓片,裝在試管中密封滅菌(121度,20分鍾)。
2.將已經培養好的菌製成一定濃度的懸浮液,取1ml該菌懸液至滅過菌的(121度,20分鍾)培養皿中,倒入適量(約4毫米厚吧)已滅菌的培養基(溫度約45度,用手摸瓶壁不感覺燙手即可),輕輕轉動培養皿,使培養基與菌液混勻,靜置凝成平板。
3.將用於試驗的農葯配製成幾個所需的濃度,用無菌鑷子夾起一片濾紙放入葯液中浸透,夾出時在容器邊緣停靠片刻,濾掉多餘的葯液,把濾紙片放在平板中凝好的培養基的中心,用鑷子稍用力按一下,使之與培養基充分緊貼。
4.按上述方法,每個濃度做3個重復,以滅菌水浸濕的濾紙片做空白對照。
5.在適當溫度下培養一定時間後觀察,用直尺或游標卡尺測量抑菌圈的大小,計算抑菌率就OK了!
希望能對你有幫助,有什麼問題可以短消息我:)
⑵ 如何進行ALK抑制劑Ceritinib的生物活性實驗
葯物描述:
LDK378是一種有效的ALK抑制劑,IC50為0.2
nM,作用於IGF-1R和InsR,選擇性分別為40和35倍。Phase
3。
體外研究:
LDK378作用於Ba/F3-NPM-ALK和Karpas290細胞,具有顯著的抗增殖活性,IC50分別為26.0
nM
和
22.8
nM,作用於Ba/F3-Tel-InsR
和Ba/F3-WT細胞,IC50分別為319.5
nM
和
2477
nM。
體內研究:
LDK378
用於降低形成反應代謝的可能性,在肝微粒體幾乎檢測不到谷胱甘肽(GSH)加合物的水平(<1%)。LDK378具有相對良好的代謝穩定性,中度抑制CYP3A4(Midazolam底物)和抑制hERG。LDK378處理動物,與肝臟血流量相比,具有低的血漿清除率(小鼠,大鼠,狗和猴),處理小鼠,大鼠,狗和猴的口服生物利用度都在55%以上。
⑶ 葯品領域的微生物檢測及標准
中國葯典微生物限度檢查法,為《中國葯典》附錄收載的關於葯品微生物檢查的法定方法。葯品的不同劑型的微生物檢測標准不同,具體如下:
1、制劑通則品種
制劑通則、品種項下要求無菌的制劑及標示無菌的制劑應符合無菌檢查法規定。
2、口服給葯制劑
細菌數每1g不得過l000cfu。每lml不得過100cfu。
黴菌和酵母菌數每lg或lml不得過100cfu。
大腸埃希菌每1g或lml不得檢出。
3、耳、鼻及呼吸道吸入給葯制劑
細菌數每1g、lml或l0cm²,不得過100cfu。
黴菌和酵母菌數每1g、lml或l0cm²,不得過10cfu。
金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌每1g、lml或l0cm²不得檢出。
大腸埃希菌鼻及呼吸道給葯的制劑,每1g、lml或l0cm²,不得檢出。
4、陰道、尿道給葯制劑
細菌數每1g、lml或l0cm²,不得過100cfu。
黴菌數和酵母菌數每1g、lml或l0cm²應小於10cfu。
金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌每1g、lml或l0cm²,不得檢出。
5、直腸給葯制劑
細菌數每1g不得過l000cfu。每lml不得過100cfu。
黴菌和酵母菌數每1g或lml不得過100cfu。
金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌每lg或lml不得檢出。
6、其他局部給葯制劑
細菌數每1g、lml或l0cm²不得過100cfu。
黴菌和酵母菌數每1g、lml或l0cm²不得過100cfu。
金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌每1g、lml或l0cm²不得檢出。
7、含動物組織
含動物組織(包括提取物)的口服給葯制劑每10g或10ml還不得檢出沙門菌。
8、兼用途徑制劑
應符合各給葯途徑的標准。
(3)葯物生物活性如何測定擴展閱讀
微生物限度檢查法的注意事項:
1、當建立產品的微生物限度檢查法時,應進行控制菌檢查方法的驗證,以確認所採用的方法適合於該產品的控制菌檢查。若產品的組分或原檢驗條件發生改變可能影響檢驗結果時,檢查方法應重新驗證。
2、檢查項目應當包括細菌數、黴菌數、酵母菌數及控制菌檢查。
3、微生物限度檢查應在環境潔凈度10000 級下的局部潔凈度100 級的單向流空氣區域內進行。
4、檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作,防止再污染。單向流空氣區域、工作檯面及環境應定期按《醫葯工業潔凈室(區)懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現行國家標准進行潔凈度驗證。
5、除另有規定外,本檢查法中細菌及控制菌培養溫度為30℃~35℃;黴菌、酵母菌培養溫度為23℃~28℃。
6、檢驗結果以1g、1ml、10g、10ml、10c㎡ 為單位報告,特殊品種可以最小包裝單位報告。
⑷ 簡述酶法分析生物葯物和基因工程葯物的原理,主要有哪些方法
酶分析法在生物葯物分析中的應用主要有兩個方面:第一,以酶為分析對象,根據需要對生物葯物生產過程中所使用的酶和生物葯物樣品所含的酶進行酶的含量或酶活力的測定,稱為酶分析法;第二,利用酶的特點,以酶作為分析工具或分析試劑,用於測定生物葯物樣品中用一般化學方法難於儉測的物質,如底物、輔酶、抑制劑和激動劑(活化劑)或輔助因子含量的方法稱為酶法分析。
目錄
摘要
基本信息
主要內容
特定及優勢
微信文章
新聞動態
特定及優勢
而如果有僅作用於被測物質的酶,利用酶的特異性,不需要分離就能辨別試樣中的被測組分,從而對被測物質進行定性和定量分析。所以,酶法分析常用於復雜組分中結構和物理化學性質比較相近的同類物質的分離簽定和分析,而且樣品一般不需要進行很復雜的預處理。酶法分析具有特異性強,干擾少,操作簡便,樣品和試劑用量少,測定快速精確,靈敏度高等特點。通過了解酶對底物的特異性。可以預料可能發生的干擾反應並設法糾正。在以酶作分析試劑測定非酶物質時,也可用偶聯反應;而且偶聯反應的特異性,可以增加反應全過程的持異性。此外,由於酶反應一般在溫和的條件下進行,不需使用強酸強鹼,它還是一種無污染或污染很少的分析方法。很多需紅使用氣相色譜儀、高壓液相色譜儀等貴重的大型精密分析儀器才能完成的分析檢驗工作,應用酶法分析方法即可簡便快速地進行。酶法分析目前主要廣泛應用於醫葯、臨床、食品和生化分析檢測中,如尿素、各種糖類、氨基酸類、有機酸類、維生素類、毒素等物質的定性和定量分析。
⑸ 生物活性的種類有哪些評價這些活性的參數有哪些呢
喹諾酮類葯物的葯效學研究
--------------------------------------------------------------------------------
來源:中國醫學論壇報 時間:2003.10.15
葯效學作為一門科學受到廣泛關注。抗生素殺菌作用分為濃度依賴性和時間依賴性兩種不同方式。濃度依賴性殺菌抗生素(包括氨基糖甙類、喹諾酮類,甲硝唑)的活體試驗中的數據,可用24小時曲線下面積(AUC)/最小抑菌濃度(MIC)比值和峰值/MIC比值來描述。而與時間依賴性殺菌的抗生素(如β-內醯胺酶類、大環內酯類等)的治療效果最相關的參數是t>MIC。
喹諾酮類葯物的峰值/MIC和24小時AUC/MIC比值與治療結果密切相關。能使臨床結果有所改善的峰值/MIC比值約為10~12。也推薦峰值/MIC比值作為出現耐葯菌株時的葯物選擇參數。對於該類中的許多葯物而言,增加其劑量使之超過常規值時其發生不良事件的可能性也隨之升高。所以,這個比值並不能常作為最佳的優化參數,除非該病原體相對敏感。
最佳的葯效學目標值是與特定病原體相關的,可以用24小時AUC/MIC比值預測臨床治療結果。治療革蘭陰性腸桿菌和假單胞菌感染時,24小時AUC/MIC比值≥125與最佳臨床治癒率相關;而對於革蘭陽性菌, 24小時AUC/MIC比值要低,但需要同時考慮到游離葯物濃度。
由於喹諾酮類葯物的高生物利用度,無論靜脈給葯還是口服給葯均可獲得相似的葯效學關系,在新一代喹諾酮類葯物中同樣如此。蛋白結合率的程度不僅影響葯物對組織的滲透能力,也決定了在感染部位可以對細菌起作用的葯物劑量。在葯效學分析中應用到的葯代動力學參數應是反映游離葯物(活性葯物)的濃度,而不是總體葯物濃度(表1)。
表1. 主要喹喏酮類葯物的葯代動力學參數
--------------------------------------------------------------------------------
參數 諾氟
沙星 環丙
沙星 左氧
氟沙星 斯帕
沙星 加替沙星
(天坤) 莫西
沙星 曲伐
沙星 吉米
沙星
--------------------------------------------------------------------------------
劑量(mg) 400 750 500 200 400 400 200 320
生物利用度(%) 50 70 99 92 96 90 88 80
蛋白結合率(%) 15 25 30 40 20 55 75 59
峰濃度(μg/ml) 1.2 3.5 6 1.3 4.3 4.5 2.3 1.48
游離峰濃度(μg/ml) 1.3 2.6 4.2 0.8 3.4 2.0 0.6 0.6
AUC(0~24)(μg/h/ml) 13.6 64 47.5 17.7 51.3 48 31.2 9.3
游離AUC(0~24)(μg/h/ml) 11.6 48 33.3 10.6 41 21.6 7.8 3.8
T1/2 3.3 4 6 20 9 12 12 7.4
%腎清除率(活性葯物) 40 60 95 10 85 20 6 30
--------------------------------------------------------------------------------
肺炎鏈球菌體外感染模型顯示:左氧氟沙星和環丙沙星的24小時AUC/MIC比值范圍在大約30左右與4倍log殺菌作用(即殺滅99.99%的細菌)相關,而24小時AUC/MIC比值范圍小於30時殺菌作用顯著下降,並在某些情況下細菌出現重新生長。非粒細胞減少感染動物模型研究數據支持了以上這些觀察結果,並提示抗生素24小時AUC/MIC比值為25時,治療肺炎鏈球菌感染可獲最高生存率。臨床上發現環丙沙星治療的病例中,有相當部分治療失敗和出現與肺炎鏈球菌腦膜種植相關的多重感染,而其24小時AUC/MIC比值大約為12左右。相反,並未在24小時AUC/MIC比值超過30~40的喹諾酮類葯物治療患者中發現相似的治療失敗或多重感染。
目前,肺炎鏈球菌已對多種抗菌葯物產生廣泛的耐葯,包括β-內醯胺類、大環內酯類、磺胺類和四環素類,而新一代喹諾酮類葯物正可彌補這一不斷擴大的耐葯情況。盡管喹諾酮類葯物對多數肺炎鏈球菌菌株有高度的抗菌活性,但是活性較低的種類如環丙沙星、氧氟沙星和左旋氧氟沙星則顯示出耐葯發生率的增高。合理使用喹諾酮類葯物並選擇有最佳葯效學特點的種類,將可降低由於肺炎鏈球菌耐葯而引起的葯物選擇壓力。新一代喹諾酮類葯物之間的這種耐葯性菌株選擇性趨勢並不相同,就肺炎鏈球菌產生耐葯的選擇性趨勢而言,從最可能到最不可能的順序依次為環丙沙星>左氧氟沙星>加替沙星�天坤=莫西沙星。
總之,目前已有不同的葯效學目標參數可以預測對患者應用抗生素治療成功的幾率大小。對於應用喹諾酮類葯物治療革蘭陰性腸桿菌和假單胞菌感染而言,24小時AUC/MIC比值應達到125。為了防止出現耐葯,主要針對非Bush1類的產β-內醯胺酶革蘭陰性桿菌,建議葯物的24小時AUC/MIC比值至少達到100。對於革蘭陽性病原體如肺炎鏈球菌,AUC/MIC比值至少應達到30,才可使清除細菌的成功率較高。顯然需要更多的數據資料,來評價這些葯效學參數對新出現的細菌耐葯機制和厭氧性病原體的作用。
⑹ 生物檢測技術是什麼
是利用生物體(整體組織 ,離體組織微生物和細胞等)來測定葯物的生物活性的一種方法。它以葯物的葯理為基礎,以生物統計為工具,運用特定的實驗設計,在一定條件下比較供試品和相當的標准品或對照品所產生的特定反應,通過等反應劑量間比例的運算,從而測得供試品的效價。