生物指示劑如何使用

Ⅰ 生物指示劑的基本信息

生物指示劑是一類特殊的活微生物製品，可用於確認滅菌設備的性能，滅菌程序的驗證，生產過程滅菌效果的監控等。
生物指示劑的定義：
對特定滅菌處理有確定的抗力，並裝在內層包裝中可供使用的染菌載體。用於確認滅菌設備的性能，滅菌程序的驗證,生產過程滅菌效果的監控等。
生物指示劑分類：
1）按結構分可分為片狀生物指示劑(strip biological indicator)和自含式生物指示劑(self-contained biological indicator)；片狀生物指示劑需要使用陽性對照和陰性對照，而自含式生物指示劑只需要陽性對照即可 。
2）根據ISO 11138 -1(2006)的分類，目前的生物指示劑有環氧乙烷滅菌用生物指示物、濕熱滅菌用生物指示物、乾熱滅菌用生物指示物、過氧化氫低溫等離子滅菌生物指示物和甲醛滅菌用生物指示物 。
3）按培養時間可分為通用型生物指示劑和快速型生物指示劑。通用型生物指示劑根據芽孢復甦後指示菌種新陳代謝引起培養液pH值改變，通過酸鹼指示劑變色來進行判讀，時間一般在24或48小時以上；而快速型生物指示劑根據芽孢復甦後的酶促反應，通過熒光進行判讀，時間一般為3-4小時。同時國外正在研發更加快速的生物指示劑，有望在1小時之內得出結果。
生物指示劑重量質量特性：
1）芽孢含量
2）D值（生存曲線法測定）
生物指示劑生產商：
1）國外專業生產商：有美國強生，3M，Raven，Steris，Namsa，SGM，ACE等；
2）國內專業生產商：有杭州富捷，北京四環等。

Ⅱ 脈動真空滅菌器生物指示劑挑戰時指示劑能否放在液體內

壓力蒸汽滅菌生物指示劑是由嗜熱指肪桿菌（ATCC 7953）芽孢菌片、恢復培養基和外管組成。菌片含菌量為5.0×105 ～5.0×106 cfu/片。生物指示劑的抗力符合國際標准和國家標準的規定：既在121℃飽和蒸汽作用下，存活時間≥3.9min，殺滅時間≤19min，D 10 值1.3～1.9min。
【適用范圍】
適用於 121℃下排氣式壓力蒸汽滅菌器、132℃～134℃預真空或脈動真空壓力蒸汽滅菌器、134℃～136℃台式或卡式壓力蒸汽滅菌器滅菌效果的監測和制葯工業、醫院制劑生產等各行業使用的壓力蒸汽滅菌器滅菌效果的監測。
【使用方法】
1 使用時，將生物指示劑放入標准檢測包的中心或待滅菌物品包的中心，置於滅菌器的難消毒的位置按規定的滅菌溫度和時間進行滅菌處理。
2 滅菌完畢，即刻將生物指示劑取出，蓋朝上垂直握於手中，用專門工具夾碎管內安瓶，讓培養液流出浸沒菌片，置於56℃恆溫培養箱內或配套的微型培養器內培養24小時觀察初步結果，48小時觀察最終結果，按規定每月至少用生物指示劑進行一次滅菌效果監測。
【結果判定】
培養後生物指示劑中的溴甲酚紫培養液由紫色澄清液體變為黃色澄清液體即表示有菌生長，判定為滅菌不合格；培養液仍為紫色澄清液體為無菌生長，同時陽性對照管中的嗜熱脂肪桿菌生長正常即培養液由紫色澄清液體變為黃色澄清液體，判定為滅菌合格。
【注意事項】
1將生物指示劑管從滅菌器內取出或從冰箱內取出後，需在室溫下放10min左右，再夾碎安瓿，以免過熱或過冷夾碎外管。
2液體培養基的pH值低於7.0或高於7.5，均可使嗜熱脂肪桿菌不能生長；
3 培養溫度須在56℃～65℃之間，否則可導致嗜熱脂肪桿菌生長不良，或不能生長。
4 滅菌處理後，生物指示劑中的液體培養基顏色與壓力蒸汽滅菌前比較會變淺，呈顯淺紫色，這種變化屬正常現象。
5 用恢復培養液在56℃培養時間過長（72小時以上），陽性對照管中培養液的黃色容易消退，培養液逐漸乾燥，應注意每天觀察，隨時記錄培養結果。

Ⅲ 指示劑選擇的依據

在多種指示劑中，選擇指示劑的依據是：要選擇一種變色范圍恰好在滴定曲線的突躍范圍之內，或者至少要佔滴定曲線突躍范圍一部分的指示劑。

這樣當滴定正好在滴定曲線突躍范圍之內結束時，其最大誤差不過0.1%，這是容量分析容許的。

指示劑選擇不當，加之肉眼對變色點辨認困難，都會給測定結果帶來誤差。

在各類滴定過程中，隨著滴定劑的加入，被滴定物質和滴定劑的濃度都在不斷變化，在等當點附近，離子濃度會發生較大變化，能夠對這種離子濃度變化作出顯示（如改變溶液顏色，生成沉澱等）的試劑就叫指示劑。如果滴

定劑或被滴定物質是有色的，它們本身就具有指示劑的作用，如高錳酸鉀。

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雙色指示劑的變色范圍不受其用量的影響，但因指示劑本身就是酸或鹼，指示劑的變色要消耗一定的滴定劑，從而增大測定的誤差。

對於單色指示劑而言，用量過多，會使用變色范圍向pH值減小的方向發生移動，也會增大滴定的誤差。

例如：用0.1mol/LnaOH滴定0.1mol/LHAc,pHsp=8.5,突躍范圍為pH8.70-9.00,滴定體積若為50ml,滴入2-3滴酚酞，大約在pH=9時出現紅色；若滴入10-15滴酚酞，則在pH=8時出現紅色。

顯然後者的滴定誤差要大得多。指示劑用量過多，還會影響變色的敏銳性。例如：以甲基橙為指示劑，用HCl滴定NaOH溶液，終點為橙色，若甲基橙用量過多則終點敏銳性就較差。

Ⅳ 嗜熱脂肪芽孢桿菌生物指示劑怎麼用

在滅菌時將指示劑同時加入，一並進行滅菌。滅菌完成後將該指示劑進行培養，滅菌合格那麼培養將無菌生長，指示劑不變色。

Ⅳ 如何進行 生物指示劑 微生物數量的確認

所謂的稀釋就是加水稀釋
所謂的計數就是倒平板
然後數出菌落數
可以先進行濃度梯度稀釋，在不同的稀釋度下進行倒平板操作
然後進行計數
根據
真菌和細菌的繁殖速度不同
真菌常溫下培養3到4天
而細菌
最好在35°條件下培養18
到20個小數
所謂的培養基
由於你的菌種原因可能需要在普通的牛肉膏培養基裡面加入少許脂肪
培養溫度可以稍稍提高~~望採納~

Ⅵ 如何選擇壓力蒸汽滅菌生物指示劑

按照壓力蒸汽滅菌生物指示劑的分類原則進行選擇，具體選擇依據如下：

1、按培養時間可分為通用型生物指示劑和快速型生物指示劑。通用型生物指示劑根據芽孢復甦後指示菌種新陳代謝引起培養液pH值改變，通過酸鹼指示劑變色來進行判讀，時間一般在24或48小時以上。

而快速型生物指示劑根據芽孢復甦後的酶促反應，通過熒光進行判讀，時間一般為3-4小時。同時國外正在研發更加快速的生物指示劑，有望在1小時之內得出結果。

2、按結構分可分為片狀生物指示劑和自含式生物指示劑；片狀生物指示劑需要使用陽性對照和陰性對照，而自含式生物指示劑只需要陽性對照即可。

註：3M壓力蒸汽滅菌的生物指示劑1262與生物PCD1276測試包的48小時內出檢測結果，指示劑1292與生物PCD1296測試包的檢測時間為3小時內。環氧乙烷滅菌的生物指示劑1264與生物PCD1278的最終結果48小時得出，指示劑1294與生物PCD1298的最終結果4小時得出。

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壓力蒸汽滅菌生物指示劑的使用注意事項：

1、滅菌完畢，含生物指示劑的包裹很熱並有一定壓力；需至少冷卻10分鍾以上，否則可能引起塑料管內的安瓿破裂，飛濺的碎片導致損傷。

2、只有對照管為陽性，其生物監測結果才算有效。

3、貯存於室溫：15-30℃，相對濕度為35-60%；避免靠近滅菌器和化學消毒劑。

4、檢查生物指示劑標簽上的化學指示劑，顏色由玫瑰色變成棕色證明生物指示劑經過壓力蒸汽滅菌過程的處理。該顏色的變化並非表明該處理達到滅菌的目的，如果化學指示劑沒有變化，檢查滅菌過程。

Ⅶ 高中生物指示劑有哪些

1.斐林試劑（由甲液0.1g/ml
NaOH和乙液0.05g/ml
CuSO4組成，混勻後現配現用），用於檢測還原性糖，沸水浴加熱呈磚紅色沉澱。
2.雙縮脲試劑（由A液0.1g/ml
NaOH和B液0.01g/ml
CuSO4組成，使用時先加A液後加B液），用於檢測具有二個以上肽鍵的化合物,蛋白質，在鹼性條件下呈紫色（絡合物）。
3.甲基綠，用於檢測細胞中的DNA的分布，呈綠色。（一般與吡羅紅混合使用，現用現配）
4.吡羅紅，用於檢測細胞中的RNA的分布，呈紅色。（一般與甲基綠混合使用，現用現配）
5.健那綠，用於檢測細胞中線粒體的分布，呈鮮綠色。
6.碘液，用於檢測澱粉，呈藍色。
7.酸性橙色重鉻酸鉀溶液，用於檢測乙醇，在酸性條件下變為灰綠色。
8.溴麝香草酚藍水溶液，遇二氧化碳後，由藍變綠再變黃。
9.澄清石灰水（Ca(OH)2水溶液），遇二氧化碳即產生渾濁。
10.龍膽紫，使染色體被染成深色。
11.醋酸洋紅液，功用同10，使染色體顏色変深。
12.測定亞硝酸鹽標准顯色液，對氨基苯磺酸(0.4%和0.5%)
對氨基苯磺酸(1%)
鹽酸萘乙二胺溶液(0.2%和1%)
N-1-萘基乙二胺溶液(0.1%)
鹽酸(5mol/L)
乙酸(60%)，設置比色梯度，觀察玫瑰紅色的深淺。
13.剛果紅，可以與纖維素此類多糖形成紅色復合物。

Ⅷ 什麼是生物指示劑,作用是什麼

生物指示劑常用於制葯工藝中滅菌設備的性能確認以及氣體滅菌法、過濾除菌法的滅菌程序的驗證。

Ⅸ 醫用高壓鍋生物指示劑監測方法

每周監測一次，可以用自含式的壓力蒸汽滅菌生物指示劑，隨同待滅菌物品一起放到裡面進行滅菌，滅菌後56℃培養48小時，觀察顏色變化，如顏色依然為淡紫色，說明滅菌合格；注意，要有一支沒經過滅菌的作陽性對照試驗。

Ⅹ 生物指示劑的生物指示劑的應用

在滅菌程序驗證中，盡管可通過滅菌過程某些參數的監控來評估滅菌效果，但生物指示劑的被滅殺程度，則是評價一個滅菌程序有效性最直觀的的指標。可使用市售的標准生物指示劑，也可使用有日常生產污染菌監控中分離的耐受性最強的微生物制備的孢子。在生物指示劑驗證試驗中，需確定孢子在實際滅菌條件下的D值，並測定孢子的純度和數量。驗證時，生物指示劑的微生物用量應比日常檢出的微生物污染量大，耐受性強，以保證滅菌程序有更大的安全性。在最終滅菌法中，生物指示劑應放在滅菌櫃的不同部位。並避免指示劑直接接觸到被滅菌物品。生物指示劑按設定的條件滅菌後取出，分別置培養基中培養，確定生物指示劑中的孢子是否被完全殺滅。
過度殺滅產品滅菌驗證一般不考慮微生物污染水平，可採用市售的生物指示劑。對滅菌手段耐受性差的產品，設計滅菌程序時，根據經驗預計在該生產工藝中產品微生物污染的水平，選擇生物指示劑的菌種和孢子書數量。這類產品的無菌保證應通過監控每批滅菌前的微生物污染的數量、耐受性和滅菌程序驗證所獲得的數據進行評估。
在醫療機構的滅菌生物監測中，WS310國家標准已明確規定：1、壓力蒸汽滅菌過程為每周一次，使用壓力蒸汽滅菌生物指示劑；2、環氧乙烷氣體滅菌為每批次都要監測，使用環氧乙烷滅菌生物指示劑；3、低溫等離子體滅菌為每日監測一次，使用低溫等離子體滅菌生物指示劑。以上三種滅菌方式，。也是2012年醫療機構的主要滅菌方式，其中，壓力蒸汽滅菌使用最為廣泛。