顯微鏡生物染色劑怎麼用

1. 給細菌染色的方法都有幾種，怎麼操作，都用復紅染色嗎麻煩一一講來，詳細點，本人初學者.

細菌染色分為活菌染色跟死菌染色兩種。其中死菌染色分為正染色跟負染色。正染色又包括普通染色與特殊染色兩種。普通染色有簡單染色法、革蘭氏染色法和抗酸染色法；特殊染色分為芽孢染色法、莢膜染色法和細胞壁染色法。一般都只用革蘭氏染色法跟抗酸染色法。

革蘭氏染色法(Gram's stain)是最常用的細菌染色法。細菌經結晶紫初染染成藍色。革蘭氏染色陽性菌（G+）細胞壁肽聚糖層數多，且肽聚糖為空間網狀結構，再經乙醇脫水，網狀結構更為緻密，染料復合物不易從細胞內漏出，仍為藍色。而革蘭氏染色陰性菌（G-）細胞壁脂類含量多，肽聚糖層數少，且肽聚糖為平面片層結構，易被乙醇溶解，使細胞壁通透性增高，結合的染料復合物容易泄漏，細菌被脫色為無色，再經石炭酸復紅稀釋液復染成紅色。
①將結晶紫染液加於塗膜上，染色（初染）1min。②水洗後加蘆戈氏碘液處理(媒染)1min。③水洗後用95％酒精脫色，脫色時頻頻搖動玻片，直至流下的液體無色為止(約需0.5min)。④水洗後加石炭酸復紅稀釋液染色(復染)0.5min。⑤水洗，用濾紙輕輕吸干，待標本充分乾燥後進行鏡檢。染色過程中，水洗要用自來水的細流徐徐沖洗，沖洗塗膜的背面，勿使強水流直接沖到塗膜上。

抗酸染色法（acid-fast stain）對分枝桿菌屬等一般染色法不易著色的抗酸性細菌染色。要注意：1）塗片要略厚；2）加溫染色或延長染色時間，加溫時隨時補加染色液；3）分枝桿菌呈紅色（+），其他細菌和背景為藍色。
①石碳酸復紅加溫染色8~10分鍾。②3%的鹽酸酒精脫色約1~2分鍾，脫色是輕搖玻片，直到塗片顏色脫去為止。③水洗後，用鹼性美藍復染1分鍾。④再次水洗，印干。

芽孢染色法是專門給細菌芽孢染色的。要注意：1）芽孢染色用的菌種應控制菌齡，使大部分芽孢仍保留在菌體上為宜；2）染色加熱過程要及時補充染液，切勿讓塗片乾涸。
①孔雀綠加熱染色5分鍾。②水洗。③番紅染色2~3分鍾。④水洗，乾燥。

莢膜染色法是專門給與染料親和性弱的細菌莢膜染色。由於莢膜很薄，且含水量高（90%以上），易變形，所以製片和染色時一般不用熱固定。這個包括黑素負染色法、Leifson染色法跟Tyler染色法。
黑素負染色法：
1.制菌液：在潔凈載破片一端加一滴蒸餾水，按無菌操作要求，用接種環取少量斜面試管培養物於蒸餾水中，輕輕混勻。
2.塗片（推片法）：取另一塊邊緣光滑的載玻片，使之一端與菌液接觸，然後迅速均勻地將菌液推向玻片的另一端，使菌液塗成一薄層。置空氣中自然乾燥。注意：勿熱固定。
3.復紅染色：滴加石炭酸復紅染色液覆蓋塗布面，染色4~5分鍾後，除去多餘染液（勿用水洗）。乾燥時間不要太長，防莢膜脫水。
4.黑素染色：在玻片一端加一滴1%黑素液，再取一塊邊緣光滑的裁玻片，當邊緣與黑素液接觸後，迅速均勻地推向玻片另一端，使成一薄層。置空氣中自然乾燥。
5. 鏡檢（油鏡）：菌體呈紅色，背景呈黑色，莢膜無色。
注意事項：滴黑色素要量少；取菌要適量。
Leifson染色法
1.制備塗片同前，自然乾燥。
2.滴加Leifson』s染色液覆蓋塗布面，染色10分鍾，傾去多餘染料（勿用水洗）。
3.滴加硼酸鈉美藍染色液，染色5分鍾，輕輕用水沖洗，置空氣中自然乾燥。
4.油鏡下鏡檢，菌體呈藍色，莢膜呈紅色。
Tyler染色法
1.制備塗片同前，自然乾燥。
2.滴加結晶紫冰醋酸染色液覆蓋塗布面，染色5~7分鍾。傾去多餘染料（勿用水洗）。
3.用20%CuS04水溶液輕輕沖去染料，用吸水紙印干後，置空氣中自然乾燥。
4.油鏡下檢查，菌體呈紫色，莢膜呈淺紫色或淺藍色。

細胞壁染色法是觀察細菌細胞壁時採用的染色法。細菌細胞壁很薄，它與染料結合的能力差，不易著色，在細菌的染色過程中，一般情況染料都是通過細胞壁的滲透、擴散等作用而進入細胞，細胞壁本身並未染色，因此，欲通過染色來觀察細胞壁，必須設法使細胞壁能著色，而細胞質則不易著色，常用的方法有單寧酸法和磷鉬酸法。單寧酸和磷鉬酸都是起媒染作用，它們使細胞壁形成可著色的復合物，而使細胞質不易被著色，經結晶紫或甲基綠染色後，便可在普通光學顯微鏡下觀察到細胞壁。
根據細菌細胞在高滲溶液中或用乙醚蒸氣處理後，會產生質壁分離這一現象，經染色後也可在普通光學顯微鏡下區分細胞壁和細胞質膜。
1．單寧酸法
(1)將培養16—18小時的巨大芽孢桿菌按常法製成塗片。
(2)用5％單寧酸染5分鍾後，水洗。
(3)用0．2％結晶紫染3—5分鍾，水洗，吹乾。用油鏡觀察，細胞壁呈紫色，細胞質呈淡紫色。
2．磷鉬酸法
(1)制備濃厚的塗片，在未乾時浸入1％磷鉬酸水溶液3—5分鍾。
(2)用1％甲基綠水溶液染3—5分鍾。
(3)水洗後，吹乾，用油鏡觀察。細胞壁為綠色，細胞質無色。
3．區分細胞壁與細胞質膜
(1)乙醚蒸氣法
(a)將巨大芽孢桿菌塗布於蓋玻片上，翻轉蓋玻片使其放在乙醚蒸氣瓶的瓶口上蒸3分鍾。
(b)取下蓋玻片置Bouin氏固定液中30分鍾後取出，水洗。
(c)用硫堇染色30秒鍾。
(d)水洗，水封，置油鏡下觀察。
(2)NaCl法
(a)取一滴25％NaCl溶液於潔凈的載玻片上。
(b)挑一小環培養6小時的枯草芽孢桿菌，在25％NaCl水滴中塗布均勻，待自然乾燥。
(c)滴加0．01％結晶紫於其上，使蓋滿有菌部分，30秒鍾後水洗，乾燥，用油鏡觀察結果。

2. 怎麼用染色劑

在我們做生物醫學實驗或者某些物理化學實驗時，為了更好地觀察到實驗效果，通常會選用合理的染色劑，在選擇適當的染色劑後，我們就能夠很好地觀察到預期的實驗現象或結果。染色劑依據來源可分為天然染色劑和人工合成染色劑，各種不同的實驗選擇不同的染色劑，同一種染色劑也可以用不同的配方進行調配製成

3. 用光學顯微鏡觀察染色體 用什麼染色

用光學顯微鏡觀察染色體
，用鹼性染料著色，如龍膽紫、醋酸洋紅溶液染色。
觀察染色體行為一定要保持細胞的活性，用鹼性顏料可以在不影響的情況下觀察到染色體。酸性(鹼性)染色劑的界定並非由染料溶液的pH值決定的，而是根據染料物質中助色基團電離後所帶的電荷來決定。一般來說，助色基團帶正電荷的染色劑為鹼性染色劑，反之則為酸性染色劑。

4. 初一生物題，顯微鏡使用

首先要明白，滴加染料是為了將細胞的細胞核染成深色。而只有滴加鹼性染料（如：紅墨水，稀碘液）才能夠達到染色的目的，這樣方便對細胞和細胞核進行觀察。其次，滴加清水是為了使植物細胞的細胞壁緊緊的粘在載玻片上。蓋上蓋玻片之後再在一端滴上墨水，再用吸水紙一吸，就可對整個細胞進行全面染色，就不會發生墨水溢出或染色不均勻的事情了。如果先滴加紅墨水再蓋上蓋玻片的話，就會導致染色不均勻，最後觀察失敗。
（樓上的不懂就不要亂說，別誤導人家）

5. 若用光學顯微鏡觀察染色體 可用什麼進行染色

若用光學顯微鏡觀察染色體
，可用龍膽紫、醋酸洋紅溶液等鹼性染料染色。
1、染色體染色劑：
醋酸-洋紅染液
醋酸-地衣紅染液，龍膽紫染液，甲苯胺藍染液配置方法。
配方一
醋酸-洋紅染液
取45毫升冰醋酸，加蒸餾水55毫升，煮沸後徐徐加入洋紅1克，攪拌均勻後加入1顆鐵銹釘，煮沸10分鍾，冷卻後過濾，貯存在棕色瓶內。
配方二
醋酸-地衣紅染液
取45毫升醋酸，跟55毫升蒸餾水相混，加熱，徐徐加入地衣紅粉末1～2克，攪拌溶解後，緩緩煮沸2小時。冷卻後過濾，貯存在棕色瓶里。
配方三
龍膽紫染液
取1克龍膽紫，用少量蒸餾水溶解後，加蒸餾水，稀釋到100毫升，保存在棕色瓶內。
配方四
甲苯胺藍染液
取0.5克甲苯胺藍，溶解在100毫升蒸餾水中，即成0.5%甲苯胺藍水溶液。
2、觀察染色體行為一定要保持細胞的活性，用鹼性顏料可以在不影響的情況下觀察到染色體。酸性(鹼性)染色劑的界定並非由染料溶液的pH值決定的，而是根據染料物質中助色基團電離後所帶的電荷來決定。一般來說，助色基團帶正電荷的染色劑為鹼性染色劑，反之則為酸性染色劑。

6. 熒光顯微鏡下觀察細胞，用什麼染色方法

1. 染色是提高標本顯微觀察效果的關鍵措施：：

2. 由於活體的微生物個體的顏色在顯微鏡下差別很小，同時所觀察樣本中所含的微生物種類繁多，個體微小，形態千差萬別。每一種的組織結構、內含物質復雜多變，相互間交織貫穿在一起。如果不加染色顯然是很難在顯微鏡的視野中把它們相互區別出來。

3. 正是因為這樣，由於標本內部的微生物種類、形態、組織結構、物質大分子的成分染色劑的化學反應（著色）各有不同。通過染色，它們之間就會形成各自不同的顏色梯度，從而產生不同的視覺對比度。這樣便有利於在顯微鏡下把它們的個體形態、著色差別、內含物、組織結構區分出來。所以大多數的標本都需要染色才能更好地在顯微鏡進行下觀察。

4. 染色是製作永久標本的必須步驟和措施：

5. 在製作永久保存標本時，必須對標本進行固定和染色，通過固定和染色才能把標本的外部形態和內部結構層次永久固定下來，使之得以長久保存不分解變質。

6. 不是所有的觀察標本都需要染色：

7. 染色的標本雖然能夠增加標本的色度和色差，但在固定、染色過程中由於化學作用的緣故，也會使一些內部物質的形態和分子結構發生變性而失真，從而影響觀察的真實性。再者，一些活體觀察是不需要或不能使用染色劑的。

7. 光學顯微鏡觀察染色體用什麼染色

光學顯微鏡觀察染色體可以使用龍膽紫溶液或醋酸洋紅溶液等鹼性染色劑。
龍膽紫，其1～2%溶液俗稱紫葯水，是人們所熟悉的外用葯。龍膽紫為一種鹼性陽離子染料，因其陽離子能與細菌蛋白質的羧基結合，影響其代謝而產生抑菌作用。它能抑製革蘭氏陽性菌，特別是葡萄球菌、白喉桿菌，對白色念珠菌也有較好的抗菌作用。它殺菌力強，對組織沒有刺激性，也沒有毒性和副作用。
染色質(體)容易被鹼性染料染成深色。實驗中對染色質(體)進行染色，須使用龍膽紫溶液或醋酸洋紅溶液等鹼性染色劑，這些染色劑是以龍膽紫或醋酸洋紅溶解於醋酸溶液中製得，配製後的龍膽紫溶液pH值約小於7(呈酸性)。
酸性(鹼性)染色劑的界定並非由染料溶液的pH值決定的，而是根據染料物質中助色基團電離後所帶的電荷來決定。一般來說，助色基團帶正電荷的染色劑為鹼性染色劑，反之則為酸性染色劑。

8. 要想在顯微鏡下看清染色體必須用到的什麼染色劑

要想在顯微鏡下看清染色體必須用到的染色劑是：鹼性染料。
解析：可以選擇龍膽紫或者醋酸洋紅溶液對染色體進行染色，便於觀察。

9. 用光學顯微鏡觀察染色體要用什麼染色

光學顯微鏡觀察染色體可以用龍膽紫溶液或醋酸洋紅溶液等鹼性染色劑進行染色。

解析：

染色體之所以叫染色體，就是易被鹼性染料染成深色，高中生物學中曾經學過，實驗中觀察染色體須使用龍膽紫溶液或醋酸洋紅溶液進行染色：

1. 龍膽紫俗稱紫葯水，是一種外用葯，其陽離子能與細菌蛋白質羧基結合，影響其代謝而產生抑菌作用。

2. 洋紅是從一種熱帶昆蟲胭脂蟲雌蟲體內提取的天然染料。醋酸洋紅是由1體積冰醋酸、1體積蒸餾水混合煮沸後，加入飽合量的洋紅再煮20分鍾所得。

實際上兩種溶液都顯酸性，但卻又是鹼性染料，這是因為染色劑酸鹼性的界定並非由染料溶液的PH值決定的，而是根據染料物質中助色基團電離後所帶的電荷來決定。一般來說，助色基團帶正電荷的染色劑為鹼性染色劑，反之則為酸性染色劑。

10. 在顯微鏡下觀察大腸桿菌的形態時用什麼著色劑

顯微鏡下觀察大腸桿菌形態時，需要對細胞染色，所用的染色劑是草酸銨結晶紫。鹼性染料的染色部分很容易與細菌結合使細菌著色。在顯微鏡下更易於識別。常用作簡單染色的染料有美藍(或草酸銨結晶紫染液)、結晶紫、鹼性復紅等。碘液能夠使細胞核著色。