怎麼進行化學幾種染色發

⑴ 給細菌染色的方法都有幾種，怎麼操作，都用復紅染色

給細菌染色的方法都有幾種，怎麼操作，都用復紅染色
簡單染色法：利用單一染料對細菌進行染色的一種方法.例如番紅.
1．塗片：用灼燒滅菌冷卻後的接種環挑取少量菌體與水滴充分混勻,塗成極薄的菌膜.
2．乾燥：可自然晾乾,或將塗片置於火焰高處微熱烘乾,但不能直接在火焰上烘烤.
3．固定：手執玻片一端,有菌膜的一面朝上,通過迅速通過火焰2-3次（用手指觸塗片反面,以不燙手為宜）.
4．染色：加適量(以蓋滿菌膜為度)結晶紫染色液(或石炭酸復紅液),染l～2min.
5．水洗：用自來沖洗至流下的水中無染色液的顏色時為止.
6．乾燥
7．鏡檢
復染色：利用用兩種以上染料對細菌進行染色.例如革蘭氏染色法.
革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,需要鹼性染料（basic dye）初染液；媒染劑（mordant）；脫色劑（decolorising agent）和復染液（counterstain）.
鹼性染料初染液的象在細菌的單染色法基本原理中所述的那樣,而用於革蘭氏染色的初染液一般是結晶紫（crystal violet）.媒染劑的作用是增加染料和細胞之間的親和性或附著力,即以某種方式幫助染料固定在細胞上,使不易脫落,碘（iodine ）是常用的媒染劑.脫色劑是將被染色的細胞進行脫色,不同類型的細胞脫色反應不同,有的能被脫色,有的則不能,脫色劑常用95%的酒精（ethanol）.復染液也是一種鹼性染料,其顏色不同於初染液,復染的目的是使被脫色的細胞染上不同於初染液的顏色,而未被脫色的細胞仍然保持初染的顏色,而且將細胞區分成G+和G-兩大類群,常用的復染液為番紅.
1.載玻片固定.在無菌操作條件下,用接種環挑取少量細菌於干凈的載玻片上塗布均勻,在火焰上加熱以殺死菌種並使其粘附固定.
2.草酸銨結晶紫染1分鍾.
3.自來水沖洗,去掉浮色.
4.用碘-碘化鉀溶液媒染1分鍾,傾去多餘溶液.
5.用中性脫色劑如乙醇（95%）或丙酮酸脫色30秒,革蘭氏陽性菌不被褪色而呈紫色,革蘭氏陰性菌被褪色而呈無色.
6.用番紅染液或者沙黃復染30秒,革蘭氏陽性菌仍呈紫色,革蘭氏陰性菌則呈現紅色.

⑵ 天然染料的染色方法是什麼

直接染色法某些植物染料的天然色素對水的溶解度好,染液能直接吸附到纖維上,就可以採用直接染色法,如梔子、姜黃等。媒染法某些植物染料天然色素對水的溶解度頗好,染液成分雖然能直接吸附到纖維上,但為提高染色牢度,要求採用媒染法進行染色。媒染的過程一般分為先染色再媒染、先媒染再染色或先媒染再染色再媒染等方法。先染色再媒染天然色素對水基本不溶解,但其配糖體能溶解於水,並與纖維吸附,要求採用後媒染使之固著,如梔子、槐花。其染色步驟如下:染色:被染織物在染液中沸染20~30分鍾。媒染:在室溫條件下進行,依色澤的不同採用不同的媒染劑,媒染劑一般可用含鋁、鐵、錫等金屬離子的化學品。即把煮染過的織物或服飾放在含有媒染劑溶液中浸漬30~40分鍾,就完成了媒染過程。

⑶ 通常染色有幾種方法

通常染色的方法有七種：
以紡織品為例，紡織品的染色可以在任何階段進行，可以在纖維、紗線、織物及成衣等不同階段景進行染色:
1、散狀纖維染色 在紡紗之前的纖維或散狀纖維的染色，裝入大的染缸，在適當的溫度進行染色。色紡紗大多採用散纖維染色的方法（也有不同纖維單染的效果），常用於粗紡毛織物。
2、毛條染色 這也屬於纖維成紗前的纖維染色，與散狀纖維染色的目的一樣，是為了獲得柔和的混色效果。毛條染色一般用於精梳毛紗與毛織物。
3、紗線染色 織造前對紗線進行染色，一般用於色織物、毛衫等或直接使用紗線（縫紉線等）。紗線染色是染織的基礎。
常規紗線染色的方法有三種：
①絞紗染色——將鬆散的絞紗浸在特製的染缸中，這是一種成本最高的染色方法；
②筒子染色——筒子染色的紗線卷繞在一個有孔的筒子上，然後將許多的筒子裝入染色缸，染液循環流動，蓬鬆效果與柔軟程度不如絞紗染色。
③經軸染色——是一種大規模卷裝染色，梭織製造前要先製成經軸（整經），將整個經軸的紗線進行染色，如聯合漿染機與經軸紗線束裝染色。由於是經軸，所以多適用梭織染色使用。 但隨著經軸落筒的出現，我們可以把染色後經軸上的紗線落成筒子紗，這種染色的紗線使用范圍就更廣了，譬如靛藍染色大多使用的還原染色方法，只有使用經軸染色才可以很好的解決，如果沒有經軸落筒，是很難實現的。
4、匹染對織物進行染色的方法為匹染，常用的方法有繩狀染色、噴射染色、卷染、軋染（不是扎染）和經軸染色。這里不一一介紹。
5、成衣染色 把成衣裝入尼龍袋子，一系列的袋子一起裝入染缸，在染缸內持續攪拌（槳葉式染色機）。成衣染色多適合於針織襪類、T恤等大部分針織服裝、毛衫、褲子、襯衫等一些簡單的成衣。
6、藝術染色—主要有扎染、蠟染、吊染、段染、潑染以及手繪等。
7、染色過程中固定面料的夾具最好選用全塑料製作的夾子，避免彈簧金屬圈耐受不了酸性或者鹼性的染色劑而生銹沾染面料，所以選用純塑膠夾是最妥當最安全的夾具，這在淘寶網上可以很容易購買得到。

⑷ 酶免疫細胞如何進行化學染色

免疫細胞化學染色是將血液、骨髓液、漿膜腔積液等等各種體液組織製成的塗片和骨髓等組織的切片經各種單克隆抗體的標定和常用的過氧化物酶或鹼性磷酸酶顯色後對白血病細胞直接鏡檢，以確定細胞類型。
免疫組織化學染色方法繁多，可根據標記物的不同分為：免疫酶細胞化學染色、免疫熒光細胞化學染色、免疫金銀染色技術以及親合免疫組織化學染色技術等。目前血液系統疾病檢查常用免疫細胞化學染色方法有三種：過氧化物酶-抗過氧化物酶（PAP）法、鹼性磷酸酶-抗鹼性磷酸酶（APAAP）法和親和素-生物素-過氧化物酶復合物（ABC-AP）法。PAP法抗原、抗體反應及酶標原理與APAAP法完全相同，都屬於免疫組織化學反應，只是所標記的酶不同。PAP法酶化學反應原理與ABC-AP法完全相同，但ABC-AP法為親合免疫組織化學反應。在染色步驟及方法上PAP法和ABC-AP法完全相同。
免疫細胞化學能夠識別抗原蛋白質一級結構中氨基酸的差別，從而對細胞結構、功能及細胞代謝等進行綜合分析，確定細胞的類型、來源及細胞的分化階段。應用骨髓切片免疫組織化學技術可以對骨髓細胞進行原位觀察，通過對細胞特異性抗原的定性、定位和定量分析，了解骨髓組織和細胞的結構和變化，這對血液系統疾病尤其是血液系統腫瘤的診斷、鑒別診斷，以及血液腫瘤的分類、分型和預後的判斷提供了有利的研究手段。

⑸ DNA熒光組織化學染色的方法

一步雙染色法先將兩種熒游標{己抗體按適當比例混合(A+B)，按直接法進行染色。二步雙染色法先用TRITC標記的A抗體進行免疫熒光染色，再用FITC標記的B抗體染色，根據兩種抗體的動物種屬不同，可用直接法也可用間接法，結果A抗原呈現橘紅色熒光，而B抗原呈現黃綠色熒光。在應用中，常用的方法是免疫熒光組織化學中間接法和SABC-Cy3法相結合。例如，在實驗設計時，選擇小鼠抗大鼠A和兔抗大鼠B作為兩種不同的特異性一抗，相匹配的二抗分別為FITC-抗小鼠IgG和生物素化―抗兔IgG。進行雙重染色時，由於兩種一抗種屬來源不同，可把一抗混合使用。孵育結束後洗滌未結合的一抗，滴加二抗時，先加人生物素化―抗兔IgG(二抗)孵育，洗滌後，滴加SABC-Cy3復合物，經熒光顯微鏡下觀察已出現特異性熒光，再進行FITC―抗小鼠IgG(二抗)的孵育，最後封片觀察。其結果A抗原呈現綠色熒光，B抗原呈現紅色熒光。

⑹ 給細菌染色的方法都有幾種，怎麼操作，都用復紅染色嗎麻煩一一講來，詳細點，本人初學者.

細菌染色分為活菌染色跟死菌染色兩種。其中死菌染色分為正染色跟負染色。正染色又包括普通染色與特殊染色兩種。普通染色有簡單染色法、革蘭氏染色法和抗酸染色法；特殊染色分為芽孢染色法、莢膜染色法和細胞壁染色法。一般都只用革蘭氏染色法跟抗酸染色法。

革蘭氏染色法(Gram's stain)是最常用的細菌染色法。細菌經結晶紫初染染成藍色。革蘭氏染色陽性菌（G+）細胞壁肽聚糖層數多，且肽聚糖為空間網狀結構，再經乙醇脫水，網狀結構更為緻密，染料復合物不易從細胞內漏出，仍為藍色。而革蘭氏染色陰性菌（G-）細胞壁脂類含量多，肽聚糖層數少，且肽聚糖為平面片層結構，易被乙醇溶解，使細胞壁通透性增高，結合的染料復合物容易泄漏，細菌被脫色為無色，再經石炭酸復紅稀釋液復染成紅色。
①將結晶紫染液加於塗膜上，染色（初染）1min。②水洗後加蘆戈氏碘液處理(媒染)1min。③水洗後用95％酒精脫色，脫色時頻頻搖動玻片，直至流下的液體無色為止(約需0.5min)。④水洗後加石炭酸復紅稀釋液染色(復染)0.5min。⑤水洗，用濾紙輕輕吸干，待標本充分乾燥後進行鏡檢。染色過程中，水洗要用自來水的細流徐徐沖洗，沖洗塗膜的背面，勿使強水流直接沖到塗膜上。

抗酸染色法（acid-fast stain）對分枝桿菌屬等一般染色法不易著色的抗酸性細菌染色。要注意：1）塗片要略厚；2）加溫染色或延長染色時間，加溫時隨時補加染色液；3）分枝桿菌呈紅色（+），其他細菌和背景為藍色。
①石碳酸復紅加溫染色8~10分鍾。②3%的鹽酸酒精脫色約1~2分鍾，脫色是輕搖玻片，直到塗片顏色脫去為止。③水洗後，用鹼性美藍復染1分鍾。④再次水洗，印干。

芽孢染色法是專門給細菌芽孢染色的。要注意：1）芽孢染色用的菌種應控制菌齡，使大部分芽孢仍保留在菌體上為宜；2）染色加熱過程要及時補充染液，切勿讓塗片乾涸。
①孔雀綠加熱染色5分鍾。②水洗。③番紅染色2~3分鍾。④水洗，乾燥。

莢膜染色法是專門給與染料親和性弱的細菌莢膜染色。由於莢膜很薄，且含水量高（90%以上），易變形，所以製片和染色時一般不用熱固定。這個包括黑素負染色法、Leifson染色法跟Tyler染色法。
黑素負染色法：
1.制菌液：在潔凈載破片一端加一滴蒸餾水，按無菌操作要求，用接種環取少量斜面試管培養物於蒸餾水中，輕輕混勻。
2.塗片（推片法）：取另一塊邊緣光滑的載玻片，使之一端與菌液接觸，然後迅速均勻地將菌液推向玻片的另一端，使菌液塗成一薄層。置空氣中自然乾燥。注意：勿熱固定。
3.復紅染色：滴加石炭酸復紅染色液覆蓋塗布面，染色4~5分鍾後，除去多餘染液（勿用水洗）。乾燥時間不要太長，防莢膜脫水。
4.黑素染色：在玻片一端加一滴1%黑素液，再取一塊邊緣光滑的裁玻片，當邊緣與黑素液接觸後，迅速均勻地推向玻片另一端，使成一薄層。置空氣中自然乾燥。
5. 鏡檢（油鏡）：菌體呈紅色，背景呈黑色，莢膜無色。
注意事項：滴黑色素要量少；取菌要適量。
Leifson染色法
1.制備塗片同前，自然乾燥。
2.滴加Leifson』s染色液覆蓋塗布面，染色10分鍾，傾去多餘染料（勿用水洗）。
3.滴加硼酸鈉美藍染色液，染色5分鍾，輕輕用水沖洗，置空氣中自然乾燥。
4.油鏡下鏡檢，菌體呈藍色，莢膜呈紅色。
Tyler染色法
1.制備塗片同前，自然乾燥。
2.滴加結晶紫冰醋酸染色液覆蓋塗布面，染色5~7分鍾。傾去多餘染料（勿用水洗）。
3.用20%CuS04水溶液輕輕沖去染料，用吸水紙印干後，置空氣中自然乾燥。
4.油鏡下檢查，菌體呈紫色，莢膜呈淺紫色或淺藍色。

細胞壁染色法是觀察細菌細胞壁時採用的染色法。細菌細胞壁很薄，它與染料結合的能力差，不易著色，在細菌的染色過程中，一般情況染料都是通過細胞壁的滲透、擴散等作用而進入細胞，細胞壁本身並未染色，因此，欲通過染色來觀察細胞壁，必須設法使細胞壁能著色，而細胞質則不易著色，常用的方法有單寧酸法和磷鉬酸法。單寧酸和磷鉬酸都是起媒染作用，它們使細胞壁形成可著色的復合物，而使細胞質不易被著色，經結晶紫或甲基綠染色後，便可在普通光學顯微鏡下觀察到細胞壁。
根據細菌細胞在高滲溶液中或用乙醚蒸氣處理後，會產生質壁分離這一現象，經染色後也可在普通光學顯微鏡下區分細胞壁和細胞質膜。
1．單寧酸法
(1)將培養16—18小時的巨大芽孢桿菌按常法製成塗片。
(2)用5％單寧酸染5分鍾後，水洗。
(3)用0．2％結晶紫染3—5分鍾，水洗，吹乾。用油鏡觀察，細胞壁呈紫色，細胞質呈淡紫色。
2．磷鉬酸法
(1)制備濃厚的塗片，在未乾時浸入1％磷鉬酸水溶液3—5分鍾。
(2)用1％甲基綠水溶液染3—5分鍾。
(3)水洗後，吹乾，用油鏡觀察。細胞壁為綠色，細胞質無色。
3．區分細胞壁與細胞質膜
(1)乙醚蒸氣法
(a)將巨大芽孢桿菌塗布於蓋玻片上，翻轉蓋玻片使其放在乙醚蒸氣瓶的瓶口上蒸3分鍾。
(b)取下蓋玻片置Bouin氏固定液中30分鍾後取出，水洗。
(c)用硫堇染色30秒鍾。
(d)水洗，水封，置油鏡下觀察。
(2)NaCl法
(a)取一滴25％NaCl溶液於潔凈的載玻片上。
(b)挑一小環培養6小時的枯草芽孢桿菌，在25％NaCl水滴中塗布均勻，待自然乾燥。
(c)滴加0．01％結晶紫於其上，使蓋滿有菌部分，30秒鍾後水洗，乾燥，用油鏡觀察結果。

⑺ 實驗室常用的染色方法有哪幾種

實驗室常用的染色方法有如下幾種：

（1）瑞氏染色法

染色結果使組織細胞的胞漿和核染成不同顏色，菌體呈藍紫色，易於識別。

（2）革蘭氏染色法

可用於鑒別革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌。革蘭氏陽性菌不易被酒精脫色而染成藍紫色，革蘭氏陰性菌則易被酒精脫色，經復染呈紅色。

（3）美藍染色法

多色性美藍染色液可染細菌莢膜，使其呈淺紅色（菌體為藍色）。

（4）姬姆薩染色法

適用於螺旋體、支原體、立克次氏體等病原體的染色。其可使組織細胞的胞漿和核染成不同顏色，而菌體呈藍紫色，易於識別。

⑻ 細菌有哪些染色方法

一、常用的染色方法有革蘭氏染色(最基本)、芽孢染色、莢膜染色、鞭毛染色等。
二、.1 革蘭染色法 （1）取含金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌的混合菌液塗片、乾燥、固定;（2）染色:用結晶紫染液染1min，水沖洗;盧戈碘液染1min，水沖洗;0.4%復紅酒精溶液染30s，水沖洗;（3）吸干後鏡檢［2］ 。
1.2 抗酸染色法 （1）取結核桿菌陽性的痰標本（已處理）塗片、乾燥、固定。（2）染色:將石炭酸復紅染液沸水浴10min，滴加2～3滴覆蓋菌膜染色 5min，水沖洗，3%鹽酸酒精脫色30s，水沖洗;鹼性美蘭復染30s，水沖洗。（3）吸干後鏡檢［3］ 。
1.3 莢膜染色法 （1）取接種肺炎球菌死亡的小鼠腹腔液塗片、乾燥、固定;（2）染色:用石炭酸復紅染液染1min，水沖洗;95%酒精脫色5s水沖洗;20%鞣酸溶液媒染10min水沖洗;0.8%孔雀綠溶液染色1min，水沖洗;（3）吸干後鏡檢［4］ 。
1.4 芽胞染色法 （1）取等量破傷風桿菌厭氧培養菌液和5%孔雀綠水溶液，放入小試管中充分混合，沸水浴20min;取上述混合液塗片、乾燥、固定;（2）用 1%沙黃液復染10min，水沖洗;（3）干後鏡檢。
2.1 革蘭染色 鏡下，金黃色葡萄球菌染成紫色、球形，為革蘭陽性菌;大腸埃希菌染成紅色、桿狀，為革蘭陰性菌。革蘭染色法是細菌學中最經典，應用最廣泛的染色法之一。脫色是影響革蘭染色的關鍵步驟，脫色時間長短直接關繫到染色結果的准確性［5］ 。脫色過度則革蘭陽性菌可能被誤染為革蘭陰性菌，脫色不 夠則革蘭陰性菌可能被誤染為革蘭陽性菌，為此學生難以把握。現將原有四步染色法改為三步法，即把第三步酒精脫色和第四步復紅復染合並一步進行，使用 0.4%復紅酒精溶液作為復染劑，可達到脫色和復染雙重目的。這樣，就可以避免學生在四步法中因脫色時間不易掌握而造成染色的失敗，減少重復性實驗，提高了教學效果。
2.2 抗酸染色 鏡下，結核分枝桿菌染成紅色，為抗酸菌;背景和其他菌被染成藍色，為非抗酸菌。傳統的方法是滴加石炭酸復紅染液於塗片上，用玻片夾夾住塗片以微火煙葉熱，保持染液冒蒸汽約5min，此法學生容易使染液蒸干或使染液沸騰，從而影響染色效果和污染環境。改良後的方法是將染液直接加熱改為水浴後使用，克服上述的缺點，且染色效果良好。適合實驗教學使用。
2.3 莢膜染色 鏡下，肺炎球菌菌體染成紅色（成雙排列），莢膜染成綠色，存在於菌體的周圍。傳統的莢膜染色是用結晶紫染液染色，菌體染成紫色，莢膜染成淡紫色或無色，菌體和莢膜之間反差小，不易分辨。改良後，增加了脫色、媒染、復染的步驟，使菌體和莢膜之間反差增大，易於觀察，可用於學生實驗和示教片的製作。
2.4 芽胞染色 鏡下，破傷風桿菌的菌體染成紅色，芽胞染成綠色。傳統的方法是滴加石炭酸復紅染液於塗片上並弱火加熱，使染液冒蒸汽約5min，此法染液用量大，且容易污染衣物和實驗台。現改為菌液和染液混合水浴加熱初染，然後制備塗片、固定、復染，即節約時間，染液消耗又少，且菌體、芽胞對比鮮明。此法適用於教學標本片的製作。
三、簡單染色法是利用單一染料對細菌進行染色的一種方法。

操作步驟

1．塗片：用灼燒滅菌冷卻後的接種環挑取少量菌體與水滴充分混勻，塗成極薄的菌膜。

2．乾燥：可自然晾乾，或將塗片置於火焰高處微熱烘乾，但不能直接在火焰上烘烤。

3．固定：手執玻片一端，有菌膜的一面朝上，通過迅速通過火焰2-3次（用手指觸塗片反面，以不燙手為宜）。

4．染色：加適量(以蓋滿菌膜為度)結晶紫染色液(或石炭酸復紅液)，染l～2min。

5．水洗：用自來沖洗至流下的水中無染色液的顏色時為止。

6．乾燥

7．鏡檢

⑼ 常用免疫組織化學染色方法有哪些

常用免疫組織化學染色方法， LSAB法。(SP法)(Labelled streptavidim biotln) 1.切片脫蠟至水。 2.0.3%H2O2甲醇處理切片10-20分鍾。 3.水洗。 4.抗原修復。 5.PBS洗3次，1分鍾/次。 6.加入血清孵育10分鍾。 7.摔去血清，加入一抗孵育30-60分鍾。 8.PBS洗3次，每次2分鍾。加入二抗，孵育20分鍾。 9.PBS洗3次，每次2分鍾。 10.加入SP復合物孵育20-30分鍾。 11.PBS洗3次，每次2分鍾。 12.DAB-H2O2孵育5-10分鍾。 13.PBS洗，水洗。 14.Harris蘇木素染核5-10分鍾。 15.水洗，分化 ，藍化，脫水，透明並封固。生物幫上面有的，去看看吧， http://www.bio1000.com/zt/disease/ 疾病機理,疾病研究。

⑽ 常用免疫組織化學染色方法有哪些

常用免疫組織化學染色方法, LSAB法.(SP法)(Labelled streptavidim biotln) 1.切片脫蠟至水. 2.0.3%H2O2甲醇處理切片10-20分鍾. 3.水洗. 4.抗原修復. 5.PBS洗3次,1分鍾/次. 6.加入血清孵育10分鍾. 7.摔去血清,加入一抗孵育30-60分鍾. 8.PBS洗3次,每次2分鍾.加入二抗,孵育20分鍾. 9.PBS洗3次,每次2分鍾. 10.加入SP復合物孵育20-30分鍾. 11.PBS洗3次,每次2分鍾. 12.DAB-H2O2孵育5-10分鍾. 13.PBS洗,水洗. 14.Harris蘇木素染核5-10分鍾. 15.水洗,分化 ,藍化,脫水,透明並封固.