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化學發光有哪些方法

發布時間:2022-06-24 00:39:27

㈠ 化學發光免疫分析技術的類型

化學發光免疫分析法以標記方法的不同而分為兩種:
(1)化學發游標記免疫分析法;
(2)酶標記、以化學發光底物作信號試劑的化學發光酶免疫分析法 從標記免疫分析角度, 化學發光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,
CL E IA ) , 應屬酶免疫分析, 只是酶反應的底物是發光劑, 操作步驟與酶免分析完全相同[ 5 ]: 以酶標記生物活性物質(如酶標記的抗原或抗體) 進行免疫反應, 免疫反應復合物上的酶再作用於發光底物, 在信號試劑作用下發光, 用發光信號測定儀進行發光測定。目前常用的標記酶為辣根過氧化物酶(HRP) 和鹼性磷酸酶(AL P) , 它們有各自的發光底物。 常用的底物為魯米諾(32氨基鄰苯二甲醯肼,lum ino l) , 或其衍生物如異魯米諾(42氨基鄰苯二甲醯肼) , 是一類重要的發光試劑。魯米諾的氧化反應在鹼性緩沖液中進行, 在過氧化物酶及活性氧[ 過氧化陰離子(O 2- ) , 單線態氧(1O 2 ) , 羥自由基(OH·) , 過氧化氫(H2O 2) ]存在下,生成激發態中間體, 當其回到基態時發光, 其波長為425nm。
早期用魯米諾直接標記抗原(或抗體) , 但標記後發光強度降低而使靈敏度受到影響。近來用過氧化物酶標記抗體, 進行免疫反應後利用魯米諾作為發光底物, 在過氧化物酶和起動發光試劑(N aOH2H2O 2) 作用下, 魯米諾發光, 發光強度依賴於酶免疫反應物中酶的濃度。Kodak Am erliteTM 半自動分析系統就是利用這一體系專門設計的。 (enhanced lum ines2cence enzym e imm unoassay, ELEIA )
在發光系統中加入增強發光劑, 如對2碘苯酚等, 以增強發光信號, 並在較長時間內保持穩定, 便於重復測量, 從而提高分析靈敏度和准確性。在全自動分析儀上, 還可通過計算機嚴密控制, 進行自動操作, 如加試劑, 混合, 溫育, 洗滌, 加發光試劑, 發光計數, 數據處理, 繪制標准曲線, 直至完成病人血清樣品的分析並列印出結果。Am erliteTM 發光增強酶免分析系統用熒光素、噻唑等增強劑, 其發光時間可持續長達20m in, 試劑盒有甲狀腺功能檢測的
促甲狀腺素、三碘甲腺原氨酸、甲狀腺素、甲狀腺素結合球蛋白、游離甲狀腺素, 與性激素有關的有促黃體激素、促卵泡激素、人絨毛膜促性腺激素、甲胎蛋白、雌二醇、睾酮, 以及其他方面的如癌胚抗原、鐵蛋白、地高辛等。 所用底物為環1, 22二氧乙烷衍生物, 這是一類很有前途的發光底物 , 用於化學發光酶免分析底物而設計的分子結構中包含起穩定作用的基團——金剛烷基, 其分子中發光基團為芳香基團和酶作用的基團, 在酶及起動發光試劑作用下引起化學發光。最常使用的底物是AM PPD [ 32(2』2 sp iroadam an2tane ) 42m ethoxy242( 3』2 pho spho ryloxy) 2phenyl21,22dioxetane ], 中文名為: 32(2』2 螺金剛烷) 242甲氧基242(3』2 磷醯氧基) 2苯基21, 22環二氧乙烷)。在鹼性磷酸酶(AL P) 作用下, 磷酸酯基發生水解而脫去一個磷酸基, 得到一個中等穩定的中間體AM PD (半壽期為2~ 30m in) , 此中間體經分子內電子轉移裂解為一分子的金剛烷酮和一分子處於激發態的間氧苯甲酸甲酯陰離子, 當其回到基態時產生470nm 的光, 可持續幾十分鍾(如圖5)。AM PPD 為磷酸酯酶的直接化學發光底物, 可用來檢測鹼性磷酸酯酶或酶和抗體、核酸探針及其它配基的結合物。可檢測到鹼性磷酸酯酶的濃度為10- 15mo l?L 。
美國DPC 公司的Imm u lite 全自動酶放大發光免疫分析儀, 以鹼性磷酸酶為標記物, 以金剛烷作發光底物, 測定靈敏度相當於10- 21mo l?mL 的酶, 採用聚苯乙烯珠作載體, 其檢測水平已能達到10- 12g?mL。

㈡ 化學發光免疫分析法有哪三類

1、直接化學發光,標記物為吖啶酯(雅培)或者ABEI(新產業)

2、酶促化學發光,標記物為鹼性磷酸酶(廈門波生)或者辣根過氧化物酶(強生)

3、電化學發光,標記物為三聯吡啶釕(羅氏)


註:括弧內為代表廠家。

㈢ 什麼是化學發光分析方法

化學發光分析法就是對化學發光進行分析的。如伯樂生命的chemidoc
xrs+
系統與chemidoc
mp
系統就是進行化學發光分析法的。化學發光分析法具有靈敏度高、設備簡單、操作方便、線性范圍廣、分析快、也便於實現自動化等優點。無論是測定微時金屬元素、大氣污染檢測還是降低噪音等方面,都會運用化學發光分析法。
希望採納

㈣ 有哪位大神解釋一下電化學發光法,跪謝

化學發光法是分子發光光譜分析法中的一類,它主要是依據化學檢測體系中待測物濃度與體系的化學發光強度在一定條件下呈線性定量關系的原理,利用儀器對體系化學發光強度的檢測,而確定待測物含量的一種痕量分析方法。

電化學發光分析法具有靈敏度高、儀器設備簡單、操作方便、易於實現自動化等特點,廣泛地應用於生物、醫學、葯學、臨床、環境、食品、免疫和核酸雜交分析和工業分析等領域。

在21世紀中必將繼續為解決人類面臨的各種重大問題發揮更加顯著的作用。

化學發光與其它發光分析的本質區別是體系產生發光 (光輻射) 所吸收的能量來源不同。

體系產生化學發光,必須具有一個產生可檢信號的光輻射反應和一個可一次提供導致發光現象足夠能量的單獨反應步驟的化學反應

(4)化學發光有哪些方法擴展閱讀

依據供能反應的特點,可將化學發光分析法分為:

1)普通化學發光分析法(供能反應為一般化學反應)。

2)生物化學發光分析法(供能反應為生物化學反應;簡稱BCL)。

3)電致化學發光分析法(供能反應為電化學反應,簡稱ECL)等。

根據測定方法該法又可分為:

1)直接測定CL分析法。

2)偶合反應CL分析法(通過反應的偶合,測定體系中某一組份)。

3)時間分辨CL分析法(即利用多組份對同一化學發光反應影響的時間差實現多組份測定)。

4)固相、氣相、液相CL分析法。

5)酵聯免疫CL分析法等。

㈤ 常見的化學發光反應體系有哪些

最常見的是魯米諾及其衍生物-過氧化氫體系,其次,吖啶脂類如光澤精-過氧化氫體系,二氧雜環丁烷類如AMPPD在鹼性知磷酸酶ALP的催化下分解,然後,還有過氧化草醯酯+染料體系,釕聯吡啶道+TPA體系等等。除此之外還有版很多,像魯米諾體系裡的氧化劑未必只有過氧化氫,還有高錳酸鉀、Br2、甲醛等等。催化劑也可以是過氧化物酶或者過渡金屬離子還有就是諸如乙醇蒸汽、異丙醇蒸汽這些,在納米金屬粒子上也是可權以產生催化化學發光的。

㈥ 化學發光分析法的分類

化學發光分析法分為:
1、普通化學發光分析法 ( 供能反應為一般化學反應 ) ;
2、生物化學發光分析法 ( 供能反應為生物化學反應;簡稱 BCL) ;
3、電致化學發光分析法 ( 供能反應為電化學反應,簡稱 ECL) 等。
根據測定方法該法又可分為:
a、直接測定 CL 分析法;
b、偶合反應 CL 分析法 ( 通過反應的偶合,測定體系中某一組份;
c、時間分辨 CL 分析法 ( 即利用多組份對同一化學發光反應影響的時間差實現多組份測定 ) ;
d、固相、氣相、掖相 CL 。分析法;
e、酵聯免疫 CL 分析法等。

㈦ 「化學發光法」指的是什麼

化學發光法是利用化學發光測定化學發光反應反應物、催化劑、增敏劑、抑制劑,偶合反應中的反應物、催化劑、增敏劑的方法。
化學發光現象是一種常見的自然現象。
化學發光是物質在化學反應過程中,其物質分子吸收化學能產生光的輻射現象,如:REK-20N型化學發光定氮儀是興化睿科採用化學發光檢測原理,待測樣品(或標樣)被引入到高溫裂解爐後,在1050℃左右的高溫下,樣品被完全氣化並發生氧化裂解,其中的氮化物定量地轉化為一氧化氮(NO)。樣品氣經過膜式乾燥器脫去其中的水份。亞穩態的一氧化氮在反應室內與來自臭氧發生器的O3氣體發生反應,轉化為激發態的NO2*。當激發態的NO2*躍遷到基態時發射出光子,光信號由光電倍增管按特定波長檢測接收。再經微電流放大器放大、計算機數據處理,即可轉換為與光強度成正比的電信號。在一定的條件下,反應中的化學發光強度與一氧化氮的生成量成正比,而一氧化氮的量又與樣品中的總氮含量成正比,故可以通過測定化學發光的強度來測定樣品中的總氮含量。

㈧ 關於化學發光檢測法

化學發光檢測法有很多,不知你說的是不是焰色反應,如果是焰色反應,則是由於金屬原子內部電子能級躍遷導致的,不同金屬會發出不同顏色(波長)的光。這時一般只能作為定性檢測,不能作為定量檢測。
如果指的是原子發射光譜,其發光原理也是原子中最外層電子受到激發(可以是光致也可以是熱致等等),由基態轉化為激發態,然後躍遷回基態以光的形式輻射能量。這時可以作為定量分析(可定量必可以定性),這時可以看發射光譜譜圖曲線的高度,一般有幾種方法來測量,像外標法,內標法,標准曲線法等等,如果想知道更詳細的東西可以參考儀器分析的有關內容。

㈨ 化學發光是什麼技術

化學發光是指能量來自於化學反應引起的發光。相對於化學發光的生物發光,是指能量來自於酶促催化下的生化反應引起的發光。化學發光作為一種分析工具的吸引之處就在於檢測的簡單性。化學發光的實質是自身發光,這意味著化學發光的分析測試儀器只需要提供一種可以檢測光信號和紀錄結果的方法就可以了。
簡單的說,化學發光
(ChemiLuminescence
,簡稱為
CL)
分析法是分子發光光譜分析法中的一類,它主要是依據化學檢測體系中待測物濃度與體系的化學發光強度在一定條件下呈線性定量關系的原理,利用儀器對體系化學發光強度的檢測,而確定待測物含量的一種痕量分析方法。
發光技術的應用:
Ø
鈣流檢測
Ø
活性氧分析
Ø
發光免疫分析
Ø
基因調控(Luciferase
報告基因)
Ø
蛋白質相互作用(BRET,生物發光共振能量傳遞)
BRET是細胞內實時分析蛋白質-蛋白質相互作用的工具。

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