如何做化學免疫發光

① Hiv化學發光法是什麼

1，這種方法其實是變種的酶聯，但靈敏度比傳統酶聯高數量級的關系。
2，關於試劑：一般都是用的抗原抗體聯合試劑，在每次檢測之間試劑都要對陽性參照標本進行一次檢測對比。目前全部是進口試劑，值得恐友的信賴。
3，關於報告單上面的檢測時間，恐友沒必要太在意，這個試驗一般在20分鍾左右出結果。
4，關於結果：判斷標准COI還是以小於1為陰性，即使大於1了但在6以下恐友也沒必要太害怕，

艾滋病化學發光法等同於4代酶聯，最新方法，抗原抗體同測。
化學免疫發光測試HIV抗原抗體是定性而非定量。
化學發光法主要代表有廣州8院和成都華西醫院的羅氏電化學發光法，還有雅培化學發光法。

② 化學發光免疫分析技術的類型

化學發光免疫分析法以標記方法的不同而分為兩種:
(1)化學發游標記免疫分析法;
(2)酶標記、以化學發光底物作信號試劑的化學發光酶免疫分析法 從標記免疫分析角度, 化學發光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,
CL E IA ) , 應屬酶免疫分析, 只是酶反應的底物是發光劑, 操作步驟與酶免分析完全相同[ 5 ]: 以酶標記生物活性物質(如酶標記的抗原或抗體) 進行免疫反應, 免疫反應復合物上的酶再作用於發光底物, 在信號試劑作用下發光, 用發光信號測定儀進行發光測定。目前常用的標記酶為辣根過氧化物酶(HRP) 和鹼性磷酸酶(AL P) , 它們有各自的發光底物。 常用的底物為魯米諾(32氨基鄰苯二甲醯肼,lum ino l) , 或其衍生物如異魯米諾(42氨基鄰苯二甲醯肼) , 是一類重要的發光試劑。魯米諾的氧化反應在鹼性緩沖液中進行, 在過氧化物酶及活性氧[ 過氧化陰離子(O 2- ) , 單線態氧(1O 2 ) , 羥自由基(OH·) , 過氧化氫(H2O 2) ]存在下,生成激發態中間體, 當其回到基態時發光, 其波長為425nm。
早期用魯米諾直接標記抗原(或抗體) , 但標記後發光強度降低而使靈敏度受到影響。近來用過氧化物酶標記抗體, 進行免疫反應後利用魯米諾作為發光底物, 在過氧化物酶和起動發光試劑(N aOH2H2O 2) 作用下, 魯米諾發光, 發光強度依賴於酶免疫反應物中酶的濃度。Kodak Am erliteTM 半自動分析系統就是利用這一體系專門設計的。 (enhanced lum ines2cence enzym e imm unoassay, ELEIA )
在發光系統中加入增強發光劑, 如對2碘苯酚等, 以增強發光信號, 並在較長時間內保持穩定, 便於重復測量, 從而提高分析靈敏度和准確性。在全自動分析儀上, 還可通過計算機嚴密控制, 進行自動操作, 如加試劑, 混合, 溫育, 洗滌, 加發光試劑, 發光計數, 數據處理, 繪制標准曲線, 直至完成病人血清樣品的分析並列印出結果。Am erliteTM 發光增強酶免分析系統用熒光素、噻唑等增強劑, 其發光時間可持續長達20m in, 試劑盒有甲狀腺功能檢測的
促甲狀腺素、三碘甲腺原氨酸、甲狀腺素、甲狀腺素結合球蛋白、游離甲狀腺素, 與性激素有關的有促黃體激素、促卵泡激素、人絨毛膜促性腺激素、甲胎蛋白、雌二醇、睾酮, 以及其他方面的如癌胚抗原、鐵蛋白、地高辛等。 所用底物為環1, 22二氧乙烷衍生物, 這是一類很有前途的發光底物 , 用於化學發光酶免分析底物而設計的分子結構中包含起穩定作用的基團——金剛烷基, 其分子中發光基團為芳香基團和酶作用的基團, 在酶及起動發光試劑作用下引起化學發光。最常使用的底物是AM PPD [ 32(2』2 sp iroadam an2tane ) 42m ethoxy242( 3』2 pho spho ryloxy) 2phenyl21,22dioxetane ], 中文名為: 32(2』2 螺金剛烷) 242甲氧基242(3』2 磷醯氧基) 2苯基21, 22環二氧乙烷)。在鹼性磷酸酶(AL P) 作用下, 磷酸酯基發生水解而脫去一個磷酸基, 得到一個中等穩定的中間體AM PD (半壽期為2～ 30m in) , 此中間體經分子內電子轉移裂解為一分子的金剛烷酮和一分子處於激發態的間氧苯甲酸甲酯陰離子, 當其回到基態時產生470nm 的光, 可持續幾十分鍾(如圖5)。AM PPD 為磷酸酯酶的直接化學發光底物, 可用來檢測鹼性磷酸酯酶或酶和抗體、核酸探針及其它配基的結合物。可檢測到鹼性磷酸酯酶的濃度為10- 15mo l?L 。
美國DPC 公司的Imm u lite 全自動酶放大發光免疫分析儀, 以鹼性磷酸酶為標記物, 以金剛烷作發光底物, 測定靈敏度相當於10- 21mo l?mL 的酶, 採用聚苯乙烯珠作載體, 其檢測水平已能達到10- 12g?mL。

③ 化學發光包括哪些方法

化學發光是物質在進行化學反應過程中伴隨的一種光輻射現象，可以分為直接發光和間接發光。直接發光是最簡單的化學發光反應，有兩個關鍵步驟組成：即激發和輻射。如A、B兩種物質發生化學反應生成C物質，反應釋放的能量被C物質的分子吸收並躍遷至激發態C*，處於激發的C*在回到基態的過程中產生光輻射。這里C*是發光體，此過程中由於C直接參與反應，故稱直接化學發光。

④ 化學發光免疫分析法有哪三類

1、直接化學發光，標記物為吖啶酯（雅培）或者ABEI（新產業）

2、酶促化學發光，標記物為鹼性磷酸酶（廈門波生）或者辣根過氧化物酶（強生）

3、電化學發光，標記物為三聯吡啶釕（羅氏）

註：括弧內為代表廠家。

⑤ 化學發光免疫分析法的原理

1、直接化學發光，標記物為吖啶酯（雅培）或者abei（新產業）
2、酶促化學發光，標記物為鹼性磷酸酶（廈門波生）或者辣根過氧化物酶（強生）
3、電化學發光，標記物為三聯吡啶釕（羅氏）
括弧內為代表廠家

⑥ 化學發光免疫分析儀的發光試劑

HRP 標記的CLEIA常用的底物為魯米諾(32氨基鄰苯二甲醯肼,lum ino l) ,或其衍生物如異魯米諾(42氨基鄰苯二甲醯肼) , 是一類重要的發光試劑。其結構如圖4 所示。魯米諾的氧化反應在鹼性緩沖液中進行,在過氧化物酶及活性氧[ 過氧化陰離子(O 2- ) , 單線態氧(1O 2 ) , 羥自由基(OH·) , 過氧化氫(H2O 2)]存在下,生成激發態中間體, 當其回到基態時發光, 其波長為425nm。
早期用魯米諾直接標記抗原(或抗體) ,但標記後發光強度降低而使靈敏度受到影響。近來用過氧化物酶標記抗體, 進行免疫反應後利用魯米諾作為發光底物, 在過氧化物酶和起動發光試劑(NaOH2H2O 2) 作用下, 魯米諾發光, 發光強度依賴於酶免疫反應物中酶的濃度。Kodak Am erliteTM半自動分析系統就是利用這一體系專門設計的。

⑦ 化學發光免疫分析儀能做什麼

化學發光免疫分析是一個平台，化學發光免疫分析是將具有高靈敏度的化學發光測定技術與高特異性的免疫反應相結合，用於各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和葯物等的檢測分析技術。
其實主要是替換酶聯免疫的，在這個平台上，只要是測抗原抗體的免疫診斷試劑都能做，現在主要用於臨床檢驗，食品安全領域也在不斷擴展新的產品