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化學檢測黴菌怎麼檢測

發布時間:2022-08-23 07:53:21

❶ 黴菌檢測ppt豆丁網

1.1 固體和半固體樣品:稱取10 g 樣品至盛有90 mL 滅菌生理鹽水的錐形瓶中,充分振搖,即為1:10。(可在瓶內預置適當數量的無菌玻璃珠)

1.2 液體樣品:以無菌吸管吸取10 mL 樣品至盛有90mL 生理鹽水的錐形瓶(可在瓶內預置適當數量的無菌玻璃珠)中,充分混勻,製成1:10 的樣品勻液。

1.3 取1 mL 1:10 稀釋液注入含有9 mL 無菌水的試管中, 另換一支1 mL 無菌吸管反復吹吸,此液為1:100 稀釋液。

1.4 按1.3 操作程序,制備10 倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次,換用1 次1 mL 無菌吸管。

1.5 根據對樣品污染狀況的估計,選擇2 個~3 個適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液),在進行10 倍遞增稀釋的同時,每個稀釋度分別吸取1 mL 樣品勻液於2 個無菌平皿內。同時分別取1 mL 樣品稀釋液加入2 個無菌平皿作空白對照。

1.6 及時將15 mL~20 mL 冷卻至46 ℃的黴菌培養基傾注平皿,並轉動平皿使其混合均勻。

❷ 飼料中黴菌毒素怎麼檢測

黴菌毒素的檢測方法很多,但由於黴菌毒素的化學結構和物理化學特性復雜,在樣品中分配不均和基質的干擾,使其分析更加復雜。飼料的樣品基質對黴菌毒素的影
響最大,因為飼料是由多種物質混合在一起的,不同的物質中的黴菌毒素檢測的程序是不同的。通常,首先要對懷疑被污染的物質進行嚴格的樣品處理,從樣品中提
取毒素,分析之前再進行洗脫除去雜質的干擾。在實際的分析中,有些方法可直接進行分離和定量,有些方法在分離和定量之前需要對黴菌毒素進行衍生。
有些黴菌毒素具有一個熒光特性的發色基團,如黃麴黴毒素(AF)、赭麴黴毒素(OT)、玉米赤霉烯酮(ZE),樣品的提取物經常用薄層色譜(TLC)和高效液相色譜(HPLC)來分離結構相似的化合物和污染物。

通過比較樣品和標准品色譜的比移值(Rf)和保留時間來定性黴菌毒素,通過熒光強度和吸光度來定量黴菌毒素。一些黴菌毒素含有單端孢霉烯團,最大吸收值
還不清楚,通常用氣相色譜和氣質聯用色譜進行檢測。這些樣品在提取後,上樣之前通常需要進行柱前衍生。TLC和HPLC的方法對單端孢霉烯團有效,但對黃
麴黴毒素的敏感性和特異性不強。TLC對穀物中的脫氧血腐鐮刀菌烯醇的檢測限是50~100μg/kg。

❸ 黴菌和酵母菌的測定還有什麼方法

黴菌和酵母菌介紹及檢測方法
一、黴菌和酵母菌介紹:
黴菌和酵母菌及其檢驗酵母菌是真菌中的一大類,通常是單細胞,呈圓形,卵圓形、臘腸形或桿狀。黴菌也是真菌,能夠形成疏鬆的絨毛狀的菌絲體的真菌稱為黴菌。
黴菌和酵母廣泛分布於自然界並可作為食品中正常菌相的一部分。長期以來,人們利用某些黴菌和酵母加工一些食品,如用黴菌加工乾酪和肉,使其味道鮮美;還可利用黴菌和酵母釀酒、制醬;食品、化學、醫葯等工業都少不了黴菌和酵母。但在某些情況下,黴菌和酵母也可造成中腐敗變質。由於它們生長緩慢和競爭能力不強,故常常在不適於細菌生長的食品中出現,這些食品是pH低、濕度低、含鹽和含糖高的食品、低溫貯藏的食品,含有抗菌素的食品等。由於黴菌和酵母能抵抗熱、冷凍,以及抗菌素和輻照等貯藏及保藏技術,它們能轉換某些不利於細菌的物質,而促進致病細菌的生長;有些黴菌能夠合成有毒代謝產物-黴菌毒素。黴菌和酵母往往使食品表面失去色、香、味。例如,酵母在新鮮的和加工的食品中繁殖,可使食品發生難聞的異味,它還可以使液體發生混濁,產生氣泡,形成薄膜,改變顏色及散發不正常的氣味等。因此黴菌和酵母也作為評價食品衛生質量的指示菌,並以黴菌和酵母計數來制定食品被污染的程度。目前已有若干個國家制訂了某些食品的黴菌和酵母限量標准。我國已制訂了一些食品中黴菌和酵母的限量標准。
二、檢驗方法:
黴菌和酵母的計數方法,與菌落總數的測定方法基本相似。主要步驟為:將樣品製作成10倍梯度的稀釋液,選擇3個合適的稀釋度,吸取1mL於平皿,傾注培養基後,培養觀察,計數。對黴菌的計數,還可以採用顯微鏡直接鏡檢計數的方法。
具體檢測標准參見:
GB4789.15-94,《中華人民共和國國家標准食品衛生微生物檢驗黴菌和酵母計數》
三、說明:
1.樣品的處理。為了准確測定黴菌和酵母數,真實反映被檢食品的衛生質量,首先應注意樣品的代表性。對大的固體食品樣品,要用滅菌刀或鑷子從不同部位採取試驗材料,再混合磨碎。如樣品不太大,最好把全部樣品放到滅菌均質器杯內攪拌2min。液體或半固體樣品可用迅速顛倒容器25次來混勻。
2.樣品的稀釋:為了減少櫚稀釋倍數的誤差,在連續遞增稀釋時,每一稀釋度應更換一根吸管。在稀釋過程中,為了使黴菌的孢子充分散開,需用滅菌吸管反復吹吸50次。
3.培養基的選擇:在黴菌和酵母計數中,主要使用以下幾種選擇性培養基。
馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養基(PDA):黴菌和酵母在PDA培養基上生長良好。用PDA作平板計數時,必項加入抗菌素以抑制細菌。
孟加拉紅(虎紅)培養基:該培養基中的孟加拉紅和抗菌素具有抑制細菌的作用。孟加拉紅還可抑制黴菌菌落的蔓延生長。在菌落背面由孟加拉紅產生的紅色有助於黴菌和酵母菌落的計數。
高鹽察氏培養基:糧食和食品中常見的麴黴和青黴在該培養基上分離效果良好,它具有抑制細菌和減緩生長速度快的毛霉科菌種的作用。
4.傾注培養。每個樣品應選擇3個適宜的稀釋度,每個稀釋度傾注2個平皿。培養基熔化後冷卻至45℃,立即傾注並旋轉混勻,先向一個方向旋轉,再轉向相反方向,充分混合均勻。培養基凝固後,把平皿翻過來放溫箱培養。大多數黴菌和酵母在25-30℃的情況下生長良好,因此培養溫度25~28℃。培養3d後開始觀察菌落生長情況,共培養5d觀察記錄結果。
5.菌落計數及報告:選取菌落數10~150之間的平板進行計數。一個稀釋度使用兩個平板,取兩個平板菌落數的平均值,乘以稀釋倍數報告。固體檢樣以g為單位報告,液體檢樣以mL 單位報告。關於稀釋倍數的選擇可參考細菌菌落總數測定。
6.黴菌直接鏡檢計數法:對黴菌計數,可以採用直接鏡檢的方法進行計數。
在顯微鏡下,黴菌菌絲具有如下特徵:
平行壁:黴菌菌絲呈管狀,多數情況下,整個菌絲的直徑是一致的。因此在顯微鏡下菌絲壁看起來象兩條平行的線。這是區別黴菌菌絲和其他纖維時最有用的特徵之一。
橫隔:許多黴菌的菌絲具有橫隔,毛霉、根霉等少數黴菌的菌絲沒有橫隔。
菌絲內呈粒狀:薄壁、呈管狀的菌絲含有原生質,在高倍顯微鏡下透過細胞壁可見其呈粒狀或點狀。
分枝:如菌絲不太短,則多數呈分枝狀,分枝與主幹的直徑幾乎相同,有分枝是鑒定霉功得出可靠的特徵之一。
菌絲的頂端:常呈鈍圓形。無折射現象。
凡有以上特徵之一的絲狀均可判定為黴菌菌絲。
觀察視野中有無菌絲,凡符合下列情況之一者為陽性視野。
一根菌絲長度超過視野直徑1/6;
一根菌絲長度加上分枝的長度超過視野直徑1/6;
兩根菌絲總長度超過視野直徑1/6;
三根菌絲總長度超過視野直徑1/6;
一叢菌絲可視為一個菌絲,所有菌絲(包括分枝)總長度超過視野直徑1/6。
根據對所有視野的觀察結果,計算陽性視野所佔比例,並以陽性視野百分數(%)報告結果。計算公式:
每件樣品陽性視野(%)=(陽性視野數 / 觀察視野數)×100

❹ 食物中的黴菌可以用什麼方法檢測出來

一步式黃麴黴毒素檢測金標試紙法
一步式黃麴黴毒素檢測金標試紙法是利用單克隆抗體而設計的固相免疫分析法。由此產生的一步式黃麴黴毒素快速檢測試紙可在5—10分鍾完成對樣品中黃麴黴毒素的定性測定.藉助黃麴黴毒素標准樣品這種方法能估算黃麴黴毒素的含量,非常適用於現場測試和進行大量樣品的初選。

❺ 怎麼用最簡單最快捷的方法檢測水中黴菌

這個我是聽同學說的,德國拜發公司的RIDA® Count系列微生物測試片,可分別檢測菌落總數、大腸菌群計數、大腸桿菌計數、黴菌和酵母計數、腸桿菌等。

採用黴菌和酵母菌快速檢驗紙片檢測樣品中黴菌和酵母菌,僅需25℃恆溫培養,在48小時內即可完全對樣品中的黴菌和酵母菌進行計數。

其他方法比如PCR等。

❻ 黴菌試驗是什麼

黴菌試驗就是檢測產品抗黴菌的能力和在有利於黴菌生長的條件下(即高濕溫暖的環境中和有無機鹽存在的條件下),設備是否受到黴菌的有害影響。
GJB150A-2009《軍設備環境試驗方法-黴菌試驗方法》中兩組不同試驗菌種對主要非金屬材料影響的研究。分析、論證同一種材料在相同塗覆工藝與加工工藝的試驗件在長霉程度、長霉等級上的差異。

菌種包含:
一組:
黑麴黴(Aspergillus niger)AS3.3928
繩狀青黴(Penicillium funiculosum)AS3.3875
土麴黴(Asp.terreus)AS 3.3935
宛氏擬青黴(Paecilomyces varioti)AS3.4253
綠色木霉(Trichoderma viride)AS 3.2942
赭色青黴(Penicillium ochrochloron)AS3.4302,
短柄帚霉(Scipulariopsis breuicaulis) AS3.3985

二組:
黃麴黴Aspergillus Flavus AS3.3950
雜色麴黴Aspergullus versicolor AS3.3885
繩狀青黴Penicillium funiculosumAS3.3875
球毛殼霉Chaetomium globosum AS3.4254
黑麴黴(Aspergillus niger)AS3.3928

黴菌試驗的標准有:
GJB 150.10A-2009軍設備環境試驗方法黴菌試驗
HB 6167.11-1989民用飛機機載設備環境條件和試驗方法 黴菌試驗.
GJB4.10艦船電子設備環境試驗 黴菌試驗
GB T 2423.16-1999電工電子產品環境試驗 第2部分 試驗方法 試驗J和導則長霉
GB/T10588-2002 GB 10588-89

❼ 飼料中黴菌毒素怎麼檢測

黴菌毒素的檢測方法很多,但由於黴菌毒素的化學結構和物理化學特性復雜,在樣品中分配不均和基質的干擾,使其分析更加復雜。飼料的樣品基質對黴菌毒素的影響最大,因為飼料是由多種物質混合在一起的,不同的物質中的黴菌毒素檢測的程序是不同的。

通常,首先要對懷疑被污染的物質進行嚴格的樣品處理,從樣品中提取毒素,分析之前再進行洗脫除去雜質的干擾。在實際的分析中,有些方法可直接進行分離和定量,有些方法在分離和定量之前需要對黴菌毒素進行衍生。

有些黴菌毒素具有一個熒光特性的發色基團,如黃麴黴毒素(AF)、赭麴黴毒素(OT)、玉米赤霉烯酮(ZE),樣品的提取物經常用薄層色譜(TLC)和高效液相色譜(HPLC)來分離結構相似的化合物和污染物。

通過比較樣品和標准品色譜的比移值(Rf)和保留時間來定性黴菌毒素,通過熒光強度和吸光度來定量黴菌毒素。一些黴菌毒素含有單端孢霉烯團,最大吸收值還不清楚,通常用氣相色譜和氣質聯用色譜進行檢測。這些樣品在提取後,上樣之前通常需要進行柱前衍生。

TLC和HPLC的方法對單端孢霉烯團有效,但對黃麴黴毒素的敏感性和特異性不強。TLC對穀物中的脫氧血腐鐮刀菌烯醇的檢測限是50~100μg/kg。

❽ 黃麴黴菌的檢驗

黃麴黴菌菌落生長較快,10~14天直徑3~4或6—7cm。菌落正面色澤也隨其生長由白色變為黃色及黃綠色,呈半絨毛狀。孢子成熟後顏色變為褐色。表面平坦或有放射狀溝紋,反面無色或帶褐色。
在低倍顯微鏡下觀察可見分生孢子頭呈疏鬆放射狀,繼而為疏鬆柱狀。
製片鏡檢觀察,可見分生孢子梗很粗糙。頂囊呈燒瓶形或近球形。
分生孢子在小梗上呈鏈狀著生,分生孢子的周圍有小突起、球形、粗糙。 可歸納為化學方法、生物學方法和免疫學方法三大類。
1、生物學方法
1)抑菌試驗
黃麴黴菌有抑制某些微生物生長的作用,故用其抑菌作用來測定黃麴黴菌的存在和含量。已經發現巨大芽胞桿菌和短芽胞桿菌對AFT最敏感。通過平皿中抑菌圈大小來衡量黃麴黴菌含量。
2 )熒光測定法
根據黃麴黴菌在紫外光照射下可發出熒光的原理,將待檢菌株接種於培養基中,28—30~C培養48~72小時,產生的毒素便浸入培養基中,在紫外燈光下照射培養基會呈現出特異的熒光。此法操作簡便。對AFT最低檢出量為5pg/ml。·
3)大白鼠試驗法
黃麴黴菌對大白鼠毒性最早出現損害的是肝臟,其受損范圍廣,而幼鼠最敏感,雄性幼鼠比雌性幼鼠敏感性更高,用100-150g大白鼠作急性中毒試驗,一般3—4天死亡。
4)雞胚試驗
5)鴨雛試驗
鴨雛對黃麴黴菌非常敏感,致死性強,一般用一次劑量後72小時內死亡。
6)斑點試驗
本法用於檢測真菌毒素致突變試驗的一種有意義的方法。主要利用沙門氏菌/微粒體突變性來檢測某些樣品種AFT的存在與含量。
A先將鼠傷寒沙門氏菌組氨酸缺陷型變種的菌懸液,與一定量肝組織勻漿混合作傾注平板。
B待凝固後,再將一定量被檢物(含AFT)加在平板中央待黃麴黴菌往外圍瓊脂中擴散時,圍繞中心點將出現密布的回復突變的菌落。
本法作為一種生物學檢驗法廣泛應用於開發安全、有用的化學物質和檢測食品或農產品中黃麴黴菌。
2.免疫學方法
黃麴黴菌是分子量為312~346的二氫呋喃香豆素的衍生物,無免疫原性,不能引起抗體的產生,故必須與大分子化學基團或蛋白質偶聯,成為完全抗原,方能引起免疫動物的抗體形成,然後利用血清學方法檢測AFT。
由於黃麴黴菌的量一般都較低,因此,檢測方法主要是敏感性較高的放射免疫測定法(RIA)和酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。近幾年來,國外已成功制備了測定B1的酶聯免疫測定盒及檢測乳中Ml含量的RIA檢測盒。這兩種檢測盒都十分方便,而且快速准確。

❾ 微生物限度檢查的細菌,黴菌方法

黴菌檢測方法:稱25g樣品,加入生理鹽水或PBS緩沖液225mL.選擇適宜的稀釋倍數,吸取1ml加入無菌平板,然後加入孟加拉紅培養基,29攝氏度培養5-7天.從第三天開始計數.

❿ 檢測食物中黴菌微生物可以用什麼方法

食品中黴菌可引起食物霉變,還會刺激人體消化道、胃部等,嚴重的還可損傷肝臟,造成食物中毒。
一般檢測可以用孟加拉紅培養基檢測,或者用黴菌總數檢測紙片都可以的。

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