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葡萄糖測定干化學法怎麼做啊

發布時間:2022-09-02 10:13:51

① 什麼是葡萄糖測定(干化學法)

菲林試劑..

② 如何測定葡萄中的葡萄糖含量

葡萄糖氧化酶法。
1.原理
葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下產生葡萄糖酸和過氧化氫,過氧化氫在過氧化物酶的作用下使鄰聯甲苯胺生成藍色物質,該有色物質在625 nm波長下與葡萄糖濃度成正比。通過側定藍色物質的吸光度值可計算樣品中葡萄糖的含量。
2.儀器
①實驗室常用設備。
②722型分光光度計。
3.試劑
除特殊說明外,實驗用水為蒸餾水,試劑為分析純。
①三氯乙酸(40%):稱取4.0 g三氯乙酸,用水溶解並稀釋至100 mL。
②無水乙醇。
③2 mol·L-1NaOH溶液:稱取8 g NaOH,用水溶解並稀釋至100 mL。④1%鄰聯甲苯胺溶液:稱取0.1 g鄰聯甲苯胺溶解於10 mL無水乙醇中,倒人棕色瓶中,4℃冰箱保存。
⑤乙酸緩沖液(pH5.O):稱取14.28 g乙酸鈉(CH。COONa.3H20)溶於水中,加入2.7mL冰乙酸,使pH為5.O,用水定容至1L。
⑥葡萄糖氧化酶溶液:稱取一定量的葡萄糖氧化酶(Sigma公司)用水溶解,使酶含量為100U/mL。4℃冰箱保存一周。
⑦過氧化物酶溶液:0.010 g辣根過氧化物酶溶於10 mL7J(~,4℃冰箱保存一周。
⑧酶溶液:取100 mL乙酸緩沖液,分別加入鄰聯甲苯胺溶液、葡萄糖氧化酶溶液、過氧化物酶溶液各l mL,混勻。4℃冰箱可保存7周。
⑨酶空白液:取100 mI。乙酸緩沖液,分別加人鄰聯甲苯胺溶液、過氧化物酶溶液各l mL,混勻。4℃冰箱保存1周。(注意酶空白液中不含葡萄糖氧化酶)
⑩葡萄糖標准液:將葡萄糖標准品(純度大於99%)於80℃乾燥至恆量。精確稱取O·050 g,用水移人100 mL容量瓶中,定容至刻度線。此標准液相當於濃度為0.5 mg.mI。_。。
4.操作步驟
①樣品處理
a.固體樣品:稱取0.5~5 g已粉碎的樣品於錐形瓶中,加入50 mL水後沸水浴15 min。冷卻後,轉移至100 mL容量瓶中並用水定容至刻度,反復搖動混勻樣品,過濾,棄初始幾滴濾液。收集濾液,如果濾液澄清,可直接用於測定或稀釋後用於測定。如果濾液渾濁,吸取20mL濾液轉移至另一容量瓶中,加人無水乙醇至刻度。混合後靜置至少30 min,過濾,濾液用於測定。
b·液體樣品或少糖、澱粉等碳水化合物水解液:吸取2~10 mL樣品或水解液,加入4倍
量無水乙醇(使乙醇最終濃度為80%,以沉澱不溶性多糖和部分蛋白質),混合。靜置至少30
min,過濾後濾液定容備用(如果過濾後濾液仍渾濁,或樣液體積過少,可於3 000 r/min離心15
min,上清液備用)。
c.新鮮牛乳等樣品:吸取0.5~2 mL樣品,用水稀釋,加入3 mL 40%三氯乙酸溶液(用於沉澱蛋白質),用水定容至100 mL,過濾。吸取5 mL濾液,用2 m01.L一,NaOH調節pH至中性,用水定容至i0 mL,備用。
②測定
a-標准空白管的制備:在試管中加入0.5 mL水和5 mL酶溶液。
b·標准管的制備:5支試管中先分別加入葡萄糖標准液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL,再分別加入水0.4、0.3、0.2、0.1.0.0 mL,最後各加入酶溶液5 mL。
c·樣品空白管的制備:在試管中加人0.5 mI。樣品提取液和5 mI。酶空白液。
d·樣品測定管的制備:在試管中加人0.5 mL樣品提取液和5 mL酶溶液。
將上述各試管中溶液混合後於37℃水浴反應15 rain,625nm測定吸光度值。(注意:反應時間應嚴格控制,因葡萄糖與酶溶液的成色反應與反應時間密切相關,
5.計算
根據吸光度值求出葡萄糖標准曲線的回歸方程,採用插入法求出測定管中葡萄糖含量,再根據稀釋定容體積和稱樣量,計算出樣品中葡萄糖含量。
6.說明
①此法適用於谷類、乳類、飲料、酒類等食品樣品和血液樣品。檢出量為0.02 mg。
②此方法中的酶溶液只能和葡萄糖反應,特異性強,靈敏度高。
③如果樣品提取液為無色,不需做樣品空白。有色樣品或樣品提取液渾濁,則應做樣品空白以減少干擾。

③ 初中化學實驗(測定某種水果中是否含有葡萄糖) 具體步驟 理化實驗操作緊張啊

1、取少量水果萃取液(或者少量果汁),加氫氧化鈉至鹼性。
2、加少量新制氫氧化銅,加熱(煮沸)。
3、觀察,如有磚紅色沉澱(Cu2O,氧化亞銅)產生,則證明有葡萄糖。

④ 如何測定葡萄糖含量

可以通過以下方法測量葡萄糖含量:
1、如果糖樣中沒有別的帶醛基的有機物,可以用DNS法測還原糖。
2、如果糖樣中有別的帶醛基的有機物,可以考慮採用高效液相色譜法(HPLC)。
3、其它也有一些方法,比如碘量法等。

⑤ 干化學法測定血糖的方法

干化學葡萄糖氧化酶法:特異強、價廉、方法簡單,是目前國內首選的測定血糖方法。其正常值:空腹全血為3.5-5.3毫摩爾/升(55-95毫克/分升),血漿為3.9-5.1毫摩爾/升(70-110毫克/分升)。

干化學鄰甲苯胺法:結果較可靠,由於血中絕大部分非糖物質及抗凝劑中的氧化物同時被沉澱下來,因而不易出現假性過高或過低。其正常值:空腹全血為3.3-5.5毫摩爾/升(50-100毫克/分升),血漿為3.9-5.4毫摩爾/升(70-115毫克/分升)。

(5)葡萄糖測定干化學法怎麼做啊擴展閱讀:

血糖的來源包括:

①食物消化、吸收;

②肝內儲存的糖元分解;

③脂肪和蛋白質的轉化。血糖的去路包括:

①氧化轉變為能量;

②轉化為糖原儲存於肝臟、腎臟和肌肉中;

③轉變為脂肪和蛋白質等其他營養成分加以儲存。胰島是體內調節血糖的血糖濃度的主要器官,肝臟儲存肝糖元。此外,血糖濃度還受神經、內分泌激素的調節。

⑥ 葡萄糖和乳酸測定的方法

葡萄糖和乳酸測定的方法:用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時,溶液的顏色變化過程為:淺藍色—棕色—磚紅色(沉澱)。

斐林試劑由質量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.05g/mL的硫酸銅溶液配製而成,二者混合後,立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉澱。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的Cu2O沉澱,而葡萄糖本身被氧化成葡萄糖酸。

臨床意義

乳酸反映組織對氧的需求與血液的供氧能力是否平衡。乳酸增高可見於各種原因引起的乳酸酸中毒、高乳酸血症、正常人做缺血性運動實驗等。其中引起乳酸酸中毒的原因主要包括:

心、肺功能障礙、血管阻塞、休克、貧血、心衰、窒息、CO中毒等可引起組織嚴重缺氧,導致乳酸酸中毒。雙胍類葯物、某些醇類葯物、撲熱息痛以及水楊酸鹽的應用均可引起體內乳酸堆積,導致乳酸酸中毒。

以上內容參考:網路-乳酸測定

⑦ 求三種葡萄糖的測定方法(除了碘量法)

1、乙醯化法,用過量乙酸酐酯化Glc,用NaHCO3除去多餘的乙酸酐,然後用鹼處理Glc乙醯化產物,測水解出來的乙酸根的量,n(Glc):n(乙酸根)=1:5

2、高碘酸法:用高碘酸鹽處理Glc,Glc一般是吡喃糖,遇高碘酸鹽反應產生甲酸,測生成的甲酸的量,n(甲酸):n(Glc)=1:1

3、糠醛-蒽酮法:用熱的12%HCl處理Glc,然後用蒽酮處理,形成藍綠色復合物,然後用分光光度法

4、糠醛-間苯二酚法:用熱的12%HCl處理Glc,然後用間苯二酚處理,形成紅色復合物,然後用分光光度法

——PS第三、四招都不大好用,Glc作為己醛糖,與12%HCl進行糠醛反應的時間慢,而且如果共熱的時間太長,還會形成暗黑色的腐黑物(糠醛反應,一般用來測戊糖或者己酮糖)



如果lz測的Glc裡面含有別的糖,那必須先預處理掉

⑧ 葡萄糖測定干化學法

1、干化學分析技術是相對於濕化學技術而言的,是指將液體檢測樣品直接加到為不同項目特定生產的商業化的乾燥試劑條上,以被測樣品的水分作為溶劑引起特定的化學反應,從而進行化學分析的方法,是以酶法為基礎的一類分析方法,又有干試劑化學或固。

⑨ 檢驗葡萄糖的方法

(1)在試管中加入幾毫升10%NaOH溶液,滴加5%的CuSO4溶液4-5 滴,可看到藍色沉澱現象.
(2)立即加入適量的待測溶液,在酒精燈上加熱至沸,觀察到產生紅色沉澱現象,即可證明含有葡萄糖.

⑩ 測定葡萄糖含量的方法

 
 
 
 葡萄糖注射液中葡萄糖含量的測定 
摘要  運用氧化還原滴定的原理設計葡萄糖注射液中葡萄糖含量的測定方案並具體實施。從而進一步掌握Na2S2O3及I2標准溶液的配製和標定方法,鞏固氧化還原滴定的操作技能。學會間接碘量法測定葡萄糖含量的方法和原理,進一步掌握返滴定法技能。其中,葡萄糖分子中含有醛基,能被IO-定量地氧化為羧基。故可將一定量過量的I2在鹼性條件下加入葡萄糖溶液中,使醛基完全轉化為羧基。再將其酸化,用Na2S2O3標准溶液滴定析出的I2。所用指示劑為澱粉。根據所加I2標准溶液的量及滴定所耗Na2S2O3標准溶液的量結合反應式中各物質之間的計量關系,便可計算葡萄糖的含量。該方法簡便易行且准確度高,基本符合實驗要求。 
關鍵詞  葡萄糖注射液  間接碘量法  返滴定法 
1引言 
葡萄糖注射液中葡萄糖含量的測定目前有以下幾種方法 方案一:旋光測定法 
根據葡萄糖分子結構中的五個碳都是手性碳原子,具有旋光性,可採用旋光法測定含量。取出旋光計的測定管,先用蒸餾水為空白對儀器進行校正。用供試液體(5%葡萄糖注射液)沖洗數次,緩緩注入供試液體適量(注意勿使發生氣泡)。置於旋光計內,讀取旋光度,連續測定3次,取平均值。 方案二:間接碘量法。 
碘與NaOH作用能生成NaIO,而C6H12O6能定量地被NaIO氧化。在酸性條件下,未與C6H12O6作用的NaIO可轉變為I2析出,只要用標准Na2S2O3溶液滴定析出的I2,便可計算C6H12O6的含量。 
本實驗採用第二種方案進行葡萄糖注射液中葡萄糖含量的測定。 
2實驗原理 
    在鹼性溶液中,碘與氫氧化鈉作用可生成次碘酸鈉(NaIO),葡萄糖能定量的被次碘酸鈉氧化成葡萄糖酸(C6H12O7)。過量的NaIO可以轉化為NaIO3和NaI。在酸性條件下,NaIO3和NaI作用析出I2,然後用Na2S2O3標准溶液滴定析出的I2,便可計算出葡萄糖的含量。其反應如下: 
1、I2與NaOH作用:      I2+2NaOH=NaIO+NaI+H2O 
2、C6H12O6和NaIO定量作用:  C6H12O6+ NaIO=C6H12O7+NaI     3、總反應式:       I2+C6H12O6+2NaOH=C6H12O7+2NaI+H2O 

 
4、C6H12O6作用完後,過量的NaIO發生歧化反應:   3NaIO=NaIO3+2NaI 5、在酸性條件下NaIO3和NaI作用:   NaIO3+5NaI+6HCl=3I2+6NaCl+3H2O 6、析出過量的碘用Na2S2O3標准溶液滴定:  I2+2Na2S2O3=Na2S4O6+2NaI 實驗還涉及到Na2S2O3和 I2溶液的標定 
1、Na2S2O3的標定    Cr2O72-+6I-+14H+=2Cr3++3I2+7H2O                          I2+2S2O32-=S4O62-+2I
-      
                                     
Cr2O72-~3I2~6S2O32-    
             3
223
227
223
2200.256)(6OSNaOSNaOCrKOSNa
VcVcVc

   
      
2、碘的標定        I2+2S2O32-
=S4O62-+2I

              
        V
Vc3
22322OSNaOSNac2/1
 
3、葡萄糖注射液中葡萄糖的含量  
   
計算式:
%10050
6
126
L
gOHCW標示量
葡萄糖含量 
3實驗儀器及材料 
3.1 儀器 
    稱量瓶、電子台秤、分析天平、容量瓶(250ml)、移液管(25ml)、量筒(10ml)、錐形瓶(25ml,3個)、酸式滴定管(50ml)、燒杯(50ml)、玻璃棒、碘量瓶 3.2 葯品 
    K2Cr2O7(S)、鹽酸(6mol/L)、KI溶液(100g/L)、澱粉(5g/L)、Na2S2O3溶液(0.1mol/L)、I2溶液(0.05mol/L)、NaOH溶液(1mol/L)、葡萄糖注射液(5%) 
4 實驗方法 
4.1 0.1mol/L Na2S2O3標准溶液的標定 4.1.1 K2Cr2O7標准溶液的配製 
    准確稱取1.2~1.3g分析純K2Cr2O7固體於小燒杯中,加少量的水溶解並轉入到250mL的容量瓶中,用水稀釋到刻線,搖勻。並計算其准確濃度 

)
(100000
.25100021101612632232222

LgOHCMOSNavOSNacIvIc葡萄糖含量=

 
4.1.2  Na2S2O3溶液的標定 
    准確移取25mlK2Cr2O7標准溶液於碘量瓶中,加5mL 6mol/L HCl溶液和10mL 100g/LKI,立即密塞搖勻,置暗處5min,然後沖洗瓶蓋並用蒸餾水稀釋至100 mL左右,用待標定Na2S2O3溶液滴定至K2Cr2O7標准溶液呈淺黃綠色時,加2mL 5g/L澱粉,繼續滴定至藍色剛好褪去,記錄所需體積,平行測定3次,計算Na2S2O3溶液的准確濃度。 4.2  0.05mol/L I2溶液的標定 
    准確移取25mLI2標准溶液於錐形瓶中,加50ml蒸餾水,用Na2S2O3標准溶液滴定至溶液呈淺黃綠色,加2ml 5g/L澱粉,繼續滴定至藍色剛好褪去,溶液呈無色即為終點。 4.3  葡萄糖含量的測定 
    用移液管移取5%葡萄糖注射液25.00ml於250ml容量瓶中,加水稀釋至刻線,搖勻。然後移取25.00ml上述溶液於碘量瓶中,准確加入I2標准溶液25ml,慢慢滴加NaOH邊加邊搖,直至溶液呈淺黃色,將碘量瓶加塞搖勻,於暗處放置10~15min,加2ml 6mol/L HCl酸化,立即用Na2S2O3標准溶液滴定,至溶液呈淺黃色,加2ml 5g/L澱粉,繼續滴定至藍色消失即達到滴定終點,記錄數據,平行滴定3次,計算其含量。

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