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常用的化學發光底物有哪些

發布時間:2022-11-01 11:25:27

『壹』 常用的鹼性磷酸酶(ALP)化學發光底物為

正確答案:B
解析:化學發光免疫分析中常用的標記酶有辣根過氧化物酶(HRP)和鹼性磷酸酶(ALP),HRP的化學發光底物為魯米諾或其衍生物;ALP的化學發光底物為AMPPD
。因此本題最佳答案是B

『貳』 直接化學發光免疫分析使用的發光底物為

正確答案:E
解析:吖啶酯常用於直接標記發光;HRP標記的化學發光免疫分析的發光底物為魯米諾;鹼性磷酸酶標記的化學發光免疫分析的發光底物為AMPPD;三聯吡啶釕用於電化學發光免疫分析

『叄』 有好的ECL化學發光底物推薦嗎

beckman lumigen KPL Luminal等等 ,你是需要AP底物還是HRP?用於Kit還是WB?

『肆』 熒光底物有哪些

(一)熒光色素 許多物質都可產生熒光現象,但並非都可用作熒光色素.只有那些能產生明顯的熒光並能作為染料使用的有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料.常用的熒光色素有:

  1. 異硫氰酸熒光素

  2. 2.四乙基羅丹明

  3. 3.四甲基異硫氰酸羅丹明

  4. 4.藻紅蛋白

  5. (二)其他熒光物質

  6. 1.酶作用後產生熒光的物質:某些化合物本身無熒光效應,一旦經酶作用便形成具有強熒光的物質.例如4-甲基傘酮-β-D半乳糖苷,受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基傘酮,後者可發出熒光,激發光波長為360nm,發射光波長為450nm.其他如鹼性磷酸酶的底物4-甲基傘酮磷酸鹽和辣根過氧化物酶的底物對羥基苯乙酸等.

『伍』 什麼是化學發光液,主要用在什麼地方,它有分類嗎

本品為辣根過氧化物酶(HRP)發光底物,分A液和B液兩瓶,A液主要成分為魯米諾(Luminol)及發光增強劑,B液主要成分為過氧化物及增強劑.
[用 途]:
用於酶促化學發光免疫分析.

『陸』 化學發光 發光劑 底物 有何不同

發光劑是指在發光反應中參與能量轉移並最終以發射光子的形式釋放能量的化合物,根據上述發光特點可將發光劑分為熒光知素、生物發光劑和化學發光劑三種。常用的化學發光劑有以三種,酶促反應的發光底物的發光劑,直接化學發光劑,電道化學發光劑。
發光劑是回指在發光反應中參與能量轉移並最終以發射光子的形式釋放能量的化合物,根據上述發光特點可將發光劑分為熒光素、生物發光劑和化學發光劑三種。常用的化學發光劑有以答三種,酶促反應的發光底物的發光劑,直接化學發光劑,電化學發光劑。

『柒』 化學發光免疫分析技術的類型

化學發光免疫分析法以標記方法的不同而分為兩種:
(1)化學發游標記免疫分析法;
(2)酶標記、以化學發光底物作信號試劑的化學發光酶免疫分析法 從標記免疫分析角度, 化學發光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,
CL E IA ) , 應屬酶免疫分析, 只是酶反應的底物是發光劑, 操作步驟與酶免分析完全相同[ 5 ]: 以酶標記生物活性物質(如酶標記的抗原或抗體) 進行免疫反應, 免疫反應復合物上的酶再作用於發光底物, 在信號試劑作用下發光, 用發光信號測定儀進行發光測定。目前常用的標記酶為辣根過氧化物酶(HRP) 和鹼性磷酸酶(AL P) , 它們有各自的發光底物。 常用的底物為魯米諾(32氨基鄰苯二甲醯肼,lum ino l) , 或其衍生物如異魯米諾(42氨基鄰苯二甲醯肼) , 是一類重要的發光試劑。魯米諾的氧化反應在鹼性緩沖液中進行, 在過氧化物酶及活性氧[ 過氧化陰離子(O 2- ) , 單線態氧(1O 2 ) , 羥自由基(OH·) , 過氧化氫(H2O 2) ]存在下,生成激發態中間體, 當其回到基態時發光, 其波長為425nm。
早期用魯米諾直接標記抗原(或抗體) , 但標記後發光強度降低而使靈敏度受到影響。近來用過氧化物酶標記抗體, 進行免疫反應後利用魯米諾作為發光底物, 在過氧化物酶和起動發光試劑(N aOH2H2O 2) 作用下, 魯米諾發光, 發光強度依賴於酶免疫反應物中酶的濃度。Kodak Am erliteTM 半自動分析系統就是利用這一體系專門設計的。 (enhanced lum ines2cence enzym e imm unoassay, ELEIA )
在發光系統中加入增強發光劑, 如對2碘苯酚等, 以增強發光信號, 並在較長時間內保持穩定, 便於重復測量, 從而提高分析靈敏度和准確性。在全自動分析儀上, 還可通過計算機嚴密控制, 進行自動操作, 如加試劑, 混合, 溫育, 洗滌, 加發光試劑, 發光計數, 數據處理, 繪制標准曲線, 直至完成病人血清樣品的分析並列印出結果。Am erliteTM 發光增強酶免分析系統用熒光素、噻唑等增強劑, 其發光時間可持續長達20m in, 試劑盒有甲狀腺功能檢測的
促甲狀腺素、三碘甲腺原氨酸、甲狀腺素、甲狀腺素結合球蛋白、游離甲狀腺素, 與性激素有關的有促黃體激素、促卵泡激素、人絨毛膜促性腺激素、甲胎蛋白、雌二醇、睾酮, 以及其他方面的如癌胚抗原、鐵蛋白、地高辛等。 所用底物為環1, 22二氧乙烷衍生物, 這是一類很有前途的發光底物 , 用於化學發光酶免分析底物而設計的分子結構中包含起穩定作用的基團——金剛烷基, 其分子中發光基團為芳香基團和酶作用的基團, 在酶及起動發光試劑作用下引起化學發光。最常使用的底物是AM PPD [ 32(2』2 sp iroadam an2tane ) 42m ethoxy242( 3』2 pho spho ryloxy) 2phenyl21,22dioxetane ], 中文名為: 32(2』2 螺金剛烷) 242甲氧基242(3』2 磷醯氧基) 2苯基21, 22環二氧乙烷)。在鹼性磷酸酶(AL P) 作用下, 磷酸酯基發生水解而脫去一個磷酸基, 得到一個中等穩定的中間體AM PD (半壽期為2~ 30m in) , 此中間體經分子內電子轉移裂解為一分子的金剛烷酮和一分子處於激發態的間氧苯甲酸甲酯陰離子, 當其回到基態時產生470nm 的光, 可持續幾十分鍾(如圖5)。AM PPD 為磷酸酯酶的直接化學發光底物, 可用來檢測鹼性磷酸酯酶或酶和抗體、核酸探針及其它配基的結合物。可檢測到鹼性磷酸酯酶的濃度為10- 15mo l?L 。
美國DPC 公司的Imm u lite 全自動酶放大發光免疫分析儀, 以鹼性磷酸酶為標記物, 以金剛烷作發光底物, 測定靈敏度相當於10- 21mo l?mL 的酶, 採用聚苯乙烯珠作載體, 其檢測水平已能達到10- 12g?mL。

『捌』 化學發光劑有哪些

發光劑是指在發光反應中參與能量轉移並最終以發射光子的形式釋放能量的化合物,根據上述發光特點可將發光劑分為熒光素、生物發光劑和化學發光劑三種。常用的化學發光劑有以三種,酶促反應的發光底物的發光劑,直接化學發光劑,電化學發光劑。

『玖』 化學發光劑的常用發光劑

酶促反應的發光底物
酶促反應的發光底物是指經酶的降解作用而發出光的一類發光底物,目前化學發光酶免疫技術中常用的酶有辣根過氧化物酶(HRP)和鹼性磷酸酶(AP)。HRP的發光底物為魯米諾或其衍生物和對-羥基苯乙酸。AP的發光底物為3-(2-螺旋金剛烷-4-甲氧基-4-甲基-4-(3-磷酸氧基)-苯基-1,2-二氧乙烷(AMPPD)和4-甲基傘形酮磷酸鹽(4-MUP,熒光底物)。
(1).魯米諾或其衍生物。 魯米諾的氧化反應在鹼性緩沖液中進行,通常以0.1mol/L pH8.6Tris緩沖液作底物液。要注意是:首先,魯米諾和H2O2在無HRP催化時也能緩慢自發發光,而在最後光強度測定中造成空白乾擾,因而宜分別配製成2瓶試劑溶液,只在用前即刻混合;其次, HRP發光增強劑如某些酚試劑(如鄰-碘酚)或螢火蟲熒光素酶可增強HRP催化魯米諾氧化的反應和延長發光時間,提高發光敏感度。
(2).對-羥基苯乙酸(HPA)。 對-羥基苯乙酸(HPA)在H2O2存在下被HRP氧化或氧化二聚體(熒光物質),在350nm激發光作用下,發出450nm波長的熒光,可用熒光光度計測量。
(3).AMPPD。 AMPPD在鹼性條件下,被ALP酶解生成相當穩定的AMP-D陰離子,其有2-30min的分解半衰期,發出波長為470nm的持續性光,在15min時其強度達到高峰,15-60min內光強度保持相對穩定。
(4)4-MUP。 4-MUP被ALP催化生成4-甲基傘形酮,在360nm的激發光的作用下,發出448nm的熒光,用熒光光度計進行測量。
直接化學發光劑
直接化學發光劑不需酶的催化作用,只需改變溶液的pH等條件就能發光的物質,如吖啶酯(acridinium, AE)在有過氧化氫的稀鹼溶液中即能發光。
電化學發光劑
電化學發光劑是指通過在電極表面進行電化學反應而發出光的物質。化學發光劑三聯吡啶釕[Ru(bpy)3]2+(圖16-7)和電子供體三丙胺(TPA)在陽性電極表面可同時失去一個電子而發生氧化反應。二價的[Ru(bpy)3]2+被氧化成三價,成為強氧化劑,TPA失去電子後被氧化成陽離子自由基TPA+,它很不穩定,可自發地失去一個質子(H+),形成自由基TPA.,成為一種很強的還原劑,可將一個高能量的電子遞給三價的[Ru(bpy)3]3+使其形成激發態的[Ru(bpy)3]2+.。激發態的三聯吡啶釕不穩定,很快發射出一個波長為620nm的光子,回復到基態的三聯吡啶釕。這一過程可在電極表面周而復始地進行,產生許多光子,使光信號增強。

『拾』 HRP標記的化學發光免疫分析的發光底物為

正確答案:D
解析:吖啶酯常用於直接標記發光;HRP標記的化學發光免疫分析的發光底物為魯米諾;鹼性磷酸酶標記的化學發光免疫分析的發光底物為AMPPD;三聯吡啶釕用於電化學發光免疫分析

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