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酶促反應的化學發光有哪些

發布時間:2022-11-01 23:26:38

『壹』 常見的化學發光反應體系有哪些

最常見的是魯米諾及其衍生物-過氧化氫體系,其次,吖啶脂類如光澤精-過氧化氫體系,二氧雜環丁烷類如AMPPD在鹼性知磷酸酶ALP的催化下分解,然後,還有過氧化草醯酯+染料體系,釕聯吡啶道+TPA體系等等。除此之外還有版很多,像魯米諾體系裡的氧化劑未必只有過氧化氫,還有高錳酸鉀、Br2、甲醛等等。催化劑也可以是過氧化物酶或者過渡金屬離子還有就是諸如乙醇蒸汽、異丙醇蒸汽這些,在納米金屬粒子上也是可權以產生催化化學發光的。

『貳』 化學發光劑有哪些

發光劑是指在發光反應中參與能量轉移並最終以發射光子的形式釋放能量的化合物,根據上述發光特點可將發光劑分為熒光素、生物發光劑和化學發光劑三種。常用的化學發光劑有以三種,酶促反應的發光底物的發光劑,直接化學發光劑,電化學發光劑。

『叄』 ivd體外診斷檢測中有哪些常用的發光底物發光劑

直接發給劑有吖啶酯、三聯吡啶釕,酶促發光有魯米諾,這些都是最常用的。

『肆』 化學發光劑的常用發光劑

酶促反應的發光底物
酶促反應的發光底物是指經酶的降解作用而發出光的一類發光底物,目前化學發光酶免疫技術中常用的酶有辣根過氧化物酶(HRP)和鹼性磷酸酶(AP)。HRP的發光底物為魯米諾或其衍生物和對-羥基苯乙酸。AP的發光底物為3-(2-螺旋金剛烷-4-甲氧基-4-甲基-4-(3-磷酸氧基)-苯基-1,2-二氧乙烷(AMPPD)和4-甲基傘形酮磷酸鹽(4-MUP,熒光底物)。
(1).魯米諾或其衍生物。 魯米諾的氧化反應在鹼性緩沖液中進行,通常以0.1mol/L pH8.6Tris緩沖液作底物液。要注意是:首先,魯米諾和H2O2在無HRP催化時也能緩慢自發發光,而在最後光強度測定中造成空白乾擾,因而宜分別配製成2瓶試劑溶液,只在用前即刻混合;其次, HRP發光增強劑如某些酚試劑(如鄰-碘酚)或螢火蟲熒光素酶可增強HRP催化魯米諾氧化的反應和延長發光時間,提高發光敏感度。
(2).對-羥基苯乙酸(HPA)。 對-羥基苯乙酸(HPA)在H2O2存在下被HRP氧化或氧化二聚體(熒光物質),在350nm激發光作用下,發出450nm波長的熒光,可用熒光光度計測量。
(3).AMPPD。 AMPPD在鹼性條件下,被ALP酶解生成相當穩定的AMP-D陰離子,其有2-30min的分解半衰期,發出波長為470nm的持續性光,在15min時其強度達到高峰,15-60min內光強度保持相對穩定。
(4)4-MUP。 4-MUP被ALP催化生成4-甲基傘形酮,在360nm的激發光的作用下,發出448nm的熒光,用熒光光度計進行測量。
直接化學發光劑
直接化學發光劑不需酶的催化作用,只需改變溶液的pH等條件就能發光的物質,如吖啶酯(acridinium, AE)在有過氧化氫的稀鹼溶液中即能發光。
電化學發光劑
電化學發光劑是指通過在電極表面進行電化學反應而發出光的物質。化學發光劑三聯吡啶釕[Ru(bpy)3]2+(圖16-7)和電子供體三丙胺(TPA)在陽性電極表面可同時失去一個電子而發生氧化反應。二價的[Ru(bpy)3]2+被氧化成三價,成為強氧化劑,TPA失去電子後被氧化成陽離子自由基TPA+,它很不穩定,可自發地失去一個質子(H+),形成自由基TPA.,成為一種很強的還原劑,可將一個高能量的電子遞給三價的[Ru(bpy)3]3+使其形成激發態的[Ru(bpy)3]2+.。激發態的三聯吡啶釕不穩定,很快發射出一個波長為620nm的光子,回復到基態的三聯吡啶釕。這一過程可在電極表面周而復始地進行,產生許多光子,使光信號增強。

『伍』 酶促反應的發光原理和特點是什麼

酶促反應(Enzyme catalysis)又稱酶催化或酵素催化作用,指的是由酶作為催化劑進行催化的化學反應。

生物體內的化學反應絕大多數屬於酶促反應。酶作為一種生物催化劑在催化一個化學反應時,既具有一般的催化劑的特徵,又具有不同於一般催化劑的特殊性。

『陸』 化學發光包括哪些方法

化學發光是物質在進行化學反應過程中伴隨的一種光輻射現象,可以分為直接發光和間接發光。直接發光是最簡單的化學發光反應,有兩個關鍵步驟組成:即激發和輻射。如A、B兩種物質發生化學反應生成C物質,反應釋放的能量被C物質的分子吸收並躍遷至激發態C*,處於激發的C*在回到基態的過程中產生光輻射。這里C*是發光體,此過程中由於C直接參與反應,故稱直接化學發光。

『柒』 流動注射化學發光法測定抗壞血酸 化學發光由什麼物質產生

光澤精體系可用於測定一些還原性物質,如乳糖、葡萄糖,用於抗壞血酸和脫氫抗壞血酸的分析測定有很高的靈敏度。但此法用於復雜樣品分析卻因干擾多而受到限制。用草醯胺化學發光照相法測定了葡萄糖。在微量滴定板上將草醯胺發光劑、熒光增感劑及 50 uL 試樣混合,於 5 m in 內用照相熒光劑測定液斑的發光強度,可檢出 100 pmo l 的萄萄糖。糖類物質測定的另一個重要方法是測定酶反應產生的 H 2 O 2 ,由此對酶底物 —— 葡萄糖、乳糖等進行測定。而酶的固定化技術為此法的發展注入了新的活力。採用物理包埋法將葡萄糖氧化酶固定在聚丙烯醯胺凝膠中並製成酶柱,再將酶柱接入流動注射系統中,用流動注射化學發光法測定由酶促反應產生的 H 2 O 2 ,從而測定人體血液中的葡萄糖,檢出限可達 0.1 m g / L 。2.5 類固醇與類酯一些特異性酶如類固醇脫氫酶和其它熒光素酶與合適底物反應產生 H 2 O 2 ,通過測定 H 2 O 2 達到分析測定底物的目的氨基酸分析方法的改進有利於推動生物技術、基因工程、 DNA 重組和基因克隆等的發展。由於絕大多數氨基酸沒有內源熒光特性,因此用過氧草酸鹽體系測定氨基酸需將其衍生成熒光物質,但此法避免不了衍生法所固有的缺點。此外亦可通過測定氨基酸與氨基酸氧化酶反應產生的過氧化氫來測定氨基酸的含量,如 L 2 氨基酸經反相色譜柱分離後流經 L 2 氨基酸氧化酶反應器產生過氧化氫,然後用過氧草酸鹽體系檢測。氨基酸與 Ru (b ipy) 3+3 反應,用流動注射化學發光法檢測,相對於脯氨酸和天冬醯胺檢測限可分別達到 20 pmo l 和 50 pmo l 。一般來說,仲胺反應產生的的發光強度比伯胺大。對氨基酸上取代基性質研究表明,給電子基有利於增強化學發光強度。

『捌』 化學發光 發光劑 底物 有何不同

發光劑是指在發光反應中參與能量轉移並最終以發射光子的形式釋放能量的化合物,根據上述發光特點可將發光劑分為熒光知素、生物發光劑和化學發光劑三種。常用的化學發光劑有以三種,酶促反應的發光底物的發光劑,直接化學發光劑,電道化學發光劑。
發光劑是回指在發光反應中參與能量轉移並最終以發射光子的形式釋放能量的化合物,根據上述發光特點可將發光劑分為熒光素、生物發光劑和化學發光劑三種。常用的化學發光劑有以答三種,酶促反應的發光底物的發光劑,直接化學發光劑,電化學發光劑。

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