如何增強電化學發光強度

『壹』 在化學上，什麼是「電化學發光法」

電化學發光免疫測定（ECLI）是一種在電極表面由電化學引發的特異性發光反應，包括電化學和化學發光兩個部分。分析中應用的標
記物為電化學發光的底物三聯吡啶釕或其衍生物N-羥基琥珀醯胺（NHS）酯，可通過化學反應與抗體或不同化學結構抗原分子結合，
製成標記的抗體或抗原。ECLI的測定模式與ELISA相似。其基本原理是發光底物二價的三聯吡啶釕及反應參與物三丙胺在電極表
面失去電子而被氧化。氧化的三丙胺失去一個H+而成為強還原劑，將氧化型的三價釕還原為激發的二價釕，隨即釋放光子而恢復為基態
的發光底物。這一過程在電極表面周而復始地進行，不斷地發出光子而常保持底物濃度的恆定。
具有以下優點：1.標記物的再循環利用，使發光時間更長、強度更高、易於測定；2.敏感度高，可達pg/ml或pmol水平；3
.線性范圍寬，>10的四次方；4.反應時間短，20min以內可完成測定；5.試劑穩定性好，2～5℃可保持一年以上。

『貳』 化學發光劑的常用發光劑

酶促反應的發光底物
酶促反應的發光底物是指經酶的降解作用而發出光的一類發光底物，目前化學發光酶免疫技術中常用的酶有辣根過氧化物酶（HRP）和鹼性磷酸酶（AP）。HRP的發光底物為魯米諾或其衍生物和對-羥基苯乙酸。AP的發光底物為3-（2-螺旋金剛烷-4-甲氧基-4-甲基-4-（3-磷酸氧基）-苯基-1，2-二氧乙烷（AMPPD）和4-甲基傘形酮磷酸鹽（4-MUP，熒光底物）。
（1）.魯米諾或其衍生物。 魯米諾的氧化反應在鹼性緩沖液中進行，通常以0.1mol/L pH8.6Tris緩沖液作底物液。要注意是:首先,魯米諾和H2O2在無HRP催化時也能緩慢自發發光，而在最後光強度測定中造成空白乾擾，因而宜分別配製成2瓶試劑溶液，只在用前即刻混合;其次, HRP發光增強劑如某些酚試劑（如鄰－碘酚）或螢火蟲熒光素酶可增強HRP催化魯米諾氧化的反應和延長發光時間，提高發光敏感度。
（2）.對-羥基苯乙酸（HPA)。 對-羥基苯乙酸（HPA）在H2O2存在下被HRP氧化或氧化二聚體（熒光物質），在350nm激發光作用下，發出450nm波長的熒光，可用熒光光度計測量。
（3）.AMPPD。 AMPPD在鹼性條件下，被ALP酶解生成相當穩定的AMP-D陰離子，其有2-30min的分解半衰期，發出波長為470nm的持續性光，在15min時其強度達到高峰，15-60min內光強度保持相對穩定。
（4）4-MUP。 4-MUP被ALP催化生成4-甲基傘形酮，在360nm的激發光的作用下，發出448nm的熒光，用熒光光度計進行測量。
直接化學發光劑
直接化學發光劑不需酶的催化作用，只需改變溶液的pH等條件就能發光的物質，如吖啶酯（acridinium, AE）在有過氧化氫的稀鹼溶液中即能發光。
電化學發光劑
電化學發光劑是指通過在電極表面進行電化學反應而發出光的物質。化學發光劑三聯吡啶釕[Ru(bpy)3]2+（圖16-7）和電子供體三丙胺（TPA）在陽性電極表面可同時失去一個電子而發生氧化反應。二價的[Ru(bpy)3]2+被氧化成三價，成為強氧化劑，TPA失去電子後被氧化成陽離子自由基TPA+，它很不穩定，可自發地失去一個質子（H+），形成自由基TPA.，成為一種很強的還原劑，可將一個高能量的電子遞給三價的[Ru(bpy)3]3+使其形成激發態的[Ru(bpy)3]2+.。激發態的三聯吡啶釕不穩定，很快發射出一個波長為620nm的光子，回復到基態的三聯吡啶釕。這一過程可在電極表面周而復始地進行，產生許多光子，使光信號增強。

『叄』 電化學發光的好處

電化學發光現在是很熱的研究領域，雖然已經發展了五六十年，但隨著檢測技術和電極（特別是透明電極的發展），電致發光得到了進一步應用，在生物分析、電分析領域發揮到越來越大的作用。
其中電化學發光與光譜學（比如紫外、熒光等）聯用，可以實現高靈敏度、高選擇性分析及電化學體系的測定。我正在看電化學大神J. Bard的《電化學方法原理與應用》，書里對電化學發光的描述：
60年代初，美國著名電化學家R.N. Adams教授在指導他的研究生T. Kuwana進行鄰二苯胺衍生物電氧化時，觀察到電極反應伴隨有顏色的變化，他提出了這樣的設想：「能不能設計出一種能看穿的電極，以光譜的方法來識別所形成的有色物質呢？」。這個創新思想終於在1964年由Kuwana 實現了。他們第一次使用的光透電極（OTE）是在玻璃板上鍍了一薄層摻雜Sb的SnO2
玻璃（Nesa玻璃）。光譜電化學從此得到了迅速發展，已成為電化學的一個重要分支。它是各種波譜技術和電化學方法相結合，在同一個電解池內同時進行測量的方法。其特點是同時具有電化學和波譜學二者的特性，可以在電極反應過程中獲得多種有用的信息，對於研究電極過程機理、電極表面特性，檢測反應中間體、瞬間狀態和產物性質，測定式量電位、電子轉移數，電極反應速率常數和擴散系數等，提供了非常用力的研究手段。

『肆』 如何有效提高LED燈的發光強度

1.採用大晶元,高亮度等級的晶元
2.採用恆流電源
3.加聚光的透鏡
4.可能的話再加反光材料。

『伍』 化學發光包括哪些方法

化學發光是物質在進行化學反應過程中伴隨的一種光輻射現象，可以分為直接發光和間接發光。直接發光是最簡單的化學發光反應，有兩個關鍵步驟組成：即激發和輻射。如A、B兩種物質發生化學反應生成C物質，反應釋放的能量被C物質的分子吸收並躍遷至激發態C*，處於激發的C*在回到基態的過程中產生光輻射。這里C*是發光體，此過程中由於C直接參與反應，故稱直接化學發光。

『陸』 有哪位大神解釋一下電化學發光法，跪謝

化學發光法是分子發光光譜分析法中的一類，它主要是依據化學檢測體系中待測物濃度與體系的化學發光強度在一定條件下呈線性定量關系的原理，利用儀器對體系化學發光強度的檢測，而確定待測物含量的一種痕量分析方法。

電化學發光分析法具有靈敏度高、儀器設備簡單、操作方便、易於實現自動化等特點，廣泛地應用於生物、醫學、葯學、臨床、環境、食品、免疫和核酸雜交分析和工業分析等領域。

在21世紀中必將繼續為解決人類面臨的各種重大問題發揮更加顯著的作用。

化學發光與其它發光分析的本質區別是體系產生發光 （光輻射） 所吸收的能量來源不同。

體系產生化學發光，必須具有一個產生可檢信號的光輻射反應和一個可一次提供導致發光現象足夠能量的單獨反應步驟的化學反應。

(6)如何增強電化學發光強度擴展閱讀

依據供能反應的特點，可將化學發光分析法分為：

1）普通化學發光分析法（供能反應為一般化學反應）。

2）生物化學發光分析法（供能反應為生物化學反應；簡稱BCL）。

3）電致化學發光分析法（供能反應為電化學反應，簡稱ECL）等。

根據測定方法該法又可分為：

1）直接測定CL分析法。

2）偶合反應CL分析法（通過反應的偶合，測定體系中某一組份）。

3）時間分辨CL分析法（即利用多組份對同一化學發光反應影響的時間差實現多組份測定）。

4）固相、氣相、液相CL分析法。

5）酵聯免疫CL分析法等。