一個化學式如何標記熒光

『壹』 單鏈DNA上怎麼標記上熒光染料分子

1.DNA溶於苯酚而RNA不溶,故可用苯酚來沉澱 這是最簡單的方法. 2.利用吖啶橙的變色特性可鑒別DNA和RNA.吖啶橙作為一種熒光染料已被用於染色固定,非固定細胞核酸,或作溶酶體的一種標記.觀察死亡細胞熒光...

『貳』 生物熒游標記法是什麼

熒游標記所依賴的化合物稱為熒光物質。熒光物質是指具有共軛雙鍵體系化學結構的化合物，受到紫外光或藍紫光照射時，可激發成為激發態，當從激發態恢復基態時，發出熒光。熒游標記技術指利用熒光物質共價結合或物理吸附在所要研究分子的某個基團上，利用它的熒光特性來提供被研究對象的信息。熒游標記的無放射物污染，操作簡便等優點，使得熒游標記物在許多研究領域的應用日趨廣泛。

熒游標記物質在蛋白的功能研究、葯物篩選等領域也有著廣泛的應用。人們利用利用熒游標記的多肽來檢測目標蛋白的活性，並將其發展的高通量活性篩選方法應用於疾病治療靶點蛋白的葯物篩選和葯物開發（例如，各種激酶、磷酸酶、肽酶等）。因此，多肽的熒光修飾，同樣是多肽合成領域的重要內容。

下面是一些常用的多肽修飾熒光物質：

『叄』 如何用FITC熒光素標記細菌（細菌，熒光素標記

免疫熒光技術是將熒光素如異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)與相應抗體（或抗原）以化學的方法結合，將熒游標記抗體（或抗原）與標本中相應的抗原結合形成熒游標記的抗體- 抗原復合物，用熒光顯微鏡觀察。在鏡下見到有熒光存在即推斷有抗原抗體復合物的存在，根據已 知的抗體（或抗原）即可推知另一個未知抗原（或抗體）的存在。直接免疫熒光法直接免疫熒光法是利用熒光色素標記的特異性抗體直接與相應的抗原結合，以鑒定未知抗原。本法具有操作簡單、時程短、特異性高的優點，但也 存在缺點如不能檢查抗體，敏感性較差。（1）在標本上滴加熒光素標記抗體，放入濕盒中。37℃溫育30min。 （2）PBS 沖洗後，再用PBS分三缸浸泡，每缸3min。（3）PBS浸泡1～2min，風干。（4）緩沖甘油封片。在熒光顯微鏡下觀察。進行直接免疫熒光法時應注意：①溫育時一定要將玻片放在濕盒中，以防液體蒸發。②用PBS浸泡時應不斷振盪。 2. 間接免疫熒光法間接免疫熒光法以熒光素標記抗球蛋白抗體，抗體與相應抗原結合後，熒游標記的抗球蛋白抗體與已結合的抗體發生作用，從而推知抗原或抗體的 存在。間接熒光技術可以用已知的抗原檢測未知的抗體，也可用已知的抗體測出未知抗原。現以檢測流行性熱病毒抗體（IgM）為例介紹如下：（1）將待測病人血清加至抗原片（流行性熱病毒感染的Vero-E6細胞片）上，每個稀釋 度加2孔，最後2孔加PBS做對照。將玻片放置濕盒中，37℃溫育 60min。取出玻片，棄去反應液，用PBS洗滌5min，風干。（2）加入1∶40稀釋的FITC標記的羊抗人IgM，37℃溫育60min。取出玻片，按步驟2洗滌，風干。（3）PBS甘油封片，熒光顯微鏡下觀察。陽性結果：在細胞膜及細胞質中可見顆粒狀熒光顆粒，細胞核 呈紅色。注意事項：溫育時將玻片放在濕盒中，以防液體蒸發。選擇低溫、乾燥、潔凈的環境風干。

『肆』 熒游標記法是什麼

熒光物標記法，神經纖維的末梢可以吸收很多熒光化合物或熒光染料,經軸突逆向運輸到細胞體內,從而建立逆行熒游標記法。

例如：Kuypers等(1977)用這種方法在熒光顯微鏡下根據所用熒光物標記物特有的波長顯示吸收熒光物的神經細胞。

相關信息：

熒游標記所依賴的化合物稱為熒光物質。熒光物質是指具有共軛雙鍵體系化學結構的化合物，受到紫外光或藍紫光照射時，可激發成為激發態，當從激發態恢復基態時，發出熒光。

熒游標記技術指利用熒光物質共價結合或物理吸附在所要研究分子的某個基團上，利用它的熒光特性來提供被研究對象的信息。熒游標記的無放射物污染，操作簡便等優點，使得熒游標記物在許多研究領域的應用日趨廣泛。

『伍』 熒游標記用的是什麼東西標記的它與被標記物如何結合在一起適用於哪些反應

同位素標記法，就是用某個放射性元素代替它的同位素，比如說用氧18代替原來的氧元素，放射性元素可以通過一定的一起檢測到，在紫外線等的照射下顯出熒光，可以用於光合作用和呼吸作用的產物研究，或者標記等位基因

『陸』 如何測定一種有機化合物是否具有熒光性質

如果化合物有紫外吸收，應該有熒光性質。
常溫物質經紫外線或X射線照射，吸收光能後進入激發態，並且立即退激發並發出比入射光的的波長長的出射光即熒光。。
熒光光譜有兩個主要優點:第一是靈敏度高.由於熒光輻射的波長比激發光波長長,因此測量到的熒光頻率與入射光的頻率不同.另外,由於熒光光譜是發射光譜,可以在與入射光成直角的方向上檢測,這樣,熒光不受來自激發光的本底的干擾,靈敏度大大高於紫外-可見吸收光譜,測量用的樣品量很少,且測量方法簡便.第二,熒光光譜能提供較多的信息,例如激發譜,發射譜,峰位,峰強度,熒光壽命。

『柒』 什麼是熒游標記法

熒光物標記法，神經纖維的末梢可以吸收很多熒光化合物或熒光染料,經軸突逆向運輸到細胞體內,從而建立逆行熒游標記法。例如:Kuypers等(1977)用這種方法在熒光顯微鏡下根據所用熒光物標記物特有的波長顯示吸收熒光物的神經細胞。

目前用於神經元標定的熒光物質有十多種。可以根據實驗的要求進行單熒光物、雙標定和三標定。後者可以用來做神經元軸突側枝投射的追蹤。

(7)一個化學式如何標記熒光擴展閱讀

1. SYBR green I染料

反應體系中，加入過量SYBR

熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈後，發射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產物的擴增完全同步。

其優點是對模板沒有選擇性，使用方便，非常方便，但也易與非特異性雙鏈DNA結合，產生假陽性，可以通過溶解曲線的分析，優化反應條件。

2. Taqman 探針

目前在Real-time

Q-PCR中最廣泛使用的Tagman系統就是運用了這個原理。它能被DNA合成酶（例如Taq酶）的5'-3'活性所降解，探針的5'端有一熒光報告基團，3'端有一熒光淬滅基團。

當兩個基團相互先靠近的時候，由於發生能量傳遞作用，報告基團不能發出熒光，但隨著擴增反應的進行，5'端得報告基團隨著探針的水解而脫落下來，不再與淬滅發生能量傳遞作用，從而能發出熒光，被信號探測器所捕獲。

3. Scorpions

它由兩個寡核苷酸分子組成，一個是引物，另一個是帶熒光分子的探針，但是此探針也具有引物的功能。引物與形成發夾結構的探針相連，在探針上由於熒光報告基團與淬滅基團相互靠近，不發熒光。

變性階段，探針的發夾結構會解開，在退火時則與模板相結合，形成線性分子，報告基團同淬滅基團分離而發射熒光。在探針的設計上，要求絕對保守，長度為25-32bp，Tm在68-70度之間，探針的5'端不能為G，避免多個鹼基同時出現，尤其要避免4個G同時出現，另外，探針應靠近上游引物。

4. 分子信標

分子信標是（Molecular

beacon）是一種呈發夾結構的莖環雙標記寡核苷酸探針，兩端的核酸序列互補配對，因此標記在一端的熒光基團與標記在另一端的淬滅基團緊緊靠近。

熒光基團被激發後產生的光子被淬滅劑淬滅，由熒光基團產生的能量以紅外光而不是可見光形式釋放出來。在復性溫度下，因為模板不存在時形成莖環結構。

當加熱變性會互補配對的莖環雙鏈解開，如果有模板存在環序列將與模板配對。與模板配對後，分子信標將成鏈狀而非發夾裝，使得熒光基團與淬滅劑分開。當熒光基團被激發時，淬滅作用被解除，發出激光分子。

『捌』 求教如何給細菌標記熒光

1、買一個GFP原核表達質粒，如pEGFP。當然，找別人要也可以（自己要不出來就讓導師去要），這個東西很多的~自己搜索一下找個方便的即可。
2、GFP質粒轉化大腸桿菌，看一下是否發光，同時保種和保存質粒。
將GFP質粒轉化到你的目的菌株中，觀察GFP是否正常表達，如果可以正常表達，標記成功~
只要你的目標菌株可以正常進行遺傳轉化操作，整個實驗周期不會超過一周，當然，如果目標菌株有問題，那就難了~~
建議找一個有分子生物學操作經驗的實驗室，去那裡做一下吧，自己摸索會很吃力的。不行就甩給公司做。

『玖』 熒光怎麼樣才能夠被標記上

1、 熒游標記是將熒光基團共價連接到蛋白、核酸等分子上的過程.通常使用能夠選擇性地與目標分子上存在的功能基團反應的熒光素基團衍生物來完成這樣的過程.
最常見的標記過的分子是抗體,經常使用標記過的抗體來檢測特定的目標分子.可在多種檢測系統中使用熒游標記來實現靈敏和定量的檢測.
熒游標記用的熒光染料會和特定的蛋白或者核酸連接,使其具有熒光反應.因此只要這種物質存在,就會被標記.所以基因復制生成的另一個基因也會被標記.
2、同位素示蹤所利用的放射性核素（或穩定性核素）及它們的化合物,與自然界存在的相應普通元素及其化合物之間的化學性質和生物學性質是相同的,只是具有不同的核物理性質.因此,就可以用同位素作為一種標記,製成含有同位素的標記化合物（如標記食物,葯物和代謝物質等）代替相應的非標記化合物.利用放射性同位素不斷地放出特徵射線的核物理性質,就可以用核探測器隨時追蹤它在體內或體外的位置、數量及其轉變等.
使用同位素標記的核苷酸合成的DNA都具有放射性,然後給具有放射性的DNA只提供正常的沒有放射性的核苷酸,則新合成的DNA序列均不帶有放射性.